• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    不同磷濃度條件下地表球囊霉對黃瓜枯萎病抗性和抗氧化酶活性的影響

    2019-11-28 10:54:11王倡憲王艷張志
    江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2019年18期
    關(guān)鍵詞:菌根黃瓜病原菌

    王倡憲 王艷 張志

    摘要:試驗采用盆缽培養(yǎng)的方法于黃瓜育苗時接種地表球囊霉(G. versiforme),并分別澆灌磷濃度為0、31、93 mg/kg 的營養(yǎng)液,于苗齡為4周時,采用灌根法接種尖孢鐮刀菌(Fusarium oxysporum f. sp.)分生孢子懸液,以明確不同磷濃度條件下G. versiforme對黃瓜幼苗枯萎病的防效及相關(guān)酶活性的影響。結(jié)果表明,磷濃度為31 mg/kg時,G. versiforme可明顯提高黃瓜幼苗對枯萎病的抗性,接種病原菌后9 d時,菌根化幼苗的病情指數(shù)較相應(yīng)對照降低10百分點;同時,接種G.versiforme的幼苗葉片中蔗糖含量為其相應(yīng)對照的1.4倍。幼苗接種病原菌后,與各自相應(yīng)的對照相比,接種G.versiforme處理葉片中多酚氧化酶(PPO)活性較高,過氧化物酶(POD)活性相對穩(wěn)定,且峰值出現(xiàn)時間較晚。

    關(guān)鍵詞:黃瓜;地表球囊霉;磷濃度;枯萎病;抗病性;抗氧化酶

    中圖分類號: S436.421.1+3文獻標志碼: A

    文章編號:1002-1302(2019)18-0129-03

    收稿日期:2018-08-03

    基金項目:黑龍江省教育廳科學(xué)技術(shù)研究項目(編號:12511403)。

    作者簡介:王倡憲(1974—),女,內(nèi)蒙古包頭人,博士,副教授,主要從事植物根際營養(yǎng)的教學(xué)與科研工作。E-mail:wangcxsz08@163.com。

    黃瓜(Cucumis sativus L.)作為我國主要栽培蔬菜種類之一,近年來,種植面積和產(chǎn)量均呈現(xiàn)增加趨勢,與此同時,土傳病害逐年加重是黃瓜栽培過程中存在的一個古老而又現(xiàn)實的問題[1-3]。其中,由尖孢鐮刀菌黃瓜?;停‵usarium xysporum f.sp.cucumerinum)病原菌引起的枯萎病易發(fā)難防,危害嚴重,目前,該病以化學(xué)農(nóng)藥防治為主,而由此引起的瓜果質(zhì)量下降與環(huán)境污染問題已成為人們?nèi)找骊P(guān)注的焦點[4]。

    隸屬于球囊霉門的叢枝菌根(arbuscular mycorrhizal,AM)真菌廣泛分布于農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)中,該類真菌可以和包括黃瓜在內(nèi)的約90%維管植物形成菌根共生體,互惠型共生體建成后,AM真菌對寄主的生長發(fā)育及抗逆性的提高均表現(xiàn)出積極效應(yīng)[5-6]。近年來,有關(guān)AM真菌對黃瓜枯萎病防效及其機制的研究陸續(xù)展開,但是,結(jié)果卻不盡相同,主要是由于AM真菌的防效與AM真菌種類、寄主、土壤環(huán)境等諸多因素有關(guān),其中,介質(zhì)中的磷水平是影響共生體發(fā)育的最根本因素[7-13]。鑒于此,本試驗探索不同磷濃度條件下AM真菌對黃瓜枯萎病的抗性及不同處理下黃瓜葉片中與抗性相關(guān)酶活性的變化,以明確AM真菌對黃瓜枯萎病的防效及適宜磷濃度,并為深入研究相關(guān)機制奠定理論基礎(chǔ)。

    1?材料與方法

    1.1?試驗材料

    黃瓜:津綠3號,由天津科潤黃瓜研究所提供。播種前將充分吸水的種子在10% H2O2中浸泡10 min進行表面消毒,然后用蒸餾水洗凈藥液,在55 ℃條件下水浴浸種,浸種時不斷攪拌,持續(xù)20 min,使種子吸水膨脹,供給種子萌發(fā)所需基本水量,并起到種子表面消毒的作用,取出后于28 ℃恒溫箱中黑暗催芽。

    育苗基質(zhì)及容器:將滅菌的草炭與蛭石以1 ∶1的體積比混合均勻。營養(yǎng)缽(上口徑8.5 cm,底徑6.0 cm,高7.5 cm)用福爾馬林密封1周進行消毒處理,待氣味散盡后備用。

    AM菌劑:以玉米為寄主,以草炭為基質(zhì)擴繁2個月,混合接種劑中含有地表球囊霉(G.versiforme,縮寫為G.v)真菌的孢子、菌絲和被侵染根段。

    病原菌(Fusarium oxysporum f.sp.,略寫為F.o,由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護研究所提供)孢子懸液:先將病原菌在馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)培養(yǎng)基上25 ℃黑暗培養(yǎng)3 d,然后從菌落邊緣挑取2塊直徑為3~4 mm的菌塊于滅菌的馬鈴薯-葡萄糖培養(yǎng)液中28 ℃、50 r/min培養(yǎng)2周,用消毒的雙層紗布濾掉菌絲,將剩余的培養(yǎng)液于4 ℃、9 000 r/min 下離心3次,收集孢子懸液,用血球板計數(shù),最后用10 mmol/L MgSO4·7H2O調(diào)節(jié)孢子濃度至5×104 CFU/mL。病原菌孢子懸液制備過程中的所有器皿及制備后的病原菌殘余物均須滅菌處理。

    1.2?試驗設(shè)計

    本試驗共設(shè)6個處理。AM真菌:接種G.v(M)、不接種G.v的對照(NM);磷水平:P0(0 mg/kg)、P1(31 mg/kg)、P2(93 mg/kg)。

    6個處理分別表示為:(1)MP0;(2)MP1;(3)MP2;(4)NMP0;(5)NMP1;(6)NMP2。每處理設(shè)15次重復(fù)。磷以Ca(H2PO4)2·H2O的形式加入Hoagland營養(yǎng)液中,調(diào)節(jié)營養(yǎng)液pH值為6.5。

    1.3?試驗實施

    試驗采用生物模擬培養(yǎng)的方法于人工氣候室進行。每盆裝基質(zhì)90 g,播種2粒黃瓜種子,出苗后留1株,其中接種AM真菌處理將菌劑與基質(zhì)混勻裝盆,每盆菌劑用量為10 g,不接種的對照加入等量的滅菌菌劑和10 mL菌種濾液,以保證其他微生物的種類一致。從播種開始,1周后出苗,第2周開始隔日澆灌1/4強度不同P濃度營養(yǎng)液,第3周真葉展開,澆灌1/2強度不同磷濃度的營養(yǎng)液。出苗4周后采用灌根法接種病原菌,每盆接種20 mL病原菌孢子懸液,接種后即停止?jié)补酄I養(yǎng)液。

    1.4?分析測定

    分別于接種病原菌后1、3、5、7、9 d隨機取3株黃瓜幼苗進行葉片中多酚氧化酶(PPO)、過氧化物酶(POD)活性測定,同時取根樣調(diào)查根系發(fā)病情況,最后1次取樣測定植株生物量并計算病情指數(shù);植株葉片全氮、全磷含量用FIA分析儀測定;菌根侵染率用網(wǎng)格交叉法測定[14];PPO活性采用兒茶酚比色法、POD活性采用愈創(chuàng)木酚比色法[15]測定。

    2?結(jié)果與分析

    2.1?不同磷濃度條件下,AM真菌對植株生長及抗病性的影響

    從表1可以看出,植株長勢及生物量隨介質(zhì)中磷濃度的增加而增加,并且以磷濃度為93 mg/kg時植株生物量最高。3種磷濃度條件下,只有無磷處理條件下接種AM真菌的植株生物量顯著高于其相應(yīng)的對照,磷濃度為31、93 mg/kg 時,接種AM真菌幼苗的生物量與其各自相應(yīng)對照間差異均未達到顯著水平,表明在無磷營養(yǎng)脅迫條件下,AM真菌具有顯著的促生效應(yīng),隨著介質(zhì)中磷濃度的升高,AM真菌的促生效應(yīng)降低。蔗糖作為植株體內(nèi)光合作用的主要運輸產(chǎn)物,它在植株葉片中含量的高低間接反映了植株體內(nèi)的能量儲備狀況及植株根系可獲得能量物質(zhì)的潛力。3種磷濃度條件下,接種AM真菌處理植株葉片中蔗糖含量與各自相應(yīng)的對照間均無顯著差異,磷濃度為31 mg/kg 時,接種AM真菌的幼苗葉片中蔗糖含量顯著高于無磷條件的對照,該處理幼苗葉片中的蔗糖含量為其相應(yīng)對照的1.4倍。接種病原菌后較高的磷濃度(93 mg/kg)下,G.V.依然可以侵染黃瓜幼苗根系,且菌根侵染率高達40.2%。高磷處理條件下植株葉片中蔗糖含量低于中等磷濃度處理可能是寄主中可利用碳源供給AM真菌所致。有研究認為,在足夠的磷供應(yīng)條件下,如果菌根侵染率不因磷濃度升高而有所下降時,AM真菌會誘導(dǎo)光合產(chǎn)物從寄主轉(zhuǎn)運至AM真菌[16]。取樣調(diào)查根系發(fā)病情況時發(fā)現(xiàn),無磷條件下,3 d取樣時,非菌根化植株即有10%的側(cè)根壞死,而接種AM真菌處理到接種后5 d才有零星的側(cè)根壞死,但到接種后9 d取樣時,2處理間的受害程度基本一樣嚴重,這主要是由無磷條件下植株長勢相對較弱,容易受到病原菌的侵害所致。在中等磷條件下,AM真菌的抗病效應(yīng)較為明顯。而在高磷條件下,AM真菌對植株的抗病性基本無影響,這主要由于在該條件下,無論接種與否,植株生長相對較為健壯,不易感染病害。

    2.2?不同磷濃度條件下,AM真菌對葉片中多酚氧化酶、過氧化物酶活性的影響

    2.2.1?多酚氧化酶活性

    不同磷濃度條件下,接種病原菌后植株葉片PPO活性變化見圖1,可以看出,在無磷處理條件下, 菌根化植株葉片中PPO活性在接種病原菌后3 d即達到第1個峰值,且顯著高于對照,到接種病原菌后的7 d出現(xiàn)第2個酶活性高峰,而不接種的對照到接種病原菌后的7 d才達到其僅有的一個峰值,接種后第3天和第7天此時的酶活分別為同時期對照酶活性的8.3倍和1.9倍。當(dāng)營養(yǎng)液中磷水平上升為31 mg/kg 時,菌根化植株葉片中PPO活性的變化趨勢與其相應(yīng)的對照基本一致,即到接種病原菌后7 d,葉片中PPO活性均達到僅有的一個峰值,但接種病原菌后一直以接種AM真菌處理PPO活性較高;當(dāng)磷濃度增加至93 mg/kg 時,接種AM真菌處理葉片中PPO活性于接種病原菌后7 d達峰值,此時的酶活性為相應(yīng)對照的3.4倍,盡管對照酶活性于接種病原菌后3 d就達到其僅有的一個峰值,但此時的酶活性與接種AM真菌處理的酶活性相等。

    綜合上述接種病原菌后植株在不同磷濃度條件下葉片中PPO酶活性變化趨勢可以推斷,植株受到病原入侵時,菌根化植株對外源病原菌的侵入表現(xiàn)得更為敏感,而非菌根化植株的反應(yīng)較為遲鈍。即在無磷條件下,接種病原菌后菌根化幼苗葉片中PPO活性較高且峰值出現(xiàn)得較早,而非菌根化植株體內(nèi)PPO活性較低且峰值出現(xiàn)得較晚,且在3種磷濃度條件下,以無磷條件下菌根化植株對病原菌的侵入更為敏感,這可能是在低磷條件下菌根共生體的形成受到了影響所致。

    2.2.2?過氧化物酶活性?在無磷處理條件下,接種病原菌后非菌根化植株葉片中POD活性變幅一直明顯大于菌根化處理(圖2),即對照POD活性于接種病原菌后3 d即達到峰值,此時的酶活性為菌根化處理的7.2倍,而菌根化植株葉片POD活性于接種病原菌后5 d達到其僅有的一個峰值。磷濃度為31 mg/kg 時,菌根化植株葉片POD活性于接種病原菌后7 d達到峰值,而不接種的對照比菌根化處理提前2 d 達到其峰值。當(dāng)營養(yǎng)液中磷濃度增加至93 mg/kg時,接種AM真菌處理植株葉片POD活性于接種病原菌后9 d達到峰值,但此時的酶活性與相應(yīng)的對照接近,而對照植株葉片POD活性較相應(yīng)的菌根化處理提前4 d達到最大值,且此時的酶活性為菌根化處理的1.6倍。

    在3種磷水平條件下,接種病原菌后,AM真菌對植株體內(nèi)POD活性的影響具有相似的趨勢,結(jié)合植株的發(fā)病情況認為,植株受到病原侵襲時,其體內(nèi)POD活性的變化在很大程度上是植株受害程度的一種體現(xiàn)。具體而言,與菌根化幼苗葉片幼苗葉片中相對穩(wěn)定的POD活性相比,菌根化植株體內(nèi)POD活性變幅較大,且酶活性峰值出現(xiàn)時間早。

    早期在番茄上的研究首次證實,AM共生體的形成可誘導(dǎo)寄主產(chǎn)生系統(tǒng)抗性[17]。即植株在受到病原菌攻擊時,被感染的部位會通過一定的方式對病原菌的入侵做出反應(yīng),同時在未感染病原菌的部位也產(chǎn)生相類似的反應(yīng)。因此,不同磷濃度條件下,接種病原菌后,植株葉片PPO、POD活性的變化在一定程度上反映了植株根系受到病原侵襲時所誘導(dǎo)的防御反應(yīng),且PPO、POD均與植株的抗病性有關(guān),相關(guān)研究結(jié)果認為,當(dāng)植株受到病原菌的侵害時,植株體內(nèi)的PPO、POD活性均會升高,以增加其抗病性[18-20]。本研究中,在接種病原菌的條件下,AM真菌對植株體內(nèi)PPO、POD活性的影響不同,其中,菌根化植株P(guān)PO活性峰值總體出現(xiàn)得較早且酶活性較高,而非菌根化植株體內(nèi)PPO活性峰值出現(xiàn)得較晚且相對穩(wěn)定較低;周寶蜊等研究發(fā)現(xiàn),接種病原菌條件下,菌根真菌可顯著提高寄主PPO活性[21]。菌根化植株體內(nèi)POD活性相對穩(wěn)定,且酶活性峰值出現(xiàn)時間較晚,而非菌根化植株體內(nèi)POD活性變幅較大,且酶活性峰值提早出現(xiàn)。接種病原菌后,當(dāng)介質(zhì)中無磷供給時,非菌根化幼苗葉片中POD活性的變化尤為明顯。這與已報道的相關(guān)研究結(jié)果[22]一致。

    3?結(jié)論

    在接種病原菌密度為5×104 CFU/mL的條件下,基質(zhì)中磷濃度影響植株的抗病性。其中,磷濃度為31 mg/kg時,AM真菌的促生效應(yīng)不明顯,但可明顯提高黃瓜幼苗對枯萎病的抗性。無磷條件下,AM真菌表現(xiàn)出顯著的促生效應(yīng),但因植株長勢較弱,抗病能力極低。高磷條件下,接種AM真菌可在一定程度上減輕病害。G. versiforme(G.v)在較高的磷濃度(93 mg/kg)條件下,其菌根侵染率仍高達40.2%,因此在黃瓜生產(chǎn)中可將其引入磷含量較高的土壤,提高植株的抗病性。植株受到病原入侵時,植株體內(nèi)PPO活性的變化可作為植株受病原菌入侵后做出迅速反應(yīng)的指標;而接種病原菌后植株葉片中POD活性的變化只是病癥表現(xiàn)的反映。

    參考文獻:

    [1]沈?辰,熊?露,韓書慶,等. 我國果菜類蔬菜生產(chǎn)與流通形勢分析[J]. 中國蔬菜,2017(9):7-11.

    [2]張真和. 我國發(fā)展現(xiàn)代蔬菜產(chǎn)業(yè)面臨的突出問題與對策[J]. 中國蔬菜,2014(8):1-6.

    [3]喻景權(quán),周?杰. “十二五”我國設(shè)施蔬菜生產(chǎn)和科技進展及其展望[J]. 中國蔬菜,2016(9):18-30.

    [4]路?粉,王文橋. 我國蔬菜殺菌劑及其應(yīng)用狀況[J]. 中國蔬菜,2017(10):6-13.

    [5]Smith S E,Read D J. Mycorrhizal symbiosis[M]. 3rd ed. London:Academic Press,2008.

    [6]Kubota M,McGonigle T P,Hyakumachi M. Co-occurrence of Arum- and Paris-type morphologies of arbuscular mycorrhizae in cucumber and tomato[J]. Mycorrhiza,2005,15(2):73-77.

    [7]Díaz F,Alvarado C,Ortiz C,et al. Plant nutrition and fruit quality of pepper associated with arbuscular mycorrhizal in greenhouse[J]. Revista Mexicana de Ciencias Agrícolas,2013,4(2):315-321.

    [8]Valentine A J,Osborne B A,Mitchell D T. Interactions between Phosphorus supply and total nutrient availability on mycorrhizal colonization,growth and photosynthesis of cucumber[J]. Scientia Horticulturae,2001,88(3):177-189.

    [9]Chen S C,Jin W J,Liu A R,et al. Arbuscular mycorrhizal fungi(AMF)increase growth and secondary metabolism in cucumber subjected to low temperature stress[J]. Scientia Horticulturae,2013,160(3):222-229.

    [10]Miransari M. Contribution of arbuscular mycorrhizal symbiosis to plant growth under different types of soil stress[J]. Plant Biology,2010,12(4):563-569.

    [11]Yan L,Chen Y L,Min L,et al. Effects of arbuscular mycorrhizal fungi communities on soil quality and the growth of cucumber seedlings in a greenhouse soil of continuously planting cucumber[J]. Pedosphere,2012,22(1):79-87.

    [12]Chandanie W A,Kubota M,Hyakumachi M. Interaction between arbuscular mycorrhizal fungus Glomus mosseae and plant growth promoting fungus Phoma sp. on their root colonization and growth promotion of cucumber(Cucumis sativus L.)[J]. Mycoscience,2005,46(3):201-204.

    [13]Chandanie W A,Kubota M,Hyakumachi M. Interaction between the arbuscular mycorrhizal fungus Glomus mosseae and plant growth-promoting fungi and their significance for enhancing plant growth and suppressing damping-off of cucumber(Cucumis sativus L.)[J]. Applied Soil Ecology,2009,41(3):336-341.

    [14]Phillips J M,Hayman D S,Improved procedures for clearing roots and staining parasitic and vesicular arbuscular mycorrhiza fungi for rapid assessment of infection[J]. Transactions of British Mycological Society,2010,55:158-161.

    [15]李合生. 植物生理生化實驗原理與技術(shù)指導(dǎo)[M]. 北京:高等教育出版社,2000.

    [16]Hayman D S. Vesicular-arbuscular mycorrhizas in field crop system[M]. Boca Raton:CRC press,1987.

    [17]Cordier C,Pozo M J,Barea J M,et al. Cell defense responses associated with localized and systemic resistance to Phytophthora parasitica induced in tomato by an arbuscular mycorrhizal fungus[J]. Molecular Plant-Microbe Interactions,1998,11(10):1017-1028.

    [18]王紅英,錢春桃,張永兵,等. 不同抗性甜瓜接種蔓枯病菌后若干生理指標的變化[J]. 中國瓜菜,2012,25(1):7-10.

    [19]郭勤衛(wèi),王紅英,李?季,等. BTH處理對甜瓜苗期抗蔓枯病相關(guān)POD和PPO酶活性的影響[J]. 中國瓜菜,2013,26(6):7-10.

    [20]張?寧,畢研飛,郭?靜,等. 不同抗性甜瓜接種蔓枯病菌后PAL、PPO與POD活性的變化[J]. 植物生理學(xué)報,2016,52(8):1169-1175.

    [21]周寶蜊,鄭繼東,畢曉華,等. 叢枝菌真菌對茄子黃萎病的防治效果和茄子植株生長的影響[J]. 生態(tài)學(xué)雜志,2015,34(4):1026-1030.

    [22]王倡憲,秦?嶺,馮?固,等. 叢枝菌根真菌對接種尖孢鐮刀菌后黃瓜根系次生代謝物的影響[J]. 植物保護學(xué)報,2005,32(2):148-152.

    猜你喜歡
    菌根黃瓜病原菌
    杧果采后病原菌的分離、鑒定及致病力研究
    清新脆嫩的黃瓜
    中老年保健(2021年5期)2021-08-24 07:08:02
    黃瓜留瓜要注意兩點
    我喜歡黃瓜
    外生菌根真菌菌劑的制備及保存研究
    園林科技(2020年2期)2020-01-18 03:28:26
    摘黃瓜
    MALDI-TOF MS直接鑒定血培養(yǎng)陽性標本中的病原菌
    殼聚糖對尿路感染主要病原菌的體外抑制作用
    雜交羔羊腹瀉病原菌的分離鑒定與防治
    重金屬污染土壤的生物修復(fù)——菌根技術(shù)的應(yīng)用
    av有码第一页| 99热这里只有精品一区 | 三级毛片av免费| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 欧美高清成人免费视频www| 国产av在哪里看| 国产av一区二区精品久久| 舔av片在线| 成人av在线播放网站| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 国产精品影院久久| 88av欧美| 亚洲九九香蕉| 国产一区二区激情短视频| 床上黄色一级片| 久久久久久大精品| 午夜免费观看网址| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 亚洲美女黄片视频| 久久精品人妻少妇| 亚洲全国av大片| 大型黄色视频在线免费观看| 精品国产超薄肉色丝袜足j| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡| 无限看片的www在线观看| 亚洲国产欧美网| 超碰成人久久| 国产精品99久久99久久久不卡| 欧美成人午夜精品| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 亚洲av第一区精品v没综合| xxxwww97欧美| 搞女人的毛片| 国产成人系列免费观看| 男女之事视频高清在线观看| 成年女人毛片免费观看观看9| 国产亚洲精品综合一区在线观看 | x7x7x7水蜜桃| 国产亚洲精品一区二区www| 亚洲 国产 在线| 国产成人av激情在线播放| 久久久久久久久免费视频了| 国产一级毛片七仙女欲春2| 在线永久观看黄色视频| 国产精品久久视频播放| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 老司机深夜福利视频在线观看| 国产三级中文精品| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 亚洲人与动物交配视频| 香蕉久久夜色| 午夜激情av网站| 婷婷精品国产亚洲av| 国产伦人伦偷精品视频| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 亚洲 欧美一区二区三区| 欧美绝顶高潮抽搐喷水| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 亚洲成人久久性| 在线观看一区二区三区| 丝袜美腿诱惑在线| 国产日本99.免费观看| 久热爱精品视频在线9| 欧美日本亚洲视频在线播放| 亚洲狠狠婷婷综合久久图片| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 淫妇啪啪啪对白视频| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 亚洲自拍偷在线| 亚洲av成人av| 亚洲人成电影免费在线| 国产亚洲精品av在线| 免费在线观看影片大全网站| 亚洲av成人av| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 99国产精品99久久久久| 色在线成人网| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 亚洲欧美精品综合久久99| 99久久99久久久精品蜜桃| 亚洲专区中文字幕在线| 国产黄a三级三级三级人| 欧美色视频一区免费| 观看免费一级毛片| 又粗又爽又猛毛片免费看| 国产亚洲欧美在线一区二区| 国产97色在线日韩免费| 白带黄色成豆腐渣| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 成人午夜高清在线视频| 午夜久久久久精精品| 久久国产精品影院| 亚洲国产欧美人成| xxxwww97欧美| 午夜激情av网站| 精品国产美女av久久久久小说| 中亚洲国语对白在线视频| 国产精品久久电影中文字幕| 妹子高潮喷水视频| 淫秽高清视频在线观看| 欧美中文日本在线观看视频| 一二三四在线观看免费中文在| 欧美av亚洲av综合av国产av| АⅤ资源中文在线天堂| 精品国产乱码久久久久久男人| 男插女下体视频免费在线播放| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 久久天堂一区二区三区四区| 精品熟女少妇八av免费久了| 国产成+人综合+亚洲专区| 亚洲国产精品999在线| 黄频高清免费视频| 一本精品99久久精品77| 亚洲av成人不卡在线观看播放网| 亚洲精品中文字幕一二三四区| 成人三级做爰电影| 动漫黄色视频在线观看| 黄色视频,在线免费观看| av片东京热男人的天堂| 国产精品一区二区精品视频观看| 亚洲,欧美精品.| 成人手机av| 夜夜躁狠狠躁天天躁| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 亚洲七黄色美女视频| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 亚洲精品在线美女| 叶爱在线成人免费视频播放| 欧美中文综合在线视频| 悠悠久久av| 视频区欧美日本亚洲| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 欧美乱色亚洲激情| 国产私拍福利视频在线观看| 久久这里只有精品19| 国产午夜精品论理片| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 欧美zozozo另类| 伦理电影免费视频| 久久精品人妻少妇| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 欧美大码av| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 亚洲av电影在线进入| 国产精品亚洲av一区麻豆| 手机成人av网站| 他把我摸到了高潮在线观看| 黄色片一级片一级黄色片| 久久久久免费精品人妻一区二区| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 午夜福利视频1000在线观看| 亚洲一区二区三区不卡视频| 91麻豆精品激情在线观看国产| 国产av又大| 91在线观看av| 国产精品,欧美在线| 欧美色视频一区免费| netflix在线观看网站| 巨乳人妻的诱惑在线观看| 久久精品91无色码中文字幕| 人妻久久中文字幕网| 亚洲国产欧美网| 免费看a级黄色片| 欧美zozozo另类| 国产精品一区二区免费欧美| 国产av在哪里看| 99久久无色码亚洲精品果冻| 亚洲 欧美一区二区三区| 2021天堂中文幕一二区在线观| 69av精品久久久久久| 最新美女视频免费是黄的| 国产精品综合久久久久久久免费| 69av精品久久久久久| 亚洲在线自拍视频| 在线视频色国产色| 一本一本综合久久| 日本熟妇午夜| 床上黄色一级片| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 免费无遮挡裸体视频| 88av欧美| 特大巨黑吊av在线直播| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 老鸭窝网址在线观看| 精品一区二区三区av网在线观看| 国产精品久久久av美女十八| 1024手机看黄色片| 国产精品国产高清国产av| 88av欧美| 成人三级做爰电影| 日本免费一区二区三区高清不卡| 一级片免费观看大全| 一级毛片女人18水好多| 国产一区二区在线观看日韩 | 久久亚洲精品不卡| 国产成人av教育| 激情在线观看视频在线高清| 久久精品综合一区二区三区| www.熟女人妻精品国产| 亚洲自拍偷在线| 久久久久九九精品影院| 超碰成人久久| 亚洲熟妇熟女久久| 国产精品av久久久久免费| 国产97色在线日韩免费| 少妇粗大呻吟视频| 日本 欧美在线| 欧美一级a爱片免费观看看 | 亚洲在线自拍视频| av在线播放免费不卡| 香蕉国产在线看| 日本在线视频免费播放| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 国产成人精品无人区| 亚洲人成伊人成综合网2020| 欧美精品亚洲一区二区| 国产精品精品国产色婷婷| 国产av一区在线观看免费| 日韩免费av在线播放| 性色av乱码一区二区三区2| www.精华液| 久久久久久九九精品二区国产 | 久久香蕉精品热| 18禁国产床啪视频网站| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 变态另类成人亚洲欧美熟女| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 久久 成人 亚洲| 在线观看一区二区三区| e午夜精品久久久久久久| 又紧又爽又黄一区二区| 制服丝袜大香蕉在线| 久久热在线av| 国内揄拍国产精品人妻在线| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 在线观看免费视频日本深夜| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 亚洲av片天天在线观看| 国产av不卡久久| 欧美成人免费av一区二区三区| 国产99白浆流出| 亚洲av第一区精品v没综合| 淫妇啪啪啪对白视频| av国产免费在线观看| 精品欧美国产一区二区三| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 老汉色av国产亚洲站长工具| 亚洲男人的天堂狠狠| 亚洲全国av大片| 国产精品 国内视频| 看片在线看免费视频| 亚洲美女视频黄频| 99久久综合精品五月天人人| 国产精品亚洲一级av第二区| 久久久久久久精品吃奶| 特级一级黄色大片| 天天添夜夜摸| 国产激情欧美一区二区| 国产精品,欧美在线| 少妇的丰满在线观看| 身体一侧抽搐| 在线观看免费日韩欧美大片| 国产精品免费视频内射| 亚洲国产精品成人综合色| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 首页视频小说图片口味搜索| 大型黄色视频在线免费观看| 一本一本综合久久| 午夜两性在线视频| 18美女黄网站色大片免费观看| 日韩欧美在线乱码| АⅤ资源中文在线天堂| 黑人欧美特级aaaaaa片| 1024香蕉在线观看| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 99国产极品粉嫩在线观看| 这个男人来自地球电影免费观看| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 国产激情久久老熟女| 日韩欧美国产一区二区入口| 欧美色视频一区免费| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 亚洲av第一区精品v没综合| 麻豆一二三区av精品| 国产又色又爽无遮挡免费看| 欧美zozozo另类| 中文在线观看免费www的网站 | 国产精品1区2区在线观看.| 欧美丝袜亚洲另类 | av国产免费在线观看| 男女视频在线观看网站免费 | 黄片小视频在线播放| 成人av在线播放网站| 两性夫妻黄色片| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 日本五十路高清| 国产黄色小视频在线观看| 精品日产1卡2卡| 国产亚洲精品av在线| 国产精品久久久久久精品电影| 久久久国产成人精品二区| 欧美一区二区精品小视频在线| 一本久久中文字幕| 又紧又爽又黄一区二区| 免费看十八禁软件| 国产精品亚洲一级av第二区| www.www免费av| 欧美日韩精品网址| 最近最新中文字幕大全免费视频| 在线国产一区二区在线| or卡值多少钱| 亚洲国产欧美网| 亚洲国产欧美人成| 99国产精品99久久久久| 90打野战视频偷拍视频| 9191精品国产免费久久| 国产精品爽爽va在线观看网站| 国内精品久久久久精免费| 国产精品免费一区二区三区在线| 正在播放国产对白刺激| 99久久精品热视频| 日韩欧美国产在线观看| 午夜a级毛片| 欧美色欧美亚洲另类二区| 日韩免费av在线播放| 久久午夜亚洲精品久久| 国产一级毛片七仙女欲春2| www.www免费av| 一二三四在线观看免费中文在| 69av精品久久久久久| 国产精品乱码一区二三区的特点| 成人午夜高清在线视频| 欧美日韩精品网址| 麻豆av在线久日| 国产精品98久久久久久宅男小说| 中国美女看黄片| 婷婷亚洲欧美| 99久久无色码亚洲精品果冻| 久久国产精品影院| 男插女下体视频免费在线播放| 久久国产精品影院| 久久性视频一级片| 国产一级毛片七仙女欲春2| 日本一二三区视频观看| 亚洲中文字幕日韩| 国产亚洲av嫩草精品影院| 中文亚洲av片在线观看爽| 日本 欧美在线| 国产黄片美女视频| a级毛片在线看网站| 国产精品一区二区精品视频观看| 在线观看午夜福利视频| 中文亚洲av片在线观看爽| 这个男人来自地球电影免费观看| 动漫黄色视频在线观看| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 久久精品91蜜桃| 丝袜人妻中文字幕| 欧美日韩黄片免| 欧美乱妇无乱码| 成人特级黄色片久久久久久久| 一本久久中文字幕| 我的老师免费观看完整版| 亚洲成av人片免费观看| 老司机靠b影院| 在线观看一区二区三区| 午夜福利成人在线免费观看| 一区福利在线观看| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 国产又色又爽无遮挡免费看| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 久久99热这里只有精品18| 国产精品久久电影中文字幕| 成人三级黄色视频| 人妻久久中文字幕网| av在线播放免费不卡| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 亚洲美女视频黄频| 精品第一国产精品| 长腿黑丝高跟| 看黄色毛片网站| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 亚洲中文日韩欧美视频| 国产精品精品国产色婷婷| 久久精品亚洲精品国产色婷小说| 日本a在线网址| 成人国产综合亚洲| 1024视频免费在线观看| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 日韩大码丰满熟妇| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 男插女下体视频免费在线播放| 久久久久久免费高清国产稀缺| 日韩高清综合在线| 欧美日韩黄片免| 国产熟女午夜一区二区三区| 每晚都被弄得嗷嗷叫到高潮| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 国产三级中文精品| 国产成人欧美在线观看| 99re在线观看精品视频| 色尼玛亚洲综合影院| 美女黄网站色视频| 久久热在线av| av有码第一页| 国产免费男女视频| 啪啪无遮挡十八禁网站| 动漫黄色视频在线观看| 国产麻豆成人av免费视频| 又粗又爽又猛毛片免费看| 夜夜夜夜夜久久久久| 精品久久久久久,| 成人亚洲精品av一区二区| 99久久精品热视频| 日韩大尺度精品在线看网址| 色综合站精品国产| 一本综合久久免费| 日韩av在线大香蕉| 一边摸一边做爽爽视频免费| av福利片在线| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 美女扒开内裤让男人捅视频| 国产欧美日韩一区二区三| 最近最新中文字幕大全电影3| 88av欧美| 亚洲午夜理论影院| а√天堂www在线а√下载| 成人国产综合亚洲| 毛片女人毛片| 好男人电影高清在线观看| 国产日本99.免费观看| 搡老岳熟女国产| 成人18禁在线播放| 变态另类丝袜制服| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看 | 国产精品香港三级国产av潘金莲| 91大片在线观看| 欧美黑人欧美精品刺激| 麻豆一二三区av精品| 免费观看人在逋| 国语自产精品视频在线第100页| 黄片大片在线免费观看| 一区二区三区高清视频在线| 国产单亲对白刺激| 国产在线精品亚洲第一网站| 国产精品影院久久| tocl精华| 国产精品久久久久久久电影 | 亚洲精品在线美女| av超薄肉色丝袜交足视频| 欧美日韩国产亚洲二区| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区| 两个人看的免费小视频| 婷婷六月久久综合丁香| 欧美极品一区二区三区四区| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 这个男人来自地球电影免费观看| 国产精品野战在线观看| 日韩欧美三级三区| 亚洲欧美精品综合久久99| 午夜影院日韩av| 一级作爱视频免费观看| 亚洲国产精品合色在线| 九色成人免费人妻av| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 国产亚洲精品第一综合不卡| 操出白浆在线播放| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 亚洲av第一区精品v没综合| 免费一级毛片在线播放高清视频| 亚洲片人在线观看| 性欧美人与动物交配| 国产高清视频在线播放一区| 日本 欧美在线| 曰老女人黄片| 中国美女看黄片| 一进一出抽搐gif免费好疼| av片东京热男人的天堂| 色综合亚洲欧美另类图片| 国内精品久久久久精免费| 99国产综合亚洲精品| 午夜激情av网站| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 2021天堂中文幕一二区在线观| 亚洲国产精品久久男人天堂| 国产一区二区激情短视频| 搞女人的毛片| 禁无遮挡网站| 久久人人精品亚洲av| 日韩欧美在线二视频| 日韩三级视频一区二区三区| 欧美乱色亚洲激情| 禁无遮挡网站| 午夜福利18| 天堂影院成人在线观看| 亚洲无线在线观看| 国产精品国产高清国产av| 真人一进一出gif抽搐免费| 午夜福利18| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 听说在线观看完整版免费高清| 亚洲最大成人中文| 禁无遮挡网站| 神马国产精品三级电影在线观看 | 老汉色av国产亚洲站长工具| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 午夜激情福利司机影院| 色在线成人网| 亚洲av成人精品一区久久| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 精品不卡国产一区二区三区| 亚洲欧美激情综合另类| 国产精品一及| 看黄色毛片网站| a级毛片在线看网站| 久久久久久九九精品二区国产 | 波多野结衣高清作品| 国产伦在线观看视频一区| 中国美女看黄片| 波多野结衣高清无吗| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 久久久水蜜桃国产精品网| 搞女人的毛片| 1024手机看黄色片| 午夜福利欧美成人| 国产精品野战在线观看| av超薄肉色丝袜交足视频| 成人国产一区最新在线观看| 成人三级做爰电影| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 激情在线观看视频在线高清| 免费在线观看黄色视频的| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 欧美最黄视频在线播放免费| cao死你这个sao货| 亚洲全国av大片| 日本三级黄在线观看| 亚洲国产欧美人成| av福利片在线观看| 午夜老司机福利片| 欧美午夜高清在线| 欧美日本视频| 国产亚洲av嫩草精品影院| 久久精品国产清高在天天线| 一区二区三区国产精品乱码| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 两人在一起打扑克的视频| 久久天堂一区二区三区四区| 在线观看舔阴道视频| 最近最新免费中文字幕在线| 国产高清视频在线播放一区| 国产成人啪精品午夜网站| 视频区欧美日本亚洲| 在线a可以看的网站| 亚洲人成伊人成综合网2020| 久久中文看片网| 久久久久免费精品人妻一区二区| 久久九九热精品免费| 啦啦啦免费观看视频1| 亚洲精品av麻豆狂野| 最近最新免费中文字幕在线| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 91老司机精品| 精品免费久久久久久久清纯| 久久久久久人人人人人| 亚洲欧美精品综合久久99| 久久香蕉国产精品| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 精品一区二区三区四区五区乱码| 免费电影在线观看免费观看| 无限看片的www在线观看| 欧美色视频一区免费| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 欧美高清成人免费视频www| a在线观看视频网站| 村上凉子中文字幕在线| 国产探花在线观看一区二区| 69av精品久久久久久| 日韩欧美国产一区二区入口| 男女那种视频在线观看| 久久久久久久精品吃奶| 午夜福利在线在线| 久久久久久久久免费视频了| 日日干狠狠操夜夜爽| www.自偷自拍.com| 男女那种视频在线观看| 69av精品久久久久久| 亚洲精品在线观看二区| 久久久精品大字幕| 大型av网站在线播放| 午夜福利在线在线| 久久久精品大字幕| 一级片免费观看大全| 午夜影院日韩av| 亚洲 欧美一区二区三区| 国模一区二区三区四区视频 | 国产亚洲精品久久久久5区| 老汉色∧v一级毛片| 99热这里只有精品一区 | 日本 欧美在线| 亚洲乱码一区二区免费版| 高潮久久久久久久久久久不卡| 99国产精品一区二区蜜桃av| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 久久热在线av| 色播亚洲综合网| 亚洲乱码一区二区免费版| 一级毛片精品| 午夜福利视频1000在线观看|