丁酸梭菌和地衣芽孢桿菌對(duì)斷奶仔豬生長性能及血液指標(biāo)的影響

尹會(huì)方，姚志翔，楊守深

（1.龍巖學(xué)院，福建龍巖 364012；2.廣東德興食品股份有限公司，廣東汕頭 515133；3.南京金桔飼料有限公司，江蘇南京 210000）

半個(gè)多世紀(jì)以來，抗生素在養(yǎng)豬業(yè)中被廣泛用于預(yù)防斷奶后腹瀉和促進(jìn)動(dòng)物生長。但長期和過量使用抗生素導(dǎo)致一系列負(fù)面效應(yīng)，包括誘導(dǎo)細(xì)菌產(chǎn)生耐藥性等，因此，在部分國家已禁止或限制使用。益生菌是一種新型飼料補(bǔ)充劑，能促進(jìn)動(dòng)物腸道菌群平衡，從而促進(jìn)養(yǎng)分利用、預(yù)防疾病，最終促進(jìn)生長（金爾光等，2018）。目前，益生菌飼料添加劑在畜禽、水產(chǎn)養(yǎng)殖上的使用越來越廣泛。丁酸梭菌（CB）和地衣芽孢桿菌（BL）被納入我國飼料添加劑目錄，是兩種常見的益生菌，具有平衡腸道菌群、促進(jìn)免疫器官發(fā)育、提高免疫功能、促進(jìn)動(dòng)物生等功能，具有良好的應(yīng)用前景（楊家軍，2014；劉曉琳等，2008）。而這兩種益生菌同時(shí)添加于飼糧中的應(yīng)用效果是否更好尚不清楚，因此，本試驗(yàn)旨在研究CB結(jié)合BL對(duì)斷奶仔豬生長和免疫功能等指標(biāo)的影響，擬評(píng)估這兩種益生菌聯(lián)合使用的潛力。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 試驗(yàn)所用丁酸梭菌和地衣芽孢桿菌均購買自廣州市某生物科技有限公司，活菌數(shù)量分別為 2.8×108CFU/g、1.9×1010CFU/g。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)在廣東某規(guī)?；B(yǎng)豬場進(jìn)行，選擇體重近似的21日齡斷奶三元雜交仔豬100頭，隨機(jī)分為4組，每組5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)5頭豬。預(yù)飼期5 d后，試驗(yàn)1、2組按照4.0×108CFU/kg的劑量分別在對(duì)照組飼糧的基礎(chǔ)上添加丁酸梭菌和地衣芽孢桿菌，試驗(yàn)3組飼糧中添加4.0×108CFU/kg的丁酸梭菌 +4.0×108CFU/kg的地衣芽孢桿菌。基礎(chǔ)飼糧見表1，試驗(yàn)為期30 d。

表1 飼糧配方和營養(yǎng)水平

1.3 樣品采集及指標(biāo)測定

1.3.1 生長性能 在試驗(yàn)開始和結(jié)束時(shí)稱量仔豬空腹體重，每天記錄采食量。試驗(yàn)結(jié)束后計(jì)算平均日采食量（ADFI）、平均日增重（ADG）及料肉比（FCR）。

1.3.2 血液指標(biāo) 試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選擇2頭仔豬通過前腔靜脈采血，采血前饑餓12 h。血液在室溫靜置1 h后離心收集上層血清。用試劑盒測定血清中總抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSHPx）活性和丙二醛（MDA）濃度，用ELISA試劑盒檢測血清中白細(xì)胞介素2（IL-2）、白細(xì)胞介素6（IL-6）、腫瘤壞死因子α（TNFα）的濃度，自動(dòng)生化分析儀檢測血清中總蛋白、白蛋白、球蛋白濃度。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì) 采用SPSS15.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析，采用Duncan’s法多重比較。結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示，P＜0.05為差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 丁酸梭菌和地衣芽孢桿菌對(duì)斷奶仔豬生長性能的影響 由表2可知，益生菌處理后各組采食量較對(duì)照組無顯著變化（P＞0.05），生長性能提高。試驗(yàn)2、3組仔豬末重較對(duì)照組分別提高5.9%、7.1%（P＜0.05），ADG分別提高12.6%、15.4%（P＜0.05），試驗(yàn)1組仔豬平均末重、ADG較對(duì)照組分別提高2.9%、5.8%，但未達(dá)顯著水平（P＞0.05），試驗(yàn)3組ADG較試驗(yàn)1組顯著提高9.0%（P＜0.05）。試驗(yàn)組FCR較對(duì)照組分別顯著降低6.1%、8.3%、9.9%（P＜0.05）。

表2 丁酸梭菌和地衣芽孢桿菌對(duì)斷奶?仔豬生長性能的影響

2.2 丁酸梭菌和地衣芽孢桿菌對(duì)斷奶仔豬血液指標(biāo)的影響 由表3可知，試驗(yàn)組仔豬血清中SOD較對(duì)照組分別顯著提高8.9%、15.2%、17.1%（P＜ 0.05），MDA濃度分別降低 7.6%、8.7%、10.6%（P＜ 0.05）；試驗(yàn) 1、2組仔豬血清中T-AOC、GSH-Px濃度較對(duì)照組均有上升，但不顯著（P＞0.05）；試驗(yàn)3組T-AOC、GSH-Px濃度較對(duì)照組均提高8.9%（P＜0.05）。試驗(yàn)組仔豬血清中球蛋白濃度較對(duì)照組分別提高10.9%、12.9%、16.3%（P＜0.05），白蛋白/球蛋白分別降 低 9.1%、12.9%、16.3%（P＜ 0.05）。 此 外，試驗(yàn)組仔豬血清中免疫因子濃度較對(duì)照組升高，試驗(yàn)2、3組IgG濃度分別顯著提高8.7%、12.2%（P＜0.05），IgA濃度顯著提高7.3%、11.4%（P＜0.05），試驗(yàn)1組血清中免疫因子較對(duì)照組升高，但未達(dá)顯著水平（P＞0.05）。

3 討論

3.1 丁酸梭菌和地衣芽孢桿菌對(duì)斷奶仔豬生長性能的影響 斷奶讓仔豬被迫適應(yīng)營養(yǎng)和環(huán)境的變化，是豬一生中最為關(guān)鍵的階段。斷奶造成營養(yǎng)供給方式的轉(zhuǎn)變顯著影響仔豬小腸上皮結(jié)構(gòu)，嚴(yán)重時(shí)引起腸上皮層受損，降低營養(yǎng)物質(zhì)的消化率，導(dǎo)致仔豬斷奶后經(jīng)常出現(xiàn)腹瀉和生長遲緩。目前，益生菌是一種新型的綠色飼料添加劑，能減少仔豬斷奶后腹瀉、促進(jìn)胃腸道健康，有部分或全部替代抗生素作為飼料添加劑應(yīng)用的潛力（金爾光等，2018）。此外，飼糧中添加益生菌還可以降低斷奶造成的氧化損傷和炎癥反應(yīng)。CB和BL是兩種常見的益生菌，均被列入我國飼料添加劑目錄，在養(yǎng)殖生產(chǎn)中應(yīng)用效果良好（趙敏孟等，2018；楊家軍等，2014）。本研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加CB時(shí)仔豬FCR較對(duì)照組顯著降低，添加BL時(shí)仔豬末重、ADG較對(duì)照組顯著提高，F(xiàn)CR降低。李玉鵬等（2017）報(bào)道，飼糧中添加CB飼喂仔豬14 d后，試驗(yàn)組仔豬ADG較對(duì)照組顯著提高，而FCR降低。賈聰慧等（2016）研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加CB處理42 d，肉雞末重、ADG、采食量較對(duì)照組均顯著提高，與抗生素組飼喂效果相近。而Yang等（2012）報(bào)道，添加低劑量CB時(shí)肉雞生長無顯著改善，而隨著劑量增加，肉雞的生長性能也顯著提高。因此，本試驗(yàn)中CB組仔豬末重和ADG無顯著提高可能是由于未選擇最佳添加劑量，同時(shí)處理效果還與試驗(yàn)動(dòng)物的種類等因素有關(guān)。類似的，楊家軍等（2014）發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加BL，肉雞末重、ADG顯著提高，F(xiàn)CR降低。劉曉琳等（2008）在仔豬上的試驗(yàn)也得到相似結(jié)果。以上研究與本試驗(yàn)結(jié)果相符，表明飼糧中分別添加以上兩種益生菌均能促進(jìn)仔豬生長。但本研究還發(fā)現(xiàn)，兩者同時(shí)添加時(shí)也能顯著改善仔豬生長，并且飼喂效果最好，顯著優(yōu)于CB組，這表明兩者同時(shí)添加時(shí)可能存在疊加效應(yīng)或協(xié)同作用。

表3 丁酸梭菌和地衣芽孢桿菌對(duì)斷奶?仔豬血液指標(biāo)的影響

3.2 丁酸梭菌和地衣芽孢桿菌對(duì)斷奶仔豬血液指標(biāo)的影響 仔豬早期斷奶常伴隨斷奶應(yīng)激和抵抗力低下，血液指標(biāo)與機(jī)體營養(yǎng)、健康狀況密切相關(guān)，可以直接反映機(jī)體氧化應(yīng)激和免疫水平。T-AOC、T-SOD、GSH-Px、MDA是反映機(jī)體氧化應(yīng)激狀態(tài)的標(biāo)志性指標(biāo)，T-AOC能直接反映機(jī)體抗氧化能力，MDA濃度升高表明脂質(zhì)過氧化、氧化損傷水平上升，SOD、GSH-Px能分別降低機(jī)體內(nèi)超氧陰離子和過氧化物濃度（鄭有秀等，2018）。本研究發(fā)現(xiàn)，CB和BL處理均能顯著提高仔豬血清中T-AOC，降低MDA含量，而兩者同時(shí)添加時(shí)還能提高血清中抗氧化酶活性。研究發(fā)現(xiàn)，肉雞飼糧中添加CB顯著提高血清中抗氧化酶活性，顯著改善抗氧化性能（賈聰慧等，2016）。而飼糧中添加BL時(shí)顯著提高肉雞血清中T-AOC，降低MDA濃度（陳家祥等，2010）。表明CB和BL均能提高仔豬抗氧化性能，而兩者同時(shí)添加時(shí)效果最好。

血清中總蛋白、白蛋白、球蛋白濃度在一定程度上能綜合反應(yīng)動(dòng)物機(jī)體對(duì)蛋白質(zhì)的利用情況及免疫水平，免疫因子可以直接反映體液免疫狀態(tài)（Yang等，2012）。益生菌最重要的功能之一是刺激免疫系統(tǒng)，促進(jìn)免疫器官發(fā)育，增強(qiáng)體液免疫等（Chao等，2017）。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，CB和BL均顯著增加仔豬血清中球蛋白含量，降低白蛋白和球蛋白的比值，表明仔豬的免疫功能得到改善。此外，我們還發(fā)現(xiàn)，BL組、CB-BL組仔豬血清中IgG、IgA濃度較對(duì)照組顯著升高，表明仔豬體液免疫功能增強(qiáng)，而CB組免疫因子濃度無顯著變化。袁慧坤等（2018）報(bào)道，CB和BL均能促進(jìn)北京鴨免疫器官發(fā)育，且兩種益生菌聯(lián)合添加時(shí)效果最好。而有研究發(fā)現(xiàn)，飼糧中添加CB顯著提高肉雞血清中IgG等免疫因子的含量（Yang等，2012）。總的來說，CB和BL均能提高仔豬免疫水平，而本試驗(yàn)結(jié)果與前人研究存在的差異可能是由試驗(yàn)對(duì)象和添加劑量不同引起。

4 結(jié)論

綜上所述，飼糧中添加CB和BL均能促進(jìn)仔豬生長，提高其免疫功能。在本試驗(yàn)的添加劑量下BL的處理效果優(yōu)于CB，兩者同時(shí)添加時(shí)效果最好，表明二者可能存在協(xié)同作用，具體機(jī)制有待研究。