鳙慢沉性飼料加工及其蛋白營養(yǎng)需要研究

劉 磊 ，王輔臣，黃 峰 ，李建文 ，胡先勤 ，馮 偉，王 燕

(1.武漢輕工大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與營養(yǎng)工程學(xué)院,武漢430040; 2.湖北戰(zhàn)友生物科技有限公司，湖北孝感 432016)

蛋白質(zhì)營養(yǎng)是魚類配合飼料中最重要、成本最高的成分[1]。飼料中適量的蛋白含量可使魚類獲得最佳生長效果。蛋白質(zhì)含量過低，生長速度緩慢；含量過高，容易造成資源浪費(fèi)。因此，有必要確定魚類生長的適宜飼料蛋白質(zhì)水平。

鳙(Aristichthysnobilis)因其具有食物鏈短、生長快、疾病少等優(yōu)良的生物學(xué)特性而成為我國重要的淡水養(yǎng)殖品種之一[2]。鳙具有特殊的濾食器官，是典型的濾食性魚類。在天然水域中，其食物組成以浮游動(dòng)物為主，其次是浮游植物、有機(jī)碎屑和細(xì)菌。在養(yǎng)殖生產(chǎn)中普遍采用施肥培養(yǎng)水體中浮游生物的方式來養(yǎng)殖鳙[3]。但是施肥培育的餌料生物數(shù)量有限，制約了鳙的生長，使得其快速生長的潛能難以充分發(fā)揮出來[4]，而且隨著市場(chǎng)需求的變化和養(yǎng)殖生產(chǎn)的發(fā)展，這種傳統(tǒng)的施肥養(yǎng)殖方式容易導(dǎo)致池塘水質(zhì)富營養(yǎng)化[5]，因此使用人工配合飼料養(yǎng)殖鳙已經(jīng)成為必然趨勢(shì)。本實(shí)驗(yàn)針對(duì)鳙的攝食特性及營養(yǎng)需求問題，研究了鳙慢沉性飼料的加工工藝，并在此基礎(chǔ)上，制作不同蛋白質(zhì)含量的配合飼料，探討了鳙對(duì)飼料蛋白質(zhì)的適宜需要量，旨在促進(jìn)鳙人工飼料的開發(fā)利用，提高養(yǎng)殖產(chǎn)量，增加經(jīng)濟(jì)效益。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)飼料

本實(shí)驗(yàn)采用單因素實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，以白魚粉和酪蛋白為主要蛋白源，分別配制6個(gè)不同蛋白質(zhì)水平(20%、25%、30%、35%、40%、45%)的飼料，調(diào)整物料水分含量、機(jī)筒溫度、物料油脂含量和物料蛋白質(zhì)含量等參數(shù)，使用雙螺桿擠壓膨化機(jī)，制得相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)飼料，分別標(biāo)記為P20、P25、P30、P35、P40、P45。各組飼料的配方見表1。各組飼料風(fēng)干后，粉碎，通過0.18 mm的分級(jí)篩，存放在-20 ℃冰箱里備用。

1.2 實(shí)驗(yàn)用魚及飼養(yǎng)管理

實(shí)驗(yàn)鳙購自漢川市華嚴(yán)農(nóng)場(chǎng)，運(yùn)入武漢輕工大學(xué)動(dòng)物營養(yǎng)與飼料科學(xué)湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室后，在暫養(yǎng)池(2 m×1.5 m×1.5 m)投喂基礎(chǔ)日糧馴化兩周，然后挑選體質(zhì)健康，初始體重(6.00±0.02) g的實(shí)驗(yàn)魚，隨機(jī)分為6組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)45尾魚，放入已消毒的室內(nèi)18個(gè)圓形水族箱(直徑80.0 cm，高60.0 cm)中，實(shí)驗(yàn)期為90 d。使用循環(huán)水過濾系統(tǒng)并24 h通氣以保持水中DO>6 mg/L，NH3-N<0.2 mg/L，水溫控制在25～30 ℃，pH為7.0～7.5，光照周期為12 h光照和12 h黑暗，每2 d換水一次，換水量約為1/4～1/3。每天投喂3次，時(shí)間分別為7∶30、12∶30和17∶30，采用適度過量投喂的原則。投喂飼料之前吸除未食用的飼料和糞便。

表1 養(yǎng)殖實(shí)驗(yàn)飼料配方及營養(yǎng)成分Tab.1 Formulation and proximate composition of experimental diets %

注：1.礦物質(zhì)預(yù)混料(g/kg)：MgSO4·7H2O，745 g；FeSO4·H2O，125 g；痕量元素預(yù)混料，80 g；石粉，50 g.

*痕量元素混合物(g/kg)：CuSO4·5H2O，31.0；ZnSO4·7H2O，353；AlCl3·6H2O，10.0；KIO3，3.0；MnSO4·5H2O，162；COCl2·6H2O，1.0；石粉，440.

2.每公斤維生素預(yù)混料含:VA，700 000 IU；VD3，350 000 IU；VK3，3.5 g；VE，16 g；VB1，3.5 g；VB2，7 g；VB6，7 g；VB12，0.007 g；VC，35 g；生物素，0.03 g；葉酸，1.6 g；煙酸，35 g；泛酸鈣，16 g；肌醇，35 g；淀粉，840.12 g.

1.3 飼料加工的參數(shù)設(shè)置

飼料質(zhì)量受多方面因素的綜合影響。在經(jīng)過多次預(yù)備實(shí)驗(yàn)后，發(fā)現(xiàn)對(duì)飼料質(zhì)量影響較大的工藝參數(shù)主要有：物料水分含量、脂肪含量、蛋白含量和機(jī)筒溫度等四個(gè)，因此本實(shí)驗(yàn)對(duì)這幾個(gè)參數(shù)設(shè)置不同的梯度，以飼料的糊化度、膨化度和下沉速度來評(píng)價(jià)物料水分含量、脂肪含量、蛋白含量和機(jī)筒溫度對(duì)飼料質(zhì)量的影響。

1.3.1 物料水分含量的設(shè)置

按照表1中的P35實(shí)驗(yàn)飼料配方，準(zhǔn)確稱取各種經(jīng)過粉碎的原料，然后混合均勻，再分別加入不同量的水，使物料水分含量分別達(dá)到20%、25%和30%，再混勻。之后，設(shè)置螺桿轉(zhuǎn)速為250 r/min、機(jī)筒溫度(進(jìn)料段→中間段→出料段)為90→115→130 ℃，制作飼料。

1.3.2 機(jī)筒溫度的設(shè)置

根據(jù)表1中的P35實(shí)驗(yàn)飼料配方，準(zhǔn)確稱取各種經(jīng)過粉碎的原料，然后混合均勻，加水將物料水分穩(wěn)定在25%，混勻之后，設(shè)置螺桿轉(zhuǎn)速為250 r/min，機(jī)筒溫度(進(jìn)料段→中間段→出料段)分別為T1、T2、T3，即90→90→90 ℃、90→115→130 ℃和90→130→145 ℃，制作飼料。

1.3.3 物料油脂含量的設(shè)置

依據(jù)表1中的P35實(shí)驗(yàn)飼料配方，準(zhǔn)確稱取各種經(jīng)過粉碎的原料，然后混合均勻，調(diào)節(jié)物料油脂含量分別達(dá)到5%、7%、9%和11%，再混勻；加水，使物料水分達(dá)到25%，再一次混勻，設(shè)置螺桿轉(zhuǎn)速為250 r/min和機(jī)筒溫度(進(jìn)料段→中間段→出料段)為90→115→130 ℃，制作飼料。

1.3.4 物料蛋白質(zhì)含量的設(shè)置

依照表1中的P20、P35和P45實(shí)驗(yàn)飼料，準(zhǔn)確稱取各種經(jīng)過粉碎的原料，混合均勻，加水，使物料水分達(dá)到25%，然后設(shè)置螺桿轉(zhuǎn)速為250 r/min和機(jī)筒溫度(進(jìn)料段→中間段→出料段)為90→115→130 ℃，制作飼料。

1.4 飼料特性表達(dá)指標(biāo)及檢測(cè)方法

飼料膨化度:一般采用徑向膨化度表示，即用游標(biāo)卡尺測(cè)量樣品的直徑，每個(gè)樣品測(cè)20個(gè)平行，取平均值為該樣品的直徑。樣品的膨化度=顆粒直徑/?？字睆?。

淀粉糊化度的測(cè)定：根據(jù)文獻(xiàn)[6]的方法測(cè)定淀粉的糊化度。用飼料中已熟化(糊化)淀粉與所含全部淀粉量之比的百分?jǐn)?shù)表示。

下沉速度(SV)是指飼料顆粒在水中下沉的平均速度。根據(jù)趙建偉和金征宇等[7]的方法測(cè)量飼料的下沉速度。取一個(gè)1 000 mL的量筒，裝1 000 mL水，豎直放置(水面距量筒底部的高度為300 mm)，用秒表測(cè)定1粒飼料顆粒從水面下沉到量筒底部的時(shí)間。測(cè)定20次，計(jì)算平均下沉速度(cm/s)。

1.5 生長和形體指標(biāo)的測(cè)定

在實(shí)驗(yàn)開始及實(shí)驗(yàn)結(jié)束的前1 d停止投喂，禁食24 h，稱魚體重，計(jì)算增重率、特定生長率。飼養(yǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取5尾魚，麻醉后分別稱體重、測(cè)體長，解剖分離內(nèi)臟，稱取其重量，計(jì)算肥滿度和臟體比。

增重率(WG)=(Wf-Wi)/Wi×100%

特定生長率(SGR)=(lnWf-lnWi)×100%/t

肥滿度(CF)=Wt/(Le)3×100

臟體比(VI)=Wo/Wt×100%

其中Wi和Wf分別表示鳙的初始均重和末期均重，Le為鳙的體長，t為試驗(yàn)天數(shù)，Wt為鳙的體重，Wo為鳙的內(nèi)臟重。

1.6 腸道消化酶活性的測(cè)定

實(shí)驗(yàn)魚饑餓1 d后，從每個(gè)缸中隨機(jī)取5尾魚，麻醉后于冰盤上解剖，取出腸道，剔除脂肪組織，將腸道內(nèi)容物沖洗干凈，吸干水分，稱重，勻漿后，于4 ℃、12 000 r/min冷凍離心20 min，取上清液測(cè)定酶活性。

腸道蛋白酶活性的測(cè)定：采用Folin-酚法[8]，以2%酪蛋白為底物，在30 ℃、pH7.5的條件下，保溫10 min，以1 min內(nèi)1 g組織中蛋白酶分解酪蛋白產(chǎn)生1 μg酪氨酸為1個(gè)活力單位(μg·Tyr/(min·g))。

淀粉酶活性的測(cè)定：采用3，5-二硝基水楊酸顯色法[9]，以1%淀粉為底物，反應(yīng)條件為30 ℃、pH7.5。淀粉酶活性為1 min內(nèi)1 g組織中的淀粉酶能完全水解淀粉產(chǎn)生1 mg麥芽糖為1個(gè)活力單位(mg·maltose/(min·g))。

1.7 統(tǒng)計(jì)與分析

本實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)采用SPSS22軟件進(jìn)行單因素方差分析(One-way ANOVA)，均值間的多重比較采用Duncan’s檢驗(yàn)方法。表中數(shù)值為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差，顯著性差異水平為P<0.05。

2 結(jié)果

2.1 物料水分含量對(duì)鳙飼料特性的影響

從表2可知，物料水分對(duì)飼料的糊化度和下沉速度有顯著影響。隨著物料水分含量的增加，飼料淀粉糊化度顯著提高，當(dāng)水分含量達(dá)到30%時(shí)，糊化度最高，顯著高于20%組，但與25%組無顯著性差異。隨著物料水分含量增加，下沉速度顯著降低；膨化度則呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，當(dāng)水分含量為25%時(shí)，膨化度達(dá)到最高，但與20%和30%組均無顯著差異。因此在飼料制作過程中，物料水分含量控制在25%，可以生產(chǎn)出糊化度高、下沉速度慢的鳙飼料。

表2 物料水分含量對(duì)飼料質(zhì)量特性的影響Tab.2 Effect of moisture content on quality characteristics of the feed

注：同行數(shù)據(jù)的上標(biāo)字母不同表示相互之間存在顯著差異(P<0.05)。以下同。

2.2 機(jī)筒溫度對(duì)鳙飼料特性的影響

從表3可以看出，機(jī)筒溫度對(duì)飼料的糊化度和下沉速度有顯著影響。機(jī)筒溫度為90→115→130 ℃時(shí)，飼料的糊化度最高，顯著高于機(jī)筒溫度為90→90→90 ℃組，但與90→130→145 ℃組無顯著性差異；隨著機(jī)筒溫度的增加，飼料下沉速度顯著降低；飼料膨化度則呈現(xiàn)先減小后增大的趨勢(shì)，但各組之間無顯著性差異。因此在飼料制作過程中，將物料機(jī)筒溫度控制在90→115→130 ℃時(shí)，可以生產(chǎn)出糊化度高，下沉速度慢的鳙飼料。

表3 機(jī)筒溫度對(duì)飼料質(zhì)量特性的影響Tab.3 Effect of barrel temperature on quality characteristics of the feed

2.3 物料油脂含量對(duì)鳙飼料特性的影響

由表4顯示，隨著物料中油脂含量的增加，飼料糊化度呈先升后降的趨勢(shì)，物料油脂為7%時(shí)，飼料的糊化度最高，顯著高于物料油脂含量為5%和11%組，但與物料油脂含量為9%組無顯著性差異。隨著物料中油脂含量的增加，下沉速度顯著降低；膨化度則呈先上升后降低的趨勢(shì)，當(dāng)物料油脂含量為7%時(shí)，飼料的膨化度最大，但各組之間無顯著性差異。因此，物料中油脂含量為7%～9%時(shí)，有利于加工制作出慢沉性鳙飼料。

表4 物料油脂含量對(duì)飼料質(zhì)量特性的影響Tab.4 Effect of lipid content on quality characteristics of the feed

2.4 物料蛋白含量對(duì)鳙飼料特性的影響

由表5可知，隨著物料蛋白含量的增加，飼料糊化度呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，當(dāng)物料蛋白含量為35%時(shí)，飼料糊化度最高，顯著高于物料蛋白含量為20%和45%組；飼料膨化度則呈現(xiàn)先降后升的趨勢(shì)，當(dāng)物料蛋白含量為45%時(shí)，飼料膨化度最高，顯著高于物料蛋白為20%和35%組；但物料蛋白含量的增加，對(duì)飼料下沉速度無顯著影響。

表5 物料蛋白含量對(duì)飼料質(zhì)量特性的影響Tab.5 Effect of protein content on quality characteristics of the feed

2.5 飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)鳙生長的影響

從表6可知，飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)鳙生長有顯著影響。隨著飼料蛋白質(zhì)水平提高，鳙增重率呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，其中P35組(34.24%)鳙增重率達(dá)到最高，與P40組(39.93%)差異不顯著，但顯著高于其他各組。當(dāng)飼料蛋白質(zhì)含量超過34.24%時(shí)，增重率略有下降，但P40組(39.93%)與P45組(46.00%)之間沒有顯著性差異。P20組(18.77%)的增重率顯著低于其他各組。鳙特定生長率的變化趨勢(shì)與增重率相似。飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)鳙的肥滿度和臟體比無顯著性影響。

采用表6的數(shù)據(jù)，分別以鳙的增重率和特定生長率兩項(xiàng)指標(biāo)為因變量，以飼料蛋白質(zhì)水平為自變量，進(jìn)行回歸分析，并作二次曲線擬合，分析鳙的增重率和特定生長率與飼料蛋白質(zhì)水平之間的關(guān)系，得到的回歸方程分別為y=-0.154 3x2+11.32x-90.961(R2=0.831 0)和y=-0.000 4x2+0.027 9x-0.136 9(R2=0.860 3)。由上述數(shù)學(xué)表達(dá)式可以求得，當(dāng)增重率、特定生長率取極大值時(shí)，對(duì)應(yīng)的飼料蛋白質(zhì)含量分別為34.65%、34.88%。因此，通過二次曲線回歸模型分析，鳙對(duì)慢沉性粉狀飼料蛋白質(zhì)的適宜需要量為34.65%～34.88%。

表6 蛋白質(zhì)水平對(duì)鳙生長性能的影響Tab.6 Effect of protein level on growth performance of bighead carp

2.6 飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)鳙腸道消化酶活性的影響

由表7可知，隨著飼料蛋白質(zhì)水平的增加，腸道蛋白酶活性呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，但各組之間沒有顯著性差異，其中P30組活性最大。飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)淀粉酶活性無顯著性影響。

表7 蛋白質(zhì)水平對(duì)鳙腸道消化酶活性的影響Tab.7 Effect of protein levels on digestive enzyme activity of bighead carp

3 討論

3.1 鳙飼料的加工工藝

天然水域中，鳙以濾食器官攝取浮游動(dòng)物，投喂配合飼料時(shí)，飼料的懸浮性即慢沉性要符合該魚的天然食性特征。本研究顯示，物料的水分含量對(duì)飼料產(chǎn)品的淀粉糊化度和下沉速度有顯著的影響。物料水分含量在25%～30%時(shí)，淀粉糊化度的增加程度趨于平緩，下沉速度明顯降低。淀粉的糊化受很多因素的影響，在高溫低水分的條件下難以充分熔融，對(duì)淀粉的糊化不利[10]；淀粉分子吸水膨脹程度，會(huì)影響飼料的糊化度。隨著物料水分含量的增加，糊化度會(huì)提高，同時(shí)飼料的下沉速度會(huì)有所降低。當(dāng)物料水分含量過高時(shí)，會(huì)減弱物料與螺桿之間的剪切作用，使物料在膨化腔內(nèi)的停留時(shí)間變短，不利于淀粉糊化度的提高。物料水分的變化對(duì)飼料產(chǎn)品的膨化度也會(huì)產(chǎn)生影響。Ding等[11]認(rèn)為，隨著物料水分含量的增加，膨化度先增加后減小。因?yàn)樗志哂袧櫥饔?，物料所受剪切作用與物料對(duì)螺桿和機(jī)膛內(nèi)壁的摩擦力減小，從而降低模板處物料所受壓力，減小出模瞬間物料的汽化程度[12]。水分含量在20%時(shí)，水分的潤滑作用較小，物料出模時(shí)，顆粒內(nèi)部形成網(wǎng)絡(luò)狀結(jié)構(gòu)，增加膨化度，減緩下沉速度；而當(dāng)水分含量超過25%時(shí)，超出物料能接受的范圍，水分會(huì)在膨化腔中充當(dāng)潤滑劑的作用，物料所受剪切力和摩擦力減小，出模物料所受壓力減小，汽化程度降低，使膨化度降低[12]。

在飼料加工過程中，物料混合物中的淀粉團(tuán)粒在溫度升高時(shí)，氫鍵破壞，分子能量增加，加快了糊化反應(yīng)的速度，短時(shí)間內(nèi)就獲得較高的糊化度[7]，同時(shí)淀粉會(huì)發(fā)生降解，分子內(nèi)的1,3-糖苷鍵斷裂，成為低分子量的麥芽糊精、麥芽糖和葡萄糖等[13]。本研究顯示，隨著機(jī)筒(進(jìn)料段→中間段→出料段)溫度從90→90→90 ℃升高到90→115→130 ℃時(shí)，飼料的糊化度顯著增加，之后保持在較高水平。這是因?yàn)闇囟冗^高時(shí)，進(jìn)一步增加了淀粉分子的降解程度，反而會(huì)使得能夠發(fā)生糊化反應(yīng)的淀粉數(shù)量相對(duì)減少[14]。此外物料在機(jī)筒腔內(nèi)的停留時(shí)間有限，當(dāng)溫度超過130 ℃后，淀粉糊化度不隨溫度升高而繼續(xù)增加。因此，隨著機(jī)筒溫度的增加，飼料的糊化度呈現(xiàn)先增加后略減小的趨勢(shì)，當(dāng)機(jī)筒溫度為90→115→130 ℃時(shí)，飼料的糊化度最大。飼料產(chǎn)品的下沉速度似乎與飼料加工過程中的飼料糊化程度密切相關(guān)，但溫度進(jìn)一步升高，飼料的下沉速度則緩慢降低。

在擠壓膨化加工過程中，物料的油脂具有降低物料粘度，限制膨脹的作用。本研究顯示，隨著物料油脂含量的增加，淀粉糊化度先增高至一定水平后再降低。在一定范圍內(nèi)，物料油脂含量增加可以提高物料在機(jī)筒內(nèi)的潤滑作用，糊化度有所增加；而當(dāng)油脂含量繼續(xù)增加時(shí)，由于物料內(nèi)部摩擦力以及物料與膨化腔壁摩擦力減小，從而降低飼料糊化度。本研究還顯示，隨著物料油脂含量的增加，飼料膨化度呈先增高后降低的趨勢(shì)，原因在于當(dāng)物料中油脂含量低時(shí)，增加油脂含量，物料粘度適度降低，飼料的膨化度呈上升趨勢(shì)；而當(dāng)物料油脂含量繼續(xù)增加時(shí)，由于游離脂肪的含量增加，脂肪與蛋白質(zhì)和淀粉所形成的復(fù)合物達(dá)到最大值，不再增加，飼料的粘度下降，導(dǎo)致擠壓熔融物料失去持水能力，從而喪失其膨化能力[15]。

本研究表明，飼料的蛋白含量從25%增加到45%時(shí)，淀粉糊化度呈現(xiàn)先增大后減小的趨勢(shì)，膨化度則呈現(xiàn)先減小后增大的趨勢(shì)，而飼料下沉速度則沒有顯著差異?？赡苁且?yàn)榈鞍踪|(zhì)受擠壓機(jī)膨化腔內(nèi)高溫、高壓及機(jī)械剪切力作用，使其表面電荷重新分布且趨向均一化。蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)發(fā)生伸展和重組，分子間的氫鍵、二硫鍵等部分?jǐn)嗔眩瑢?dǎo)致蛋白質(zhì)變性。變性的蛋白質(zhì)分子之間發(fā)生疏水鍵和二硫鍵鍵合，產(chǎn)生組織化作用[16]，從而對(duì)飼料質(zhì)量產(chǎn)生影響。另外，組成蛋白質(zhì)的氨基酸在高溫高壓的擠壓條件下，可與飼料中的一些還原糖或其他羰基化合物發(fā)生美拉德反應(yīng)[16]，也會(huì)影響飼料的質(zhì)量特性。

3.2 飼料蛋白水平對(duì)鳙生長的影響

蛋白質(zhì)是動(dòng)物必需的營養(yǎng)素，攝入的蛋白質(zhì)不足通常會(huì)引起動(dòng)物的生長受阻[17]。本研究顯示，飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)鳙生長有顯著性影響。隨著飼料蛋白質(zhì)水平的增加，鳙的增重率和特定生長率也提高，當(dāng)飼料蛋白質(zhì)水平為35%時(shí)達(dá)到峰值，超過這一水平的各組鳙增重率和特定生長率略有下降，但差異不顯著。這種變化趨勢(shì)與一些學(xué)者對(duì)羅非魚(Oreochromisniloticus)[18]和寶石鱸(Scortumbarcoo)[19-20]等的研究結(jié)果一致。魚類攝食蛋白質(zhì)含量過高的飼料時(shí)，機(jī)體無法完全利用蛋白質(zhì)，為了維持機(jī)體穩(wěn)態(tài)，通過脫氨基作用消耗過量的蛋白質(zhì)，同時(shí)消耗大量的能量，使魚類用于生長的能量相對(duì)減少，反而使魚類的生長下降[21]。以增重率和特定生長率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，根據(jù)二次曲線模型得出鳙幼魚(6.00±0.02g)對(duì)飼料蛋白質(zhì)的適宜需要量為34.65%～34.88%。這個(gè)結(jié)果高于草魚(Ctenopharyngodonidellus)(22.66%)等草食性魚類[22]，低于青魚(Mylopharyngodonpiceus)(41%)[23]、南方鲇(Silurusmeridionalis)(41.1%～45.1%)[24]等肉食性魚類。通過與不同食性魚類蛋白質(zhì)需要量的比較，說明濾食攝食方式的鳙，可以認(rèn)為是一種雜食性偏肉食性魚類。

一般來說，處于發(fā)育階段早期的魚對(duì)飼料蛋白適宜需求量要高于處于發(fā)育后期的魚。Santiago等[25]研究初始重3.80 mg的鳙仔魚時(shí)，指出鳙仔魚的蛋白適宜需要量為30%，其結(jié)果是偏低。本研究所使用的鳙初始重為6.00 g，得到的適宜蛋白需求量高于Santiago等[25]的結(jié)果，其原因可能與飼料原料(飼料蛋白源)、投喂率等有關(guān)。另外，飼料中的粗纖維含量會(huì)影響鳙對(duì)食物的消化、吸收和利用；當(dāng)粗纖維含量適宜時(shí)，有利于鳙消化機(jī)能的改善，但是當(dāng)粗纖維含量過高時(shí)，又會(huì)妨礙鳙對(duì)食物的消化利用，從而影響生長。本研究中的P20和P25飼料，其纖維素粉配比相對(duì)較高，這在魚類蛋白需求研究中是難以避免的，因?yàn)樵趯?shí)驗(yàn)過程中配制低蛋白質(zhì)含量飼料時(shí)，需要使用纖維素當(dāng)填充料，所以P20組和P25組鳙的生長速度較慢可能受到蛋白含量低和纖維素含量高的雙重影響。因此，本研究所獲得的鳙適宜的蛋白質(zhì)需要量與Santiago等[25]的研究結(jié)果存在差別的原因可能是飼料蛋白源和粗纖維含量的高低所致。但總體來說，本實(shí)驗(yàn)得到的鳙幼魚的適宜蛋白需求量為34.65%～34.88%是比較恰當(dāng)?shù)?，也符合該魚的天然食性特征。

消化酶的主要作用是分解消化道內(nèi)的食物，其活性大小會(huì)影響魚類對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，從而影響魚類的生長[26]。但是，消化酶活性又受到諸多因素的影響。在本研究中，蛋白酶活性呈先上升再下降的趨勢(shì)，這可能與飼料蛋白質(zhì)水平高低有關(guān)。當(dāng)飼料蛋白由低水平向高水平增加時(shí)，會(huì)刺激腸道蛋白酶的分泌，使腸道蛋白酶的活性增加，但飼料蛋白質(zhì)水平進(jìn)一步增加，可能使腸道的消化負(fù)擔(dān)加重，從而對(duì)消化酶的分泌產(chǎn)生負(fù)反饋調(diào)節(jié)，導(dǎo)致蛋白酶活性降低[27]。有研究顯示，魚類淀粉酶活性隨飼料蛋白含量的變化而出現(xiàn)規(guī)律性變化，黃峰等[28]對(duì)南方鲇的研究時(shí)發(fā)現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)后期(25 d以后)高、中蛋白飼料組的淀粉酶活性呈遞增趨勢(shì)，而低蛋白飼料組則呈明顯的降低趨勢(shì)。也有研究認(rèn)為，魚類淀粉酶活性與飼料中淀粉含量有關(guān)[29]。但本研究沒有發(fā)現(xiàn)飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)鳙腸道淀粉酶活性的顯著性影響。

致謝：在本論文成文之時(shí)，得到了余登航、劉軍、劉立鶴等老師的大力幫助，也得到了淡水水產(chǎn)健康養(yǎng)殖湖北省協(xié)同創(chuàng)新中心的支撐，在此深表感謝！