幾種抗球蟲藥對雞柔嫩艾美耳球蟲病療效的對比分析

李星星，顧夢恬，侯慶明，耿 梅*

(1.山東勝利生物工程有限公司，山東濟寧，272000； 2.揚州大學獸醫(yī)學院，江蘇揚州，225000)

雞球蟲病是雞常見且危害十分嚴重的寄生蟲病，一旦爆發(fā)，將造成巨大的經濟損失。隨著時間推移，抗球蟲藥物開發(fā)應用越來越多，但在現實養(yǎng)殖實踐中不斷出現錯誤用藥、泛濫用藥現象，這嚴重加劇了抗球蟲藥(Anticoccidiosis drugs)的抗藥性和交叉耐藥性，給雞群球蟲病的防治造成巨大困難。本試驗采用爆發(fā)球蟲病的雞場分離出的卵囊，進行人工感染健康雞群患得雞球蟲病，對雞群分別飼喂常用五種抗球蟲藥——海南霉素鈉(Hainanmycin sodium)、鹽霉素(Salinomycin)、莫能菌素(Monensin)、尼卡巴嗪(Nicarbazin)、地克珠利(Diclazuril)，對比分析其治療效果，為防治雞球蟲病(Coccidiosis in Chicken)提供參考意見。

1 材料與方法

1.1 試驗動物 試驗AA雞購自江蘇八達畜禽有限公司。將統(tǒng)一時間段孵出的雛雞立即運回揚州大學，在全面消毒的試驗動物房中飼養(yǎng)至25日齡，經糞檢確認無球蟲感染，用于試驗。

1.2 試驗藥物 1%海南霉素鈉預混劑(Hainanmycin premix)，批號：HNP11702006。推薦給藥方案：混飼，雞每噸飼料，5～7.5 ppm(相當于添加藥品500～750 g/噸)；12%鹽霉素預混劑(Salamphenicol premix)，批號：201705018。推薦給藥方案：混飼，雞每噸飼料，60 ppm(相當于添加藥品500 g/噸)；20%莫能菌素預混劑(Monensin premix)，批號：MON20170501。推薦給藥方案：混飼，雞每噸飼料，90～110 ppm(相當于添加藥品450～550 g/噸)；25%尼卡巴嗪預混劑(Nicarbazin premix)，批號：2018-1-17。推薦給藥方案：雞每噸飼料，100 ppm(相當于添加藥品400g/噸)；0.5%地克珠利預混劑(Dikzuli premix)，批號：20170504023。推薦給藥方案：雞每噸飼料，1 ppm(相當于添加藥品200 g/噸)。

1.3 蟲種 雞艾美耳球蟲卵囊(Oocysts ofEimeriavulgaris in chickens)：由山東勝利生物工程有限公司從山東省發(fā)生雞球蟲病的雞場中采集新鮮糞便，經試驗室分離、純化而得。經試驗室檢查鑒定主要為柔嫩艾美耳球蟲，并經雞體傳代增殖，收集球蟲卵囊經孢子化后保存于4 ℃冰箱備用。

1.4 確定蟲種的感染量 接種前挑選30只20日齡無球蟲感染史的AA雞，隨機分成3組(每組10只)，每組中的每只雞分別經嗉囊接種孢子化的球蟲卵囊，接種量分別為8×104、10×104和15×104個。感染后每天觀察雞的發(fā)病及死亡情況，感染后第8天將所有存活雞撲殺剖檢，觀察腸道病變情況。根據死亡率和腸道病變記分情況，確定藥物正式試驗時的球蟲感染量，即除不感染不給藥組外，感染組接種球蟲量為每只雞經嗉囊感染孢子化卵囊約10×104個。

1.5 試驗分組 試驗設置7個組，各組處理詳見表1。

1.6 給藥途徑 受試藥物均按《2015年獸藥典》或《2017年版獸藥質量標準》國家法規(guī)規(guī)定的給藥劑量添加于飼料中混飼給藥。給藥持續(xù)時間為9 d，期間動物均自由采食。所有藥物在給藥前通過逐級稀釋法與飼料充分混勻。具體給藥方案見表1。

1.7 試驗周期 試驗周期9 d，即感染前1 d逐只雞稱重、編號、分組，感染前48小時各藥物試驗組即按規(guī)定劑量和途徑給藥，連續(xù)給藥9 d。感染后第8天試驗結束。

1.8 觀察指標 試驗期間，每天觀察記錄雞的精神、食欲、飲水、排糞、發(fā)病雞及死亡數。死亡雞稱重后剖檢，以確定病死雞是否死于球蟲病。感染后第6、7、8天，每天計數糞便中的卵囊數。感染后第8天全部試驗雞稱重剖檢，觀察腸道病變，取腸道內容物，計算腸道內的卵囊數。

1.9 數據統(tǒng)計分析 用Duncan氏新復極差法對各試驗組雞的平均增重與平均病變記分進行顯著性分析。

2.0 藥效判定標準 按抗球蟲指數(ACI)，在180以上為高效，在160～180之間為中效，在120～160之間為低效。ACI按默克公司[1]的方法計算，即：ACI=(存活率+相對增重率)-(病變值+卵囊值)。其中：

(1)存活率(Survival rate)(%)：存活雞數÷開始雞數×100 %。(2)相對增重率(Relative weight gain rate)(%)：用藥組或感染不用藥組雞的平均增重÷不感染不用藥組雞的平均增重×100%。不感染不用藥組雞的相對增重率為100 %。(3)病變值(Lesion value)：每組的平均病變記分×10。(4)每雞平均卵囊數(Average number of oocysts per chicken)：為糞便與腸道中卵囊數之和，其中糞便卵囊數按Norton等(1976)[2]的方法計算，腸道卵囊數按蔣金書等(1992)[3]的方法計算。(5)卵囊值(Oocyst value)：按角田清(1983)[4]的方法計算。

2 結果與分析

2.1 臨床癥狀 在試驗期間，健康對照組雞的精神、食欲、飲欲、糞便都正常。其余各試驗組雞均出現不同程度的臨床癥狀，如精神不振、羽毛聳立、頭蜷縮、呆立一隅、食欲減退、腹瀉、消瘦等。在感染后第五天，陽性對照組開始排出血便并一直持續(xù)到試驗結束，其中陽性對照組在第6天排出血便數量最多。各給藥組試驗雞癥狀減輕，精神、食欲、飲欲等情況好于陽性對照組，血便減少，死亡率降低，海南霉素鈉(Hainanmycin sodium)組的存活率為100%。

2.2 存活率、平均增重與相對增重率 由表2可知，受藥5組的平均增重均要高于陽性對照組，但差異不顯著(P>0.05)。在相對增重率方面，受藥5組的相對增重率均大于92%，高于陽性對照組。

表2 試驗結束時各組存活率(%)、平均增重與相對增重率(%)Tab 2 Survival rate (%), average weight gain and relative weight gain rate (%) of each group at the end of the experiment

2.3 卵囊產量與卵囊值 由表3可知，試驗中，陽性對照組的每雞平均卵囊產量最高，達133.2×106個卵囊，卵囊值為40；各用藥組的卵囊產量明顯低于陽性對照組，卵囊值為5～10。

表3 試驗結束后各試驗組每雞的平均卵囊產量與卵囊值Tab 3 Average oocyst yield and oocyst value per chicken per test group after the end of the experiment

2.4 病變記分與病變值 人工感染球蟲后病變部位主要在盲腸，盲腸上皮顯示增厚，一側或兩側盲腸顯著腫大，腸道內充滿血液、血凝塊。由表4可知，十二指腸和中段腸道的病變不明顯。陽性對照組的平均病變記分最高，顯著高于海南霉素(Hainanmycin sodium)組(P< 0.05)。其他藥物組、陽性對照組均出現病變，但各個藥物組的病變較輕。

表4 試驗結束后各組平均病變記分與病變值Tab 4 Average lesion scores and lesion values of each group after the end of the trial

注：各組初始體重間差異均不顯著(P> 0.05)；同列右上角具有不同小寫字母者表示差異顯著(P< 0.05)。

2.5 抗球蟲指數(ACI) 由表5可知，受試藥物中， 海南霉素鈉(Hainanmycin sodium)組的抗球蟲指數(ACI)最高；莫能菌素(Monensin)組、尼卡巴嗪(Nicarbazin)組也處于160～180，具有抗球蟲中效水平。

表5 各組的抗球蟲指數計算結果Tab 5 Calculation results of anti-coccidial index of each group

3 討論與結論

雞球蟲病(Coccidiosis in Chicken)是由艾美耳屬(Eimeria)的多種單細胞寄生蟲引起的嚴重危害雞生長發(fā)育的一種疾病。集約化養(yǎng)雞廠是球蟲病爆發(fā)的最適場所, 其發(fā)病率50%～70%, 死亡率20%～30%,嚴重時高達80%[5]。球蟲病的主要特征是患雞消瘦、食欲下降、貧血和血痢，病愈后雞生長發(fā)育受阻，成年雞多為帶蟲者，增重和產蛋均會受到影響，經濟效益降低[6]。在各種雞病中，球蟲病發(fā)生率最高, 占 1/6～ 1/5[7]，據報道，全世界每年因雞球蟲病(Coccidiosis in Chicken)造成高達30億美元經濟損失，在美國每年因球蟲病造成的直接和間接經濟損失約為6.4億美元[8]。據統(tǒng)計，中國每年用于防治雞球蟲病(Coccidiosis in Chicken)的藥物費用達數億元人民幣，占雞病全部防制費用的近1/3[9]。自 Levine P P[10]發(fā)現磺胺類藥物具有抗球蟲作用以來，已先后有 50 多種藥物投入臨床應用， 為養(yǎng)雞業(yè)的發(fā)展做出了貢獻。雖然人們對雞球蟲病(Coccidiosis in Chicken)的免疫預防進行了一些研究， 但目前及今后相當長的一段時間內，藥物防治仍是控制雞球蟲病(Coccidiosis in Chicken)的主要手段。

3.1 存活率(Survival rate)、平均增重(Average weight gain)、相對增重率(Relative weight gain rate) 由表2可以看出，存活率方面海南霉素組(Hainanmycin sodium)、尼卡巴嗪(Nicarbazin)組100%，高于受藥組平均值(97)的3.1%。另外，海南霉素(Hainanmycin sodium)組相對增重率97.2%，高于受藥組平均值(95.8%)的1.5%，優(yōu)于其他受藥組。表明在雞只感染球蟲后，海南霉素(Hainanmycin sodium)可以很好的提高雞的存活率和雞只增重。這與范江坤[11]等，海南霉素(Hainanmycin sodium)可以提高雞群成活率和飼料利用率，對增加雞群日增重效果顯著的研究一致。

3.2 平均產卵量(Average egg production)、卵囊值(Oocyst value) 由表3可以看出，海南霉素(Hainanmycin sodium)組平均產卵量合計32.4，低于受藥組平均值(42.1)的23.0%。另外海南霉素(Hainanmycin sodium)組卵囊值5，低于受藥組平均值(9)的44.4%。充分說明海南霉素(Hainanmycin sodium)可以很好的抑制球蟲增值，降低球蟲產卵量。

3.3 平均病變積分與病變值(Mean lesion score and lesion value) 由表4可以看出，海南霉素(Hainanmycin sodium)組優(yōu)于鹽霉素(Salinomycin)組、莫能菌素(Monensin)組、地克珠利(Diclazuril)組，但差異不顯著(P > 0.05)，顯著優(yōu)于尼卡巴嗪(Nicarbazin)組(P < 0.05)。另外，海南霉素(Hainanmycin sodium)組病變值16，低于受藥組平均值(19.4)的17.5%。聶奎等[12]認為海南霉素(Hainanmycin sodium)對雞柔嫩艾美耳球蟲病(Eimeriatenella Infection in Chicken)有很高療效，這與本研究結果一致。

3.4 抗球蟲指數(ACI) 由表5可以看出，海南霉素(Hainanmycin sodium)組176.2，高于受藥組平均值(164.4)的7.2%，海南霉素(Hainanmycin sodium)的抗球蟲指數屬于中效抗球蟲藥，優(yōu)于其他球蟲藥。這與鄭月華[13]等研究的7.5 ppm 海南霉素(Hainanmycin sodium)對雞柔嫩艾美耳球蟲(Eimeriatenella Infection in Chicken)有很強的作用，其ACI均在184以上，屬高效抗球蟲藥(Anticoccidial)，結果基本一致。

3.5 結論 綜合考慮海南霉素鈉預混劑(Hainanmycin premix)對雞人工感染艾美耳球蟲(Eimeria)的臨床癥狀(排血便)、病變損害和卵囊的控制及增重等的影響，海南霉素鈉預混劑(Hainanmycin premix)按推薦劑量750 mg/kg連續(xù)使用9 d，對來自山東省某雞場分離的艾美爾球蟲(Eimeria)臨床株有較好的療效。