生化免疫檢驗(yàn)中化學(xué)發(fā)光免疫測定技術(shù)的應(yīng)用及臨床價(jià)值探討

傅美麗

東?？h人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇東海 222300

甲亢是頭頸部常見的疾病，其發(fā)生可能與內(nèi)分泌、自身免疫、遺傳因素有關(guān)，患者往往存在機(jī)體中糖、脂肪或蛋白質(zhì)等代謝異常而誘發(fā)一系列的生化免疫指標(biāo)改變[1]。目前，臨床上對于甲亢的診斷主要還是通過甲狀腺生化免疫指標(biāo)、核素掃描、B超檢查等等，這其中，生化免疫指標(biāo)檢驗(yàn)的價(jià)值較高[2]。化學(xué)發(fā)光免疫測定(CLIA)、放射免疫分析法(RIA)是甲亢生化免疫檢驗(yàn)的兩種常見方式，隨著CLIA技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用，其在生化免疫檢驗(yàn)中發(fā)揮了重要的作用，該文以CLIA法為例展開研究[3]。該次研究以2016年12月—2018年12月該院檢驗(yàn)科檢驗(yàn)的 70例甲亢患者標(biāo)本為例，觀察CLIA法在甲亢生化免疫檢驗(yàn)中的臨床應(yīng)用價(jià)值，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機(jī)選擇該時間段內(nèi)該院70例甲亢患者和70名健康志愿者的生化免疫檢驗(yàn)資料進(jìn)行分析。其中甲亢組70例患者中，男性36例、女性34例；患者年齡在34～75歲，平均年齡(54.24±20.07)歲。對照組70名志愿者中，男性40名，女性 30名，患者年齡在 34～75歲，平均(55.08±20.15)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①甲亢組患者均由臨床證實(shí)為甲亢；②臨床資料全面；③簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①資料不全或標(biāo)本污染者；②存在血液系統(tǒng)疾病者；③不同意參與研究者。該次研究上報(bào)該院倫理委員會，并獲得批準(zhǔn)同意，利用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對兩組受檢者基本資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果得到差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），可比較。

1.2 方法

兩組均取清晨空腹靜脈血3 mL，采用促凝管采血，以CLIA法測定，采用貝克曼庫爾勒UNICEL DXI 800化學(xué)發(fā)光檢測儀，以3 500 r/min下離心10 min，獲取血漿冷凍保存，進(jìn)行甲狀腺各項(xiàng)功能檢測，包括血清游離三碘甲狀腺原氨酸(FT3)、游離甲狀腺素(FT4)、甲狀腺球蛋白水平(Tg)、促甲狀腺激素(TSH)水平，試劑盒由貝克曼庫爾勒公司提供，參照說明書操作。

1.3 觀察指標(biāo)

對比兩組患者的 FT3、FT4、Tg、TSH 等指標(biāo)結(jié)果，F(xiàn)T3 ＞6.47 pmol/L、FT4＞16.0 pmol/L、Tg＞40 ng/mL、TSH ＜4.91 μIU/mL者診斷為甲亢，對比兩種方法診斷結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

應(yīng)用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料用（±s）表示，組間比較行t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用[n(%)]表示，組間比較行χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組受檢者 FT3、FT4、Tg、TSH 水平對比

甲亢組FT3、FT4、Tg水平明顯高于對照組，但TSH水平低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 兩種方法生化免疫指標(biāo)檢驗(yàn)結(jié)果（±s）

表1 兩種方法生化免疫指標(biāo)檢驗(yàn)結(jié)果（±s）

組別 FT4(pmol/L)FT3(pmol/L) Tg(ng/mL) TSH(μIU/mL)甲亢組(n=70)20.07±2.318.98±1.7247.47±3.620.41±0.18對照組(n=70)8.32±1.144.52±1.5224.62±4.323.74±0.61 t值6.8184.0338.4718.921 P值0.0000.0000.0000.000

2.2 CLIA甲亢檢出情況

甲亢組經(jīng)CLIA檢出陽性68例，漏診2例，陽性檢出率97.14%，漏診率2.86%；對照組均未檢出陽性。

3 討論

甲狀腺功能亢進(jìn)顧名思義就是指甲狀腺功能異常的一種疾病，甲狀腺激素是促進(jìn)新陳代謝、機(jī)體氧化還原反應(yīng)的重要激素，甲狀腺功能異常時，甲狀腺分泌的T3、T4、FT3、FT4、TSH、Tg等指標(biāo)就會有一定的變化。原則上，甲亢患者因性甲狀腺激素水平測定，檢測甲狀腺激素水平可判斷患者是否存在甲狀腺疾病，也可用于檢測患者是否存在某些臟器機(jī)能出現(xiàn)問題的情況；同時，檢測促甲狀腺激素受體抗體水平也具有檢測甲狀腺激素相同的功能，更可為發(fā)現(xiàn)和治療疾病提供依據(jù)。Tg、FT3、FT4、TSH等生化免疫指標(biāo)檢驗(yàn)不僅能反映甲狀腺功能，更能幫助判斷甲狀腺疾病類型[4]。

首先，F(xiàn)T3屬于甲狀腺素生理活性部分，當(dāng)甲狀腺功能紊亂時，可聯(lián)合FT4、TSH等指標(biāo)一起測定，對甲狀腺功能是否正常、亢進(jìn)或低下有重要意義；FT4是體外試驗(yàn)的靈敏指標(biāo)之一，與T3、T4在血液中保持相對恒定，一般FT4升高時表示患者可能出現(xiàn)甲狀腺重度、甲亢、甲狀腺受體不應(yīng)癥，降低時可能表示患者可能存在甲減、低蛋白血癥等等[5]。TSH是腺垂體分泌的促進(jìn)甲狀腺生長和維持其機(jī)能的激素，其分泌一方面受下丘腦分泌的TRH的促進(jìn)行影響，也受T3、T4反饋性的抑制性影響，TSH增高是可能表示患者存在甲減、橋本病，降低時可能表示患者存在甲亢、垂體性甲功低下[6]。Tg是甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞分泌（TFEC）的大分子糖蛋白，由甲狀腺細(xì)胞合成、釋放進(jìn)入TFEC，也可由TSH、碘缺乏和刺激性免疫球蛋白因素刺激產(chǎn)生。正常情況下，Tg在機(jī)體中的水平較低，但當(dāng)機(jī)存在部分甲狀腺病變時，因病變引起Tg合成和分泌異常[7]。

對于上述甲狀腺各項(xiàng)生化免疫指標(biāo)的檢測方法，臨床上常見的包括放射免疫分析法、酶免分析法、化學(xué)發(fā)光免疫分析法、時間分辨熒光免疫分析法，而其中放射免疫分析法和化學(xué)發(fā)光免疫分析法是最常見的兩種方法。放射免疫分析法利用同位素標(biāo)記的與未標(biāo)記的抗原同抗體發(fā)生競爭性抑制反應(yīng)，反應(yīng)分離后分別測量放射性而求得未標(biāo)記抗原的量[8]。其優(yōu)勢在于靈敏度高、特異性好，精密度高，對儀器和設(shè)備的要求不高，因而被廣泛使用，但因檢測過程容易產(chǎn)生放射性污染，檢驗(yàn)結(jié)果也受放射性元素衰減影響，手工操作也容易影響精確度?；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析法的原理是利用具有高靈敏度的化學(xué)發(fā)光測定技術(shù)與高特異性的免疫反應(yīng)相結(jié)合，用于檢測抗原、半抗原、抗體等物質(zhì)?；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析法的優(yōu)勢在于靈敏度高，線性范圍寬，儀器設(shè)備簡單，操作方便，穩(wěn)定性好，因此結(jié)果范圍波動較小[9]。

該次研究結(jié)果顯示，甲亢組患者FT3(8.98±1.72)pmol/L、FT4(20.07±2.31)pmol/L、Tg(47.47±3.62)ng/mL 等指標(biāo)檢出水平高于對照組的 (4.52±1.52)pmol/L、(8.32±1.14)pmol/L、(24.62±4.32)ng/mL，但甲亢組患者 TSH(0.41±0.18)μIU/mL顯著低于對照組(3.74±0.61)μIU/mL（t=4.033、6.818、8.471、8.921，P＜0.05）。甲亢組經(jīng)CLIA檢出陽性68例，漏診2例，陽性檢出率97.14%，漏診率為2.86%；對照組均未檢出陽性。這也顯然說明，化學(xué)發(fā)光免疫法在生化免疫檢驗(yàn)中有較高的利用價(jià)值，在靈敏度、特異性及與抗體的親和力、有效期、數(shù)量級、穩(wěn)定性上有顯著優(yōu)勢。這與肖美蓮[10]的研究結(jié)果有一致之處，肖美蓮學(xué)者針對50例甲狀腺腫瘤、50例甲亢、50例其他甲狀腺疾病患者和50名健康人員均檢測FT3、FT4、Tg、TSH等指標(biāo)。結(jié)果顯示，存在甲狀腺疾病的患者的Tg、FT3、FT4、TSH各項(xiàng)指標(biāo)平均為(9.25±1.82)pmol/L、(22.31±2.31)pmol/L、(50.44±4.62)ng/mL、(0.40±0.17)μIU/mL， 健康人員的 Tg、FT3、FT4、TSH 各項(xiàng)指標(biāo)平均為 (4.45±1.42)pmol/L、(8.29±1.12)pmol/L、(24.68±4.16)ng/mL、(3.94±0.70)μIU/mL， 兩組檢測指標(biāo)有差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），且甲亢組化學(xué)發(fā)光免疫分析檢測法靈敏度和特異性均為100%，甲狀腺腫瘤及其他甲狀腺疾病的靈敏度在85%～95%之間。這也顯然說明，化學(xué)發(fā)光免疫可有效的對甲狀腺疾病進(jìn)行檢測，可為臨床診斷提供準(zhǔn)確數(shù)據(jù)，應(yīng)在臨床檢驗(yàn)中推廣應(yīng)用。

綜上所述，利用化學(xué)發(fā)光免疫法可測定FT3、FT4、TSH、Tg等指標(biāo)可幫助臨床診斷甲亢。