• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    外源NAA對甜瓜嫁接愈合關(guān)鍵期保護性酶活性及相關(guān)基因表達的影響

    2019-11-17 12:33張穎劉義玲湯雨凡許傳強
    中國瓜菜 2019年9期
    關(guān)鍵詞:外源嫁接苗甜瓜

    張穎 劉義玲 湯雨凡 許傳強

    摘 要:通過分析外源施用植物激素NAA(萘乙酸)條件下甜瓜嫁接愈合3個關(guān)鍵時期(隔離層形成期、愈傷組織形成期、維管束橋形成期)保護性酶活性及相關(guān)基因表達的變化,探析外源施用NAA對甜瓜愈合過程中生理及其基因表達特性的影響。以蘸取清水的嫁接苗為對照,外源施用40 mg·L-1 NAA的嫁接苗為處理,薄皮甜瓜‘銀泉一號為接穗,白籽南瓜‘圣砧一號為砧木,采用頂端貼接法嫁接。利用石蠟切片篩選嫁接愈合關(guān)鍵時期,測定嫁接愈合過程中4種關(guān)鍵代謝酶(SOD、POD、PPO和PAL)活性,并利用實時熒光定量(qRT-PCR)測定其相關(guān)基因表達量。通過石蠟切片觀察發(fā)現(xiàn),外源NAA處理后,愈傷組織形成期和維管束橋形成期較對照提前1 d。SOD、POD酶活性呈先升高后降低的趨勢,在愈傷組織形成期達到最高值,且酶活性顯著高于對照,PAL酶活性在愈合過程中均高于對照,且在維管束橋形成時期達到最高值。PPO酶活性在隔離層形成期顯著高于對照,隨后其活性略低于對照,但差異不顯著。除CmPOD外,外源NAA處理能夠顯著提高CmFe-SOD、CmCu-Zn-SOD、CmMn-SOD、CmPPO相對表達量,且其變化趨勢與酶活性基本一致。綜合分析表明,外源施用NAA后,縮短了甜瓜嫁接苗的愈合期,并且能夠誘導(dǎo)影響嫁接愈合的關(guān)鍵酶基因表達,提高其相關(guān)酶活性,進而促進甜瓜嫁接苗的愈合進程。

    關(guān)鍵字:甜瓜;嫁接愈合;NAA;保護性酶;基因表達

    Effects of exogenous NAA on the protective enzymes activities and related genes expression at the key stages of melon graft healing

    ZHANG Ying1,LIU Yiling1,TANG Yufan2,XU Chuanqiang1

    (1. Key Laboratory of Protected Horticulture(Shenyang Agricultural University),Ministry of Education / National & Local Joint Engineering Research Center of Northern Horticultural Facilities Design & Application Technology (Liaoning) / College of Horticulture, Shenyang Agricultural University, Shenyang 110866, Liaoning, China:2. College of Horticulture,Jilin Agricultural University,Changchun 130118, Jilin, China)

    Abstract: The protective enzyme activities and related gene expression were analyzed to investigate the effects of exogenous NAA (naphthalene acetic acid) application on the physiological and related genes expression characteristics at three key stages of melon graft healing process (isolated layer formation, callus formation, vascular bundle formation). In this experiment, the grafted seedlings that graft union dipped 40 mg×L-1 NAA were used as the treatment, and those dipped water were used as the control. We used the oriental melon ‘Yinquan No. 1 as the scion, and the white-seed pumpkin 'Shengzhen No.1' as the rootstock. Splice approach grafting was used as the grafting method. The paraffin sections screened out the key stages of graft healing process. The activities of four key metabolic enzymes (SOD, POD, PPO and PAL) during graft healing were determined, and the expression of related genes was determined by real-time quantitative quantification (qRT-PCR). It was observed by paraffin sections that the formation of the callus and vascular bundle were 1 day earlier than the control by exogenous NAA treatment. The activities of SOD and POD increased first and then decreased, reached the highest value at the stage of callus formation, and the enzyme activities were significantly higher than that of control. The activities of PAL were higher than that of control and reached the highest value at the formation of vascular bundle. The activities of PPO were significantly higher than that of control at the formation of the isolated layer and indistinctively lower than the control with the grafting seedlings growth. Exogenous NAA treatment significantly increased the relative expression of CmFe-SOD, CmCu-Zn-SOD, CmMn-SOD and CmPPO except CmPOD , and the trend of changes is basically consistent with the enzyme activities changes. The comprehensive analysis showed that the exogenous NAA application shortened the time of grafted healing, induced the expression of key enzyme genes that involved in graft union and increased the related enzyme activities, which promoted the graft healing process of grafting melon seedlings.

    Key words: Melon; Graft healing; Naphthalene acetic acid; Protective enzyme; Gene expression

    甜瓜(Cucumis melo L.)屬于葫蘆科(Cucurbitaceae)甜瓜屬(Cucumis)一年生蔓性草本植物,在世界園藝生產(chǎn)中一直占有重要地位,具有很高的經(jīng)濟價值[1]。但在甜瓜生產(chǎn)中出現(xiàn)的土傳病害和連作障礙嚴重等問題已成為制約甜瓜產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展的主要原因。由于輪作困難、藥劑防效不理想且易污染環(huán)境、抗病育種周期長等方法的局限,甜瓜嫁接技術(shù)已成為生產(chǎn)中防治土傳病害和連作障礙的有效方法之一。此外,嫁接可通過切斷和重連來自不同植物物種或品種的維管束來應(yīng)對非生物和生物脅迫的抗性,提高植株抗逆性和抗病性,改變植株的發(fā)育進程等,從而使其增產(chǎn)、提高果實品質(zhì)或改變植株大小[2-4]。

    嫁接愈合是植物的器官、組織或細胞相互影響、相互作用結(jié)合成一個有機整體的過程。盡管嫁接愈合過程所分的階段及所需時間因不同品種、年齡、嫁接方法及嫁接時間等的不同而有差異,但砧穗間所發(fā)生的愈合過程卻基本相同。大致分為3個過程:接穗和砧木間的組織黏連及隔離層的形成;愈傷組織的形成;接穗和砧木間維管束橋的重連[5]。在植物嫁接愈合過程中,愈傷組織的分化產(chǎn)生及其延伸速度是決定形成愈傷組織時間長短的一個關(guān)鍵因素,而植物生長調(diào)節(jié)劑在嫁接愈合過程中起著非常重要的調(diào)節(jié)作用。在生產(chǎn)實踐中,人們常用生長調(diào)節(jié)劑來處理植物的接穗或砧木,發(fā)現(xiàn)它們有促進愈合、提高成活率的作用[6]。萘乙酸(α-Naphthalene acetic acid,NAA)是一種生長素類的植物生長調(diào)節(jié)劑,其通過使細胞壁松弛、促進RNA和蛋白質(zhì)等物質(zhì)合成從而促進細胞生長。外源施加濃度較高(≥10-7 mol·L-1)的NAA,對根部生長有抑制作用,而對不親和的嫁接體來說,其影響更大,但適宜的NAA濃度能有效促進嫁接成活。趙宇瑛等[7]對黃瓜子葉進行組織培養(yǎng)研究表明,極低濃度的NAA即能誘導(dǎo)大量愈傷組織,在0.05~0.10 mg·L-1濃度范圍內(nèi),隨NAA濃度的提高,出愈率提高,愈傷組織增殖加快。馬慶等[8]在黃瓜嫁接研究中發(fā)現(xiàn),外源施用40 mg·L-1的NAA處理后嫁接苗成活率最高,并能提高幼苗品質(zhì)。但NAA的應(yīng)用對嫁接苗內(nèi)部生理的響應(yīng)機制以及調(diào)控作用仍不明確。因此,筆者以薄皮甜瓜‘銀泉一號為試材,以外源施用40 mg×L-1 NAA為處理,蘸取清水為對照,用石蠟切片技術(shù),分析外源施用NAA對薄皮甜瓜嫁接苗愈合過程中組織變化的影響,確定薄皮甜瓜嫁接苗愈合的關(guān)鍵時期。其次,利用生理生化指標和qRT-PCR技術(shù),明確外源施用NAA對薄皮甜瓜嫁接苗愈合關(guān)鍵時期主要相關(guān)酶活性及相關(guān)基因表達的影響,以期能夠進一步解析外源NAA調(diào)控甜瓜嫁接愈合的生理及分子機制,為提高甜瓜嫁接效率提供理論和實踐基礎(chǔ)。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    以薄皮甜瓜品種‘銀泉一號為接穗(遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院提供),白籽南瓜品種‘圣砧一號為砧木(沈陽圣地亞農(nóng)業(yè)科技有限公司提供)。待接穗1葉1心,砧木子葉展開時,采用頂端貼接法進行嫁接。

    1.2 試驗設(shè)計

    試驗于2018年4月在沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)北山科研基地18號日光溫室嫁接間進行。在嫁接過程中以接穗蘸取清水為對照(CK),蘸取40 mg×L-1的NAA溶液為處理(NAA),對照和外源NAA處理的嫁接苗管理方式一致。于嫁接后第1天開始取樣,取嫁接接口處0.5~1.0 cm處放于配好的FAA固定液(含70%無水乙醇、福爾馬林和冰乙酸)中,取至嫁接后第10天,將樣品進行橫切進行石蠟切片觀察。取長勢健壯的嫁接苗嫁接口處約0.2 g莖段,去離子水沖洗,吸水紙擦干,迅速放入液氮冷凍,保存于-80 ℃超低溫冰箱中備用,3次重復(fù)。

    1.3 方法

    1.3.1 石蠟切片的制作 參照葉寶興等[9]的方法處理樣品,使用Lecia RM 2245輪轉(zhuǎn)式切片機制作石蠟切片,厚度10 ?m,甲苯胺藍染色。在光學(xué)顯微鏡下觀察組織細胞結(jié)構(gòu)變化并照相。

    1.3.2 SOD、POD、PAL、PPO酶活性測定 通過石蠟切片觀察后,篩選出關(guān)鍵時期,取出相對應(yīng)的樣品,進行相關(guān)酶活性的測定(以FW計)。超氧化物歧化酶(SOD)活性采用氮藍四唑法測定[10],苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性采用紫外分光光度法測定[11];過氧化物酶(POD)活性采用愈創(chuàng)木酚法測定[12];多酚氧化酶(PPO)活性采用鄰苯二酚氧化法測定[13]。

    1.3.3 實時熒光定量PCR分析 RNA提取試劑盒由康為世紀提供的超純RNA提取試劑盒(Ultrapure RNA Kit),其詳盡操作步驟參考說明書。并根據(jù)反轉(zhuǎn)錄試劑盒(PrimeScriptTM RT reagent Kit with gDNA Eraser,TaKaRa)提供的方法進行cDNA合成。熒光定量反應(yīng)在定量PCR儀Jena上進行。利用熒光定量試劑盒(DRR041A,TANGEN)檢測各個基因的表達量,步驟參照試劑盒說明。

    PCR反應(yīng)程序為:95 ℃ 10 min;95 ℃ 30 s, 60 ℃ 30 s,72 ℃ 30 s,40個循環(huán),收集熒光信號;50~60 ℃ 6 s,生成溶解曲線。各引物序列見表1。每個樣品做3次重復(fù),計算各個基因的相對表達量。

    采用Microsoft Excel 2007處理原始數(shù)據(jù)及繪圖,采用SPSS 17.0軟件進行差異顯著性分析。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 甜瓜愈合處石蠟切片觀察

    嫁接后第2天,在砧木和接穗相連接的區(qū)域可觀察到1個染色較深的薄層。由圖2-A、圖2-F可知,對照和外源NAA處理均產(chǎn)生隔離層,隔離層的產(chǎn)生起到一種保護作用,防止接口處水分和營養(yǎng)物質(zhì)的過量散失??梢?,外源施用NAA并沒有促進隔離層的形成。隨著嫁接苗管理天數(shù)的增加,隔離層漸漸消失,接口處顏色變淺,形成愈傷組織。外源NAA處理的嫁接苗在第5天形成愈傷組織(圖2-G),而對照植株愈傷組織形成則發(fā)生在第6天(圖2-C)。在第8天時,外源NAA處理的嫁接苗形成維管束(圖2-I),而對照植株新的維管束形成發(fā)生在第9天(圖2-E)。維管束的重新連接預(yù)示著嫁接愈合過程的完成??梢?,外源施用NAA能夠促進愈傷組織的形成,從而使愈合進程提前。

    2.2 嫁接甜瓜愈合過程關(guān)鍵時期相關(guān)酶的活性變化

    由圖3-A分析得知,隨著嫁接管理時間的延長,外源NAA處理和對照嫁接苗接口處的SOD酶活性均表現(xiàn)為先升高后降低的趨勢,且在愈傷組織形成期達到最高值。外源NAA處理后,SOD活性在3個關(guān)鍵時期均比對照高,且在隔離層和愈傷組織形成期均顯著高于對照??梢?,外源NAA處理后,SOD酶活性增高,有效抑制了活性氧給植物體造成的傷害,從而促進薄皮甜瓜嫁接苗的愈合。

    由圖3-B可知,外源NAA處理后,POD酶活性在愈傷組織和維管束形成期高于對照。且在愈傷組織形成期,POD活性顯著高于對照,活性達最高值(3 718 U·g-1·h-1)。而對照在維管束形成時期POD活性最高(3 183 U·g-1·h-1)。外源NAA處理后,POD活性較對照提前一個時期達到最高值,此時木質(zhì)化程度最大??梢姡庠碞AA處理能夠加快薄皮甜瓜嫁接苗的愈合速度。

    由圖3-C分析得知,外源NAA處理后,PAL酶活性在愈合過程3個關(guān)鍵時期均高于對照。除愈傷組織形成期外,PAL酶活性均顯著高于對照,并在維管束形成時期達到最高值(306.67 U·g-1·h-1)。PAL酶活性升高可促進木質(zhì)素合成和維管束的形成??梢?,外源NAA處理后有利于維管束的形成,進而促進薄皮甜瓜嫁接苗的愈合過程。

    由圖3-D可知,外源NAA處理和對照嫁接苗的PPO酶活性均呈現(xiàn)上升的趨勢。在隔離層時期,外源NAA處理的嫁接苗PPO酶活性顯著高于對照。分析原因可能是外源NAA處理更利于砧木與接穗接口處酚類物質(zhì)氧化成活性醌,從而保護嫁接口免受傷害。而在愈傷組織和維管束形成期,外源NAA處理的嫁接苗PPO酶活性低于對照,但差異不顯著。可見,外源NAA處理使隔離層存在的時間短于對照,更有利于嫁接苗愈合。

    2.3 甜瓜嫁接愈合過程關(guān)鍵時期關(guān)鍵酶相關(guān)基因的表達量變化

    生理數(shù)據(jù)檢測結(jié)果顯示,外源NAA處理與對照嫁接苗的酶活性存在一定的差異,為了初步解析導(dǎo)致這種差異的原因,分析了愈合過程中關(guān)鍵酶相關(guān)基因的表達特性。從NCBI數(shù)據(jù)庫(https://www.ncbi.nlm.nih.gov/)以及甜瓜基因組數(shù)據(jù)庫(https://www.cucurbitgenomics.org/feature)中得到3個超氧化物歧化酶基因(CmFe-SOD、CmMn-SOD、CmCu-Zn-SOD)、1個過氧化物酶基因(CmPOD)和1個苯丙氨酸解氨酶基因(CmPAL),1個多酚氧化酶基因(CmPPO),并設(shè)計其特異引物(表1),分析了以上基因在甜瓜嫁接愈合過程關(guān)鍵時期的表達特性。

    由圖4-A~C可知,外源NAA處理后,3個SOD酶基因(CmFe-SOD、CmMn-SOD和CmCu-Zn-SOD)在各個時期的表達量均高于對照,且外源NAA處理使CmFe-SOD和Cm-Cu-Zn-SOD表達量在愈傷組織形成時期顯著高于對照,分別為對照的3.03和3.57倍,但對CmMn-SOD表達量影響不顯著。

    由圖4-D可知,對照嫁接苗CmPOD表達量在3個關(guān)鍵時期均高于外源NAA處理,并且在愈傷組織形成期表達量顯著高于NAA處理。對照嫁接苗CmPOD表達量趨勢呈先升高后降低的趨勢,在第2個時期達到最高值為0.67。而外源NAA處理后其表達量變化呈下降趨勢,并在隔離層和愈傷組織形成期顯著低于對照??梢?,外源NAA處理后,沒有顯著誘導(dǎo)CmPOD基因的表達。

    由圖4-E分析得知,在嫁接愈合過程中,CmPAL表達量變化呈先下降后上升的趨勢。但是,外源NAA處理的嫁接苗CmPAL表達量在愈傷組織形成期和維管形成期均顯著高于對照,分別為對照的3.02和4.02倍??梢?,外源NAA處理顯著誘導(dǎo)了CmPAL在愈傷組織形成期和維管束形成期表達。

    由圖4-F分析可知,在嫁接苗愈合過程中,CmPPO表達量變化呈現(xiàn)下降的趨勢。在隔離層形成期,外源NAA處理的嫁接苗CmPPO表達量顯著高于對照,為對照的2.69倍。而在愈傷組織形成期和維管束形成期,外源NAA處理的嫁接苗CmPPO表達量低于對照,但其差異不顯著??梢姡庠碞AA處理可顯著誘導(dǎo)CmPPO在隔離層形成期表達。

    3 討論與結(jié)論

    3.1 外源施用NAA對甜瓜嫁接愈合過程中組織學(xué)的影響

    已有研究表明,外源施用生長素可促進中柱鞘細胞形成愈傷組織,引起側(cè)根的形成[14-15]。而NAA是一種合成的生長素類似物,有促進細胞的生長和促進植物體愈合的作用,并且適宜的NAA濃度能有效的促進嫁接成活率[16-17]。筆者研究發(fā)現(xiàn),外源施用40 mg×L-1 NAA后,使愈傷組織形成時期較對照提前1 d,從而促進了維管束的連接,有效的促進了愈合過程。這與Lu和Song[18]的試驗結(jié)果一致,外源施加植物激素可加快植物的愈合速率。

    3.2 外源施用NAA對甜瓜嫁接愈合過程中關(guān)鍵酶及相關(guān)基因表達的影響

    在嫁接愈合進程中,兩種植物組織結(jié)合在一起,在愈合部位發(fā)生許多生理生化和結(jié)構(gòu)過程變化[19-21]。超氧化物歧化酶(SOD)是植物體內(nèi)清除自由基的最關(guān)鍵的酶類之一。本試驗結(jié)果表明,嫁接初期,由于傷口的存在破壞了膜結(jié)構(gòu),活性氧增加,為了清除自由基對膜的破壞,抑制膜脂過氧化,維護膜的結(jié)構(gòu)和功能,在嫁接初期,SOD酶活性呈上升趨勢,在愈傷組織形成期活性最高,隨著嫁接接口的愈合,其活性逐漸下降,這與陳紅等[22]和馮金玲等[23]研究結(jié)果一致。并發(fā)現(xiàn),外源施用NAA后SOD酶活性在愈合過程3個關(guān)鍵時期均高于對照,表明NAA的施用有效地清除了活性氧給嫁接口造成的傷害,促進甜瓜的愈合進程。POD在砧穗交流中是必需的,其活性變化趨勢與SOD酶活性變化趨勢相似,均呈先上升后下降的趨勢[24]。本試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn),外源施用NAA后,POD活性在愈傷組織形成期達到最高值,且顯著高于對照。這與蘇媛等[25]對黃瓜嫁接愈合的研究結(jié)果一致,即POD活性變化與嫁接愈合過程中愈傷組織的形成有關(guān)。楊冬冬等[26]對西瓜嫁接愈合的研究結(jié)果顯示,POD活性的增加與木質(zhì)素的合成密切相關(guān)。本試驗中外源NAA處理使POD活性顯著增加可能是其促進嫁接接合部愈合的重要原因之一。PAL酶是苯丙類代謝的限速酶和關(guān)鍵酶,參與愈傷組織細胞和管狀分子的分化以及木質(zhì)素的合成,主要分布在近表皮的細胞和維管組織中[27-28]。PAL酶是嫁接體組織發(fā)育和功能重建的重要指標。另外,細胞供能的情況也可根據(jù)PAL的活性高低來反映,隨著植物嫁接愈合過程的發(fā)展,植物會供給大量的能量,而PAL酶活性的增高也為此提供了證據(jù)[29]。本試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn),外源NAA處理和對照在維管束形成時期的PAL酶活性均上升達到最高值。并且,外源NAA處理使PAL酶活性顯著高于對照??梢?,外源施用NAA處理能夠使嫁接口的木質(zhì)化程度升高,更有利于甜瓜嫁接苗愈合。PPO酶主要參與植物細胞壁木質(zhì)素的合成,并且能夠氧化體內(nèi)酚類物質(zhì)[30]。張紅梅等[31]發(fā)現(xiàn)木質(zhì)化程度越高,PPO活性越高,砧木和接穗間嫁接口隔離層存在時間就越長,從而影響嫁接愈合的成活。通過本試驗結(jié)果可以看出,外源NAA處理后,在隔離層形成時期,PPO活性顯著高于對照,表明其更有利于形成隔離層,保護受傷的嫁接口。而在之后的兩個時期低于對照,是因為隔離層消失,更好的形成愈傷組織和維管束,有利于提高愈合速度及成活率。

    為了進一步解析甜瓜嫁接愈合過程中關(guān)鍵酶活性的變化原因,我們從轉(zhuǎn)錄水平上分析了愈合關(guān)鍵時期關(guān)鍵酶相關(guān)基因的表達。從NCBI數(shù)據(jù)庫網(wǎng)站中,我們找到了6個關(guān)鍵酶相關(guān)的基因,分別是CmFe-SOD、Cm-Cu-Zn-SOD、CmMn-SOD、CmPAL、CmPOD、CmPPO。外源NAA處理后,CmFe-SOD、Cm-Cu-Zn-SOD、CmMn-SOD、CmPAL表達量均高于對照,其變化趨勢與酶活性變化趨勢基本一致,并且CmFe-SOD、Cm-Cu-Zn-SOD和CmPAL在愈傷組織形成期均顯著高于對照,CmPPO在隔離層形成時期顯著高于對照,且變化趨勢也與酶活性變化趨勢一致??梢?,外源NAA處理是通過誘導(dǎo)甜瓜嫁接愈合過程中關(guān)鍵酶相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄表達進而影響其相關(guān)酶活性變化。而CmPOD表達量的變化趨勢與酶活性相反,其原因可能是POD酶的活性并不受CmPPO轉(zhuǎn)錄表達調(diào)控,但有待于進一步研究。

    目前,已有研究報道,外源施用植物激素可促進植物的愈合過程。本試驗結(jié)果表明,外源施用NAA通過誘導(dǎo)愈傷組織形成期的關(guān)鍵酶基因(CmFe-SOD、CmCu-Zn-SOD、CmPAL)轉(zhuǎn)錄水平的上調(diào)表達,提高其酶活性,進而促進了甜瓜嫁接苗的愈合進程。但是,有關(guān)外源NAA誘導(dǎo)愈合過程中關(guān)鍵酶基因表達的具體分子機制尚不明確。甜瓜嫁接體愈合的過程十分復(fù)雜,涉及很多生理生化代謝過程,用傳統(tǒng)方法分析代謝物間的相互作用較困難。因此,在未來的研究中,可進一步應(yīng)用轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)及轉(zhuǎn)基因或基因編輯技術(shù)(CRISPR/Cas9)等手段來揭示調(diào)控甜瓜嫁接愈合的關(guān)鍵因子,為能夠系統(tǒng)闡明嫁接愈合的生理及分子化機制提供理論基礎(chǔ)。

    參考文獻

    [1] 李瑤.嫁接提高甜瓜耐低溫生理機制的研究[D].長春:吉林大學(xué),2014.

    [2] VITALE A,ROCCO M,ARENA S,et al.Tomato susceptibility to Fusarium crown and root:effect of grafting combination and proteomic analysis of tolerance expression in the rootstock[J].Plant Physiology and Biochemistry,2014,83:207-216.

    [3] FOSTER T M,WATSON A E,VAN HOOIJDONK B M,et al.Key flowering genes including FT-like genes are upregulated in the vasculature of apple dwarfing rootstocks[J].Tree Genetics & Genomes,2014,10(1):189-202.

    [4] MELNYK C,SCHUSTER C,LEYSER O,et al.A developmental framework for graft formation and vascular reconnection in Arabidopsis thaliana[J].Current Biology,2015,25(10):1306-1318.

    [5] MOORE R.Graft formation in Kalanchoe blossfeldiana[J].Journal of Experimental Botany,1982,33(3):533-540.

    [6] 楊曉盆,王躍進.吲哚丁酸對高接酥梨成活率及新梢生長的影響[J].山西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,1996,16(4):408-410.

    [7] 趙宇瑛,李永輝,李叢玉,等.6-BA、NAA和IAA對黃瓜子葉離體培養(yǎng)分化的影響[J].長江大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)農(nóng)學(xué)卷,2007(3):26-28.

    [8] 馬慶,趙瑞,陳俊琴,等.不同濃度NAA溶液對嫁接黃瓜苗期形態(tài)及生理指標的影響[J].中國蔬菜,2013(6):50-53.

    [9] 葉寶興,畢建杰,孫印石.植物細胞與組織研究方法[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2011.

    [10] 湯章城.現(xiàn)代植物生理學(xué)實驗指導(dǎo)[M].北京:科技出版社,1999,314-315.

    [11] 張志安,陳展宇.植物生理學(xué)實驗技術(shù)[M].長春:吉林大學(xué)出版社,2008.

    [12] 王學(xué)奎.植物生理生化實驗原理和技術(shù)[M].2 版.高等教育出版社,2006.

    [13] 劉萍,李明軍.植物生理學(xué)實驗技術(shù)[M].1 版,北京:科學(xué)出版社,2007.

    [14] SACHA T.The control of the patterned differentiation of vascular tissues[J].Advances in botanical research.Academic Press,1981,9:151-262.

    [15] SCARPELLA E,MARCOS D,F(xiàn)RIML J,et al.Control of leaf vascular patterning by polar auxin transport[J].Genes and Development,2006,20(8):1015-1027.

    [16] 黃堅欽,方偉,丁雨龍,等.植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)對山核桃嫁接的效用[J].南京林業(yè)大學(xué)學(xué)報,2002,26(4):78-80.

    [17] 唐輝,韋霄,梁惠凌,等.外源激素對銀杏高位嫁接及其枝梢生長的影響[J].中南林業(yè)科技大學(xué)學(xué)報,2007,27(1):85-87.

    [18] LU S,SONG Y.Relation between phytohormone level and vascular bridge differentiation in graft union of explanted internode autografting[J].Chinese Science Bulletin,1999,44(20):1874-1878.

    [19] ERREA P,F(xiàn)ELIPE A J,HERRERO M.Graft establishment between compatible and incompatible Prunnus spp.[J].Journal of Experimental Botany,1994,45(3):393-401.

    [20] PINA A,ERREA P.A review of new advances in mechanism of graft compatibility–incompatibility[J].Scientia Horticulturae,2005,106(1):1-11.

    [21] TRINCHERA A,PANDOZY G,RINALDI S,et al.Graft union formation in artichoke grafting onto wild and cultivated cardoon:An anatomical study[J].Journal of Plant Physiology,2013,170(18):1569-1578.

    [22] 陳紅,王永清,袁媛,等.茄子/番茄嫁接體發(fā)育過程中的蛋白質(zhì)含量、POD、CAT和SOD活性及其同工酶研究[J].四川農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2006,24(2):144-147.

    [23] 馮金玲,楊志堅,陳輝,等.油茶芽苗砧嫁接體的親和性生理[J].福建農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版),2011,40(1):24-30.

    [24] 胡艷青,蘇媛,韓風(fēng)葉,等.嫁接黃瓜在愈合過程中的解剖觀察和抗氧化酶活性的變化研究[J].內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)(自然科學(xué)版),2007,28(3):224-230.

    [25] 蘇媛,郭金妹,胡彥青,等.黃瓜嫁接苗愈合過程的解剖觀察及過氧化物同工酶分析[J].沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2006,37(3):343-347.

    [26] 楊冬冬,黃丹楓.西瓜嫁接體發(fā)育中木質(zhì)素合成及代謝相關(guān)酶活性的變化[J].西北植物學(xué)報,2006,26(2):290-294.

    [27] 勒棟梁,董鳳祥,李寶.雜交榛不同枝段綠枝扦插生根特性及相關(guān)氧化酶活性變化[J].林業(yè)科學(xué)研究,2009,22(4):526-532.

    [28] NAKASHIMA J,AWANO T,TAKABE K,et al.Immunocytochemical localization of phenylalanine ammonia-lyase and cinnamyl alcohol dehydrogenase in differentiating tracheary elements derived from Zinnia mesophyll cells[J].Plant Cell Physiology,1997,38(2):113-123.

    [29] VENEMA J H,DIJK B E,BAX J M,et al.Grafting tomato(Solanum lycopersicum)onto the rootstock of a high-altitude accession of Solanum habrochaites improves suboptimal-temperature tolerance[J].Environmental and Experimental Botany,2008,63(1/3):359-367.

    [30] 代麗,宮長榮,史霖,等.植物多酚氧化酶研究綜述[J].中國農(nóng)學(xué)通報,2007,23(6):312-316.

    [31] 張紅梅,丁明,姜武,等.不同苗齡接穗西瓜嫁接體愈合的組織細胞學(xué)研究[J].園藝學(xué)報,2012,39(3):493-500.

    猜你喜歡
    外源嫁接苗甜瓜
    外源NO緩解黃瓜幼苗低溫傷害的效果
    如何快速營造紅松種子
    紅松嫁接苗的后續(xù)管理
    多效唑提高西瓜砧木和嫁接苗質(zhì)量
    外源現(xiàn)代中的公正問題
    我喜歡吃甜瓜
    轉(zhuǎn)基因作物的生物安全控制
    甜瓜有多重
    細菌獲得外源DNA的方式
    婷婷精品国产亚洲av| 婷婷精品国产亚洲av在线| 亚洲精品国产一区二区精华液| 舔av片在线| 男人舔奶头视频| 国产探花在线观看一区二区| 在线观看日韩欧美| 九色成人免费人妻av| 999精品在线视频| 中文在线观看免费www的网站 | 精品欧美一区二区三区在线| 免费搜索国产男女视频| 亚洲国产看品久久| 曰老女人黄片| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 午夜免费激情av| 18禁国产床啪视频网站| 精品一区二区三区视频在线观看免费| 精品一区二区三区av网在线观看| 老司机午夜十八禁免费视频| av在线天堂中文字幕| 精华霜和精华液先用哪个| 我的老师免费观看完整版| 国内精品一区二区在线观看| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 在线观看免费午夜福利视频| 极品教师在线免费播放| 12—13女人毛片做爰片一| 日本熟妇午夜| 高清在线国产一区| 精品免费久久久久久久清纯| 午夜a级毛片| 动漫黄色视频在线观看| 一本综合久久免费| 国产v大片淫在线免费观看| 国产精品久久久久久人妻精品电影| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 夜夜夜夜夜久久久久| 欧美日韩乱码在线| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 欧美中文日本在线观看视频| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 无遮挡黄片免费观看| 国产探花在线观看一区二区| 两性夫妻黄色片| videosex国产| 久久久国产欧美日韩av| 亚洲一区二区三区不卡视频| 一进一出抽搐gif免费好疼| 欧美色视频一区免费| 国产精品一区二区三区四区久久| 欧美午夜高清在线| 欧美午夜高清在线| or卡值多少钱| www.www免费av| xxxwww97欧美| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 国产成人精品久久二区二区免费| 一边摸一边做爽爽视频免费| 人人妻人人澡欧美一区二区| 亚洲国产看品久久| 国产精品一区二区三区四区久久| 色噜噜av男人的天堂激情| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 黄色女人牲交| 国产欧美日韩一区二区三| 床上黄色一级片| 黄色视频,在线免费观看| 草草在线视频免费看| 久久久久久九九精品二区国产 | 午夜福利高清视频| 国产精品一区二区精品视频观看| 一级毛片高清免费大全| 欧美中文日本在线观看视频| av福利片在线| 久久精品91无色码中文字幕| 久久久精品欧美日韩精品| 国产精品,欧美在线| 在线视频色国产色| 999久久久精品免费观看国产| 国产免费男女视频| 国产精品电影一区二区三区| 九色国产91popny在线| 亚洲欧美日韩高清在线视频| 中文在线观看免费www的网站 | 日韩精品青青久久久久久| 日本黄色视频三级网站网址| 午夜激情av网站| 国产精品亚洲美女久久久| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 精品国产乱子伦一区二区三区| 国产激情久久老熟女| 国产97色在线日韩免费| 无人区码免费观看不卡| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 国产熟女午夜一区二区三区| 国产精华一区二区三区| 日韩大码丰满熟妇| 国产成人影院久久av| 日韩大码丰满熟妇| 国产欧美日韩一区二区精品| 后天国语完整版免费观看| 久久精品成人免费网站| a在线观看视频网站| 又大又爽又粗| 99国产精品一区二区蜜桃av| 性色av乱码一区二区三区2| 久久中文字幕一级| 国产精品爽爽va在线观看网站| 国产三级黄色录像| 舔av片在线| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 精品久久久久久久毛片微露脸| 床上黄色一级片| 九九热线精品视视频播放| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 久久久水蜜桃国产精品网| 深夜精品福利| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 88av欧美| 88av欧美| 欧美性猛交黑人性爽| 嫩草影院精品99| 精品久久久久久久毛片微露脸| 午夜亚洲福利在线播放| 久久久久久久精品吃奶| 中亚洲国语对白在线视频| 日韩高清综合在线| tocl精华| 久久午夜亚洲精品久久| 欧美乱妇无乱码| 真人一进一出gif抽搐免费| 国产单亲对白刺激| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 精品无人区乱码1区二区| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 国内精品久久久久久久电影| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 精品国内亚洲2022精品成人| 亚洲国产中文字幕在线视频| 精品久久久久久成人av| 精品国产乱子伦一区二区三区| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 99精品久久久久人妻精品| 国产成人av教育| 成人国语在线视频| 成年女人毛片免费观看观看9| 国产精品永久免费网站| 免费在线观看日本一区| 人人妻人人看人人澡| 国产精品亚洲美女久久久| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 手机成人av网站| 精品福利观看| 免费无遮挡裸体视频| 女同久久另类99精品国产91| 又紧又爽又黄一区二区| av福利片在线观看| 国产精品1区2区在线观看.| 亚洲中文字幕日韩| 午夜激情av网站| 女同久久另类99精品国产91| 国产精品久久久久久久电影 | 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 亚洲免费av在线视频| 国产v大片淫在线免费观看| 婷婷丁香在线五月| 桃色一区二区三区在线观看| 国产亚洲欧美98| 老司机午夜福利在线观看视频| 国产精品久久电影中文字幕| 制服人妻中文乱码| 亚洲av成人精品一区久久| 人妻丰满熟妇av一区二区三区| 丁香六月欧美| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 女同久久另类99精品国产91| 国产高清视频在线播放一区| 午夜免费成人在线视频| 男人舔奶头视频| 激情在线观看视频在线高清| 在线国产一区二区在线| 观看免费一级毛片| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 韩国av一区二区三区四区| 欧美日韩国产亚洲二区| 欧美日韩瑟瑟在线播放| 不卡av一区二区三区| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 一级黄色大片毛片| 两个人的视频大全免费| ponron亚洲| 悠悠久久av| 神马国产精品三级电影在线观看 | 好男人在线观看高清免费视频| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 国产亚洲欧美98| 午夜久久久久精精品| 国产探花在线观看一区二区| 久久久久免费精品人妻一区二区| 国产乱人伦免费视频| 国产亚洲av高清不卡| 在线观看www视频免费| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 亚洲真实伦在线观看| 精华霜和精华液先用哪个| 精品国产美女av久久久久小说| 国产91精品成人一区二区三区| www.999成人在线观看| 久久久久久国产a免费观看| 中文字幕熟女人妻在线| 国产高清有码在线观看视频 | 精品午夜福利视频在线观看一区| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 日韩欧美在线乱码| 午夜激情av网站| 日本黄大片高清| 亚洲国产精品sss在线观看| 在线永久观看黄色视频| 日韩三级视频一区二区三区| 九九热线精品视视频播放| 狠狠狠狠99中文字幕| 久久久久九九精品影院| 免费在线观看亚洲国产| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 怎么达到女性高潮| 看片在线看免费视频| 亚洲av五月六月丁香网| 一区二区三区高清视频在线| 亚洲美女黄片视频| 88av欧美| 欧美成人性av电影在线观看| a级毛片在线看网站| 久99久视频精品免费| 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 亚洲av成人精品一区久久| 国产精品98久久久久久宅男小说| av免费在线观看网站| 婷婷精品国产亚洲av| 999精品在线视频| 宅男免费午夜| 亚洲国产精品成人综合色| 又爽又黄无遮挡网站| 亚洲第一电影网av| 国产99久久九九免费精品| 男男h啪啪无遮挡| 欧美日韩精品网址| 国产三级中文精品| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 国产一区二区在线av高清观看| 精品免费久久久久久久清纯| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 高清在线国产一区| 国产伦在线观看视频一区| 妹子高潮喷水视频| 精品久久久久久,| 日韩欧美三级三区| 欧美zozozo另类| 国产麻豆成人av免费视频| 精品第一国产精品| 一本综合久久免费| 波多野结衣高清无吗| 免费电影在线观看免费观看| 久久久国产精品麻豆| 欧美成人一区二区免费高清观看 | 老鸭窝网址在线观看| 日韩有码中文字幕| 色尼玛亚洲综合影院| 欧美日本视频| 黄色成人免费大全| 男女午夜视频在线观看| 久久久久久久久久黄片| 俄罗斯特黄特色一大片| 一级作爱视频免费观看| 精品一区二区三区av网在线观看| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 久久精品人妻少妇| 国产蜜桃级精品一区二区三区| 久久久久久大精品| 午夜福利视频1000在线观看| 人妻久久中文字幕网| 欧美最黄视频在线播放免费| 在线观看66精品国产| 少妇粗大呻吟视频| 亚洲国产精品999在线| 亚洲精品色激情综合| 99国产精品一区二区蜜桃av| 日韩有码中文字幕| 亚洲avbb在线观看| 可以在线观看毛片的网站| 国产黄片美女视频| 日韩欧美三级三区| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 成年人黄色毛片网站| 伦理电影免费视频| 特级一级黄色大片| 日韩免费av在线播放| 午夜免费观看网址| 一个人免费在线观看电影 | 国产精品久久视频播放| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看| 欧美乱码精品一区二区三区| 老汉色∧v一级毛片| 国产高清激情床上av| 舔av片在线| 亚洲人成电影免费在线| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 看片在线看免费视频| 国产精品久久久久久久电影 | 在线看三级毛片| 中文字幕av在线有码专区| 一边摸一边做爽爽视频免费| 五月伊人婷婷丁香| 视频区欧美日本亚洲| 午夜福利在线观看吧| 三级毛片av免费| 国产在线精品亚洲第一网站| 国产精品一区二区精品视频观看| 亚洲美女黄片视频| 90打野战视频偷拍视频| 在线观看日韩欧美| 一本精品99久久精品77| 老司机在亚洲福利影院| 亚洲国产精品999在线| 91成年电影在线观看| 十八禁人妻一区二区| 成人亚洲精品av一区二区| 亚洲av五月六月丁香网| 日本 av在线| 日本a在线网址| 美女 人体艺术 gogo| 国产片内射在线| 天天一区二区日本电影三级| 午夜福利高清视频| 日韩欧美三级三区| 国产成人影院久久av| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 不卡av一区二区三区| 午夜福利高清视频| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 中文字幕人成人乱码亚洲影| 制服丝袜大香蕉在线| 国产精品亚洲av一区麻豆| 无限看片的www在线观看| 神马国产精品三级电影在线观看 | 美女扒开内裤让男人捅视频| 久久久久国产精品人妻aⅴ院| 精华霜和精华液先用哪个| 一个人免费在线观看的高清视频| 午夜精品在线福利| 蜜桃久久精品国产亚洲av| www日本在线高清视频| 欧美一区二区国产精品久久精品 | 色av中文字幕| 精品不卡国产一区二区三区| 久久久久久久久久黄片| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 国产69精品久久久久777片 | 成人精品一区二区免费| 神马国产精品三级电影在线观看 | 一级毛片精品| 好男人电影高清在线观看| 午夜福利免费观看在线| 国产成人欧美在线观看| 国产免费男女视频| 午夜福利18| 变态另类丝袜制服| 国产成人av教育| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 老熟妇仑乱视频hdxx| 国产一区二区激情短视频| 免费在线观看黄色视频的| 久久 成人 亚洲| 国产精品综合久久久久久久免费| 亚洲熟妇熟女久久| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 欧美日本视频| 亚洲成人中文字幕在线播放| 亚洲一码二码三码区别大吗| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 少妇熟女aⅴ在线视频| 日本 av在线| 在线观看免费日韩欧美大片| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 天堂动漫精品| 国产成人aa在线观看| 国产熟女xx| 国产精品av视频在线免费观看| 国产亚洲av嫩草精品影院| 一级毛片女人18水好多| 久久久久亚洲av毛片大全| 国产一区二区三区在线臀色熟女| 国产亚洲欧美98| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 美女高潮喷水抽搐中文字幕| 午夜精品久久久久久毛片777| 午夜精品一区二区三区免费看| 一区二区三区高清视频在线| 日韩三级视频一区二区三区| 热99re8久久精品国产| 搡老熟女国产l中国老女人| 国产真人三级小视频在线观看| 俺也久久电影网| 日日爽夜夜爽网站| 亚洲乱码一区二区免费版| av视频在线观看入口| 久久久久精品国产欧美久久久| 国产精品久久久久久久电影 | 夜夜躁狠狠躁天天躁| 免费看a级黄色片| 亚洲黑人精品在线| 欧美久久黑人一区二区| 午夜福利高清视频| 少妇裸体淫交视频免费看高清 | 欧美精品啪啪一区二区三区| 两个人免费观看高清视频| 桃红色精品国产亚洲av| 国产探花在线观看一区二区| 2021天堂中文幕一二区在线观| 国产精品 国内视频| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 国产av在哪里看| 色精品久久人妻99蜜桃| 久久久精品大字幕| 好男人电影高清在线观看| 搡老妇女老女人老熟妇| 国产人伦9x9x在线观看| 妹子高潮喷水视频| 极品教师在线免费播放| svipshipincom国产片| 午夜福利高清视频| 免费搜索国产男女视频| 啦啦啦韩国在线观看视频| 日韩成人在线观看一区二区三区| 宅男免费午夜| 女警被强在线播放| 99国产精品一区二区三区| 日本精品一区二区三区蜜桃| 少妇的丰满在线观看| 日韩中文字幕欧美一区二区| 欧美性猛交黑人性爽| 在线播放国产精品三级| 国产三级中文精品| 老鸭窝网址在线观看| 国产av麻豆久久久久久久| 一级a爱片免费观看的视频| 一边摸一边抽搐一进一小说| 男男h啪啪无遮挡| 久久亚洲精品不卡| 99久久国产精品久久久| 在线a可以看的网站| 国产精品爽爽va在线观看网站| 精品久久久久久久久久久久久| 97碰自拍视频| 国模一区二区三区四区视频 | 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 婷婷丁香在线五月| 老司机靠b影院| 夜夜爽天天搞| 亚洲av片天天在线观看| 精品国产美女av久久久久小说| 国产成人aa在线观看| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 欧美性猛交黑人性爽| 伦理电影免费视频| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 久久久久国内视频| 韩国av一区二区三区四区| 91麻豆精品激情在线观看国产| 桃色一区二区三区在线观看| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 午夜亚洲福利在线播放| 一级毛片女人18水好多| 日韩 欧美 亚洲 中文字幕| 精品午夜福利视频在线观看一区| 老司机靠b影院| 禁无遮挡网站| 亚洲最大成人中文| av有码第一页| 日韩欧美国产在线观看| 国产真人三级小视频在线观看| 国产麻豆成人av免费视频| 国产不卡一卡二| 精品无人区乱码1区二区| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看 | 一二三四在线观看免费中文在| 99国产综合亚洲精品| 国内精品久久久久精免费| 日韩欧美一区二区三区在线观看| 国产区一区二久久| 两个人的视频大全免费| 中国美女看黄片| 国产伦在线观看视频一区| 长腿黑丝高跟| 欧美国产日韩亚洲一区| 午夜福利18| 欧美日韩福利视频一区二区| 久热爱精品视频在线9| 国产伦人伦偷精品视频| 丁香六月欧美| 亚洲成人国产一区在线观看| 精品久久蜜臀av无| 亚洲全国av大片| 一边摸一边抽搐一进一小说| 亚洲va日本ⅴa欧美va伊人久久| 日韩三级视频一区二区三区| 亚洲第一电影网av| 亚洲国产精品sss在线观看| 久久久国产成人免费| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 国内精品久久久久精免费| 久久国产乱子伦精品免费另类| 亚洲五月婷婷丁香| 亚洲国产精品合色在线| 亚洲精品粉嫩美女一区| 久久久精品大字幕| 久久中文看片网| 国产片内射在线| 国产野战对白在线观看| 欧美乱妇无乱码| 又紧又爽又黄一区二区| 欧美在线一区亚洲| 在线十欧美十亚洲十日本专区| 亚洲性夜色夜夜综合| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 五月玫瑰六月丁香| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 国产精品久久久人人做人人爽| 法律面前人人平等表现在哪些方面| 精华霜和精华液先用哪个| 成人国语在线视频| 亚洲乱码一区二区免费版| 97超级碰碰碰精品色视频在线观看| 午夜免费成人在线视频| 在线看三级毛片| 日本五十路高清| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 一进一出抽搐gif免费好疼| 午夜精品久久久久久毛片777| 国产99白浆流出| 成人手机av| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 99精品久久久久人妻精品| 人妻夜夜爽99麻豆av| 亚洲欧美日韩高清专用| 我的老师免费观看完整版| 欧美色视频一区免费| 成人特级黄色片久久久久久久| 日韩大码丰满熟妇| 国产精品98久久久久久宅男小说| 男女之事视频高清在线观看| www日本在线高清视频| 性色av乱码一区二区三区2| 亚洲一区二区三区不卡视频| 久久中文字幕人妻熟女| 91九色精品人成在线观看| 亚洲无线在线观看| 国产亚洲精品av在线| 叶爱在线成人免费视频播放| 韩国av一区二区三区四区| 我要搜黄色片| 国产伦在线观看视频一区| 国产伦人伦偷精品视频| 少妇熟女aⅴ在线视频| 亚洲国产欧美一区二区综合| 国产精品99久久99久久久不卡| 人成视频在线观看免费观看| 曰老女人黄片| 最近最新免费中文字幕在线| 国产精品亚洲一级av第二区| 男人的好看免费观看在线视频 | 久99久视频精品免费| 两个人的视频大全免费| 我要搜黄色片| 亚洲专区字幕在线| 舔av片在线| 少妇熟女aⅴ在线视频| 亚洲五月天丁香| 久久国产精品影院| 欧美色视频一区免费| 波多野结衣高清无吗| 成年免费大片在线观看| 亚洲欧美日韩无卡精品| 老司机午夜福利在线观看视频| 亚洲美女视频黄频| 制服人妻中文乱码| www.999成人在线观看| 国产精品电影一区二区三区| 久久久久久大精品| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 久久亚洲真实| 久久国产精品影院| 久久香蕉激情| 日韩精品青青久久久久久| 国产区一区二久久| 精华霜和精华液先用哪个| 在线播放国产精品三级| 18禁国产床啪视频网站| 丁香六月欧美| 成在线人永久免费视频| 天天一区二区日本电影三级| 又大又爽又粗| 悠悠久久av| 成年免费大片在线观看| 国产高清激情床上av| 最新美女视频免费是黄的| 琪琪午夜伦伦电影理论片6080| 成人永久免费在线观看视频| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 精品国产乱码久久久久久男人|