某地區(qū)體檢女性人乳頭瘤病毒感染及亞型的分析

張保華 李 哲 景建瑜 李筱梅 牛旺福 蘇 雪 于明利 高 杰 劉 瑩 王浩飛

（北京迪安醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室有限公司，北京 102609）

宮頸癌在我國(guó)女性惡性腫瘤的發(fā)病率和病死率中居第二位。每年約46500名新發(fā)癌患者。研究發(fā)現(xiàn)，近90%的宮頸癌患者宮頸脫落細(xì)胞中均可檢測(cè)到HPV，其中高危型HPV與宮頸癌密切相關(guān)。人乳頭瘤病毒是一種嗜黏膜和皮膚上皮性病毒，是導(dǎo)致宮頸上皮增生和宮頸癌的主要因素[1]。至今為止，已鑒定出約一百多種HPV病毒，約有30多種可以感染人的生殖道黏膜。不同類(lèi)型HPV病毒的致病性有很大不同。依據(jù)HPV病毒引起的增生性病變是否致癌，可將其分為低危型和高危型兩大類(lèi)。近年來(lái)，宮頸HPV感染逐步趨向年輕化，年輕女性宮頸癌發(fā)病率明顯上升[2]。從HPV感染，到宮頸癌前病變，通常需要經(jīng)歷五到十年的時(shí)間。只有高危型HPV持續(xù)感染才會(huì)有罹患宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn)，不同的高危型別HPV病毒也有不同的致癌風(fēng)險(xiǎn)[3]，因此，針對(duì)性進(jìn)行HPV分型檢測(cè)，對(duì)宮頸癌的早期發(fā)現(xiàn)、治療、和手術(shù)效果監(jiān)測(cè)具有非常重要的意義。本文通過(guò)流式熒光雜交法，檢測(cè)健康人群中HPV各亞型的感染情況，并對(duì)感染HPV的相關(guān)因素進(jìn)行探討分析。有利于早期的宮頸癌的篩查，對(duì)降低和預(yù)防宮頸癌有一定的意義，從而讓女性對(duì)宮頸癌以及HPV有更深一步的認(rèn)知和重視。

1 資料與方法

1.1 一般資料：2018年1～6月送至北京迪安進(jìn)行HPV基因分型檢測(cè)的38338例女性宮頸脫落細(xì)胞樣本。

1.2 儀器與試劑：LifeECO PCR擴(kuò)增儀（杭州博日），Luminex200多功能流式點(diǎn)陣分析儀（美國(guó)Luminex公司）。HPV核酸分型檢測(cè)試劑盒（流式熒光雜交法）購(gòu)自上海透景生命科技股份有限公司。

1.3 方法

1.3.1 樣本采集：醫(yī)護(hù)人員用擴(kuò)陰器，將宮頸口暴露，用棉拭子擦去宮頸口的分泌物，將宮頸刷伸入宮頸口處，緊貼宮頸口，順時(shí)針輕柔轉(zhuǎn)動(dòng)4～5周，慢慢抽出宮頸刷，將其放入裝有細(xì)胞保存液的洗脫管中，在管口處沿刷柄折痕將宮頸刷折斷，宮頸刷頭留在洗脫管中，旋緊管蓋，做好樣本標(biāo)識(shí)，并保持洗脫管直立放置。

1.3.2 檢測(cè)方法：檢測(cè)流程包括以下四個(gè)步驟：DNA提取，PCR擴(kuò)增，產(chǎn)物雜交和基因型檢測(cè)。每一步嚴(yán)格按照HPV分型檢測(cè)試劑盒（流式熒光雜交法）說(shuō)明書(shū)操作。所用試劑盒共檢測(cè)27種HPV病毒亞型，包括17種高危亞型（16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68、82、53、26）和10種低危亞型（6、11、43、83、40、44、81、55、42、61）。

2 結(jié)果

2.1 HPV感染率：38338例受檢對(duì)象中，共檢出4297例HPV陽(yáng)性感染者，HPV的總體感染率11.21%，其中高危型別感染2962例，感染率7.73%，低危型別感染1135例，感染率3.48%；單一型別感染3352例，感染率8.74%，多重型別感染945例，感染率2.46%。

2.2 HPV感染亞型分布

2.2.1 本研究中有17種高危型別可被檢出，其中感染率最高的為HPV16，感染率1.51%，其次為HPV58、HPV52、HPV53，感染率分別為1.46%、1.24%、1.08%，HPV56、HPV66、HPV39、HPV51、HPV59感染率分別為0.74%、0.72%、0.70%、0.70%、0.61%，HPV18、HPV33、HPV35、HPV31、HPV82、HPV68、HPV45、HPV26感染率分別為0.52%、0.33%、0.29%、0.21%、0.19%、0.15%、0.13%、0.02%。

2.2.2 本研究中有10種低危型別可被檢出，其中感染率最高的為HPV61，感染率為0.94%，其次為HPV43、HPV81，感染率分別為0.72%和0.64%，HPV55、HPV44、HPV6、HPV42、HPV11、HPV40、HPV83，感染率分別為0.39%、0.37%、0.29%、0.20%、0.13%、0.13%、0.07%。

2.3 各年齡組HPV 感染情況：見(jiàn)表1。對(duì)受檢人群按照年齡段分組，HPV感染率最高為≤30歲人群，8450受檢者中感染1122例，感染率13.28%；HPV感染率最低為＞60歲人群，2270受檢者中感染218例，感染率8.33%。各年齡組間比較，P＞0.05，均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 各年齡組HPV感染情況

2.4 各年齡段HPV亞型分布

表2 高危亞型各年齡段感染情況（%）

2.4.1 各年齡段高危亞型感染情況：見(jiàn)表2。各年齡段均以HPV16亞型感染率最高，≤30歲年齡組HPV16亞型感染率最高，為2.24%。

2.4.2 各年齡段低危亞型感染情況：見(jiàn)表3?！?0歲組以HPV43亞型感染率最高，為1.01%；其余齡段以HPV61亞型感染率最高。

表3 各年齡段低危亞型感染情況（%）

3 討 論

HPV感染與生殖器疾病密切相關(guān)。不同型別HPV具有不同的致病性，持續(xù)高危HPV感染是宮頸鱗狀上皮內(nèi)病變和宮頸癌的主要原因；低危HPV感染與宮頸良性和低度病變相關(guān)，如尖銳濕疣[4]。HPV主要以性傳播為主，目前，國(guó)內(nèi)各地區(qū)有關(guān)HPV感染與宮頸癌病變關(guān)系的調(diào)研已廣泛開(kāi)展[5]。通過(guò)HPV 分型檢測(cè)技術(shù)來(lái)篩查宮頸癌，對(duì)于宮頸癌的早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷及早期治療具有重要的臨床意義[6]。

本研究結(jié)果表明，本地區(qū)HPV的總體感染率為11.21%。不同地區(qū)HPV感染率有所差別。徐帥師等[7]報(bào)道了河北地區(qū)HPV感染率為33.05%，田凌君[8]報(bào)道了山西地區(qū)HPV感染率為25.86%，張雅麗等[9]報(bào)道了內(nèi)蒙古地區(qū)HPV感染率為28.89%，裴莉等[10]報(bào)道了大連地區(qū)HPV感染率為18.73%。本地區(qū)HPV感染率明顯低于河北、山西、內(nèi)蒙古和大連四個(gè)地區(qū)，可能是由不同地區(qū)居住環(huán)境和生活習(xí)慣的差異導(dǎo)致的。

本研究結(jié)果表明，本地區(qū)HPV感染以單一型別和高危型別為主，這與時(shí)宇等[11]的研究結(jié)果相似。本研究中高危型別的檢出率為7.73%，低危型別檢出率為3.48%。其中排在前四位的高危型別是HPV16、58、52、53，這與山西地區(qū)[8]和河北地區(qū)[7]研究結(jié)果一致，與內(nèi)蒙古地區(qū)[9]和大連地區(qū)[10]相比存在順序差異。低危型別感染率最高的前三位型別是HPV61、43、81，這與河北、山西、內(nèi)蒙古和大連地區(qū)均有所差異，這說(shuō)明與高危型別相比，低危型別的地域差異更明顯。

HPV感染與年齡因素有一定關(guān)系，有國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道[12]，HPV感染年齡近似為“U”型分布相符本。本研究結(jié)果顯示，HPV感染率最高為≤30歲人群，其次為51～60歲年齡組，＞60歲年齡組HPV感染最低，為8.33%，其分布與國(guó)外報(bào)道有所差異?！?0歲人群可能因性生活過(guò)早、過(guò)頻、多性伴侶及各種激素食品的食用現(xiàn)象的出現(xiàn)有關(guān)[13]；51～60歲年齡組可能因隨著年齡的增加，女性激素分泌的改變使生理和免疫功能發(fā)生紊亂而易感染HPV[14]。＞60歲年齡組可能較其他年齡段人群存在數(shù)據(jù)量不足，因此導(dǎo)致出現(xiàn)感染率差異。

本研究結(jié)果顯示，各型別與年齡因素也存在一定關(guān)系。各年齡組中高危型HPV感染最高的前四位均為HPV16、52、53、58，但≤30歲年齡組和31～40歲年齡組感染率最高為HPV16，其他年齡組為HPV58；各年齡組中低危型HPV感染最高的前三位均為HPV43、61、81，但≤30歲年齡組感染率最高為HPV43，其他年齡組均為HPV61。這表明各型別感染率在各年齡組之間存在一定的差異，但感染率高的型別在各年齡依舊保持高的感染率。

綜上所述，北京市體檢女性HPV感染類(lèi)型以單一感染和高危型感染為主，感染率較高的高危型HPV基因型依次為16、58、52和53型，不同年齡段的HPV感染率存在差異，各型別在不同年齡段的感染率有所差別。