清熱藥抗呼吸道合胞病毒的研究進(jìn)展

馬元榮，孫鐵鋒，王平,4，杜海濤，張恒龍

(1.山東中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，山東 濟(jì)南 250355；2.長(zhǎng)清區(qū)平安街道社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心，山東 濟(jì)南 250300；3.山東省中醫(yī)藥研究院，山東 濟(jì)南 250014；4.天津大學(xué)精密測(cè)試技術(shù)及儀器國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津 300072；5.山東東營(yíng)勝利油田中心醫(yī)院放射科，山東 東營(yíng) 257000)

呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus，RSV)是一種有胞膜的單股負(fù)鏈RNA 病毒，屬副粘病毒科肺炎病毒屬，RSV傳染性極強(qiáng)。主要是通過(guò)空氣飛沫和密切接觸傳播。多見(jiàn)于新生兒和 6 個(gè)月以?xún)?nèi)的嬰兒。3～7 日，是導(dǎo)致幼兒急性下呼吸道疾病(LRTI)和住院的主要病原體[1],嚴(yán)重時(shí)可導(dǎo)致呼吸衰竭甚至死亡。RSV 感染已被列為全球性公共衛(wèi)生問(wèn)題。RSV易侵犯體弱和年老的人群，全球每年3 380萬(wàn)5 歲以下的兒童因感染RSV患病，其中340萬(wàn)患兒因急性下呼吸道感染需要住院治療[2-4]，約92萬(wàn)例5歲以下兒童死于繼發(fā)性肺炎,占所有死亡例數(shù)的15%[5];美國(guó)RSV感染引起 78%的死亡是65歲以上的老人,直接導(dǎo)致心臟衰竭和繼發(fā)性細(xì)菌性肺炎[6]。目前臨床沒(méi)有治療 RSV 感染的特效藥，常用的抗病毒藥物為利巴韋林(Ribavirin，俗稱(chēng)病毒唑)，其具有廣譜性、毒副作用大、耐藥性強(qiáng)，近年臨床應(yīng)用呈下降趨勢(shì)[7]；純化合物新藥的開(kāi)發(fā)難度大、周期長(zhǎng)、費(fèi)用高,且化學(xué)藥物存在毒副作用大、易產(chǎn)生抗藥性等問(wèn)題。疫苗還處于臨床試驗(yàn)階段，沒(méi)有許可上市。中醫(yī)藥2 000 多年的醫(yī)治病毒性疾病的寶貴經(jīng)驗(yàn)。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外研究者已從中藥中篩選出了大量抗病毒藥物，在臨床上的應(yīng)用也越來(lái)越多。因此探尋新的具有抗RSV 活性的藥物具有重要意義。

清熱藥是以清解里熱為主要作用的藥物,其能清解里熱、治療五臟各種熱性疾病。藥性多為寒涼，少數(shù)平而偏涼，味多苦，或甘，或辛，或咸。多入肺、胃、心、肝、大腸經(jīng)[8]；有效成分為生物堿、黃酮類(lèi)、苷類(lèi)、揮發(fā)油、酚類(lèi)等化合物,其中的苷類(lèi)和黃酮類(lèi)具有抗菌、抗病毒、增強(qiáng)機(jī)體免疫力的作用[9],臨床上主要用于熱病高熱、痢疾、癰腫瘡毒、目赤腫痛、咽喉腫痛等各種里熱證候。因藥性及適應(yīng)證的不同，可分為清熱瀉火藥、清熱燥濕藥、清熱涼血藥、清熱解毒藥和清虛熱藥5類(lèi)。清熱瀉火藥常用于醫(yī)治氣分熱證和臟器火熱證，功效表述為“清氣分熱、清肺熱、清胃熱；清熱燥濕藥除濕熱，常用來(lái)醫(yī)治各種濕熱證；清熱涼血藥有清解營(yíng)分、血分熱邪之功效；清熱解毒藥具有清解火熱毒邪作用，以 “解毒”為主“清熱”為輔，主用于實(shí)火熱毒所致的病癥；清虛熱藥能清虛熱、退骨蒸，主用于午后潮熱，低熱不退等癥。本文從清熱藥的抗RSV西藥局限性、藥理作用、抗RSV病機(jī)制、抗 RSV 藥物的篩選思路等方面進(jìn)行綜述,為下一步從清熱藥類(lèi)中篩選抗RSV特效中藥提供一些新思路。

1 目前抗 RSV 藥物的局限性

目前美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)批準(zhǔn)用于預(yù)防和治療 RSV 感染的藥物是吸入型利巴韋林和帕利珠單抗，但是這兩種藥物主要用于 RSV 感染的高風(fēng)險(xiǎn)患者，其效果仍存在異議[10-11]。

利巴韋林(Ribavirin)是人工合成的核苷類(lèi)抗病毒藥，該藥的抗病毒機(jī)制是抑制RSV的復(fù)制,同時(shí)可以啟動(dòng)AKT-NF-κB途徑、增加Bcl-2、減少Bax 蛋白表達(dá),從而抑制RSV感染誘導(dǎo)的 A549 細(xì)胞初期凋亡[12]，但對(duì)病毒無(wú)直接滅活作用。它是唯一獲準(zhǔn)用來(lái)治療RSV引發(fā)的下呼吸道感染住院患者的抗病毒藥物，但仍有其局限性，如價(jià)格昂貴、治療效果欠佳，且不良反應(yīng)較多，尤其是在大劑量、長(zhǎng)時(shí)間應(yīng)用利巴韋林注射劑治療病毒性感染時(shí)，會(huì)出現(xiàn)可逆性貧血，白細(xì)胞數(shù)量減少，肝功能異常以及腸胃功能下降等，其作為抗病毒藥物，在使用上受到了很大的限制。但停藥后可恢復(fù)[13]。

帕利珠單抗(palivizumab)是一種IgG1型的RSV中和單克隆抗體，作用靶點(diǎn)是F蛋白抗原位點(diǎn)Ⅱ的保守表位，抑制F蛋白介導(dǎo)的細(xì)胞融合。在發(fā)達(dá)國(guó)家能明顯降低高危兒童RSV感染住院率但成本費(fèi)用昂貴，96%的兒童RSV流行發(fā)生在發(fā)展中國(guó)家，他們難以負(fù)擔(dān)帕利珠單抗的高額費(fèi)用[14]。

疫苗可以有效地預(yù)防病毒感染。RSV中F蛋白是單克隆抗體藥物及疫苗研制的主要對(duì)象[15]。為了有效預(yù)防RSV感染性疾病發(fā)生,人們一直在研制RSV疫苗,尤其現(xiàn)在對(duì)RSV免疫學(xué)有了更深研究，再加上新型疫苗技術(shù)的介入我們研發(fā)了一些適用于不同人群的疫苗，如兒童、孕婦或者體弱老人，曾先后有減毒活疫苗、亞單位疫苗、載體疫苗和納米顆粒疫苗等問(wèn)世,但仍沒(méi)有疫苗獲得許可上市[16]。RSV 的流行具有明顯的氣候、季節(jié)分布特征,又稱(chēng)為季節(jié)性流行病毒，其表面抗原變異性強(qiáng)，不同的流行季節(jié)可能出現(xiàn)多種 RSV亞型，并且基因型相互轉(zhuǎn)變，隨時(shí)發(fā)生新的取代舊型基因型，導(dǎo)致RSV重復(fù)感染[17-18]?，F(xiàn)有的RSV疫苗的免疫原型差，RSV的非結(jié)構(gòu)蛋白可通過(guò)抑制Ⅰ型干擾素分泌、影響樹(shù)突細(xì)胞成熟和 T 細(xì)胞反應(yīng)、下調(diào) STAT2 表達(dá)等方式抑制自燃免疫和適應(yīng)性免疫，干擾疫苗效果[19]。

2 清熱藥與抗病毒相關(guān)的藥理作用

機(jī)體感染 RSV 后，RSV 作為外源性致熱原與呼吸道上皮組織細(xì)胞表面的TLRs 結(jié)合,激活細(xì)胞產(chǎn)生和釋放內(nèi)生致熱原(endogenous pyrogen,EP),如白細(xì)胞介素-8(IL-8)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)等，IL-8、TNF等通過(guò)血-腦脊液屏障作用于體溫調(diào)節(jié)中樞的體溫調(diào)定點(diǎn),將體溫調(diào)定點(diǎn)上移，使機(jī)體產(chǎn)熱增加，末端血管收縮，汗毛孔關(guān)閉等，散熱減少，體溫上升引起發(fā)熱[17，20]。

同時(shí)上皮細(xì)胞產(chǎn)生大量的細(xì)胞因子以及趨化因子等炎癥因子，如炎癥因子IL-6、IL-17、TNF-α、IL-29等，引發(fā)氣管以及支氣管痙攣等上皮細(xì)胞的病理改變，例如黏液分泌量增多、上皮細(xì)胞碎片的脫落及中性粒細(xì)胞聚集等，這些病理改變引起細(xì)支氣管的阻塞，進(jìn)而導(dǎo)致炎癥及疾病的產(chǎn)生。

我國(guó)中草藥資源豐富，中醫(yī)藥文化底蘊(yùn)醇厚。中醫(yī)講究采用與疾病的證候性質(zhì)相反的中藥治，即治療熱性疾病，投以寒藥；但凡內(nèi)熱之高熱、惡熱、煩渴、濕瘡濕疹、濕溫、夜熱早涼等,俱可使用清熱藥。《神農(nóng)本草經(jīng)》曰“療熱以寒藥”。《黃帝內(nèi)經(jīng)》中指出：“熱者寒之”的意義，即“熱者寒之”語(yǔ)出《素問(wèn)·至真要大論》。證屬于熱的，用寒涼性藥物治療。熱證有表熱、里熱、虛熱、實(shí)熱等不同，屬于里的用“清法”。因此中醫(yī)常用清熱藥主治里熱證。

現(xiàn)代藥理研究表明，清熱藥具有解熱、抗炎、抗病原微生物作用、調(diào)節(jié)免疫功能及抗腫瘤等多種藥理作用，具有很好的研究?jī)r(jià)值和應(yīng)用前景。其抗病毒方面的活性尤其受人關(guān)注，這些藥理活性主要與其含的酚類(lèi)、苷類(lèi)和黃酮類(lèi)成分有關(guān)。

2.1 解熱作用 據(jù)本草及民間草藥記載，結(jié)合現(xiàn)代藥效學(xué)，發(fā)現(xiàn)多種中草藥具有很好的退熱作用，如石膏、知母[21]、柴胡、黃連，其清熱藥的解熱作用可能與抑制細(xì)胞反應(yīng)因子有關(guān)。

鄒珊珊等[18]研究連翹提取物不同給藥途徑對(duì)副流感病毒致熱家兔發(fā)熱模型的影響時(shí)發(fā)現(xiàn)，連翹酯苷靜脈注射和口服灌胃均能降低家兔的體溫,但靜脈注射的解熱作用優(yōu)于口服灌胃。其解熱作用可能是抑制家兔下丘腦組織中神經(jīng)元cAMP釋放，從而降低下丘腦cAMP含量,致使體溫下降。周永學(xué)等[22]研究中藥石膏解熱抗炎作用，用合格大鼠按體重隨機(jī)分為空白對(duì)照組、模型對(duì)照組、生石膏組、煅石膏組、CaSO4·2H2O組、阿司匹林組,每組分別連續(xù)灌胃7 d，用干酵母誘導(dǎo)大鼠發(fā)熱，于2、3、4、5、6、7、8、9、10 h測(cè)大鼠肛溫，結(jié)果發(fā)現(xiàn)生石膏能明顯降低發(fā)熱大鼠的溫度，其機(jī)制可能與降低下丘腦PGE2含量有關(guān)。

2.2 抗炎作用 柳金英等[23]從中西醫(yī)結(jié)合角度闡述中醫(yī)“熱毒”的主要表現(xiàn)是炎性反應(yīng),大量臨床研究表明，許多清熱藥對(duì)炎癥的各個(gè)環(huán)節(jié)均有一定的抑制作用，如金銀花、連翹、黃連、梔子、穿心蓮、蒲公英等[24]。

Lou等[25]研究金銀花提取物綠原酸治療類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎時(shí)發(fā)現(xiàn)，綠原酸可以抑制由 IL-6引發(fā)的成纖維細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞(FLSs)炎性增殖，主要與JAK- STAT，NF-κB2條信號(hào)通路相關(guān)，可以顯著減少JAK/STAT 通路上p-STAT3與JAK1 的表達(dá)以及NF-κB 通路上p50 與IKK 的表達(dá)，抑制IKK的磷酸化。Jang等[21]用仙鶴草提取物改善高脂飲食大鼠糖耐量時(shí)發(fā)現(xiàn)，高脂飲食可引起肝臟組織的炎癥反應(yīng)，仙鶴草提取物可以降低血清TNF-α、IL-6水平，抑制炎癥反應(yīng)，改善糖代謝。

2.3 抗病原微生物作用 大多數(shù)清熱藥都有一定程度的抑菌、抗病毒作用，如黃柏、黃芩、黃連、連翹、防風(fēng)、金銀花、千里光等；但其抗病原微生物范圍和強(qiáng)度各不相同?？共≡⑸镒饔玫陌l(fā)揮途徑主要是通過(guò)調(diào)動(dòng)體內(nèi)積極因素以減輕細(xì)菌、病毒對(duì)組織細(xì)胞的破壞作用和降低病原微生物毒理的方式。

陳仁德等[26]制備黃連、黃芩、連翹的中草藥提取物，采用紙片瓊脂擴(kuò)散法測(cè)定抑菌圈大小，結(jié)果顯示以上3種藥物提取物均對(duì)金黃色葡萄球菌的敏感性較高，抑菌圈大于6 mm，因此說(shuō)明對(duì)金黃色葡萄球菌的抑制度較強(qiáng)。

徐碩超[27]研究黃芩、黃連抑菌作用效果，以大腸桿菌、嗜酸乳桿菌為實(shí)驗(yàn)菌株，用比濁法來(lái)測(cè)定以上清熱藥對(duì)大腸桿菌的最小抑菌濃度(MIC)時(shí)發(fā)現(xiàn)，黃芩、黃連對(duì)大腸桿菌和嗜酸乳桿菌均有抑制作用。姚凝[28]用苦參提取物(氧化苦參堿)對(duì)慢性乙肝病人的外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs)進(jìn)行刺激,發(fā)現(xiàn)氧化苦參堿可刺激 PBMCs 釋放大量干擾素α(IFN-α)和干擾素γ(IFN-γ)，以發(fā)揮其抑制HBV作用。

2.4 對(duì)機(jī)體免疫功能的影響 清熱藥物能普遍地影響機(jī)體免疫功能的各個(gè)方面，可提高細(xì)胞的吞噬能力，促進(jìn)抗體生成及細(xì)胞免疫,從而增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能;又能抑制異常的免疫反應(yīng)[24]， 如板藍(lán)根、蒲公英、紫花地丁、半枝蓮。劉小藝等[29]綜述黃連素對(duì)腸道黏膜免疫功能有較好的調(diào)節(jié)作用。闡述黃連素可能是通過(guò)抑制Th1、Th17細(xì)胞的分解及促炎癥因子IL-6、IL-23、IL-2等的分泌，提升Treg 細(xì)胞對(duì)機(jī)體免疫作用。李吉萍等[30]研究板藍(lán)根多糖 (RIP) 抗腫瘤作用時(shí)發(fā)現(xiàn)不同劑量的板藍(lán)根多糖均可明顯抑制腫瘤的生長(zhǎng),同時(shí)還增強(qiáng)脾淋巴細(xì)胞及 NK細(xì)胞的殺傷活性,升高血清中TNF-α、INF-γ 和 IL-2的含量。由此推斷出，RIP能增強(qiáng)荷瘤小鼠的免疫功能,能延長(zhǎng)荷瘤小鼠的生存時(shí)間。

3 清熱藥抗 RSV 的機(jī)制研究

清熱藥主要通過(guò)直接和間接兩種途徑發(fā)揮抗 RSV 的作用,即祛邪兼扶正功能[31]?！办钚啊敝杆幬镏苯幼饔糜诓《荆钄嗖《緦?duì)受體細(xì)胞的吸附、穿入、復(fù)制、蛋白質(zhì)合成等繁殖過(guò)程的某一環(huán)節(jié)，繼而殺滅病毒，達(dá)到抗病毒作用;“扶正”則為間接抑制病毒，即藥物通過(guò)調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能或通過(guò)誘生干擾素(IFN)達(dá)到抗病毒的目的[32]。

3.1 直接抗病毒作用 黃筱鈞[33]研究甘草抑制RSV機(jī)制，以利巴韋林為對(duì)照，用噻唑藍(lán)(MTT)法測(cè)定，逐日記錄細(xì)胞病變效應(yīng)(CPE)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)甘草抑制病毒DNA聚合酶的活性進(jìn)而抑制RSV在細(xì)胞內(nèi)的增殖；甘草的活性成分能破壞RSV表面的蛋白結(jié)構(gòu)從而阻斷RSV與細(xì)胞的吸附，RSV包膜等結(jié)構(gòu)的活性成分被甘草破壞，導(dǎo)致RSV直接被滅活。

劉釗等[34]設(shè)置抗病毒口服液和病毒唑?yàn)閷?duì)照組，觀察病毒引起的CPE，用MTT法計(jì)算病毒抑制率發(fā)現(xiàn)，大青葉抑制RSV是發(fā)生在病毒入侵細(xì)胞后，干擾病毒基因組的復(fù)制或者阻止病毒蛋白合成，從而阻斷 RSV的復(fù)制周期。

3.2 間接抗病毒作用(免疫調(diào)節(jié)作用) 通過(guò)作用TLR/IFN-γ，激活細(xì)胞對(duì) RSV 的免疫反應(yīng)，促進(jìn)細(xì)胞因子的釋放，增加免疫球蛋白的合成，發(fā)揮抗病毒效應(yīng)[35]。張沛等[36]研究黃芩抗病毒作用，采用ELISA法檢測(cè)大鼠體內(nèi)Ⅰ型干擾素和炎性因子IL-6和IL-12的表達(dá)量的變化，結(jié)果顯示黃芩苷可上調(diào)RSV感染大鼠體內(nèi)Ⅰ-IFN的表達(dá)，并可能通過(guò)下調(diào)IL-6和IL-12的水平來(lái)抑制SOCS1/3的表達(dá)，發(fā)揮抗病毒作用。

侯憲邦等[37]研究板藍(lán)根含藥血清對(duì)呼吸道合胞病毒(RSV)感染RAW264.7細(xì)胞后對(duì)干擾素-β(IFN-β),Toll 樣受體3(TLR3)、TBK1、干擾素調(diào)節(jié)因子3(IRF3)的表達(dá)，實(shí)驗(yàn)以不同濃度的利巴韋林含藥血清為對(duì)照組，發(fā)現(xiàn)板藍(lán)根含藥血清下調(diào)TLR3信號(hào)通路關(guān)鍵信號(hào)分子 TLR3、TBK1、p-IRF3蛋白高表達(dá)有劑量依賴(lài)性，可以通過(guò)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)作用導(dǎo)致IRF3磷酸化增加，從而適度降低IFN-β的過(guò)量表達(dá)而發(fā)揮抗RSV的作用。

4 從清熱藥中篩選抗 RSV 藥物的思路

RSV感染主要為下呼吸道感染，如肺炎或細(xì)支氣管炎等，臨床表現(xiàn)主要為發(fā)燒、咳嗽、喘息、呼吸困難等癥狀。RSV 感染致病機(jī)制：RSV 感染首先直接導(dǎo)致氣道黏膜損傷，造成氣道阻塞，間接性促進(jìn)了氣道炎癥的發(fā)生。其次刺激機(jī)體釋放大量細(xì)胞因子和趨化因子，激活機(jī)體的固有免疫應(yīng)答、B 細(xì)胞介導(dǎo)的體液免疫應(yīng)答及 T 細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫應(yīng)答，從而達(dá)到抗 RSV 的作用。因此我們可以從抑制炎癥和增強(qiáng)機(jī)體免疫力兩方面探尋新的具有抗 RSV 活性的藥物[38]。

中醫(yī)通過(guò)辨證論治，多成分、多靶點(diǎn)治療不斷變異的病毒感染性疾病，具有安全、高效、不良反應(yīng)少、無(wú)耐藥性等療效優(yōu)勢(shì),因此篩選高效低毒的抗病毒中藥是當(dāng)前抗病毒研究熱點(diǎn)之一。臨床實(shí)踐證明清熱藥在抗呼吸道合胞病毒感染方面療效顯著，尤其是清熱解毒類(lèi)中藥，除殺滅病原微生物外，還具有多種免疫學(xué)活性，能非特異性增強(qiáng)免疫系統(tǒng)功能,改善機(jī)體狀況,調(diào)動(dòng)機(jī)體免疫功能，增強(qiáng)對(duì)各種感染的抵抗力。臨床中我們更注重病毒-機(jī)體-藥物三者的關(guān)系，多途徑、多環(huán)節(jié)達(dá)到整體綜合調(diào)節(jié)作用。因此，我們應(yīng)該把清熱藥作為篩選抑制RSV中藥的首選對(duì)象。

4.1 Meta 分析 Meta 分析是系統(tǒng)綜述中將以往同類(lèi)研究的結(jié)果進(jìn)行綜合分析的一種方法。李躍文等[39]用網(wǎng)狀Meta 分析補(bǔ)益類(lèi)中藥注射液輔助治療病毒性心肌炎的作用效果，對(duì)納入的文獻(xiàn)分析得出：與單用常規(guī)治療比較，生脈注射液、參麥注射液、黃芪注射液、參芪扶正注射液 4 種補(bǔ)益類(lèi)中藥注射液聯(lián)合常規(guī)較好輔助治療病毒性心肌炎，但是提高總有效率及改善心電圖方面參麥注射液為首選項(xiàng),而黃芪注射液能更好降低心肌酶 (CK-MB、AST) 水平。

我們可以通過(guò)網(wǎng)狀Meta全面分析比較國(guó)內(nèi)外清熱藥抗病毒的研究現(xiàn)狀和熱點(diǎn)。甚至用網(wǎng)狀Meta技術(shù)評(píng)價(jià)中藥聯(lián)合常規(guī)西藥治療RSV感染性疾病的療效，為進(jìn)一步臨床用藥治療病毒感染性疾病提供理論依據(jù)。通過(guò)網(wǎng)狀Meta了解中藥抗病毒作用的有效性和安全性，判斷某類(lèi)具體藥物抑制病毒作用的效果和強(qiáng)度，藥物通過(guò)哪種方式(直接滅活、阻止病毒吸附和抑制生物合成)發(fā)揮抗病毒作用，更為我們后期做清熱藥體外抗 RSV 藥理學(xué)試驗(yàn)做好準(zhǔn)備。

4.2 網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué) Hopkins[40]2007年首次提出了網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的概念。在中藥藥理作用機(jī)制研究、藥物重新定位、先導(dǎo)化合物的發(fā)現(xiàn)、新藥靶的識(shí)別以及毒副作用研究等方面取得了較好成績(jī)，具有系統(tǒng)預(yù)測(cè)、動(dòng)態(tài)分析等特點(diǎn)的研究手段,與傳統(tǒng)中醫(yī)藥整體觀與辨證論治的原則是一致的。

蘇真真等[32]利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)中的分子對(duì)接技術(shù)分析銀黃口服液成分的化學(xué)空間分布及主成分，發(fā)現(xiàn)藥物中含有治療呼吸道感染疾病的活性化合物。藥-靶網(wǎng)絡(luò)圖的虛擬篩選，分析出藥物發(fā)揮炎癥反應(yīng)的潛在靶標(biāo)，推測(cè)出了銀黃口服液抗呼吸道感染的藥效物質(zhì)。衡霞等[41]利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)技術(shù)成功篩選出黃連解毒湯的有效成分，根據(jù)活性成分進(jìn)行潛在靶點(diǎn)信息預(yù)測(cè)、通路分析及分子對(duì)接分析等，發(fā)現(xiàn)黃連解毒湯作用某靶點(diǎn)，影響相應(yīng)產(chǎn)物的代謝，從而調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞炎癥反應(yīng)。

挖掘中藥藥效成分和預(yù)測(cè)其潛在功能靶標(biāo)是網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究的兩項(xiàng)基礎(chǔ)工作,藥物-靶點(diǎn)預(yù)測(cè)技術(shù)是網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究的核心技術(shù)之一。我們可通過(guò)“藥物-靶點(diǎn)-疾病”網(wǎng)絡(luò)模式,使用高通量技術(shù)快速有效地篩選清熱藥中抗RSV的活性成分,預(yù)測(cè)出清熱藥活性分子抗RSV的具體作用機(jī)制。為我們下一步的體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證工作減少工作量,降低新藥開(kāi)發(fā)成本。

5 展望

呼吸道合胞病毒(RSV)是全球、也是我國(guó) 5 歲以下兒童呼吸道感染的主要病原體,也是繼肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌之后第三位致兒童肺炎死亡的病原體[42]。其主要病變?cè)诿?xì)支氣管，亦可涉及支氣管與肺泡，更是嬰幼兒、老年人和免疫功能低下者誘發(fā)呼吸道感染的主要原因[43]?，F(xiàn)在仍沒(méi)有令人滿(mǎn)意的安全性好針對(duì)性強(qiáng)的疫苗出現(xiàn),供臨床使用醫(yī)治RSV的藥品較少。目前國(guó)內(nèi)外在中西醫(yī)方面對(duì)抗RSV的研究日益增多，西醫(yī)講究對(duì)癥治療RSV感染，其藥物主要為抗病毒藥物、支氣管擴(kuò)張劑、抗炎藥和免疫調(diào)節(jié)劑等。但這些藥物對(duì)機(jī)體存在嚴(yán)重的毒副作用,而疫苗免疫率又較低。與化學(xué)藥相比,中藥可通過(guò)增強(qiáng)機(jī)體的免疫力,多方位抗擊病毒感染，使病毒對(duì)其難以產(chǎn)生耐藥性，其次中藥治療呼吸道感染時(shí)毒副作用較輕、治愈溫和、資源豐富，價(jià)格低廉，這正是中藥抗病毒所具有的獨(dú)特優(yōu)勢(shì)。

清熱藥的研究歷史悠久,藥理作用廣泛，大量的研究表明,清熱藥具有解熱、抗炎、抗病原微生物作用、調(diào)節(jié)免疫功能及抗腫瘤等多種藥理作用，因其具有較強(qiáng)的抗病毒活性逐漸受到重視。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外對(duì)清熱藥抗病毒作用進(jìn)行了篩選，在實(shí)驗(yàn)和臨床研究中都有很大進(jìn)展，但是清熱藥抗 RSV 的研究仍集中在單味中藥抑制病毒增殖或調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫應(yīng)答方面,且作用機(jī)理尚不清晰;研究思路多效仿西藥模式,缺乏中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)；實(shí)驗(yàn)研究處于細(xì)胞水平，與臨床用藥相脫節(jié)。

因此，在清熱藥抗RSV的篩選中，我們應(yīng)該除了從單味藥著手外，也應(yīng)對(duì)復(fù)方制劑、拆方、中藥有效成分、多種有效成分聯(lián)合應(yīng)用等多個(gè)方面進(jìn)行研究，為研發(fā)抗RSV的新劑型提供參考條件；其次調(diào)整抗病毒機(jī)理研究方向，如用含藥血清為樣品,模擬藥物代謝的體內(nèi)過(guò)程,使結(jié)果與臨床用藥特點(diǎn)更相近；可深入研究清熱藥抗RSV作用機(jī)制,為快速尋找安全有效、特異性針對(duì)RSV感染的高效能中藥作出貢獻(xiàn)。