狗肝菜中有機(jī)酸的提取工藝及含量測(cè)定

姚山梅

摘要：本試驗(yàn)以狗肝菜為原料，研究了乙醇濃度、料液比、超聲波提取時(shí)間及超聲波提取溫度對(duì)狗肝菜中總有機(jī)酸提取量的影響規(guī)律，采用酸堿滴定法對(duì)其含量進(jìn)行測(cè)定，最終確定狗肝菜中總有機(jī)酸的最佳提取工藝。

關(guān)鍵詞：狗肝菜;有機(jī)酸;酸堿滴定;正交實(shí)驗(yàn)

中圖分類(lèi)號(hào)：G633.91 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B文章編號(hào)：1672-1578（2019）33-0190-01

1.材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料。

儀器 KQ3200B型超聲波清洗儀（昆山市超聲儀器有限公司）;烘箱（上海?，攲?shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）;電子天平（奧豪斯儀器上海有限公司）;密封型搖擺式中藥粉碎機(jī)（無(wú)錫市江成液壓機(jī)械公司）

試劑 無(wú)水碳酸鈉基準(zhǔn)試劑（天津市化學(xué)試劑批發(fā)公司）;鄰苯二甲酸氫鉀（天津市光復(fù)科技發(fā)展有限公司）;氫氧化鈉（分析純，成都市科龍化工試劑廠）;鹽酸（分析純，廣東省精細(xì)化學(xué)品工程技術(shù)研究開(kāi)發(fā)中心）;酚酞（成都市科龍化工試劑廠）;溴甲酚綠 （成都市科龍化工試劑廠）;甲基紅（成都市科龍化工試劑廠）;甲基橙（廣州化學(xué)試劑廠）;95%乙醇（分析純，成都市科龍化工試劑廠）

樣品? 狗肝菜，購(gòu)自崇左菜市場(chǎng)

1.2 實(shí)驗(yàn)方法。

采用單因素實(shí)驗(yàn)、正交實(shí)驗(yàn)，探究乙醇濃度、料液比、超聲波提取時(shí)間及溫度對(duì)狗肝菜中總有機(jī)酸提取量的影響規(guī)律，利用酸堿滴定法對(duì)其總有機(jī)酸的含量進(jìn)行測(cè)定，最終確定最佳提取條件。

工藝流程：采集狗肝菜→清洗→烘干→粉碎→乙醇浸潤(rùn)→超聲波振蕩→總有機(jī)酸含量測(cè)定

2.結(jié)果與分析

2.1 單因素實(shí)驗(yàn)。

2.1.1 不同乙醇濃度對(duì)提取效果的影響。

準(zhǔn)確稱(chēng)取5份狗肝菜葉粉末各1.0000g，在超聲提取溫度65℃、超聲提取時(shí)間30min、料液比﹝狗肝菜葉粉末（g）：乙醇（ml）﹞1：30的條件下，分別在乙醇濃度55%，65%，75%，85%，95%條件下提取，比較不同乙醇濃度對(duì)提取物中總有機(jī)酸含量的影響，乙醇濃度小于75%之時(shí)，有機(jī)酸含量隨著乙醇濃度的增大而增加，但超過(guò)75%時(shí)，總酸含量反而下降。這可能是因?yàn)橐掖紳舛冗^(guò)小時(shí)，不利于有機(jī)酸的浸出;濃度過(guò)大時(shí)，引起產(chǎn)物結(jié)構(gòu)的變化。因此提取有機(jī)酸乙醇的濃度為75%時(shí)為最優(yōu)。

2.1.2 不同料液比對(duì)提取效果的影響。

準(zhǔn)確稱(chēng)取5份狗肝菜葉粉末各1.0000g，在超聲提取溫度為65℃、超聲提取時(shí)間為30min，乙醇濃度為85%的條件下，分別于液料比為1：10，1：20，1：30，1：40，1：50的條件下提取，比較不同料液比對(duì)提取物中總有機(jī)酸含量的影響，當(dāng)料液比小于1：30時(shí)，有機(jī)酸提取率隨著料液比的增加而增加;當(dāng)料液比大于1：30時(shí)，有機(jī)酸提取率反而下降。這可能是因?yàn)榱弦罕冗^(guò)小時(shí)，浸提液太小，從而影響有機(jī)酸提取;若加水過(guò)多，不利于后濃縮，因此提取有機(jī)酸料液比為1：30時(shí)為最優(yōu)。

2.1.3 不同提取時(shí)間對(duì)提取效果的影響。

準(zhǔn)確稱(chēng)取5份狗肝菜葉粉末各1.0000g，在超聲提取溫度65℃、料液比﹝狗肝菜葉粉末（g）：乙醇（ml）﹞1：30，乙醇濃度為85%的條件下，分別超聲提取20min，30min，40min，50min，60min，比較不同超聲提取時(shí)間對(duì)提取物中總有機(jī)酸含量的影響，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，有機(jī)酸提取率先上升后下降。說(shuō)明有機(jī)酸浸出過(guò)程與時(shí)間密切相關(guān)，時(shí)間過(guò)短，有機(jī)酸浸出不充分，但時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，可能影響產(chǎn)物結(jié)構(gòu)的變化，從而使提取率降低。因此提取有機(jī)酸超聲提取時(shí)間為35min時(shí)為最優(yōu)。

2.1.4 不同提取溫度對(duì)提取效果的影響。

準(zhǔn)確稱(chēng)取5份狗肝菜葉粉末各1.0000g，在超聲提取時(shí)間30min、料液比﹝狗肝菜葉粉末（g）：乙醇（ml）﹞1：30，乙醇濃度為85%的條件下，分別在超聲提取溫度55℃，60℃，65℃，70℃，75℃條件下提取，比較不同超聲提取溫度對(duì)提取物中總有機(jī)酸含量的影響，當(dāng)提取溫度小于70℃時(shí)，隨著溫度的升高，狗肝菜有機(jī)酸提取率隨之增大;當(dāng)溫度繼續(xù)升高，有機(jī)酸提取率呈下降趨勢(shì)。說(shuō)明溫度升高有利于有機(jī)酸的浸出，但溫度過(guò)高會(huì)影響有機(jī)酸的穩(wěn)定性。因此提取有機(jī)酸超聲提取溫度為65℃時(shí)為最優(yōu)。

2.2 驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)。

精密稱(chēng)取狗肝菜葉粉末1.0000g3份，在最佳組合條件，即乙醇濃度75%，料液比1：30，提取時(shí)間35min，提取溫度65℃的條件下，按擬定方法進(jìn)行提取，測(cè)定，計(jì)算含量。在此最佳參數(shù)組合條件下，有機(jī)酸含量的平均值為7.03%，提取率大于正交試驗(yàn)表中的任何一組，為最佳選擇。

2.3 精密度實(shí)驗(yàn)。

精密稱(chēng)取狗肝菜葉粉末1.0000g，在最佳組合條件，即乙醇濃度75%，料液比1：30，提取時(shí)間35min，提取溫度65℃的條件下，按擬定方法進(jìn)行提取，平行測(cè)定5次，計(jì)算含量。相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為1.02%，表明該工藝提取方法測(cè)定總酸含量精密度良好。

2.4 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)。

精密稱(chēng)取狗肝菜葉粉末1.0000g，在最佳組合條件，即乙醇濃度75%，料液比1：30，超聲時(shí)間35min，超聲溫度65℃的條件下，按擬定方法進(jìn)行提取，分別于0h，2h，4h，6h，8h，12h進(jìn)行含量測(cè)定，計(jì)算含量。相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為1.35%，表明該工藝提取方法測(cè)定總酸含量在12h內(nèi)是穩(wěn)定的。

3.討論

雖然中草藥中有機(jī)酸類(lèi)成分的提取分離及測(cè)定方法有很多，但其適用范圍條件各有所差異。要選擇出一種適合的提取分離和分析測(cè)定方法，除了要考慮所需要分析的有機(jī)酸類(lèi)成分的結(jié)構(gòu)組成和性質(zhì)外，還需要充分考慮提取物中其它物質(zhì)成分可能對(duì)有機(jī)酸造成的干擾。因此，在實(shí)際應(yīng)用中要根據(jù)具體情況做具體分析，綜合各因素考慮，以確定出最佳的提取分離及測(cè)定方法。

參考文獻(xiàn)：

[1]陳顯雙.狗肝菜及其栽培技術(shù)[J].廣西熱帶農(nóng)業(yè)，2005（1）：41.

[2]李南薇，范媛媛，陸映機(jī).狗肝菜多糖提取工藝研究[J].廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011（11）：116-117.