馮連第
摘要:蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測法因其操作簡單、成本較低、快速方便等優(yōu)點,被企業(yè)、批發(fā)市場、農(nóng)產(chǎn)品檢測部門廣泛使用。闡述蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測的原理、優(yōu)缺點、抑制率異常情況的原因分析和應(yīng)對辦法,分析檢測過程中易出現(xiàn)的問題,并針對這些問題提出相應(yīng)對策,以減少誤差,提高檢測結(jié)果的準確性。
關(guān)鍵詞:蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測;原理;影響因素;對策
中圖分類號:S481.8? ? 文獻標識碼:A? ? 文章編號:1674-1161(2019)05-0064-02
農(nóng)藥是防治蔬菜病蟲害、提高產(chǎn)量及實現(xiàn)農(nóng)業(yè)機械化的主要手段。由于農(nóng)藥的特性、使用方式和安全間隔期,蔬菜上或多或少都存在一些農(nóng)藥殘留。當農(nóng)藥使用過量或未達到安全間隔期就進入銷售環(huán)節(jié),就會造成中毒事件,嚴重危害百姓的身體健康。因此,加強對蔬菜農(nóng)藥殘留的監(jiān)管已迫在眉睫,而蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)是對蔬菜農(nóng)藥殘留監(jiān)管的一個重要手段。
蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)是一種最為簡單和普遍的生化檢測法,蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測法根據(jù)乙酰膽堿酯酶被抑制的程度(抑制率)來檢測蔬菜上的有機磷和氨基甲酸酯類這兩類農(nóng)藥的殘留,具有方便快捷、成本低、操作簡單等優(yōu)點,可用于半定量測定和現(xiàn)場定性檢測,適合在蔬菜生產(chǎn)基地、大型蔬菜交易市場及政府檢測部門開展快速檢測工作。這種快速檢測方法可以對含有有機磷和氨基甲酸酯這兩類農(nóng)藥的蔬菜進行篩選,將食用蔬菜中農(nóng)藥殘留超標的產(chǎn)品控制在交易之前,避免流入百姓的餐桌。
1 蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)的原理
目前,國內(nèi)食用蔬菜中毒主要是由有機磷和氨基甲酸酯這兩類農(nóng)藥引起的。這兩類農(nóng)藥會使人體中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)中的乙酰膽堿酯酶活性降低,造成神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)乙酰膽堿非正常積累,導(dǎo)致急性中毒。
農(nóng)藥殘留速測法利用有機磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對動物體內(nèi)乙酰膽堿酶具有抑制作用這一昆蟲毒理學(xué)原理,在乙酰膽堿酯酶及其底物(乙酰膽堿)的共存體系中加入農(nóng)產(chǎn)品樣品提取液(樣品中含有水)。如果樣品中不含有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥,酶就會正常與其他試劑發(fā)生反應(yīng),乙酰膽堿被酶水解,水解產(chǎn)物與加入的顯色劑產(chǎn)生反應(yīng)出現(xiàn)顏色變化;如果試樣提取液中含有的有機磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥超標,酶的活性就會降低,試樣中加入的底物就不能被酶水解,顏色也就不會發(fā)生變化。用農(nóng)殘速測儀測定吸光度值,3 min后速測儀自動計算出抑制率,當抑制率小于70%時為合格,反之判定為不合格,以此判斷食用蔬菜中農(nóng)藥殘留是否超標。
2 蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測方法的優(yōu)缺點
1) 蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測方法的優(yōu)點是:農(nóng)殘速測儀體積小、便于攜帶,原理通俗易懂,操作簡單上手快,運行成本低廉,整個檢測過程只需3 min左右,可作為傳統(tǒng)儀器分析方法的有益補充,適用于現(xiàn)場定性檢測,特別適合針對未進入交易環(huán)節(jié)的生產(chǎn)基地、批發(fā)市場開展快速檢測工作,同時也是農(nóng)產(chǎn)品檢測部門對蔬菜農(nóng)藥殘留是否超標的一種快速判定方法。該方法可對含有有機磷和氨基甲酸酯這兩類農(nóng)藥殘留的蔬菜進行快速粗篩,將一部分農(nóng)藥殘留超標的蔬菜控制在流通之前,保證上市蔬菜的相對安全性,避免農(nóng)藥超標的蔬菜流入百姓的餐桌。
2) 蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測方法的缺點是:只能檢測氨基甲酸酯和有機磷這兩類農(nóng)藥,不能檢測其他類農(nóng)藥;酶試劑的活性容易降低,導(dǎo)致反應(yīng)不穩(wěn)定;人員操作上不嚴謹導(dǎo)致檢測結(jié)果誤差較大,重復(fù)性不好;存在檢測盲區(qū),不適合檢測蔥蒜類、香菜、韭菜、食用菌類農(nóng)產(chǎn)品,易出現(xiàn)假陽性結(jié)果。
3 檢測結(jié)果異常情況分析與對策
農(nóng)藥殘留速測儀檢測方法是利用分光光度計測定樣品吸光值隨時間變化而變化的情況,通過酶試劑被抑制的程度(即抑制率)來判定農(nóng)藥殘留是否超標。抑制率的正常范圍是-10%~110%,對照組樣本的吸光值在3 min后與3 min前的差值(ΔAc/ΔAs)范圍是0.4~0.8。
1) 抑制率偏小。出現(xiàn)抑制率值偏小的原因:一是由于不適當?shù)膬Υ媸姑冈趨⒓臃磻?yīng)前就已經(jīng)失去活性。酶這種生物催化劑容易失去活性、比較脆弱,一般要在常溫、常壓、接近中性酸堿度的環(huán)境中才能發(fā)揮正常的作用。酶在恒溫箱中的最適溫度是37.5~38.5 ℃,提取液的pH值控制在8.0。粉狀的酶應(yīng)儲存在冷凍室內(nèi)(約-18 ℃),用時用提取劑溶解,溶解后的酶液分成若干個小瓶,暫時不用的儲存在冷凍室內(nèi),用時解凍;用后的酶液儲存在冷藏室內(nèi)(0~5 ℃),在一周內(nèi)用完。酶液反復(fù)解凍最多不能超過2次,在試驗過程中,酶液可暫時置于室內(nèi)的冰盒上。二是操作不當導(dǎo)致底物與酶未反應(yīng)完全。應(yīng)熟練掌握操作流程,取底物時用移液槍快速直接加到比色皿內(nèi),不要濺到比色皿壁上,加完底物后立即震蕩片刻,再放入農(nóng)殘速測儀中,否則將影響判定結(jié)果。
2) 抑制率偏大。出現(xiàn)抑制率值偏大的原因:主要是由于檢測人員操作不當,導(dǎo)致在上機比色前酶就已經(jīng)與底物發(fā)生反應(yīng)。應(yīng)熟練快速地完成樣品培養(yǎng)及上機比色,盡可能在1 min內(nèi)完成。培養(yǎng)時間要固定,不能超過30 min。認真清洗比色皿,保持比色皿潔凈,使比色皿有較好的透光性。
4 蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測結(jié)果出現(xiàn)誤判的常見原因與對策
蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測法對生化反應(yīng)條件要求比較嚴格。由于在蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測過程中會出現(xiàn)一些環(huán)境因素和人為因素的影響,導(dǎo)致同一批次蔬菜樣品的檢測結(jié)果不同或出現(xiàn)較大的誤差,需要采取相應(yīng)的辦法加以解決。
1) 檢測室內(nèi)要配備空調(diào)、恒溫箱等設(shè)備,以確保試劑保存在最適宜的環(huán)境中。尤其是酶試劑及底物要在特定的溫度條件下保存,保持乙酰膽堿酯酶的活性。
2) 配置藥品時要嚴格按照藥劑說明書的比例配置。要使用蒸餾水或純凈水,不可使用礦物質(zhì)水或自來水,以免造成檢測結(jié)果不準確。
3) 速測儀分光光度計要定期進行較準調(diào)試,以確保儀器的測試準確度。保持比色皿潔凈是減少判定結(jié)果出現(xiàn)誤差的一個重要因素,可在熱水浸泡后用洗滌劑清洗比色皿。
4) 不能使用同一個移液器吸取不同的試劑,要確保一個移液器配一種試劑,避免試劑發(fā)生交叉,影響判定結(jié)果。堅持“只吸不進”的原則,防止試劑污染。定量加液器的加液量誤差較大,建議使用量筒來稱量提取試劑。
5) 蔬菜自身的影響。蔥蒜類、香菜、韭菜、食用菌類、花椒等農(nóng)產(chǎn)品的汁液中含有的物質(zhì)會對判定結(jié)果產(chǎn)生影響,出現(xiàn)假陽性。處理這類樣品時,可采用整株或大塊蔬菜浸出提取液的方法。
6) 對蔬菜樣品進行前處理時,要正確使用合適的采樣工具,控制好取樣時間、取樣位置、取樣量。注意不要將樣品搗爛而使得提取液中蔬菜色素過多,以免影響分光光度計的測定結(jié)果。
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Rapid Detection Technology, Common Problems and Countermeasures
of Pesticide Residues in Vegetables
FENG Liandi
(Liaoning Agricultural Products Processing and Circulation Promotion Center, Shenyang 110001, China)
Abstract: The rapid detection of pesticide residues in vegetables is widely used by enterprises, wholesale markets and agricultural products detection departments because of its advantages of simple operation, low cost, rapid convenience and so on. This paper expounds the principle, advantages and disadvantages of rapid detection of pesticide residues in vegetables and analyzation of the causes and countermeasures of abnormal inhibition rate, analyzes the problems that are easy to occur in the detection process, and puts forward corresponding countermeasures to reduce errors and improve the accuracy of detection results.
Key words: rapid detection of pesticides residues in vegetables; principles; influencing factors; countermeasures