蘇百維爾浸膏對四氯化碳致大鼠肝損傷的保護(hù)作用

蘇百維爾（醒久液）浸膏組方為我院基于中醫(yī)治未病理論指導(dǎo)形成的經(jīng)驗方，由葛根、枸杞、大棗、玉竹、烏梅五味藥食同源中藥材組成。葛根具有解肌退熱、透疹、生津止渴、升陽止瀉的功效，主要用于表證發(fā)熱，麻疹不透，熱病口渴，脾虛泄瀉等。玉竹具有養(yǎng)陰潤燥、生津止渴的功效，主要用于肺、胃陰虛證，咳嗽、咽干痰結(jié)等[1～3]。該方具有解熱抗炎，養(yǎng)肝護(hù)胃等功效，可用于免疫力低下、肝功能受損、慢性胃病等。本研究利用現(xiàn)代藥理學(xué)理論對該方進(jìn)行藥效學(xué)驗證，為該方二次開發(fā)提供理論依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 試驗藥品及試劑 蘇百維爾浸膏組方為葛根、枸杞、大棗、玉竹、烏梅，加10倍量水浸泡45min，煎煮3次，每次煎煮1.5h，濾過，合并煎液，減壓濃縮至流浸膏，4℃冰箱冷藏存放。其原藥材含量為 0.268g/ml，批號：20180516。多聚甲醛，批號：20180112，規(guī)格：500g/瓶，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司生產(chǎn)。

1.1.2 試驗動物 SD大鼠，SPF級，全雄，體質(zhì)量180～220g，由西南醫(yī)科大學(xué)試驗動物中心提供，試驗動物生產(chǎn)合格證號：SCXK（川）2018-17，試驗在西南醫(yī)科大學(xué)城北校區(qū)試驗動物中心進(jìn)行。肝臟病理組織學(xué)檢測委托成都里來生物科技有限公司完成。

1.2 試驗方法

1.2.1 劑量設(shè)計 根據(jù)《保健食品檢驗與評價技術(shù)規(guī)范2003》相關(guān)規(guī)定，設(shè)計蘇百維爾浸膏高劑量（H）為人體日用量30倍（2 041mg葛根每千克大鼠體重）、蘇百維爾浸膏中劑量（M）為人體日用量10倍（680mg葛根每千克大鼠體重）、蘇百維爾浸膏低劑量（L）為人體日用量5倍（340mg葛根每千克大鼠體重）。按每次浸膏灌胃2ml/100g計算，保持處方藥材比例不變以主藥示例，蘇百維爾浸膏H、M、L濃度應(yīng)分別為 102、34、17mg/ml。

1.2.2 分組與給藥 將大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)均分為模型組、空白組、蘇百維爾浸膏高、中、低劑量組共5組，每組10只。對蘇百維爾浸膏高、中、低劑量組開始灌胃給予對應(yīng)劑量蘇百維爾浸膏2ml/100g，每日1次，空白組灌胃給予等容量生理鹽水，持續(xù)30天，期間將動物每周稱重2次，以調(diào)整受試樣品劑量。

1.2.3 造模 試驗第30天各組動物隔夜禁食不禁水16h，除空白組外各組大鼠一次性給予四氯化碳（5ml/kg）灌胃，空白組給予等容量食用植物油。4h后，用藥組和空白組繼續(xù)灌胃給予對應(yīng)受試品和生理鹽水[4，5]。

1.2.4 指標(biāo)測定 于第30天末次給藥24h后，乙醚麻醉各組動物，剪開胸腔心臟取血5ml于EP管，3 000r/min離心，取血清按試劑盒方法測定ALT、AST。采血后取肝臟左葉，在4%多聚甲醛固定液中固定[6]，送病理組織學(xué)鏡檢。

1.2.5 統(tǒng)計學(xué)分析 所有數(shù)據(jù)使用Excel建立數(shù)據(jù)庫，采用SPSS 12.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，計量資料以±s表示，組間數(shù)據(jù)比較采用雙側(cè)t檢驗，以P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 蘇百維爾浸膏對大鼠ALT、AST的影響模型組與空白組AST、ALT水平具有統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05），提示造模成功。其余各組AST、ALT水平與模型組比較，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），其余各組與空白組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），提示蘇百維爾浸膏3個劑量均對大鼠化學(xué)性肝損傷導(dǎo)致的轉(zhuǎn)氨酶升高有一定抑制作用，見表1。

表1 蘇百維爾浸膏對大鼠ALT、AST水平的影響（U/L，±s）

表1 蘇百維爾浸膏對大鼠ALT、AST水平的影響（U/L，±s）

注：與空白組比較，*P<0.05；與模型組比較，ΔP<0.05

組別 n AST ALT空白組 10156.13±37.6949.88±6.01模型組 10379.89±145.11* 298.89±171.45*蘇百維爾H組 10136.60±25.56Δ 55.90±8.34Δ蘇百維爾M組 10202.29±53.73Δ 64.43±21.33Δ蘇百維爾L組 10219.56±134.93Δ 84.44±31.58Δ

2.2 大鼠肝臟病理學(xué)的改變空白組肝臟被膜完整，門管區(qū)結(jié)構(gòu)完整，未見明顯病理變化；模型組肝索排列紊亂，肝小葉內(nèi)肝細(xì)胞氣球樣變，肝細(xì)胞腫大，胞漿疏松成網(wǎng)狀，半透明，肝細(xì)胞灶狀壞死，炎性細(xì)胞浸潤；蘇百維爾浸膏H組、M組肝臟被膜完整，有少量或部分肝細(xì)胞空泡變性，胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)空泡狀或顆粒狀，門管區(qū)結(jié)構(gòu)完整，未見明顯病理變化；蘇百維爾浸膏L組肝臟被膜完整，肝索排列紊亂，部分肝小葉內(nèi)肝細(xì)胞氣球樣變，肝細(xì)胞腫大，胞漿疏松成網(wǎng)狀，半透明，呈球形；部分肝細(xì)胞空泡變性，胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)空泡狀或顆粒狀物質(zhì)，胞質(zhì)染色不均，門管區(qū)未見明顯病理變化，見圖1。

圖1 各組大鼠肝臟病理鏡檢

3 討論

隨著社會生活節(jié)奏加快，人們熬夜、酗酒、飲食不規(guī)律等不健康的生活方式導(dǎo)致肝臟負(fù)擔(dān)加重，肝功能受損，患有慢性肝病人群逐漸增多。唐代名醫(yī)孫思邈認(rèn)為：“上工治未病，中工治欲病，下工治已病”，中醫(yī)經(jīng)典理論對調(diào)理和預(yù)防肝病有自身的特色。蘇百維爾浸膏組方為我院基于中醫(yī)治未病理論指導(dǎo)形成的經(jīng)驗方，具有解熱抗炎、養(yǎng)肝護(hù)胃等功效。本研究利用現(xiàn)代藥理學(xué)理論對該方進(jìn)行藥效學(xué)驗證，為該方二次開發(fā)提供理論依據(jù)。

該方的開發(fā)初衷是研發(fā)一種具有養(yǎng)肝護(hù)胃、提神醒腦功效的純中藥飲品。主要針對長途駕駛?cè)藛T（緩解長時間駕駛疲勞和飲食不規(guī)律造成的慢性胃?。?、飯店食客（緩解辛辣食物對胃腸道的刺激性）、長期應(yīng)酬者及其他亞健康人群。目前市場上以植物為基礎(chǔ)開發(fā)的飲料較多，但以中醫(yī)理論為基礎(chǔ)，且作用于亞健康人群，具有保肝作用的產(chǎn)品，尚未出現(xiàn)。蘇百維爾浸膏及飲品的開發(fā)，將會填補(bǔ)該市場空白。

蘇百維爾浸膏組方均為藥食同源中藥材，而傳統(tǒng)藥食同源中藥材主要作為食材或佐料用于烹飪。本品以中醫(yī)理論為指導(dǎo)，利用藥食同源中藥材作為飲品進(jìn)行開發(fā)，并以現(xiàn)代藥理學(xué)的理論對其功效進(jìn)行驗證。試驗結(jié)果中，用藥組動物肝臟病理組織學(xué)檢查中僅發(fā)現(xiàn)有空泡形變或氣球樣變，而未出現(xiàn)模型組動物的炎性浸潤及灶狀壞死，這提示蘇百維爾浸膏對大鼠肝臟化學(xué)損傷帶來的炎性病變有抑制作用，但對肝細(xì)胞受損后水分增多引起肝細(xì)胞脹大、胞漿疏松化影響不明顯。本試驗僅對蘇百維爾浸膏對肝損傷的保護(hù)作用進(jìn)行了生化指標(biāo)和病理組織學(xué)方面的藥效學(xué)驗證，而浸膏中具有保護(hù)作用的有效部位群和單體以及可能的作用機(jī)制，還需進(jìn)一步研究探討。