痰瘀同治法對(duì)心肌缺血再灌注損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究

王義強(qiáng)，靳宏光，齊 鋒，常立萍*

（長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，吉林 長(zhǎng)春 130021）

急性心肌梗死嚴(yán)重影響人類生命健康，及早恢復(fù)冠脈血流是治療的關(guān)鍵，然而缺血心肌血流恢復(fù)可能引起一系列的不良事件發(fā)生。因此，探討心肌缺血再灌注損傷的機(jī)制并研發(fā)有效地防治缺血再灌注損傷的藥物是提高療效的關(guān)鍵。本文通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，研究中醫(yī)痰瘀同治法對(duì)心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用，并初步探討其作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與材料

健康雄性SD大鼠50只，體重220～250 g，北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物公司提供；參紅通絡(luò)顆粒由長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院制劑中心提供；肌酸激酶同工酶（CK-MB）、肌鈣蛋白T（c-TnT）試劑盒由南京建成生物工程研究所提供。

1.2 分組及給藥

50只SD大鼠隨機(jī)分成五組，每組10只，A組：假手術(shù)組；B組：缺血再灌注組；C組：參紅通絡(luò)顆粒低劑量組；D組：參紅通絡(luò)顆粒中劑量組；E組：參紅通絡(luò)顆粒高劑量組。C、D、E組每次分別給予參紅通絡(luò)顆粒200、400、800 mg/kg，溶于2 mL生理鹽水中灌胃，A組、B組給予等量生理鹽水，2次/d，連續(xù)灌服7天。

1.3 大鼠心肌缺血再灌注模型的制作

2%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉大鼠，固定操作臺(tái)，胸部術(shù)前備皮，記錄Ⅱ?qū)?lián)心電圖，氣管切開插管后接小動(dòng)物呼吸機(jī)，機(jī)械輔助通氣。沿胸骨左緣0.5 cm切開皮膚，打開胸腔，暴露心臟，剪開心包，暴露動(dòng)脈圓錐與左心耳根部間的左冠狀靜脈，以其作為標(biāo)志，環(huán)繞左冠狀動(dòng)脈前降支（LAD）根部用結(jié)扎線（穿6/0縫線）在左心耳根部下方2 mm處，以深1.5～2 mm，寬2～3 mm穿過心肌表層，結(jié)扎冠狀動(dòng)脈左前降支。線結(jié)下置入一個(gè)直徑約1 mm乳膠管，系緊結(jié)扎線，阻斷前降支血流。結(jié)扎后，迅速將心臟送回胸腔，并擠出胸腔內(nèi)的空氣，關(guān)閉胸腔。結(jié)扎30 min后剪開結(jié)扎線，抽出乳膠管再灌注，造成心肌缺血再灌注損傷模型（假手術(shù)組只穿線不結(jié)扎），再灌時(shí)再次記錄Ⅱ?qū)?lián)心電圖。缺血及再灌注造模成功的標(biāo)志是心電圖ST段變化和心肌顏色的改變，結(jié)扎前降支后心電圖ST段抬高大于0.2 mV，局部心肌顏色變灰，再灌注時(shí)抬高的ST段回落大于50%，局部心肌顏色變紅[1]。

1.4 觀察指標(biāo)

血清CK-MB、cTnI水平的測(cè)定；再灌注180 min后，立即腹主動(dòng)脈取血2 mL，按試劑盒說明檢測(cè)血清CK-MB、cTnI水平。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，計(jì)量資料以“±s”表示，采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例數(shù)（n），百分?jǐn)?shù)（%）表示，采用x2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

參紅通絡(luò)顆粒對(duì)心肌缺血再灌注大鼠血清CK-MB、cTnI含量的影響，B、C、D、E組血清CK-MB、cTnI水平顯著高于A組（P＜0.01），而不同劑量參紅通絡(luò)顆粒組再灌注后血清中CK和cTnI的含量與IR組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05；P＜0.01）。見表1。

表1 各組大鼠血清CK-MB、cTnI含量比較（±s）

表1 各組大鼠血清CK-MB、cTnI含量比較（±s）

注：與A組比較，*P＜0.01；與B組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01

A組 B組 C組 D組 E組CK-MB 412.3±56.8 1720.8±332.1* 1127.9±296.7*△ 1076.5±289.6*△△ 832.3±215.0*△△cTnI 4.33±1.78 65.87±12.65* 47.23±12.87*△ 35.17±14.26*△△ 28.68±13.72*△△

3 討 論

心肌缺血再灌注損傷是指冠脈血管部分和（或）完全急性閉塞后，短時(shí)間內(nèi)重新獲得再通時(shí)，缺血的心肌雖然恢復(fù)正常灌注，而心肌組織損傷反而呈進(jìn)行性加重的過程。大量的基礎(chǔ)研究證實(shí)，運(yùn)用活血化瘀方法可有效改善再灌注損傷[2-3]。

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為心肌缺血再灌注形成之后，其病機(jī)是本虛標(biāo)實(shí)，本虛為氣虛、陽(yáng)虛、陰虛；標(biāo)實(shí)為痰濁、氣滯、血瘀，我們結(jié)合已故國(guó)醫(yī)大師任繼學(xué)教授提出的伏邪理論，并結(jié)合國(guó)家中醫(yī)臨床研究基地階段性研究成果，認(rèn)為痰瘀是心肌缺血再灌注損傷發(fā)生發(fā)展過程中的重要病理因素。在心肌缺血再灌注的發(fā)生發(fā)展過程中，痰瘀是自始至終存在的病理狀態(tài)，在臨床前期（心肌缺血再灌注前），痰瘀蘊(yùn)結(jié)成毒，伏于血絡(luò)；臨床期（心肌缺血再灌注后）痰瘀伏絡(luò)，久而不愈，壅塞脈絡(luò)，正不勝邪，觸動(dòng)而發(fā)。因此有效的干預(yù)痰瘀伏邪是治療心肌缺血再灌注損傷的有效方法。參紅化濁通絡(luò)顆粒根據(jù)痰瘀伏于人體至虛之處的特點(diǎn)，由人參、紅景天、瓜蔞、半夏、丹參、水蛭、降香等組成，具有益氣活血、豁痰通絡(luò)之功，方以人參為君藥，大補(bǔ)元?dú)?，尤補(bǔ)脾肺之氣，脾為生痰之源，肺為儲(chǔ)痰之器，因氣能生血，亦能行血，故脾肺氣血充足，痰濁不生，行血有力；丹參、紅景天為臣藥，健脾益氣，活血化瘀；佐以瓜蔞、半夏、水蛭等以健脾燥濕，行氣豁痰，活血定痛；使之以降香，取其走竄通行，引諸藥歸心經(jīng)，入血絡(luò)，使藥效直達(dá)病所。我們?cè)谇捌诘难芯恐幸炎C實(shí)，基于痰瘀伏邪理論指導(dǎo)的參紅通絡(luò)顆粒對(duì)血脂異常及頸動(dòng)脈粥樣硬化均具有較好的臨床療效。本研究發(fā)現(xiàn)，參紅通絡(luò)顆?？梢悦黠@降低心肌缺血再灌注大鼠心肌損傷標(biāo)志物水平，對(duì)缺血心肌具有保護(hù)作用。