UGT1A1基因多態(tài)性與伊立替康治療小細(xì)胞肺癌療效及預(yù)后的關(guān)系△

曹亮，姬澤萱，張長洪，劉建華，陳艷紅，支學(xué)軍

河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院呼吸內(nèi)科，河北 張家口 075000

小細(xì)胞肺癌（small cell lung cancer，SCLC）是一類惡性程度極高的腫瘤，具有增長速度快、增長指數(shù)高、對初始化療敏感等特點(diǎn)[1]。雖然目前治療SCLC的化療方案首選依托泊苷聯(lián)合順鉑，但新型抗腫瘤藥物伊立替康也逐漸被應(yīng)用于臨床，伊立替康是一種半合成水溶性喜樹堿類衍生物，在人體內(nèi)轉(zhuǎn)變?yōu)橄矘鋲A，降解細(xì)胞中的DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ從而使DNA單鏈斷開，導(dǎo)致雙螺旋結(jié)構(gòu)解體以達(dá)到抗腫瘤目的。尿苷二磷酸葡糖醛酸轉(zhuǎn)移酶1A（uridine diphosphoglucuronosyl transferase 1A，UGT1A）基因是人體內(nèi)對內(nèi)源性及外源性化合物進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化、解毒并加強(qiáng)排泄的重要酶類。UGT1A基因通過不同的剪接方式形成了9種有功能的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，其中UGT1A1酶對伊立替康的療效影響最大，UGT1A1基因多態(tài)性也與伊立替康的不良反應(yīng)相關(guān)，使用伊立替康化療前行UGT1A1基因多態(tài)性檢測，可以篩查高危人群、預(yù)測伊立替康的嚴(yán)重不良反應(yīng)，從而指導(dǎo)臨床用藥。本研究探討UGT1A1基因多態(tài)性與伊立替康治療SCLC療效及預(yù)后的關(guān)系，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2016年1月至2017年1月河北北方學(xué)院附屬第一醫(yī)院收治的SCLC患者的病歷資料。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)纖維支氣管鏡或經(jīng)皮穿刺肺活檢術(shù)確診為SCLC；②未進(jìn)行化療或距離末次化療時間長達(dá)4周以上；③血常規(guī)、心電圖及肝腎功能正常；④生存時間大于3個月。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他部位腫瘤；②妊娠或哺乳期婦女。根據(jù)納入、排除標(biāo)準(zhǔn)，共納入60例SCLC患者，根據(jù)化療方法不同分為觀察組和對照組，每組30例。觀察組中，男性16例，女性14例，年齡35～78歲，平均（60.8±7.9）歲；對照組中，男性17例，女性13例，年齡34～80歲，平均（60.1±8.2）歲，兩組患者性別和年齡比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

觀察組患者采用伊立替康聯(lián)合順鉑進(jìn)行化療，第1、8和15天給予伊立替康 60 mg/m2靜脈注射，第1～3天給予順鉑60 mg/m2靜脈注射，21天為1個周期，化療2個周期。對照組患者采用依托泊苷聯(lián)合奈達(dá)鉑進(jìn)行化療，第1～3天給予依托泊苷80 mg/m2聯(lián)合250～500 ml生理鹽水進(jìn)行靜脈滴注1 h，奈達(dá)鉑給藥劑量、時間及方式同依托泊苷。21天為1個周期，化療2個周期。

兩組患者化療前30 min用昂丹司瓊8 mg聯(lián)合地塞米松5 mg靜脈推注預(yù)防嘔吐，并使用阿托品注射液0.25 mg皮下注射預(yù)防腹瀉。對白細(xì)胞總數(shù)低的患者給予粒細(xì)胞集落刺激因子治療，應(yīng)用1～2天后復(fù)查血常規(guī)，白細(xì)胞達(dá)標(biāo)后可以給予上述治療方案，治療期間根據(jù)患者的病情復(fù)查血常規(guī)、生化檢查、胸部計算機(jī)斷層掃描（CT），化療2個周期后進(jìn)行療效評價。

1.3 UGT1A1基因多態(tài)性檢測

治療前，采集觀察組患者2 ml外周血，放在抗凝管中，置于-20℃冰箱待檢。采用德國QIAGEN的Blood Mini Kit DNA提取試劑盒提取基因組的DNA。UGT1A1基因多態(tài)性檢測：設(shè)計引物序列，采用聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reaction，PCR）擴(kuò)增UGT1A1的相關(guān)基因片段（UGT1A1*28和UGT1A1*6）?；蚱螠y序后，結(jié)果采用DNAStar軟件進(jìn)行顯示，人工校讀分析UGT1A1*28和UGT1A1*6位點(diǎn)基因型。

1.4 觀察指標(biāo)及評價標(biāo)準(zhǔn)

依據(jù)實(shí)體瘤療效評價標(biāo)準(zhǔn)（response evaluation criteria in solid tumor，RECIST）1.1 版[2]進(jìn)行療效評價：完全緩解（complete response，CR），腫瘤病灶完全消失，持續(xù)4周及以上；部分緩解（partial response，PR），腫瘤病灶最大徑之和減少≥30%，持續(xù)4周及以上；疾病穩(wěn)定（stable disease，SD），腫瘤病灶最大徑之和減少＜30%或增加＜20%，持續(xù)4周及以上；疾病進(jìn)展（progressive disease，PD），腫瘤病灶最大徑之和增加≥20%或出現(xiàn)新病灶?？陀^緩解率（objective response rate，ORR）=（CR+PR）例數(shù)/總例數(shù)×100%。不良反應(yīng)參照世界衛(wèi)生組織（WHO）抗癌藥物常見毒副反應(yīng)分級標(biāo)準(zhǔn)[3]進(jìn)行評價。

1.5 隨訪

以患者復(fù)查和電話等方式進(jìn)行隨訪，隨訪截止時間為2018年7月。隨訪內(nèi)容包括：患者一般狀況；是否在外院有治療及治療方案；術(shù)后是否發(fā)生腫瘤轉(zhuǎn)移。無進(jìn)展生存時間是指從患者治療開始至疾病進(jìn)展或任何原因死亡的時間。

1.6 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計學(xué)軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)；計數(shù)資料以例數(shù)和率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 臨床療效的比較

觀察組患者的ORR為50.00%（15/30），高于對照組患者的40.00%（12/30），差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。（表1）

表1 兩組患者的臨床療效[n（%）]

2.2 不良反應(yīng)發(fā)生率的比較

觀察組患者的不良反應(yīng)發(fā)生率為43.33%（13/30），低于對照組患者的60.00%（18/30），差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。（表2）

表2 兩組患者的不良反應(yīng)發(fā)生情況[n（%）]

2.3 生存情況的比較

隨訪結(jié)束后，觀察組與對照組患者的無進(jìn)展生存時間分別為（10.34±7.03）個月和（11.07±6.99）個月，兩組患者的無進(jìn)展生存時間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

2.4 UGT1A1基因多態(tài)性分布

觀察組中，UGT1A1*28基因型為基因啟動子區(qū)TA序列呈6次重復(fù)的野生型（TA6/6）、TA序列6次和7次重復(fù)的雜合突變型（TA6/7）、TA序列7次重復(fù)的純合突變型（TA7/7）所占比例分別為76.67%（23/30）、13.33%（4/30）、10.00%（3/30）。UGT1A1*6基因型為G/G野生型、G/A雜合突變型、A/A純合突變型所占比例分別為60.00%（18/30）、33.33%（10/30）、6.67%（2/30）。

1例患者出現(xiàn)遲發(fā)性腹瀉，其UGT1A1*28基因型為純合突變型TA7/7，UGT1A1*6基因型為純合突變型A/A；2例患者出現(xiàn)貧血，其UGT1A1*28基因型分別為雜合突變型TA6/7和純合突變型TA7/7，UGT1A1*6基因型分別為雜合突變型G/A和純合突變型A/A；2例患者出現(xiàn)消化道反應(yīng)，其UGT1A1*28基因型均為純合突變型TA7/7，UGT1A1*6基因型均為純合突變型A/A；8例患者粒細(xì)胞減少，其UGT1A1*28基因型分別為4例野生型TA6/6、2例雜合突變型TA6/7、2例純合突變型TA7/7，UGT1A1*6基因型分別為2例野生型G/G、4例雜合突變型G/A、2例純合突變型A/A。

3 討論

在中國，肺癌是造成患者因疾病死亡的首要原因，男性發(fā)病率略高于女性，同時中國的發(fā)病率和病死率在全世界均處于較高水平。據(jù)研究報導(dǎo)，肺癌主要分為非小細(xì)胞肺癌和SCLC兩種類型，其中SCLC惡性程度高，生長擴(kuò)散速度快，通常在早期發(fā)生轉(zhuǎn)移，其病理切片在顯微鏡下呈現(xiàn)為紡錘形或多邊形的微小細(xì)胞[4]。目前臨床上主要采用依托泊苷聯(lián)合順鉑的化療方案治療SCLC患者，其近期效果明顯，對病情的控制具有較為重要的意義。但依托泊苷聯(lián)合順鉑治療SCLC患者具有持續(xù)時間短的特征，大部分SCLC患者會在短期內(nèi)病情有所進(jìn)展，對患者生存造成威脅。本研究中觀察組采用伊立替康聯(lián)合順鉑的改進(jìn)化療方案，順鉑屬于廣譜類抗癌藥物，伊立替康主要作用于細(xì)胞增殖周期的S期，與鉑類藥物在抗腫瘤方面作用相似，因此伊立替康聯(lián)合順鉑治療效果顯著、不良反應(yīng)少且不交叉耐藥[5]。

伊立替康主要成分為可溶性的喜樹堿類衍生物，是喜樹堿類中新的細(xì)胞毒性藥物，作用機(jī)制與喜樹堿類似，特異性地與拓?fù)洚悩?gòu)酶聯(lián)合，解旋DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)[6]。但伊立替康也存在毒性，從而引起不良反應(yīng)。臨床上較為常見的不良反應(yīng)主要有遲發(fā)性腹瀉、中性粒細(xì)胞減少、消化道反應(yīng)和骨髓抑制等，其中遲發(fā)性腹瀉和中性粒細(xì)胞減少是較為常見毒性反應(yīng)[3]。在臨床上，遲發(fā)性腹瀉定義為用藥時段高出24 h后才引發(fā)的腹瀉，主要體現(xiàn)為呈現(xiàn)水樣便或軟便；腹痛、腹部脹氣及大便次數(shù)增加、胃部疼痛等不良癥狀。本研究結(jié)果顯示，兩組患者的ORR、不良反應(yīng)發(fā)生率和無進(jìn)展生存時間比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），表明伊立替康聯(lián)合鉑類藥物治療SCLC的療效與傳統(tǒng)化療方案相當(dāng)，不良反應(yīng)也并未多于傳統(tǒng)化療方案，值得在臨床使用，但由于研究時間短暫，其長期治療效果還未有準(zhǔn)確數(shù)據(jù)說明，存在一定的欠缺。

研究表明，伊立替康的藥代動力學(xué)會因個體的差異而存在差異性[5]。UGT1A1被證實(shí)為伊立替康代謝的關(guān)鍵性酶類，而該基因的多態(tài)性分布和酶的相應(yīng)功能具有關(guān)聯(lián)性，可引起UGT1A1酶活性喪失或下降，從而使伊立替康的臨床療效降低，并出現(xiàn)一系列不良反應(yīng)[5]。UGT1A1基因中，UGT1A1*28和UGT1A1*6基因的多態(tài)性均可影響伊立替康的不良反應(yīng)[6]。本研究結(jié)果顯示，觀察組患者中UGT1A1*28基因型為野生型TA6/6、雜合突變型TA6/7、純合突變型TA7/7所占比例分別為76.67%、13.33%、10.00%；UGT1A1*6基因型為G/G野生型、G/A雜合突變型、A/A純合突變型所占比例分別為60.00%、33.33%、6.67%。UGT1A1基因突變在中國人群中較為常見，同時，伴隨基因突變數(shù)目的增大，UGT1A酶的活性會逐步降低的表現(xiàn)，從而會影響伊立替康的臨床效果，導(dǎo)致不良反應(yīng)的發(fā)生[7-9]。本研究中，1例患者出現(xiàn)遲發(fā)性腹瀉，其UGT1A1*28基因型為純合突變型TA7/7，UGT1A1*6基因型為純合突變型A/A；2例患者出現(xiàn)貧血，其UGT1A1*28基因型分別為雜合突變型TA6/7和純合突變型TA7/7，UGT1A1*6基因型分別為雜合突變型G/A和純合突變型A/A；2例患者出現(xiàn)消化道反應(yīng)，其UGT1A1*28基因型均為純合突變型TA7/7，UGT1A1*6基因型均為純合突變型A/A；8例患者粒細(xì)胞減少，其UGT1A1*28基因型分別為4例野生型TA6/6、2例雜合突變型TA6/7、2例純合突變型TA7/7，UGT1A1*6基因型分別為2例野生型G/G、4例雜合突變型G/A、2例純合突變型A/A。但UGT1A1基因的多態(tài)性與使用伊立替康出現(xiàn)不良反應(yīng)的相關(guān)性仍需要進(jìn)一步研究。

綜上所述，臨床使用伊立替康治療SCLC時，進(jìn)行UGT1A1基因多態(tài)性的檢測，針對個體差異性設(shè)計適宜的治療方案，合理指導(dǎo)臨床用藥，將有助于減少不良反應(yīng)的發(fā)生。