五加參歸芪精改善睡眠功能的時效關系研究

徐 杰，姜文月*，王寶成，王美慧，邢 成，肖俊美，楊明爽，李芯茹

(1.吉林省現(xiàn)代中藥工程研究中心有限公司，吉林 長春 130012；2.通藥制藥集團股份有限公司，吉林 通化 134001)

五加參歸芪精由刺五加、黃芪、當歸3味中藥組方而成，具有扶正固本、補氣固表、補血養(yǎng)血的功效，用于久病衰弱、失眠自汗、腰膝酸軟、氣短心悸等。近年來，對五加參歸芪精的研究報道僅有質量標準研究，如李春實等[1]建立五加參歸芪精質量標準，尚未見有關于五加參歸芪精改善睡眠功能時效關系的研究報道。

本研究采用戊巴比妥鈉誘導催眠模型開展本品在改善睡眠功能方面的藥效學研究，依據(jù)產品說明書用法與用量要求，選取每日服用10 mL、20 mL的低、高兩組劑量，設置3、7、14、21天的給藥周期，考察五加參歸芪精改善睡眠功能的藥效作用及時效關系，為臨床用藥提供參考。

1 材料與儀器

1.1 動物

ICR小鼠，雄性，體重18～22 g，由長春市億斯實驗動物技術有限責任公司提供，實驗動物生產許可證號為SCXK(吉)-2016-0003。

1.2 藥物與試劑

五加參歸芪精(批號：180519)由通藥制藥集團股份有限公司提供；復方刺五加片(批號：180403)由吉林天力泰藥業(yè)有限公司提供；戊巴比妥鈉(批號：69020100)購自北京化學試劑廠；氯化鈉注射液(批號：1805090401)購自吉林省都邦藥業(yè)股份有限公司。

1.3 儀器

JY2003電子天平(上海舜宇恒平科學儀器有限公司)。

2 方法

2.1 給藥劑量

按照產品說明書用法與用量要求，口服，每日1～2次，每次10 mL，故選取每日服用10 mL、20 mL的低、高劑量。每人按平均60 kg算，10 mL/d/人，折算小鼠劑量為1.50 mL/kg；20 mL/d/人，折算小鼠劑量為3.03 mL/kg。

2.2 戊巴比妥鈉睡眠時間試驗[2-12]

將雌性小鼠隨機分為空白組、陽性藥復方刺五加片組、五加參歸芪精低劑量和高劑量組，每組10只。末次給藥后1 h各鼠腹腔注射戊巴比妥鈉50 mg/kg，以注射戊巴比妥鈉開始至小鼠翻正反射消失為睡眠潛伏期，以翻正反射消失至恢復時間為睡眠持續(xù)時間。

2.3 戊巴比妥鈉閾下劑量催眠試驗[2-12]

將雌性小鼠隨機分為空白組、陽性藥復方刺五加片組、五加參歸芪精低劑量和高劑量組，每組10只。末次給藥后1 h各鼠腹腔注射戊巴比妥鈉30 mg/kg，觀察記錄30 min內入睡動物數(shù)(動物翻正反射消失達1 min以上者)。

2.4 統(tǒng)計學處理

采用SPSS 17.0軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析，組間比較采用雙側獨立樣本t檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

3 結果

3.1 戊巴比妥鈉閾下催眠的時效關系

與空白組相比，陽性藥復方刺五加片組給藥3天開始起效，3、7、14、21 天均顯著提高小鼠戊巴比妥鈉閾下劑量時的入睡率；五加參歸芪精低劑量各給藥周期入睡率均無顯著性差異；五加參歸芪精高劑量組給藥3天開始起效，3、7、14、21 天均顯著提高小鼠戊巴比妥鈉閾下劑量時的入睡率。實驗結果見表1。

3.2 戊巴比妥鈉閾上睡眠時間的時效關系

與空白組相比，陽性藥復方刺五加片給藥3 天開始起效，3、7、14、21 天均顯著延長閾上劑量睡眠持續(xù)時間(P<0.05，P<0.001)，睡眠潛伏期均無顯著性差異(P>0.05)；五加參歸芪精低劑量組睡眠潛伏期和睡眠持續(xù)時間均無顯著性差異(P>0.05)；五加參歸芪精高劑量組續(xù)給藥3 天開始起效，顯著延長閾上劑量睡眠持續(xù)時間(P<0.05，P<0.01)，縮短睡眠潛伏期(P<0.05)。見表2。

綜合考量閾下與閾上催眠實驗結果，在設置的時效考察周期內，五加參歸芪精低劑量組始終未起效，而五加參歸芪精高劑量組從給藥第3天便開始起效，隨著用藥時間的延長，始終維持顯著的藥效作用，表現(xiàn)為提高小鼠戊巴比妥鈉閾下劑量時的入睡率，延長閾上劑量睡眠持續(xù)時間，縮短睡眠潛伏期，呈現(xiàn)良好的時效關系。即每日服藥3.03 mL/kg，服用3 天達到良好的改善小鼠睡眠功能。

表1 五加參歸芪精對戊巴比妥鈉閾下催眠量的影響

組別給藥劑量睡眠潛伏期(min)3天7天14天21天空白組—6.625±2.9256.375±2.9734.444±2.6984.200±1.317復方刺五加片0.18g/kg6.200±3.0115.571±2.6374.500±1.6045.571±2.070低劑量組1.50mL/kg4.875±2.0319.167±4.5356.143±2.0355.444±2.297高劑量組3.03mL/kg4.000±1.803# 3.556±2.186# 2.222±1.093# 2.200±1.135# #組別給藥劑量睡眠持續(xù)時間(min)3天7天14天21天空白組—8.857±5.81511.143±8.33515.571±8.96016.375±6.413復方刺五加片0.18g/kg41.000±22.435# #33.000±12.672# # # 40.429±22.751#33.556±16.734#低劑量組1.50mL/kg15.444±9.36915.200±5.89113.571±11.77412.000±6.205高劑量組3.03mL/kg40.400±25.812# #35.167±17.440# #36.250±19.129#39.500±24.190#

注：與空白組比較，# # #P<0.001，# #P<0.01，#P<0.05。

4 討論

本研究采用戊巴比妥鈉誘導催眠模型考察本品在改善睡眠功能方面的藥效作用，在產品使用說明書每日服用最低與最高服用劑量下設計不同給藥周期，初步闡明五加參歸芪精對該適應證的時效關系，明確最佳給藥劑量與用藥時間。實驗結果表明綜合考量閾下與閾上催眠實驗結果，在設置的時效考察周期內，五加參歸芪精低劑量組始終未起效，而五加參歸芪精高劑量組從給藥第3天便開始起效，隨著用藥時間的延長，始終維持顯著的藥效作用，表現(xiàn)為提高小鼠戊巴比妥鈉閾下劑量時的入睡率，延長閾上劑量睡眠持續(xù)時間，縮短睡眠潛伏期，呈現(xiàn)良好的時效關系。即每日服藥3.03 mL/kg，服用3天達到良好的改善小鼠睡眠功能。