影響藥品微生物限度檢查方法學(xué)驗(yàn)證因素分析

叢日輝

天津紅日藥業(yè)股份有限公司 天津 301700

藥物的微生物污染是無條件藥物質(zhì)量的主要原因之一。微生物在自然界中廣泛存在，并且微生物可以在藥物的生產(chǎn)，運(yùn)輸和儲(chǔ)存中混合。藥物的微生物污染極其有害，引起副反應(yīng)和死亡。中國的“魚腥草事件”和“刺五加事件”是由微生物污染引起的重大藥物安全事件。這具有極其嚴(yán)重的社會(huì)影響，直接影響藥品銷售，甚至影響中成藥的聲譽(yù)。藥物的微生物閾值測試是用于檢查藥物的微生物含量以確定其是否超過安全標(biāo)準(zhǔn)并因此確定藥物質(zhì)量的質(zhì)量控制方法之一。但是，在檢查微生物的極限時(shí)，會(huì)發(fā)生不可避免的測試錯(cuò)誤。監(jiān)測藥物測試的微生物誤差范圍，提高檢測質(zhì)量，減少誤檢測和檢測的頻率。在這項(xiàng)研究中，回顧性分析和小組討論的組合來分析，導(dǎo)致較大的誤差在微生物限度檢查藥物的因素，作為控制控制微生物限度的質(zhì)量奠定了基礎(chǔ)。

1 藥品微生物限度檢查的概述

藥物的微生物限度是指微生物的侵蝕和污染水平以及侵蝕和結(jié)垢的程度，并且評(píng)估了測試水平。通過某些檢測方法確定制劑中存在的微生物數(shù)量和某些病原性疾病的存在。分析手段的細(xì)菌。這個(gè)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果讓我們來分析微生物對(duì)藥物作用快速，準(zhǔn)確地檢查藥品微生物限度，并在此基礎(chǔ)上采取有效措施，以減少在一個(gè)特定區(qū)域內(nèi)的微生物污染和藥物的生產(chǎn)和測試取。兩者都很重要，可以說，保證了藥品的質(zhì)量[1]。

2 材料與方法

2.1 一般資料

從五月2016年至2017年12月選擇藥品864個(gè)批次，其中384個(gè)批次中國醫(yī)藥片劑，中國中藥片劑196個(gè)批次，口服液的114個(gè)批次，外用藥品92個(gè)批次，對(duì)于中醫(yī)顆粒制劑78個(gè)批次。

2.2 方法

藥品的所有864個(gè)批次微生物限度進(jìn)行了測試，霉菌和酵母，細(xì)菌的數(shù)量，數(shù)量等進(jìn)行了綜述。在測試期間發(fā)生了錯(cuò)誤并且進(jìn)行了影響因素的分析。分析師是實(shí)驗(yàn)室檢查員。在因素確定的第一個(gè)分析和討論，主要有四個(gè)方面：“人”，“對(duì)象”，“環(huán)”和“法律”。這四個(gè)方面被用作第一級(jí)指標(biāo)，然后進(jìn)行第二輪討論，細(xì)分每個(gè)級(jí)別。已經(jīng)產(chǎn)生了總共22個(gè)二級(jí)指標(biāo)和由第三方質(zhì)量控制，在實(shí)驗(yàn)室中的空氣質(zhì)量，細(xì)菌控制在實(shí)驗(yàn)室和詳細(xì)的材料規(guī)格的水平被排除在外。最后，確定了18個(gè)次要指標(biāo)?！叭藛T”：操作員操作技能的第1級(jí)；2度操作員專注于質(zhì)量控制。“材料”：1樣本本身取決于地理環(huán)境，并受到不同的污染。2-生物體的變異性；檢測微生物的難度；改變活動(dòng)的復(fù)雜性；3試驗(yàn)產(chǎn)品中的抗菌成分；4原料是否經(jīng)過滅菌；5-環(huán)境不育的質(zhì)量控制；6-實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的性能。“環(huán)”：細(xì)菌溶液的1個(gè)保護(hù)質(zhì)量，的細(xì)菌懸浮液，3稀釋準(zhǔn)確性的藥物的試驗(yàn)微生物限度4個(gè)技術(shù)問題的培養(yǎng)時(shí)間在測試組2對(duì)照的存活率：控制細(xì)菌，6層懸浮液的5倍通道；7種原始細(xì)菌液體材料，8種中等質(zhì)量?！癋A”：對(duì)環(huán)境質(zhì)量控制1個(gè)實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)，兩個(gè)材料控制標(biāo)準(zhǔn)，3技術(shù)的操作標(biāo)準(zhǔn)。然后評(píng)價(jià)等級(jí)的權(quán)重被分割并施加VAS方法：10分具有顯著影響，8分有很大的影響，6分產(chǎn)生作用，4分?jǐn)?shù)效果很小，2分效果很小，0分幾乎沒有效果。首先，進(jìn)行第一級(jí)的指標(biāo)的權(quán)重分析，然后水平的每一個(gè)指標(biāo)低于第二平面的指標(biāo)的權(quán)重單獨(dú)計(jì)算，并且這兩個(gè)值的乘積表示的最終重量[2]。

2.3 觀察指標(biāo)

影響誤差的四個(gè)因素的比率在統(tǒng)計(jì)上確定。根據(jù)加權(quán)因子，前10個(gè)的加權(quán)因子被定義為主要因素。

3 結(jié)果

3.1 藥品微生物去查檢驗(yàn)中誤差發(fā)生情況

據(jù)統(tǒng)計(jì)，從864個(gè)藥品中收到122個(gè)批次，14.1%的誤差率微生物測試了嚴(yán)重的錯(cuò)誤。

3.2 微生物檢驗(yàn)誤差較大的發(fā)生原因

122批發(fā)生微生物檢驗(yàn)誤差較大的檢驗(yàn)中，“人”導(dǎo)致的42批，占百分之34.4；“物”導(dǎo)致的30批，占百分之24.6；“環(huán)”導(dǎo)致的19批，占百分之15.6；“法”導(dǎo)致的31批，占百分之25.4。

3.3 重要性評(píng)價(jià)

重要的評(píng)價(jià)結(jié)果表明，加權(quán)因子從高分到低分，排名前10位的運(yùn)營商進(jìn)行測試的資格，運(yùn)營商的重視質(zhì)量控制，質(zhì)量一般，物質(zhì)控制標(biāo)準(zhǔn)，操作的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)和產(chǎn)品測試?？咕M分，所述細(xì)菌懸浮液的質(zhì)量，該細(xì)菌液體的保存質(zhì)量，實(shí)驗(yàn)室設(shè)備的生物體和生產(chǎn)率的可變性共計(jì)0.8以上。

4 討論

微生物限度測試作為測試藥物是否影響微生物污染的手段。在正常情況下，微生物藥物極限測試包含兩個(gè)主要內(nèi)容，即輸注溶液和注射。兩種類型的藥物都經(jīng)過消毒和測試。該過程通常需要嚴(yán)格的無菌操作。對(duì)于不在口服制劑和局部制劑規(guī)定范圍內(nèi)的滅菌藥品，研究期間可能存在一些微生物，但也必須嚴(yán)格遵守微生物限制的要求。因此，有必要進(jìn)行最后的微生物測試，以驗(yàn)證微生物不會(huì)被模具制劑和超出規(guī)定范圍的非無菌敷料，原料等污染。用于藥物微生物測試的方法主要是微生物測試方法，這是目前最常用的藥物測試方法。但是，在工作過程中，過程復(fù)雜，過程繁瑣，必須嚴(yán)格控制工作步驟[3]。測試周期相對(duì)較長，并且許多因素影響測試結(jié)果，這顯著降低了測試精度。如果在驗(yàn)證過程中該過程不正確，則程序包含錯(cuò)誤并且硬件損壞，藥物測試的結(jié)果會(huì)受到影響并顯示驗(yàn)證錯(cuò)誤。因此，如何提高審查準(zhǔn)確性的問題是檢查員應(yīng)該思考和決定的問題。

藥品進(jìn)行微生物限度檢驗(yàn)時(shí)應(yīng)保證藥物不具有殺菌或抑菌活性；采取的檢驗(yàn)方法應(yīng)該適合所選擇的藥品。吸取供試液之前需要將其震蕩，以保證液體分散均勻，避免吸取上清液或沉淀物而造成結(jié)果偏離。供試液如需要水浴加熱時(shí)需要注意溫度和時(shí)間，不要超過40℃，溫度過高或時(shí)間過長造成細(xì)菌死亡。供試液制備好需要在一定時(shí)間內(nèi)完成檢驗(yàn)，從供試液配置到傾注培養(yǎng)基最好在1小時(shí)之內(nèi)完成，避免時(shí)間過程過長對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果造成影響[4]。菌落計(jì)數(shù)主要是查菌落數(shù)量，一般通過肉眼觀察，計(jì)數(shù)時(shí)需要在平板的背面進(jìn)行觀察，應(yīng)注意觀察仔細(xì)，切勿漏掉平板邊緣菌落，同時(shí)需要注意區(qū)分菌落和顆粒物、沉淀物，可以通過配制空白培養(yǎng)基平板作對(duì)照，從而避免結(jié)果誤差，肉眼難以觀察時(shí)可以適當(dāng)延長培養(yǎng)時(shí)間或借助放大鏡等儀器進(jìn)行辨識(shí)。

由于藥物本身的性質(zhì)導(dǎo)致的失效分析和對(duì)策：在測試產(chǎn)品的制備過程中藥物處理不當(dāng)或使用不當(dāng)也可能影響測量結(jié)果。藥物的成分有抗菌作用，有些藥物已知有抗菌性能，如抗生素，但有些中國專利藥和化學(xué)藥具有抗菌性能，并且不知道。為了確定藥物是否含有抗菌成分，應(yīng)在極限微生物學(xué)試驗(yàn)之前進(jìn)行方法學(xué)評(píng)價(jià)，以消除試驗(yàn)產(chǎn)品的抗菌活性。在正常情況下，約50公知的每毫升100種CFU控制細(xì)菌，根據(jù)常規(guī)的測試方法中的溶液，以及相同的方法，控制細(xì)菌不能被檢測到或檢測到的菌落數(shù)比所增加的控制細(xì)菌數(shù)量顯著低。必須使用中等稀釋法，中和法，膜過濾法等處理試樣[5]。為了確保對(duì)照細(xì)菌的檢測和試樣的制備，必須嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作的要求，以防止接觸可能的物體污染，盡量減少檢查時(shí)間。

藥品微生物限度檢查受操作環(huán)境的影響，因此2015年版藥典對(duì)操作環(huán)境有明確的規(guī)定，藥品潔凈實(shí)驗(yàn)室應(yīng)定期進(jìn)行微生物監(jiān)測，檢驗(yàn)環(huán)境級(jí)別要求不低于生產(chǎn)環(huán)境。無菌操作室內(nèi)需要有無菌操作臺(tái)，檢查所需要的酒精燈、火柴、鑷子、酒精棉等操作工具放置于無菌操作臺(tái)內(nèi)，在操作之前先打開紫外燈進(jìn)行殺菌（20～30min）；定期對(duì)無菌操作臺(tái)進(jìn)行檢查維修；檢驗(yàn)員需要穿無菌服進(jìn)入無菌操作室，禁止在無菌操作室內(nèi)頻繁走動(dòng)，檢驗(yàn)過程中盡量減少外出[6]。

在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中必須麻醉藥物的微生物限度。每個(gè)階段的實(shí)驗(yàn)和每個(gè)階段都是嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)操作。在完成實(shí)驗(yàn)后，需要進(jìn)行回顧性研究以確保在實(shí)驗(yàn)的每個(gè)階段都沒有污染。同時(shí)，檢查人員需要具備專業(yè)理論和非常負(fù)責(zé)任的行為一定程度，他們是合格的，經(jīng)驗(yàn)豐富，他們能正確評(píng)估測試結(jié)果，減少錯(cuò)誤和確保的微生物限量測試結(jié)果的準(zhǔn)確性。