譚秀英,嚴(yán) 俊,范 昱,,徐欣然,王佳俊,賴弟利,,何 鳳,程曉彬,阮景軍,程劍平
(1.貴州大學(xué) 麥作研究中心,貴州 貴陽(yáng) 520025; 2.成都大學(xué) 藥學(xué)與生物工程學(xué)院,四川 成都 610106; 3.四川民族學(xué)院 農(nóng)學(xué)院,四川 康定 626001)
燕麥(AvenasativaL.)屬禾本科燕麥屬1年生草本植物,按染色體組可分為二倍體(2n=2x=14)、四倍體(2n=4x=28)和六倍體(2n=6x=42)3個(gè)種群23個(gè)種,按外稃性狀可分為皮燕麥和裸燕麥兩大類,廣泛分布于亞洲、歐洲及北美洲北緯40°以北的地區(qū),種植面積居世界第7位。其中,歐美地區(qū)主要種植皮燕麥,而我國(guó)主要種植裸燕麥[1]。燕麥含有較高的蛋白質(zhì)(25%~30%)、膳食纖維及碳水化合物,適口性好,適應(yīng)性強(qiáng),且莖葉可制成干草和草粉,籽??勺鳛榧Z食,秸稈可作為飼料、飼草來(lái)喂養(yǎng)家畜,是一種糧飼兼用的經(jīng)濟(jì)作物。野生燕麥為栽培燕麥的近緣種,主要分布于中東和北非等地區(qū),是較理想的飼料來(lái)源[2-3]。發(fā)掘野生燕麥種質(zhì)資源,可為高營(yíng)養(yǎng)、抗逆燕麥新品種的選育提供優(yōu)異材料[4-7]。不同環(huán)境條件會(huì)促使作物種子形態(tài)、營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)產(chǎn)生較大差異,野生燕麥在長(zhǎng)期自然環(huán)境選擇下,形成了可適應(yīng)當(dāng)?shù)丨h(huán)境的不同生態(tài)型及群體[8-10]。以色列是麥類作物(包括燕麥)的起源地之一,其野生燕麥具有豐富的遺傳多樣性,是改良飼草燕麥品種的優(yōu)良基因資源。目前,對(duì)起源地野生燕麥的研究多集中于對(duì)其籽粒營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)與農(nóng)藝性狀的相關(guān)性、物候期及農(nóng)藝性狀與起源地生態(tài)地理因素的相關(guān)性方面[11-13],而對(duì)起源地野生燕麥的種子形態(tài)及其與起源地生態(tài)地理因素的相關(guān)性研究尚未見報(bào)道。為此,對(duì)來(lái)自以色列不同地區(qū)的6個(gè)群體共60個(gè)生態(tài)型野生燕麥的種子形態(tài)、營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)及其與起源地生態(tài)地理因素的相關(guān)性進(jìn)行分析,為野生燕麥資源的合理利用及燕麥新品種選育提供參考依據(jù)。
供試野生燕麥由以色列海法大學(xué)進(jìn)化研究所提供,共6個(gè)群體60個(gè)生態(tài)型。各群體起源地生態(tài)地理數(shù)據(jù)見表1。
表1 以色列6個(gè)野生燕麥群體的起源地生態(tài)地理數(shù)據(jù)
注:Ln:經(jīng)度;Lt:緯度;Al:海拔;Tm:年平均溫度;Ta:8月平均溫度;Tj:1月平均溫度;Td:季節(jié)溫差;Tdd:晝夜溫差;Ev:年蒸發(fā)量;Rn:年降雨量;Rd:年降雨天數(shù);Hu14:14:00平均濕度;Huan:年平均濕度,下同。
Note:Ln represents longitude;Lt represents latitude;Al represents altitude;Tm represents annual average temperature;Ta represents average temperature in August;Tj represents average temperature in January;Td represents seasonal temperature difference;Tdd represents temperature difference between day and night;Ev represents annual evaporation;Rn represents annual rainfall;Rd represents annual rainfall days;Hu14 represents 14:00 average humidity;Huan represents annual average humidity,the same below.
野生燕麥材料于2016年11月種植在四川省成都市金堂縣五鳳鎮(zhèn)成都大學(xué)試驗(yàn)基地(104°25′08″~104°31′51″E、30°35′21″~30°40′53″N),該地海拔最高873.7 m、最低411.5 m,屬于深丘地貌特征,土質(zhì)為紅黃壤土,肥力中等,適宜多種農(nóng)作物種植。該地氣候四季分明,年平均氣溫17 ℃,降水量924 mm,日照1 241 h,年無(wú)霜期290 d,空氣相對(duì)濕度65%~70%,氣候溫和。土壤pH值6.11,含有機(jī)質(zhì)35.7 g/kg、全氮2.15 g/kg、全磷0.87 g/kg、全鉀14.8 g/kg、水解氮110.0 mg/kg、有效磷4.3 mg/kg、有效鉀116.0 mg/kg、銅44.1 mg/kg、鋅59.9 mg/kg、錳463.0 mg/kg、硒0.149 mg/kg、鐵31.5 mg/kg。
每個(gè)野生燕麥生態(tài)型挑選飽滿度一致、大小均勻的種子80粒,穴播,行長(zhǎng)1.0 m,每行5穴,穴深10.0 cm,行距20.0 cm,田間管理同栽培燕麥。成熟期,收獲野生燕麥種子,置于37 ℃烘箱中烘干,取出脫粒,研磨過篩,用于營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)分析。
1.2.1 總類黃酮、總酚含量 取50 mg野生燕麥待測(cè)樣品,加入1.6 mL 50%甲醇溶液,超聲處理1 h,取出樣品搖勻,在65 ℃水浴鍋內(nèi)水浴30 min,將樣品取出,室溫靜置30 min,放入離心管盒內(nèi),在搖床上振蕩30 min,然后于10 000 r/min離心10 min,在4 ℃下放置48 h,采用紫外分光光度法測(cè)定總類黃酮[14]和總酚[15]含量。
1.2.2 植酸、無(wú)機(jī)磷含量 將提取總類黃酮、總酚后的底物,用真空濃縮儀(Eppendorf,Concentrator Plus)濃縮8 h至無(wú)溶液,加入200 μL HCl(0.5 mol/L)溶液,室溫靜置2 h至底物完全吸漲后,用電動(dòng)組織研磨器將底物研磨成勻漿,再加入1.4 mL HCl(0.5 mol/L)溶液,放入離心管盒內(nèi),在搖床上振蕩30 min,然后于10 000 r/min離心10 min,4 ℃放置備用。采用紫外分光光度法測(cè)定植酸[16]和無(wú)機(jī)磷含量[17]。
1.2.3 氨基含量 稱取30 mg野生燕麥待測(cè)樣品,加入1 600 μL NaOH(0.1 mol/L)溶液搖勻,于 70 ℃水浴鍋中水浴1 h,每隔20 min取出搖晃一次,10 000 r/min離心10 min,4 ℃放置備用。采用紫外分光光度法測(cè)定氨基含量[18]。
1.2.4 種子形態(tài) 隨機(jī)選取野生燕麥植株主莖穗的籽粒3~8粒,用考種儀測(cè)定籽粒的千粒質(zhì)量、面積、周長(zhǎng)、長(zhǎng)、寬、直徑、圓度,并計(jì)算長(zhǎng)/寬。每個(gè)群體的每個(gè)生態(tài)型進(jìn)行3次重復(fù)。
采用Excel 2007進(jìn)行數(shù)據(jù)整理,用JMP 6.0軟件進(jìn)行單因素方差分析(One-Way ANOVA)、差異顯著性檢驗(yàn)(Tukey-Kramer HSD)和斯皮爾曼秩相關(guān)分析。
由表2可知,種子形態(tài)指標(biāo)中種子長(zhǎng)/寬、長(zhǎng)、圓度在6個(gè)群體之間均無(wú)顯著差異,其余形態(tài)指標(biāo)在Tabigha、Nahef 2個(gè)群體間均存在顯著差異。千粒質(zhì)量最大的群體是Tabigha(19.68 g),最小的群體是Nahef(14.02 g);面積最大的是Tabigha(18.49 mm2),最小的是Nahef(14.85 mm2);周長(zhǎng)最大的是Tabigha(22.19 mm),最小的是Nahef(20.20 mm);長(zhǎng)最大的是Tabigha(9.71 mm),最小的是Nahef(8.89 mm);寬最大的是Tabigha(2.36 mm),最小的是Nahef(2.07 mm);長(zhǎng)/寬最大的是Beit-Oren(4.37),最小的是Tabigha(4.13);直徑最大的是Tabigha(4.80 mm),最小的是Nahef(4.31 mm);圓度較大的群體是Atlit、Evolution Canyon、Tabigha,均為0.24,較小的群體是Beit-Oren、Caesarea、Nahef,均為0.23。
從變異系數(shù)來(lái)看,8個(gè)種子形態(tài)性狀中變異系數(shù)最大的是千粒質(zhì)量,可見6個(gè)野生燕麥群體千粒質(zhì)量的離散程度最大,差異最大;Atlit、Caesarea、Evolution Canyon群體變異系數(shù)最小的均是直徑,Nahef、Tabigha群體變異系數(shù)最小的均是長(zhǎng)/寬,Beit-Oren群體變異系數(shù)最小的是寬,說明群體間差異最小,相對(duì)較穩(wěn)定。
表2 6個(gè)以色列野生燕麥群體的種子形態(tài)性狀差異
注:同列數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示不同群體間的差異達(dá)到顯著(P<0.05)水平,下同。
Note:Different lowercase letters after the data within a column indicate significant differences among different groups (P<0.05),the same below.
由表3可知,6個(gè)野生燕麥群體間籽??偡?、植酸、無(wú)機(jī)磷、氨基含量均無(wú)顯著差異,僅總類黃酮含量在Nahef和Tabigha間差異顯著。總類黃酮含量最高的群體是Nahef,為316.89 mg/kg,最低的群體是Tabigha,為102.84 mg/kg;總酚含量最高的群體是Caesarea(863.82 mg/kg),最低的群體是Atlit(633.67 mg/kg);植酸含量最高的群體是Evolution Canyon(965.78 mg/kg),最低的群體是Beit-Oren(825.23 mg/kg);無(wú)機(jī)磷含量最高的群體是Caesarea(736.67 mg/kg),最低的群體是Tabigha(377.68 mg/kg);氨基含量由大到小為Evolution Canyon、Beit-Oren、Tabigha、Caesarea、Atlit、Nahef,最高為3 192.32 mg/kg,最低為2 787.59 mg/kg。
從變異系數(shù)來(lái)看,野生燕麥群體5個(gè)營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)指標(biāo)的變異系數(shù)總體表現(xiàn)為無(wú)機(jī)磷含量>總類黃酮含量>植酸含量>總酚、氨基含量,說明野生燕麥籽粒中無(wú)機(jī)磷含量的離散程度最大,各群體間含量差異較大,而總酚、氨基含量的變異系數(shù)較小,說明差異較小,相對(duì)較穩(wěn)定。
對(duì)6個(gè)以色列野生燕麥群體的種子形態(tài)指標(biāo)與起源地生態(tài)地理因素之間的相關(guān)性進(jìn)行分析(表4)發(fā)現(xiàn),千粒質(zhì)量與年平均溫度、8月平均溫度、1月平均溫度、季節(jié)溫差均呈極顯著或顯著正相關(guān),與年降雨量、年降雨天數(shù)分別呈顯著、極顯著負(fù)相關(guān);面積、長(zhǎng)、周長(zhǎng)、直徑與年平均溫度、8月平均溫度、1月平均溫度均呈顯著或極顯著正相關(guān),面積、直徑與年降雨天數(shù)分別呈極顯著、顯著負(fù)相關(guān);長(zhǎng)/寬與年平均溫度、8月平均溫度均呈顯著負(fù)相關(guān);寬與年平均溫度、8月平均溫度、1月平均溫度、季節(jié)溫差、晝夜溫差均呈極顯著或顯著正相關(guān),與海拔、年降雨量、年降雨天數(shù)均呈極顯著或顯著負(fù)相關(guān);圓度僅與8月平均溫度呈顯著正相關(guān),與其余起源地生態(tài)地理因素間均不存在顯著相關(guān)性。
表3 6個(gè)以色列野生燕麥群體的籽粒營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)指標(biāo)差異
表4 以色列野生燕麥種子形態(tài)性狀與起源地生態(tài)地理因素的顯著相關(guān)性
對(duì)6個(gè)以色列野生燕麥群體籽粒營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)指標(biāo)與起源地生態(tài)地理因素之間的相關(guān)性進(jìn)行分析(表5)發(fā)現(xiàn),總類黃酮含量與年平均溫度、8月平均溫度、1月平均溫度、季節(jié)溫差均呈極顯著或顯著負(fù)相關(guān),與年降雨天數(shù)、年平均濕度均呈顯著正相關(guān);植酸含量?jī)H與經(jīng)度呈顯著負(fù)相關(guān);無(wú)機(jī)磷含量與經(jīng)度、緯度均呈顯著負(fù)相關(guān)。
表5 以色列野生燕麥籽粒營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)指標(biāo)與起源地生態(tài)地理因素的顯著相關(guān)性
在6個(gè)野生燕麥群體中,Tabigha群體千粒質(zhì)量、面積、周長(zhǎng)、長(zhǎng)、寬、直徑均最大,Nahef群體均最小。各群體中千粒質(zhì)量、面積、周長(zhǎng)、寬及直徑間都存在明顯差異,說明地區(qū)間的環(huán)境差異對(duì)種子形態(tài)性狀有一定影響,而長(zhǎng)/寬、長(zhǎng)和圓度在6個(gè)群體之間均無(wú)顯著差異,說明野生燕麥中的這3個(gè)種子形態(tài)性狀可能具有一定的保守性。
本研究發(fā)現(xiàn),6個(gè)野生燕麥群體間籽??偡?、植酸、無(wú)機(jī)磷、氨基含量均無(wú)顯著差異,僅總類黃酮含量在Nahef和Tabigha群體間差異顯著,說明總類黃酮含量相對(duì)較易受基因型和環(huán)境影響。從變異系數(shù)來(lái)看,無(wú)機(jī)磷含量的離散程度最大,各群體間差異較大;而總酚、氨基含量的變異系數(shù)較小,說明差異較小,相對(duì)較穩(wěn)定,營(yíng)養(yǎng)成分含量間的差異主要由品種的遺傳特性決定,這與趙麗那[12]的研究結(jié)果相一致。相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn),總類黃酮含量與年平均溫度、8月平均溫度、1月平均溫度、季節(jié)溫差均呈極顯著或顯著負(fù)相關(guān),與年降雨天數(shù)、年平均濕度均呈顯著正相關(guān);植酸含量?jī)H與經(jīng)度呈顯著負(fù)相關(guān);無(wú)機(jī)磷含量與經(jīng)度、緯度均呈顯著負(fù)相關(guān)。綜上,與總類黃酮含量顯著相關(guān)的環(huán)境因素較多,與其余營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)指標(biāo)顯著相關(guān)的環(huán)境因素較少。種子形態(tài)指標(biāo)中,千粒質(zhì)量與年平均溫度、8月平均溫度、1月平均溫度、季節(jié)溫差均呈極顯著或顯著正相關(guān),與年降雨量、年降雨天數(shù)分別呈顯著、極顯著負(fù)相關(guān);面積、長(zhǎng)、周長(zhǎng)、直徑與年平均溫度、8月平均溫度、1月平均溫度均呈顯著或極顯著正相關(guān),面積、直徑與年降雨天數(shù)分別呈極顯著、顯著負(fù)相關(guān);長(zhǎng)/寬與年平均溫度、8月平均溫度均呈顯著負(fù)相關(guān);寬與年平均溫度、8月平均溫度、1月平均溫度、季節(jié)溫差、晝夜溫差均呈極顯著或顯著正相關(guān),與海拔、年降雨量、年降雨天數(shù)均呈極顯著或顯著負(fù)相關(guān);圓度僅與8月平均溫度呈顯著正相關(guān),與其余起源地生態(tài)地理因素間均不存在顯著相關(guān)性。說明千粒質(zhì)量、面積、長(zhǎng)、周長(zhǎng)、直徑、寬受較多環(huán)境因素影響,而圓度受較少環(huán)境因素影響??梢姺N子的形態(tài)、營(yíng)養(yǎng)成分含量等特性在不同的物種間或同一物種內(nèi)部存在的差異是植物與外界環(huán)境相互作用的結(jié)果,而同一野生燕麥群體內(nèi)部存在較大差異,可能與其自身遺傳特性、環(huán)境條件、田間管理等因素有關(guān),這與前人的研究結(jié)果一致[13,19-24]。