外源一氧化氮處理對(duì)山茶抗寒性的影響

周琳 楊柳燕 潘琦 張斌 房婉萍 朱旭君 張永春

摘要：以花鶴翎、六角大紅茶花為材料，以硝普鈉（SNP）為外源一氧化氮（NO）供體，研究外源NO對(duì)低溫脅迫條件下山茶花生理特性的影響。結(jié)果表明，在正常生長(zhǎng)條件下，外源NO對(duì)2個(gè)山茶花品種的葉綠素、可溶性糖、可溶性蛋白、游離脯氨酸（Pro）含量以及 O-2·生成速率影響不顯著，但對(duì)超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）和過氧化物酶（POD）的活性略有提高。低溫脅迫下，2個(gè)山茶花品種的葉綠素含量降低，可溶性糖、可溶性蛋白、Pro、過氧化氫（H2O2）、丙二醛（MDA）含量以及 O-2·生成速率顯著增加，SOD、CAT、POD活性顯著提高。低溫脅迫下，外源NO處理顯著減少了H2O2和膜脂過氧化物產(chǎn)物MDA的積累，顯著提高了葉綠素、可溶性糖、可溶性蛋白含量以及SOD、CAT、POD活性。低溫脅迫下，外源NO可通過提高山茶可溶性物質(zhì)含量以及抗氧化酶活性，降低H2O2和MDA的積累，從而保護(hù)細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性，最終減輕冷害脅迫對(duì)山茶花的傷害，增強(qiáng)其抗冷性。

關(guān)鍵詞：山茶;一氧化氮;生理生化;抗寒性

中圖分類號(hào)： S685.140.1?文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號(hào)：1002-1302（2019）20-0142-06

山茶花（Camellia japonica L.）屬山茶科山茶屬，主要分布于我國西南和南部溫暖地區(qū)。山茶具有葉色濃綠、常年不凋，花色花型多樣豐富等優(yōu)點(diǎn)，是我國的十大傳統(tǒng)名花之一，也是世界馳名花卉。目前茶花栽培品種已達(dá)萬余個(gè)，在英、美、日、意、法等國家都有栽培和培育，成為各國不可或缺的庭院觀賞花木，具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。山茶花喜溫暖濕潤氣候，適宜溫度在20～25 ℃之間，在炎熱和寒冷地區(qū)其長(zhǎng)勢(shì)較差，當(dāng)溫度高于35 ℃則會(huì)引起葉片灼傷、花芽分化受阻、落蕾落花，嚴(yán)重時(shí)甚至導(dǎo)致干枯死亡[1]。雖然山茶大部分品種可耐-8 ℃低溫，淮河以南地區(qū)多數(shù)可自然越冬，但大多數(shù)山茶在北方地區(qū)不能安全越冬。因此，耐熱性和耐寒性是其應(yīng)用推廣的重要基礎(chǔ)研究。目前，山茶耐熱性研究已引起了研究者的重視[2-3]，而耐寒性研究目前主要集中于山茶屬經(jīng)濟(jì)作物茶樹上[4]，因此研究低溫脅迫下山茶的生理生化，提高山茶抗寒性具有重要意義，且對(duì)于豐富北方冬季園林景觀具有十分重要的價(jià)值。

一氧化氮（nitric oxide）作為易透膜且化學(xué)性質(zhì)活躍的生物小分子，除了參與種子萌發(fā)、葉片伸展、根系生長(zhǎng)、花芽分化、枝條抽生、花粉管生長(zhǎng)、氣孔關(guān)閉以及細(xì)胞程序性死亡，還廣泛參與非生物脅迫下的信號(hào)傳導(dǎo)，在低溫脅迫、干旱脅迫、高溫脅迫、鹽脅迫、重金屬脅迫等非生物脅迫中作為信號(hào)分子起著重要作用[5]。外源NO在植物非生物脅迫中的作用已受到植物界的普遍關(guān)注，已有研究表明，施用外源NO可提高擬南芥、番茄、小麥、玉米、南瓜等植物的抗寒性[6-9]。隨著研究的深入，發(fā)現(xiàn)外源NO可通過上調(diào)抗氧化酶基因、Δ1-吡咯啉-5-羧酸合成酶基因（P5CS1）和脯氨酸脫氫酶基因（ProDH）等滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)相關(guān)基因的表達(dá)，從而提高抗氧化酶活性以及滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量，減輕低溫脅迫對(duì)植物的傷害，并且提高植物抗寒性[8，10-11]。

山茶花品種花鶴翎花型漂亮、樹型美觀、病蟲害少且管理養(yǎng)護(hù)較為簡(jiǎn)單，喜溫暖環(huán)境，其花期可從2月持續(xù)至5月，具有園林綠化應(yīng)用前景;山茶花品種六角大紅為大紅色，基本為完全重瓣型，花期可從12月中下旬持續(xù)至4月初，花朵初放至凋謝期間，花瓣始終保持挺拔，無后翻和明顯褪色現(xiàn)象，即使低溫環(huán)境下，花瓣邊緣仍保持不焦枯。因此，本試驗(yàn)針對(duì)山茶在我國北方冬季難以安全越冬問題，以花色艷麗、樹形美觀、具有園林綠化開發(fā)應(yīng)用前景的茶花品種花鶴翎和六角大紅為試驗(yàn)材料，研究外源施加NO對(duì)低溫脅迫下山茶生理特性的影響，探討外源NO對(duì)提高山茶抗冷性的作用，以期為北方地區(qū)山茶花有效防御冬季低溫冷害提供理論依據(jù)和技術(shù)支撐。

1?材料與方法

1.1?材料和試劑

選用浙江省金華市扦插繁殖2年生花鶴翎和六角大紅茶花，各150株。試驗(yàn)于2017年4月在上海市農(nóng)業(yè)科學(xué)院玻璃溫室和人工氣候箱中進(jìn)行，晝夜溫度為25 ℃/20 ℃，光周期為12 h/12 h，相對(duì)濕度為75%～80%，所有山茶花在玻璃溫室中培養(yǎng)1個(gè)月用于后期研究。

試驗(yàn)使用的NO供體為硝普鈉[Na2Fe（CN）5]，購自于Sigma公司，純度為98.5%，并用蒸餾水配制成5 mmol/L的母液，4 ℃保存，試驗(yàn)時(shí)按所需濃度進(jìn)行稀釋。

1.2?試驗(yàn)設(shè)計(jì)

培養(yǎng)1個(gè)月后對(duì)2個(gè)品種的山茶花進(jìn)行試驗(yàn)處理。外源噴施SNP溶液和純水，均為對(duì)山茶苗葉片均勻噴霧，直至有水滴落下為止。試驗(yàn)分為以下處理：（1）T1：噴施100 μmol/L SNP溶液，常溫處理;（2）T2：噴施純水后，0 ℃人工氣候箱低溫處理;（3）T3：噴施處理100 μmol/L SNP溶液，0 ℃人工氣候箱低溫處理。分別處理0、4、8、12、24、48 h時(shí)取山茶葉片，擦去葉片表面灰塵，稱質(zhì)量后放入液氮速凍，- 80 ℃冰箱保存。

1.3?測(cè)定指標(biāo)及測(cè)定方法

葉綠素含量測(cè)定參照李合生的方法[12];采用蒽酮比色法測(cè)定可溶性糖含量[13];采用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定可溶性蛋白含量[14];采用酸性茚三酮顯色法測(cè)定游離脯氨酸（Pro）含量[15];超氧陰離子自由基（O-2·）產(chǎn)生速率測(cè)定參照王愛國等的方法[16];采用劉俊等方法測(cè)定H2O2含量[17];采用硫代巴比妥酸法測(cè)定丙二醛（MDA）含量[18];采用NBT（氮藍(lán)四唑）法測(cè)定超氧化物歧化酶（SOD）活性[19];采用紫外吸收法測(cè)定過氧化氫酶（CAT）活性[20];采用愈創(chuàng)木酚法測(cè)定過氧化物酶（POD）活性[21]。以上所有指標(biāo)均重復(fù)測(cè)定3次。

1.4?數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用軟件Excel 2010進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和SPSS 20.0進(jìn)行分析，采用Duncan's新復(fù)極差法進(jìn)行多重比較。

2?結(jié)果與分析

2.1?外源NO對(duì)低溫脅迫下山茶葉片葉綠素含量的影響

葉綠素是綠色植物進(jìn)行光合作用的主要色素，對(duì)光能的吸收、傳遞和轉(zhuǎn)化起著極其重要的作用，因此葉綠素的含量與組成同植物光合作用有著密切的關(guān)系。外源NO處理下，山茶葉片葉綠素含量變化見表1。常溫下，外源SNP處理（T1處理）花鶴翎葉綠素含量不同處理時(shí)間之間不顯著，六角大紅在處理后的4 h時(shí)含量提高至3.48 mg/g，在12 h時(shí)下降至3.25 mg/g，24、48 h時(shí)升高至3.34、3.41 mg/g。在低溫脅迫下（T2處理），花鶴翎和六角大紅在4～48 h期間其葉綠素含量均顯著下降。花鶴翎和六角大紅在噴施SNP后，低溫脅迫處理下（T3處理），雖然葉綠素含量在4～48 h期間均顯著降低，但其含量均高于同時(shí)期的T2處理。此外，在T2、T3處理下，六角大紅葉綠素含量均高于同時(shí)期的花鶴翎。說明施加外源NO能夠增加低溫脅迫下山茶葉片的葉綠素含量，提高光合作用和生長(zhǎng)。

2.2?外源NO對(duì)低溫脅迫下山茶葉片可溶性糖、可溶性蛋白和游離脯氨酸含量的影響

可溶性糖、可溶性蛋白和游離脯氨酸是植物細(xì)胞器滲透調(diào)節(jié)作用的重要物質(zhì)。從表2可見，正常生長(zhǎng)下噴施SNP（T1）對(duì)2個(gè)山茶花葉片的可溶性糖、可溶性蛋白和游離脯氨酸含量無明顯影響。低溫脅迫下，2個(gè)山茶品種在4 h時(shí)可溶性糖、可溶性蛋白和游離脯氨酸含量已顯著提高（P<0.05），且隨著脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)而顯著增加。低溫脅迫下，噴施SNP處理（T3）2個(gè)山茶品種的可溶性糖、可溶性蛋白和游離脯氨酸含量在4～48 h期間顯著增加，且其含量始終高于同時(shí)期的低溫處理（T2）。低溫脅迫下（T2、T3處理），六角大紅的可溶性糖、可溶性蛋白和游離脯氨酸含量始終高于花鶴翎。表明外源NO能提高山茶葉片中可溶性糖、可溶性蛋白和游離脯氨酸含量，從而提細(xì)胞液濃度，降低質(zhì)膜受凍害的程度，從而緩解低溫對(duì)山茶造成的傷害。

2.3?外源NO對(duì)低溫脅迫下山茶葉片O-2·生成速率和H2O2、MDA含量的影響

超氧陰離子自由基（O-2·）是分子氧單電子還原產(chǎn)生的陰離子自由基，在植物體內(nèi)其不斷地產(chǎn)生也不斷被清除，而在逆境脅迫下，則導(dǎo)致其迅速積累[22]。常溫下，O-2·在外源NO處理下，其生成速率在0.37～0.40 nmol/（g·min）間浮動(dòng)且差異不顯著。低溫脅迫下（T2），花鶴翎和六角大紅的生成速率則在4 h時(shí)已分別顯著提高至0.55、0.64 nmol/（g·min）;花鶴翎隨著低溫脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)，在48 h時(shí)已達(dá) 0.93 nmol/（g·min），而六角大紅則在4～24 h期間保持在0.65 nmol/（g·min）以下，在48 h時(shí)僅為 0.70 nmol/（g·min）。T3處理下，花鶴翎和六角大紅的 O-2·生成速率雖然隨著低溫脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)而顯著增加，但在4、12、24、48 h時(shí)均顯著低于同時(shí)期的T2處理（表3）。表明外源NO處理可減少山茶花葉片中O-2·積累。

低溫脅迫會(huì)引發(fā)H2O2的大量產(chǎn)生，過量的H2O2得不到及時(shí)清除，則會(huì)對(duì)植物造成毒害作用。丙二醛含量的變化反映著環(huán)境脅迫下細(xì)胞內(nèi)氧自由基積累導(dǎo)致的脂膜過氧化程度，其含量越高表明植物受逆境脅迫傷害程度越大。正常生長(zhǎng)條件下，花鶴翎和六角大紅在外源NO處理下，H2O2和丙二醛含量雖然分別在0.17～0.23 μmol/g、1.04～1.27 nmol/g之間浮動(dòng)變化，但其含量始終都顯著處于較低水平，且顯著低于低溫脅迫時(shí)的含量。低溫脅迫下，2個(gè)山茶品種H2O2、丙二醛含量隨著脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)而顯著增加，在48 h時(shí)，花鶴翎和六角大紅的H2O2含量分別達(dá)到了0.82、0.70 μmol/g;丙二醛含量分別達(dá)到6.11、5.50 nmol/g。外源NO處理（T3）的2個(gè)山茶品種雖然變化趨勢(shì)和T2處理一致，但在處理期間H2O2和丙二醛含量均低于同時(shí)期的T2處理（表4）。表明常溫下外源NO雖然會(huì)引起山茶H2O2和丙二醛含量的變化，但并未對(duì)其造成傷害;而低溫脅迫下，外源NO處理能有效減少H2O2的大量產(chǎn)生，降低膜脂過氧化程度。

2.4?外源NO對(duì)低溫脅迫下山茶葉片抗氧化酶活性的影響

超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化物酶（POD）、過氧化氫酶（CAT）是植物保護(hù)酶系統(tǒng)中的重要3種酶，在清除生物自由基上擔(dān)負(fù)著重要功能。SOD能將O-2·轉(zhuǎn)化為H2O2，而CAT和POD可將H2O2進(jìn)一步清除產(chǎn)生H2O，三者協(xié)同作用可使自由基維持在一個(gè)較低水平，從而避免膜傷害，達(dá)到保護(hù)細(xì)胞的目的。由表5可知，正常生長(zhǎng)條件下噴施SNP（T1）提高了山茶的SOD、CAT、POD活性，即使處理達(dá)48 h時(shí)，花鶴翎的酶活性分別為109.17、99.08、925.33 U/g，六角大紅的酶活性分別為114.18、160.12、952.00 U/g，均顯著高于0 h時(shí)的酶活性。2個(gè)品種的山茶在低溫脅迫下（T2），SOD、CAT、POD活性都顯著，在48 h時(shí)花鶴翎酶活性比0 h相比提高了73.54%、59.12%、52.45%，六角大紅則分別提高了168.77%、192.34%、53.03%。外源NO處理下（T3），SOD、CAT、POD活性隨著低溫脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)而顯著增強(qiáng)，且其活性始終高于同時(shí)期的T2處理。說明隨著低溫脅迫時(shí)間的延長(zhǎng)，山茶細(xì)胞內(nèi) O-2·和H2O2含量已超出正常水平（表3、表4），觸發(fā)了細(xì)胞內(nèi)抗氧化酶活性增強(qiáng)，其活性顯著上升表明低溫脅迫下其清除自由基的能力增強(qiáng)，從而緩解細(xì)胞內(nèi)多余的自由基對(duì)細(xì)胞的傷害。同時(shí)，表明外源NO能有效提高SOD、CAT和POD的活性，以減輕低溫脅迫對(duì)山茶的傷害作用。

3?討論

3.1?外源NO對(duì)山茶葉片葉綠素含量的影響

植物光合作用中葉綠素在光能吸收、傳遞和轉(zhuǎn)化過程中起著重要作用，因此葉綠素含量是反映植物光合作用能力的一個(gè)間接指標(biāo)[23]。研究結(jié)果表明，葉綠體對(duì)低溫敏感性較強(qiáng)，低溫處理下植物葉綠體發(fā)生膨脹變形、類囊體片層結(jié)構(gòu)紊亂、葉綠體膜出現(xiàn)內(nèi)吞現(xiàn)象等，伴隨著葉綠素含量降低，最終導(dǎo)致光合速率下降[24]。外源NO能提高低溫處理下一年生黑麥草[25]、棉花[11]、玉米[26]等植株葉片中葉綠素含量，本試驗(yàn)的研究結(jié)果與之一致。此外，外源NO在鹽脅迫下能維持八寶景天光化學(xué)活性[27]，緩解鹽脅迫和高溫脅迫下水稻葉片葉綠素的降解[28]。非生物脅迫下，NO以濃度依賴的方式與活性氧（ROS）清除酶類共同作用應(yīng)對(duì)抗氧化脅迫，或者直接作為抗氧化劑清除ROS[29]。這可能是因?yàn)橥庠碞O可提高抗氧化酶活性，清除低溫脅迫產(chǎn)生的部分ROS，促進(jìn)了低溫脅迫下山茶類囊體膜蛋白復(fù)合體的組裝和穩(wěn)定，緩解了葉綠素的分解，保持葉綠體對(duì)光能的吸收和利用，從而促進(jìn)了光合作用。

3.2?外源NO對(duì)山茶葉片可溶性物質(zhì)含量的影響

植物對(duì)低溫脅迫的響應(yīng)除了基因表達(dá)、膜組成變化、激素合成、抗氧化酶活性變化外，大量可溶性物質(zhì)如可溶性糖、氨基酸、可溶性蛋白等的積累，增加了細(xì)胞液滲透壓，提高了細(xì)胞吸水和保水能力，避免原生質(zhì)脫水凝固，從而保護(hù)植物細(xì)胞免受低溫傷害[30-31]。脯氨酸是水溶性最大的氨基酸，研究結(jié)果表明低溫脅迫下脯氨酸可增加酶穩(wěn)定性，保護(hù)酶活性，減輕質(zhì)膜損傷，清除羥自由基，從而穩(wěn)定蛋白質(zhì)、DNA和細(xì)胞膜[32]。高等植物在逆境脅迫下，脯氨酸的積累是一種常見的生理反應(yīng)。在植物體內(nèi)，脯氨酸的合成由谷氨酸或鳥氨酸開始，其中谷氨酸合成途徑中，P5CS是該過程的限速酶。近幾十年來，P5CS基因反饋調(diào)節(jié)在控制植物脯氨酸水平上扮演著重要的角色，脯氨酸含量的變化也影響著植物對(duì)逆境脅迫的響應(yīng)[33-34]。在擬南芥中低溫脅迫可通過NIA1基因的表達(dá)促進(jìn)植物內(nèi)源NO合成，上調(diào)P5CS基因的表達(dá)，促進(jìn)脯氨酸的積累，提高植株的抗寒性。本研究結(jié)果表明，外源NO處理后的山茶在低溫脅迫下，其可溶性糖、可溶性蛋白和游離脯氨酸含量均顯著高于低溫脅迫處理的山茶。王芳等用 0.10 mmol/L SNP處理低溫脅迫下的玉米幼苗，其可溶性蛋白和可溶性糖含量分別增加了19.25%、123.0%，可有效緩解低溫脅迫對(duì)玉米幼苗生長(zhǎng)的抑制效應(yīng)[26];杜卓濤等以 0.50 mmol/L SNP處理苦瓜幼苗時(shí)也顯著促進(jìn)了滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)的合成，提高了低溫脅迫下植株生物量，增加了苦瓜的抗冷性[35]，本研究結(jié)果與之一致。說明外源NO可誘導(dǎo)可溶性糖和可溶性蛋白的積累，減輕低溫脅迫對(duì)植株造成的傷害，提高植株對(duì)低溫的適應(yīng)性。牟雪姣等的研究結(jié)果表明，外源NO能夠提升常溫及低溫脅迫條件下蝴蝶蘭葉片內(nèi)的滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量[36]，而本研究及楊美森等在棉花上的研究結(jié)果[11]則表明，常溫下外源NO處理植株滲透調(diào)節(jié)物質(zhì)含量雖有一定量的增加但不顯著，這可能是使用SNP濃度不同或者不同植物對(duì)外源NO敏感性不同而引起的，其機(jī)理有待進(jìn)一步研究。

3.3?外源NO對(duì)山茶葉片膜脂過氧化和抗氧化酶活性的影響

逆境脅迫下，植物細(xì)胞內(nèi)ROS動(dòng)態(tài)平衡受到破壞，導(dǎo)致O-2·、羥自由基、H2O2等活性氧迅速積累，活性氧能夠與植物體內(nèi)的蛋白質(zhì)、DNA和脂類物質(zhì)反應(yīng)，最終對(duì)植物體造成傷害[37]。MDA則是植物體在衰老或逆境條件下，發(fā)生膜脂過氧化作用的最終分解產(chǎn)物，能破壞細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)，使細(xì)胞內(nèi)溶物擴(kuò)散到細(xì)胞外，逆境脅迫下會(huì)大量積累。SOD、CAT和POD是植物的抗氧化系統(tǒng)重要的保護(hù)酶，可保護(hù)植物免受活性氧的傷害。NO可通過增加SOD、CAT、POD等抗氧化酶活性來增強(qiáng)細(xì)胞抗氧化能力[28，38-39];外源NO在逆境脅迫下可提高植株抗氧化酶活性已在多種植物上得到證實(shí)[9，11，26，34]。本研究中，低溫脅迫下?O-2·生成速率加快，MDA和H2O2的含量顯著增加，SOD、CAT和POD的活性明顯增強(qiáng);外源NO 處理提高了低溫脅迫下山茶SOD、CAT和POD的活性，降低了MDA和H2O2的含量，減緩了O-2·生成速率，緩解了冷害脅迫下膜質(zhì)過氧化作用對(duì)細(xì)胞的傷害，提高了山茶的耐冷性，研究結(jié)果與南瓜[9]、棉花[11]、玉米[26]、蝴蝶蘭[34]等的研究結(jié)果一致。證明外源NO處理確實(shí)在一定程度上提高了山茶對(duì)低溫脅迫的適應(yīng)性。低溫脅迫下，導(dǎo)致植物發(fā)生一系列的生理生化變化，包括ROS動(dòng)態(tài)平衡也受到破壞[8]，而NO作為信號(hào)分子在逆境脅迫下可通過參與不同的過程基因，如信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、防御和細(xì)胞死亡、轉(zhuǎn)運(yùn)、代謝以及ROS產(chǎn)生和降解相關(guān)基因，以促進(jìn)O-2·轉(zhuǎn)化成H2O2和O2，并且通過增強(qiáng)H2O2清除酶活性，最終抑制植物的氧化損傷[40-41]。

4?結(jié)論

低溫脅迫下，山茶幼苗葉綠素含量顯著降低，超氧陰離子自由基增加，膜脂過氧化程度增加，生長(zhǎng)受到顯著影響。外源施加100 μmol/L SNP溶液，在低溫脅迫下顯著增加了可溶性物質(zhì)含量，提高了抗氧化酶SOD、CAT、POD活性，降低了O-2·產(chǎn)生速率，減少了H2O2和膜脂過氧化物產(chǎn)物的積累，最終有效緩解了低溫脅迫對(duì)山茶花造成的傷害，從而增強(qiáng)了其抗寒性。2個(gè)品種相比，六角大紅O-2·生成速率、H2O2含量和MDA含量均低于花鶴翎，而其葉綠素、可溶性物質(zhì)含量、抗氧化酶活性均顯著高于花鶴翎，因此六角大紅的抗寒性優(yōu)于花鶴翎。外源NO能提高花鶴翎和六角大紅的抗寒性，花鶴翎和六角大紅花期不同、抗寒性不同，將花鶴翎和六角大紅配合栽植，并施以外源NO提高抗寒性，對(duì)北方山茶花品種引進(jìn)以及安全越冬具有一定的指導(dǎo)意義。

除了山茶花具有較高觀賞價(jià)值以外，山茶屬植物都具有很高的利用價(jià)值，經(jīng)濟(jì)植物茶樹是世界三大無酒精飲料之一;油茶組合紅山茶組種子含油量高;金花茶組種類繁多，是著名觀賞花木，然而這些重要經(jīng)濟(jì)植物喜溫暖濕潤環(huán)境，目前主要分布于東亞北回歸線兩側(cè)。由于木本植物生長(zhǎng)慢、育種周期長(zhǎng)，外源NO處理已有效地提高了山茶的抗寒性，深入研究其在山茶屬植物低溫脅迫中的作用，對(duì)于擴(kuò)大山茶屬植物的分布范圍，尤其是其北方分布，對(duì)于豐富北方道路、庭院、住宅、景點(diǎn)等花卉品種具有重要意義。

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