萃取劑對GC-MS 法測定天麻莖稈化學組分的影響

賈長青，馬 瑞，雷茹淋，桂干北

(1. 銅仁職業(yè)技術學院民族中獸藥國家地方聯(lián)合工程中心，貴州 銅仁 554300;2. 銅仁職業(yè)技術學院藥學院，貴州 銅仁 554300)

天麻（學名：Gastrodia elata Bl.） 為蘭科植物天麻的根莖。國內主要產(chǎn)地為云南、四川、貴州等地。貴州省德江縣是天麻主產(chǎn)地之一，德江天麻因其個大、肥厚、有效成分含量高而聞名于世。廣闊的市場前景使得天麻種植成為德江大健康產(chǎn)業(yè)的重點項目，現(xiàn)今德江縣天麻種植面積近3000 畝。在采摘收獲季節(jié)，大量的天麻地下塊莖被收獲。與此同時，每年隨之產(chǎn)生的天麻地上莖稈部分有幾十噸，它們很少被重復利用，多數(shù)被作為烹飪燃料或者被遺棄，使得巨大的資源沒有得到有效利用。

目前，對天麻地下塊莖的主要成分和生物活性研究較多，其主要起藥理作用成分為天麻素，主要功效為息風止痙，平肝潛陽，祛風通絡等[1-3]。此外現(xiàn)在對天麻地上莖稈部分的研究也表明，天麻莖稈中也含有一定數(shù)量的天麻素，對天麻莖稈的化學成分及生物活性也有一定的研究[4-6]。目前對天麻地上莖稈化學成分的提取方法主要有水提法和乙醇提取法[7-8]，溶劑對其中化學組分鑒定的影響尚不明確。因此本文采用極性溶劑甲醇和非極性溶劑四氯化碳對天麻莖稈化學成分進行提取，結合以往工作，比較研究萃取溶劑對化學組分鑒定的影響。

1 材料與方法

1.1 材料來源、溶劑與儀器

試驗用天麻地上莖稈從德江天麻種植基地采集。試驗所用有機試劑均為常規(guī)的分析純試劑。

GC-MS 法所用分析儀器為HP6890/5975C 氣質聯(lián)用儀( Agilent. )。

超聲波發(fā)生器型號為潔盟JP-060S 超聲波發(fā)生器。

1.2 試驗過程

取兩份新鮮天麻莖稈，每份100g，干燥粉碎后分別置于兩個圓底燒瓶中。在55 ℃下，分別使用甲醇和四氯化碳作為提取溶劑，在超聲波發(fā)生器中，邊攪拌邊提取30min，重復提取3 次，合并濾液，旋轉蒸發(fā)得天麻莖稈提取浸膏。分別得甲醇提取浸膏3.2g，四氯化碳提取浸膏1.1g。

1.3 GC-MS 分析條件的選用

色譜柱為FB-5MS (30m×0.25mm×0.25μm)彈性石英毛細管柱，色譜柱溫度初始46 ℃，然后以6℃/60s 的速度升溫至310℃，維持15 min，整個檢測過程運行時間，1h；汽化室溫度250℃；載氣為高純氦氣（He，99.999%)；柱前壓7.06 Pa，載氣流量1.0mL/min；分流進樣時比例為20∶1；溶劑延遲時間：300s。離子源為EI 源；EI 源運行條件為常規(guī)運行條件[10]。

參照[10]中氣質分析條件。

1.4 地上莖稈中化學組分鑒別

通過質譜計算機數(shù)據(jù)系統(tǒng)檢索、文獻檢索及核對標準質譜圖來確定總離子流圖中的各峰代表的揮發(fā)性化學成分，用峰面積歸一化法測定了各化學成分的相對質量分數(shù)[9]。

2 結果與分析

測試表明（見表1），在甲醇為萃取溶劑下，選用合適氣質條件，從天麻莖稈提取浸膏中共檢測出44 種峰面積較大化合物，占總數(shù)的88.386%。其中38 種化合物通過比對標準譜和查閱文獻后，可以確認。甲醇提取浸膏總主要化學成分為苯酚、醇類、酯類、酰胺、酮類、甾醇等極性較大的化合物。與乙醇做提取溶劑時相比[10]，可識別的化學組分明顯更為豐富，更有助于天麻莖稈化學組分的研究。

測定表明（見表2），使用四氯化碳作萃取溶劑，在氣質條件合適情況下，從天麻莖稈提取浸膏中共檢測出50 種峰面積較大化合物，占總數(shù)的80.096%。 其中43 種化合物通過比對標準譜和查閱文獻后，可以確認，其中有24 種化合物在甲醇提取浸膏中同樣被檢出。四氯化碳提取浸膏總主要化學成分為烷烴、醛類、酮類、酯類、甾醇等。與甲醇、乙醇[10]等極性溶劑做提取溶劑時相比，可識別的化學組分中烷烴等極性較小的化合物明顯增多，更有助于天麻莖稈化學組分的研究，可以根據(jù)所需分析目標的不同選用合適的提取溶劑。

3 結論

研究表明，使用不同萃取溶劑時，利用氣質聯(lián)用法鑒別其中化學組分有較大的差別。使用甲醇作萃取溶劑時，在合適氣質條件下，38 種化學組分可被鑒別確認；與乙醇做提取溶劑時相比[11]，可識別的化學組分明顯更為豐富。使用四氯化碳作萃取溶劑時，43 種化學組分可別鑒別確認，其中有24 種化合物在甲醇提取浸膏中同樣被檢出；與甲醇、乙醇[12]等大極性溶劑做提取溶劑時相比，可識別的化學組分中烷烴等極性較小的化合物明顯增多，更有助于天麻莖稈化學組分的研究，可以根據(jù)所需分析目標的不同選用合適的提取溶劑。

表1 甲醇為萃取溶劑時測定的天麻莖的化學成分Table 1 The chemical compounds of Gastrodia elata stalks

表2 四氯化碳作萃取溶劑時測定的天麻莖的化學成分Table 2 The chemical compounds of Gastrodia elata stalks