Hcy、淀粉樣蛋白、TNF-水平變化在阿爾茨海默病中的表達(dá)及意義

張照陽，范立華，蔡慶春

(河南中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科，河南 鄭州450000)

阿爾茨海默病(Alzheimer disease，AD)俗稱老年癡呆癥，是臨床常見的神經(jīng)系統(tǒng)退變性疾病，多發(fā)生于老年人，以進(jìn)行性認(rèn)知障礙、記憶力減退、生活自理能力下降、精神人格改變?yōu)橹饕∽兲卣鳎哂衅鸩‰[匿、治療棘手的特點(diǎn)，嚴(yán)重影響老年人的生存質(zhì)量和家庭關(guān)系。近年來我國已步入老齡化社會，AD的發(fā)病率逐年遞增，對AD的研究已成為熱門[1]。

目前臨床對于AD的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為與大腦皮質(zhì)彌散性萎縮、淀粉樣斑塊沉積、神經(jīng)元丟失等密切相關(guān)[2]。有研究發(fā)現(xiàn)，同型半胱氨酸 (Homocysteine，Hcy)、淀粉樣蛋白(-amyloid proteinA1-42，A1-42)、 腫瘤壞死因子(Tumor necrosis factor，TNF)等炎癥介質(zhì)與神經(jīng)系統(tǒng)疾病、心腦血管疾病的發(fā)生和進(jìn)展密切相關(guān)[3]，但與AD的關(guān)系研究較少，本研究探討了血清Hcy、A1-42和TNF-在AD中的表達(dá)及意義，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年2月至2017年12月在我院治療的AD患者87例(AD組)，納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合美國神經(jīng)病學(xué)、語言障礙和卒中研究索阿爾茨海默病和相關(guān)疾病學(xué)會制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)Hachinski缺血指數(shù)量表評分＜4分；(3)臨床癡呆評定量表(CDR)評分＞1分；(4)患者家屬知情同意并簽署同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)因其他中樞神經(jīng)系統(tǒng)導(dǎo)致的癡呆；(2)因肝功能衰竭、甲狀腺功能亢進(jìn)、朊蛋白病等引起的癡呆綜合征。同時選取100例健康志愿者作為對照組，兩組受試者性別、年齡等一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，見表1。

表1 兩組一般資料比較(，n)

表1 兩組一般資料比較(，n)

組別 例數(shù) 男/女 年齡(歲) 受教育年限(年)AD組對照組t/x2 P 87 100 43/44 49/51 0.003＞0.05 70.16±8.43 69.50±9.11 0.512＞0.05 10.23±2.33 9.89±1.88 1.104＞0.05

1.2 實(shí)驗(yàn)方法 選取AD患者和健康志愿者進(jìn)行比較，抽取空腹靜脈血檢測兩組血清Hcy、A1-42和TNF-水平，同時采用簡易智能量表(MMSE)評價認(rèn)知功能。Hcy采用循環(huán)酶法檢測，檢測儀器為Hitachi-7600-010型全自動生化分析儀，按照標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程執(zhí)行操作。Aβ1-42、TNF-α采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法檢測，Aβ1-42試劑盒購自比利時Innogenetics公司，TNF-α試劑盒購自南京建成生物工程研究所，均嚴(yán)格按試劑盒說明書要求操作。

1.3 簡易智能量表(MMSE)評價 采用簡易智能精神狀態(tài)檢查量表 (MMSE)評價患者認(rèn)知功能的變化，由患者獨(dú)立完成量表問題的回答。MMSE量表包括定向力、即刻記憶力、計(jì)算力、注意力、延遲記憶和語言等內(nèi)容?？偡譃?0分，得分越高表示認(rèn)知功能越好，得分＜27分者認(rèn)為存在認(rèn)知功能障礙。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS19.0軟件，計(jì)量資料采用()表示，組間比較使用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料比較使用x2檢驗(yàn)，相關(guān)性采用Pearson相關(guān)分析。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清Hcy、A1-42和TNF比較 AD組血清Hcy和TNF明顯高于對照組(p＜0.05)，而A1-42為明顯高于對照組(P＜0.05)，見表2。

2.2 兩組MMSE評分比較 AD組MMSE評分明顯低于對照組，差異比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，見表3。

2.3 相關(guān)分析 將AD患者M(jìn)MSE評分與Hcy、A1-42和TNF進(jìn)行相關(guān)分析，結(jié)果顯示AD患者M(jìn)MSE評分與血清Hcy濃度呈負(fù)相關(guān) (r=-0.455，P＜0.05)，而與 A1-42、TNF 無相關(guān)性(P＞0.05)。

表2 兩組血清Hcy、A1-42和TNF比較()

表2 兩組血清Hcy、A1-42和TNF比較()

組別 例數(shù) Hcy(μmol/l)Aβ1-42(pg/ml)TNF-α(pg/ml)AD組對照組t P 87 100 17.60±4.11 11.43±3.03 11.779＜0.05 37.42±10.16 57.89±11.26-12.973＜0.05 60.43±7.80 37.22±9.14 18.531＜0.05

表3 兩組MMSE評分比較()

表3 兩組MMSE評分比較()

組別 例數(shù) MMSE評分(分) t P AD組對照組87 100 3.70±0.97 29.01±1.22 -155.415 ＜0.05

3 討論

AD是一種神經(jīng)系統(tǒng)退行性病變，患者常表現(xiàn)為進(jìn)行性認(rèn)知能力下降、精神和行為異常、日常生活能力下降，在當(dāng)前老齡化社會，越來越多的AD不僅影響了患者的家庭幸福，也給社會醫(yī)療資源造成沉重的負(fù)擔(dān)[4]。AD的病因迄今未明，有研究認(rèn)為家族史、女性、頭部外傷、病毒感染、甲狀腺疾病、受教育程度、母親生育能力過高或過低均有可能影響AD的發(fā)生和進(jìn)展[5]。近年來隨著對AD的臨床研究和基礎(chǔ)研究的不斷深入，血管因素在AD發(fā)生、發(fā)展中的作用已受到學(xué)術(shù)界的高度重視[6]。大量研究已經(jīng)證實(shí)，腦組織缺血、缺氧性改變、慢性炎癥所引起的應(yīng)激反應(yīng)是導(dǎo)致AD發(fā)生和進(jìn)展的重要危險因素[7]。

人體自身是不能產(chǎn)生Hcy的，正常人血清中存在的微量Hcy是蛋氨酸的代謝產(chǎn)物，Hcy甲基化后生成蛋氨酸、S-腺苷甲硫氨酸，后者參與蛋白質(zhì)、磷脂、DNA神經(jīng)遞質(zhì)等物質(zhì)的代謝過程[8]。高Hcy血癥是血管性疾病的危險因子，與動脈粥樣硬化、急性腦梗死等疾病密切相關(guān)。tau蛋白可結(jié)合并穩(wěn)定微管系統(tǒng)，過度磷酸化后tau蛋白與微管的結(jié)合力下降，微管穩(wěn)定性不能得到很好的維持，影響細(xì)胞骨架的穩(wěn)定，最終導(dǎo)致神經(jīng)元退行性變[9]。有研究認(rèn)為，Hcy水平升高可引起tau蛋白過度磷酸化，形成成對螺旋絲堆積于神經(jīng)元內(nèi)，導(dǎo)致神經(jīng)原纖維纏結(jié)而影響神經(jīng)元功能[10]。Hcy水平升高引起β淀粉樣蛋白沉積，引起神經(jīng)元凋亡和淀粉樣變[11]。高Hcy血癥還會引起氧化應(yīng)激反應(yīng)，加重腦血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷，增加血管性癡呆的發(fā)生風(fēng)險[12]。 本研究發(fā)現(xiàn)AD患者血清Hcy水平明顯高于正常人群，AD患者M(jìn)MSE評分與血清Hcy濃度呈負(fù)相關(guān)，提示血清Hcy可在一定程度上反映AD患者的認(rèn)知功能障礙程度。這可能與高Hcy血癥誘導(dǎo)腦血管病變有關(guān)，但其具體機(jī)制尚有待于進(jìn)一步深入研究。

Aβ是淀粉樣前體蛋白裂解后的氨基酸片段，主要亞型包括Aβ1-40和 Aβ1-42。其中Aβ1-40是細(xì)胞代謝的正常產(chǎn)物，在正常人群中也可檢出，在臨床上并無診斷意義[13]。Aβ1-42的神經(jīng)毒性較強(qiáng)，易發(fā)生聚集，是AD老年斑形成的始動因子。有研究發(fā)現(xiàn)，Aβ1-42在腦脊液標(biāo)本中的特異性更高，血液標(biāo)本的特異性略低[14]，但由于在臨床工作中血液標(biāo)本的采集更加方便快捷、創(chuàng)傷小，因而本研究仍采取血液標(biāo)本進(jìn)行Aβ1-42的檢測，發(fā)現(xiàn)AD患者血清中Aβ1-42水平明顯高于正常人群。在高Hcy血癥患者體內(nèi)氧自由基大量產(chǎn)生，導(dǎo)致血管內(nèi)皮細(xì)胞發(fā)生損害。Hcy的神經(jīng)血管毒性會增強(qiáng)β淀粉樣蛋白的神經(jīng)毒性作用，引起神經(jīng)元損害。

隨著神經(jīng)免疫學(xué)的研究不斷深入，免疫因子引起的慢性炎癥反應(yīng)在AD的發(fā)病過程中的重要作用已受到重視，TNF-α在免疫應(yīng)答的早期階段啟動炎癥反應(yīng)，誘導(dǎo)補(bǔ)體、氧自由基、一氧化氮、Aβ等大量合成，作用于膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元，影響神經(jīng)的生長和可塑性[15]。本研究發(fā)現(xiàn)AD患者血清TNF-α水平明顯高于正常人群，提示AD患者機(jī)體炎癥反應(yīng)程度較高。但本研究發(fā)現(xiàn)，AD患者M(jìn)MSE評分與血清 A1-42、TNF-α無相關(guān)性，AD患者的認(rèn)知功能障礙程度與血清A1-42、TNF-α水平無關(guān)。

本文結(jié)果AD患者血清Hcy和表達(dá)明顯升高，而Aβ1-42表達(dá)明顯降低，其中Hcy可能是患者認(rèn)知功能的影響因素，值得進(jìn)一步研究。