ROS清除劑在細(xì)菌抗生素耐受中的作用研究進(jìn)展

李夢婷 曾潔 劉小東 薛云新 王岱

(分子疫苗學(xué)和分子診斷學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廈門大學(xué)，廈門 361102)

自從1928年發(fā)現(xiàn)青霉素以來，大量抗生素被投入使用，由于早期人們對抗生素的了解較少，導(dǎo)致抗生素在很長一段時(shí)間內(nèi)不合理使用，產(chǎn)生了很多危害，甚至出現(xiàn)了“超級細(xì)菌”[1]。常見的殺菌抗生素可以分為3大類，β-內(nèi)酰胺類、氨基糖苷類和喹諾酮類，這些殺菌抗生素在殺菌時(shí)存在一條共有的依賴于ROS的殺菌通路(圖1)，即他們與各自相應(yīng)的初級靶位點(diǎn)結(jié)合后，通過依賴于TCA循環(huán)的電子傳遞鏈產(chǎn)生超氧化物，超氧化物會(huì)損壞鐵硫簇釋放Fe2+，使Fe2+被Fenton反應(yīng)氧化，F(xiàn)enton反應(yīng)導(dǎo)致羥基自由基的形成，并對DNA、脂質(zhì)和蛋白質(zhì)產(chǎn)生破壞，導(dǎo)致細(xì)胞的死亡[2]。在這一過程中，由于細(xì)胞中氧化劑的產(chǎn)生和自身抗氧化應(yīng)激能力不足以清除過量的ROS，過量的ROS對細(xì)菌產(chǎn)生毒性造成細(xì)菌死亡，這在抗生素殺菌過程中起著重要的作用[2-3]。

圖1 抗生素誘導(dǎo)殺菌的機(jī)制Fig.1 The common mechanism of which antibiotics kill bacteria

活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)是細(xì)胞在有氧條件下進(jìn)行能量代謝產(chǎn)生的一類具有氧化活性的分子總稱，包括羥自由基(·OH)、超氧陰離子(O2·-)和過氧化氫(H2O2)等，它們在細(xì)菌的生理和病理發(fā)展中都起著十分重要的作用[4-5]。在真核生物中，細(xì)胞在正常生理代謝過程中形成的ROS被認(rèn)為是參與細(xì)胞生長、分化和死亡的重要信號介質(zhì)[4]，真核細(xì)胞中也存在自身的抗氧化機(jī)制來平衡過量的ROS，以便細(xì)胞能在適宜的環(huán)境中進(jìn)行生長代謝。在細(xì)菌中，ROS也能夠損傷核酸、蛋白質(zhì)和脂質(zhì)，當(dāng)胞內(nèi)ROS水平超過機(jī)體解毒作用和修復(fù)能力水平時(shí)導(dǎo)致細(xì)胞死亡[6]。過量的ROS不僅可以將細(xì)菌殺死，也能使細(xì)菌的某些基因發(fā)生突變，這也被認(rèn)為是細(xì)菌通過自發(fā)突變獲得抗生素耐受和耐藥性的方法之一。細(xì)菌對抗生素的耐受性是指細(xì)菌對抗生素的MIC不變，但其在抗生素存在時(shí)有較高存活率的一種狀態(tài)，在抗生素治療時(shí)，耐受細(xì)菌和耐藥細(xì)菌有著相同的生存優(yōu)勢，同時(shí)，在一定條件下，耐受細(xì)菌也較易發(fā)展為耐藥細(xì)菌，因此消除細(xì)菌耐受和耐藥問題也是在抗生素使用過程中噬待解決的問題[1,7]。雖然細(xì)菌可以通過轉(zhuǎn)錄調(diào)控的方式上調(diào)參與氧化應(yīng)激的蛋白KatG(hydroperoxidase I)、KatE(catalase II)、SoxS(DNA-binding transcriptional dual regulator SoxS)、OxyR(DNA-binding transcriptional dual regulator OxyR)和AhpCF(alkyl hydroperoxide reductase)等中和過量的ROS[8-12]，但是在抗生素作用下產(chǎn)生的大量ROS已經(jīng)超過細(xì)菌自身的解毒能力，因此通過使用外源ROS清除劑中和細(xì)胞內(nèi)過量的ROS能夠減少抗生素刺激產(chǎn)生的過量ROS對細(xì)菌遺傳物質(zhì)的損傷，從而增加細(xì)菌發(fā)生耐受和耐藥突變的頻率，也已經(jīng)成為研究細(xì)菌發(fā)生耐受和耐藥突變機(jī)制的一種常用方法[13-14]。

許多細(xì)菌感染復(fù)發(fā)與用抗生素治療細(xì)菌感染失敗都和細(xì)菌對抗生素耐受有關(guān)。對抗生素耐受性(tolerance)通常是指細(xì)菌在遠(yuǎn)高于最小抑菌濃度(minimum inhibitory concentration,MIC)劑量的殺菌抗菌劑作用下能短暫存活的能力[15]。目前最新界定細(xì)菌耐受的標(biāo)準(zhǔn)是細(xì)菌對抗生素具有較低的MIC，但有較高的殺死99%細(xì)菌所需的最短治療時(shí)間(minimum duration of treatment that is required to kill 99% of a bacterial population,MDK99)相對于非耐受菌株[16]。先前的研究報(bào)道在使用氟喹諾酮類抗生素奧索利酸和環(huán)丙沙星進(jìn)行MIC測定和殺菌曲線測定實(shí)驗(yàn)中添加ROS清除劑二甲基亞砜(dimethyl sulfoxide，DMSO)時(shí)并沒有改變細(xì)菌對這兩種抗生素的MIC但是增加了細(xì)菌對這兩種抗生素的MDK99相對于沒有添加ROS清除劑的對照組[17-18]，說明在細(xì)菌對抗生素的殺菌動(dòng)力學(xué)測定實(shí)驗(yàn)中添加ROS清除劑能夠增加細(xì)菌對抗生素的耐受性，但是目前并沒有文獻(xiàn)將ROS清除劑對細(xì)菌耐受性進(jìn)行綜述。本文主要通過對常見的外源ROS清除劑過氧化氫酶、硫脲、聯(lián)吡啶、二甲基亞砜、褪黑素在應(yīng)用方面的研究進(jìn)行了總結(jié)，并對不同的ROS清除劑對細(xì)菌耐受性的影響進(jìn)行了分析，以期待能更好的了解外源ROS清除劑的更為寬廣的應(yīng)用范圍和作用機(jī)制，從而對研究細(xì)菌藥物耐受及耐藥機(jī)制給予理論指導(dǎo)。

1 過氧化氫酶

過氧化氫酶(catalase,CAT)是一種比較常見的ROS清除劑(表1)，于1811年被泰納爾首次發(fā)現(xiàn)，其主要功能是將過氧化氫分解為O2和H2O，避免機(jī)體受到H2O2的損傷。常見的過氧化氫酶主要有3類：單功能過氧化氫酶、雙功能過氧化氫酶、非血紅素(錳)和小過氧化氫酶[19]。在有氧化應(yīng)激的細(xì)胞中，過氧化氫酶的存在能夠降解過多的H2O2，從而抑制Fenton反應(yīng)，減少細(xì)胞的死亡[21]。

表1 常見的ROS清除劑Tab.1 Common ROS scavengers

在細(xì)菌中過氧化氫酶的滅活或缺失能增強(qiáng)抗生素的殺菌能力，而過氧化氫酶的表達(dá)能減少細(xì)菌胞內(nèi)H2O2的濃度，提高細(xì)菌對抗生素的耐受性，從而減少抗生素對細(xì)菌的殺傷作用。特別在研究ROS引起的氧化應(yīng)激和抗菌性抗生素介導(dǎo)的ROS殺菌等問題上，過氧化氫酶發(fā)揮著重要的作用[13]。如通過青蒿琥酯滅活過的過氧化氫酶或敲除相關(guān)的過氧化氫酶合成基因可以增加抗生素的殺菌能力[22]；在銅綠假單胞菌中通過嚴(yán)謹(jǐn)反應(yīng)調(diào)節(jié)過氧化氫酶可以保護(hù)銅綠假單胞菌免受H2O2和抗生素介導(dǎo)的殺傷作用[23]；在呼吸道相關(guān)的機(jī)會(huì)致病菌和嗜水氣單胞菌等的存活中，過氧化氫酶也起著重要的調(diào)控作用[24-25]。

在植物和動(dòng)物等中，過氧化氫酶活性也起著十分重要的作用。在植物中，病原菌誘導(dǎo)的氧化還原核仁毒素Ⅰ(NRXⅠ)可以通過保護(hù)過氧化氫酶等，提高過氧化氫酶的解毒能力，從而保護(hù)細(xì)胞免受氧化應(yīng)激的損傷[26]；在水稻細(xì)菌性枯葉病中，由黃單胞菌和米曲霉編碼的CAT有助于細(xì)菌免受PCA(吩嗪-1-羧酸)誘導(dǎo)的壓力[27]。在動(dòng)物中，過氧化氫酶參與了體內(nèi)的多種生理反應(yīng)，如過氧化氫酶通過調(diào)節(jié)ROS的水平來參與宿主腸道與微生物的體內(nèi)平衡[28]；腫瘤細(xì)胞中的腫瘤因子P53和表沒食子兒茶素沒食子酸酯(EGCC)的抗癌功能也被認(rèn)為可能是通過保持過氧化氫酶的活性來抑制ROS的積累，以此保護(hù)正常細(xì)胞免受內(nèi)源性ROS的損傷[29-30]。在環(huán)境保護(hù)方面，污染環(huán)境中的過氧化氫酶可能在對活性氧的抗性及降解特定污染物等方面發(fā)揮著巨大的作用[31]。但CAT是一種酶，它在使用時(shí)對周圍環(huán)境較為敏感，比較容易失活。

2 硫脲

硫脲(又稱硫代尿素，thiourea)(表1)，是一種化工產(chǎn)品，常用于工業(yè)方面，如染料、樹脂等的原料，因其能與氧化劑發(fā)生強(qiáng)烈的化學(xué)反應(yīng)，在細(xì)菌和植物中也是一種良好的羥基自由基清除劑。

硫脲常用于研究抗生素殺菌，是由于過量的ROS產(chǎn)生的氧化毒性能導(dǎo)致細(xì)菌死亡，而非抑制濃度的硫脲的添加，能減少細(xì)菌胞內(nèi)羥基自由基的濃度，增加細(xì)菌對抗生素等引起ROS增多物質(zhì)的耐受性，從而提高細(xì)菌的存活率。Grantss等[32]發(fā)現(xiàn)在恥垢分枝桿菌和結(jié)核分枝桿菌的持留菌中維持有較高的溶解氧，當(dāng)抗生素處理時(shí)，細(xì)菌會(huì)發(fā)生死亡，而在其中加入硫脲后，細(xì)菌的存活率會(huì)大大的增加；在大腸埃希菌中，添加亞抑制濃度的硫脲會(huì)減少細(xì)菌內(nèi)羥基自由基的積累，使細(xì)菌不被氨芐西林、卡那霉素和環(huán)丙沙星3種殺菌性抗生素的殺死[18]；在亞致死濃度的抗生素處理的細(xì)菌中，會(huì)誘導(dǎo)細(xì)菌基因組發(fā)生突變，導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性的增加[33]，而加入硫脲能明顯減少抗生素誘導(dǎo)產(chǎn)生的耐藥突變[14]。精油中的主要成分含氧單萜檸檬醛和香芹酚是一種抗微生物劑，為研究其與常見的殺菌性抗生素的機(jī)制的異同，會(huì)添加硫脲作為ROS清除劑，來探究其機(jī)制是否與ROS有關(guān)[34]。在研究大腸埃希菌對脂肪酸的利用的實(shí)驗(yàn)中，添加硫脲能顯著降低胞內(nèi)的H2O2的濃度，減少H2O2對大腸埃希菌生長的抑制，促進(jìn)了脂肪酸轉(zhuǎn)變?yōu)長-賴氨酸，也為工業(yè)上L-賴氨酸的生產(chǎn)提供了很好的指導(dǎo)意義[35]。在農(nóng)業(yè)上，硫脲的使用也較為廣泛，在農(nóng)作物的葉片上施用硫脲不僅可以增強(qiáng)田間條件下不同作物的脅迫耐受性，也能增加農(nóng)作物的產(chǎn)量和含油量[36]。但硫脲在使用時(shí)會(huì)對環(huán)境和人造成較大的傷害，且容易致癌，使用過程中需做好防護(hù)措施。

3 聯(lián)吡啶

聯(lián)吡啶(bipyridine,DIP)主要有2,2'-聯(lián)吡啶和4,4'聯(lián)吡啶(表1)，是由三氯化鐵與吡啶反應(yīng)而得到的，主要用于有機(jī)合成，是醫(yī)藥中間體，本文主要闡述的是2,2'-聯(lián)吡啶的功能和用途。

2,2'-聯(lián)吡啶也是金屬離子螯合劑，在ROS的相關(guān)實(shí)驗(yàn)上，添加在細(xì)菌中時(shí)能很好地鰲合Fe2+，降低Fenton反應(yīng)的發(fā)生，減少ROS的產(chǎn)生，增加了細(xì)菌對相關(guān)物質(zhì)的耐受性，增強(qiáng)了其存活率。如在大腸埃希菌中，添加亞抑制濃度的的硫脲和2,2'-聯(lián)吡啶能夠顯著減少奧索利酸或諾氟沙星處理時(shí)細(xì)菌胞內(nèi)的羥基自由基的濃度，增強(qiáng)了大腸埃希菌對這兩種抗生素的耐受性，減少了對大腸埃希菌的殺死[37]；在其他探究鐵離子作用的相關(guān)抗生素和ROS實(shí)驗(yàn)方面，2-2'-聯(lián)吡啶也發(fā)揮了重要作用，在含有鮑曼不動(dòng)桿菌的培養(yǎng)基中，加入2-2'-聯(lián)吡啶來鰲合環(huán)境中的鐵，會(huì)使得其較易獲得多黏菌素抗性[38]；使用2-2'-聯(lián)吡啶預(yù)處理細(xì)胞也可以保護(hù)原核細(xì)胞和真核細(xì)胞免受金屬離子介導(dǎo)的過氧化氫分解引起的氧化作用對細(xì)胞造成的損傷[39-40]。同時(shí)在蠟狀芽胞桿菌的生物膜的研究中，使用2-2'-聯(lián)吡啶來降低環(huán)境中的鐵，當(dāng)環(huán)境中游離的鐵被清除時(shí)，蠟狀芽胞桿菌的生物膜形成會(huì)明顯減少[41]；在研究無胸腺嘧啶死亡(TLD)的機(jī)制過程中，為探究ROS與細(xì)菌內(nèi)TLD的關(guān)系時(shí)，添加無機(jī)化合物2-2'-聯(lián)吡啶作為ROS清除劑，顯著減少了細(xì)胞的死亡，探究結(jié)果也顯示ROS促進(jìn)了細(xì)菌內(nèi)的TLD[42]。

2,2'-聯(lián)吡啶也通常存在于許多生物活性天然產(chǎn)物的活性中心，在其中發(fā)揮著十分關(guān)鍵的作用。幾種常見的從藍(lán)色鏈霉菌或鏈霉菌屬等中分離出來的天然化合物，如caerulomycins、SF2738、collismycins和pyrisulfoxins等[43]，它們具有抗炎、抗菌或抗細(xì)胞毒性的作用。例如，caerulomycins A和caerulomycins C顯示出抗生素活性[44]；collismycins C具有較強(qiáng)的抗生物膜功能和較弱的抗生素活性和細(xì)胞毒性[43-45]；pyrisulfoxins A對小鼠白血病細(xì)胞有毒性[46]。但2,2'-聯(lián)吡啶的大量使用也會(huì)造成人的損傷和環(huán)境的污染，這是限制其使用的一個(gè)重要因素。

4 二甲基亞砜

二甲基亞砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)是種含硫的有機(jī)化合物，常溫下為液體，是一種良好的溶劑—既能溶解有機(jī)物又能溶解無機(jī)物，極性較強(qiáng)且沸點(diǎn)較高，有在較寬的溫度范圍內(nèi)保持液態(tài)的特性等，所以被稱為“萬能溶劑”(表1)。在體內(nèi)或體外實(shí)驗(yàn)中，DMSO經(jīng)常被用作溶劑溶解一些水溶性或水不溶性的藥物或測試樣品，且使用DMSO作為溶劑的藥物在進(jìn)行藥物MIC的測定時(shí)，會(huì)顯示更低且范圍更窄的MIC值。

DMSO也是一種有效的羥基自由基清除劑。非抑制濃度(1/2MIC或1/3MIC)的DMSO，能顯著減少氨芐西林、卡那霉素、環(huán)丙沙星和奧索利酸存在時(shí)細(xì)菌胞內(nèi)ROS的積累，增加細(xì)菌的對這些抗生素的耐受性，進(jìn)而提高細(xì)菌的存活率[17]；利用DMSO產(chǎn)生的甲烷和甲醛已經(jīng)被用于檢測和評估羥基自由基的產(chǎn)生對一些生物系統(tǒng)中的作用[47]。

DMSO在其他方面也有著很好的作用及應(yīng)用前景。在銅綠假單胞菌中，添加非抑制濃度的DMSO可以顯著地抑制其中的綠膿菌素的產(chǎn)生，從而降低銅綠假單胞菌的毒性[48]；在琥珀酸桿菌利用甘油的過程中，添加1%～4%的DMSO作為外部電子，會(huì)顯著提高甘油的消耗和琥珀酸的產(chǎn)生，這對生物催化利用甘油和琥珀酸的生產(chǎn)開辟了良好的應(yīng)用前景[49]；在DNA修復(fù)方面，DMSO能夠修復(fù)由γ-輻射誘導(dǎo)產(chǎn)生的單鏈DNA的斷裂[50]；在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方面，以大鼠為模型，現(xiàn)已證明DMSO能夠消除由硫代乙酰胺誘導(dǎo)的大鼠肝硬化，且也劑量依賴性地降低由慶大霉素導(dǎo)致血漿尿素濃度升高和肌酐濃度的升高，25%的DMSO能夠完全預(yù)防慶大霉素造成的腎毒性的發(fā)展[51]。這些都為DMSO的廣泛利用提供了實(shí)例。

5 褪黑素

褪黑素(N-乙?；?5-甲氧基色胺，melatonin)是一種色氨酸衍生的內(nèi)源性小分子物質(zhì)(表1)，于1958年在牛松果腺中被發(fā)現(xiàn)，隨后證明在微生物、植物、動(dòng)物中均存在，并參與機(jī)體的各種生理功能進(jìn)程。它對人體危害較小，暫時(shí)未發(fā)現(xiàn)其明顯的危害作用。褪黑素已被美國FDA批準(zhǔn)上市，在日常生活中，褪黑素也是一種常見的保健藥品，主要用于改善睡眠等癥狀。

高于生理濃度的褪黑素處理細(xì)菌時(shí)，細(xì)菌對環(huán)丙沙星(ciprofloxacin,Cip)的最小抑制濃度升高了，Cip對細(xì)菌的殺傷能力也降低了，這種現(xiàn)象被推測與褪黑素能減少由Cip殺菌時(shí)引起的ROS增多使細(xì)菌對Cip產(chǎn)生了耐受性有關(guān)[52]，但具體機(jī)制有待研究。褪黑素作為抗氧化劑，能夠有效的清除細(xì)菌胞內(nèi)的自由基，在許多體外細(xì)胞和體外組織等上均有良好的效果；褪黑素在清除自由基的同時(shí)，也能上調(diào)胞內(nèi)的幾種抗氧化酶的表達(dá)，如谷胱甘肽過氧化物酶、谷胱甘肽還原酶和過氧化氫酶等，從而加快自由基的清除[53]。

一定濃度下褪黑素也能有效地對抗各種細(xì)菌或病毒的感染，也能有效地清除胞內(nèi)的ROS。在多重耐藥的革蘭陽性菌耐甲氧西林金黃色葡萄球菌和革蘭陽性菌耐碳青霉烯類的銅綠假單胞菌和鮑曼不動(dòng)桿菌中，體外添加較低濃度的褪黑素會(huì)有明顯的抗菌作用，且抗菌作用在革蘭陰性菌中較革蘭陽性菌中好[54]；使用褪黑素也可以有效的控制結(jié)核分枝桿菌、幽門螺桿菌、支原體等引起的細(xì)菌感染或一些病毒感染[55-56]。

6 其他ROS清除劑

其他較常見的ROS有白藜蘆醇和谷胱甘肽。白藜蘆醇(resveratrol)(表1)，又稱芪三酚，是一種具有天然活性的多酚類抗氧化物，主要從植物中分離出，其中葡萄中含量較高。在體外實(shí)驗(yàn)中，在用抗菌素處理的大腸埃希菌和金黃色葡萄球菌中，亞抑制濃度(1/2MIC)的白藜蘆醇能通過減少細(xì)菌胞內(nèi)ROS的含量，增強(qiáng)它們對相關(guān)抗生素的耐受力，顯著地降低抗菌素對這些細(xì)菌的致死率，同時(shí)也能促進(jìn)細(xì)菌產(chǎn)生利福平耐藥突變體[57]。但白藜蘆醇對細(xì)菌也有一定的殺傷作用，這可能與白藜蘆醇的使用濃度有關(guān)。在大腸埃希菌中，白藜蘆醇對大腸埃希菌有一定的抗菌性，而這種殺傷作用是通過對其細(xì)胞膜上的位點(diǎn)進(jìn)行特異性損傷來介導(dǎo)的[58]；白藜蘆醇對食源性的人類致病菌傷寒沙門菌也有抗菌性，它能增加細(xì)菌外膜的滲透性和膜的去極化而使細(xì)菌被殺死[59]；白藜蘆醇對白念珠菌也有殺菌作用，但它在起作用的同時(shí)對人的紅細(xì)胞無溶血活性，是治療真菌感染的一種較好的藥物[6-61]；在癌癥及其他疾病方面，白藜蘆醇也有著很好的作用，如白藜蘆醇與鹽霉素聯(lián)用可以顯著增強(qiáng)白藜蘆醇的抗癌活性，與雷帕霉素聯(lián)用可以誘導(dǎo)膀胱癌細(xì)胞系的死亡，同時(shí)白藜蘆醇在預(yù)防胃癌、肥胖及代謝相關(guān)的病癥方面均有潛在價(jià)值[62-65]。

谷胱甘肽(glutathione,GSH)(表1)，是一種存在于人體細(xì)胞內(nèi)的三肽硫醇類的抗氧化劑，它有還原型和氧化型兩種，生理?xiàng)l件下還原型較為常見?？寡趸瘎┕入赘孰膶ΨZ酮類的抗生素殺菌有著很大地保護(hù)作用，且這種特點(diǎn)是氟喹諾酮藥物所特有的[66]，這與氟喹諾酮類抗生素產(chǎn)生ROS的能力有關(guān)，氟喹諾酮類產(chǎn)生ROS的能力較強(qiáng)，在使用GSH時(shí)能較完全的清除胞內(nèi)的ROS，使細(xì)菌對氟喹諾酮類藥物產(chǎn)生耐受性，從而能保護(hù)細(xì)菌不被氟喹諾酮類藥物殺傷。

GSH也能顯著降低細(xì)菌對抗生素的敏感性，如在大腸埃希菌中，改變細(xì)胞內(nèi)或細(xì)胞外的谷胱甘肽水平可以顯著影響其對環(huán)丙沙星及氨芐西林的敏感性[67]；臨床分離的耐碳青霉烯類的鮑曼不動(dòng)桿菌中也發(fā)現(xiàn)了類似現(xiàn)象，添加亞抑制濃度的谷胱甘肽與頭孢他啶、氨曲南、羧芐青霉素、美羅培南等抗生素聯(lián)用時(shí)會(huì)降低它們的MICs，且亞抑制的谷胱甘肽與美羅培南有著協(xié)同殺菌作用，這些為外源性的GSH與抗生素聯(lián)用來治療臨床上多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌感染提供了可能[68]；谷胱甘肽也能對金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌和銅綠假單胞菌等感染性細(xì)菌表現(xiàn)出明顯的濃度依賴性抑菌[69]。

7 展望

在常見的ROS清除劑中，每種清除劑不僅在作為ROS清除劑上有著良好的效果，也在其他方面也發(fā)揮著巨大的潛在作用。從其來源方面，過氧化氫酶和褪黑素為內(nèi)源性的物質(zhì)，而硫脲、聯(lián)吡啶和DMSO作為化工產(chǎn)品，屬于外來物質(zhì)，對機(jī)體有可能會(huì)產(chǎn)生其他的影響。不同的ROS清除劑使用時(shí)對機(jī)體的危害也不盡相同的，其中過氧化氫酶、褪黑素和谷胱甘肽作為內(nèi)源物質(zhì)對人體的危害可能較小，目前也未發(fā)現(xiàn)二者對人體有明顯的較大的傷害作用，白藜蘆醇作為植物中的提取物，對人體也屬于外來物質(zhì)，而其他幾種清除劑在使用時(shí)或多或少會(huì)對人體造成不可逆的損傷，因此，在選用ROS清除劑時(shí)不僅要關(guān)注其可能發(fā)揮的作用，也需要根據(jù)其使用效果及量的多少和使用頻率來確定相應(yīng)的清除劑。同時(shí)也期待更多的效果較好且對機(jī)體危害較小的ROS清除劑的發(fā)現(xiàn)。

此外，在很多殺菌抗菌劑殺菌機(jī)制的探究中關(guān)于ROS產(chǎn)生導(dǎo)致細(xì)菌死亡的機(jī)制研究中都會(huì)使用ROS清除劑，如硫脲，聯(lián)吡啶和DMSO等[18,37,42]，從而驗(yàn)證確實(shí)是ROS過量導(dǎo)致細(xì)菌死亡。但是，目前并沒有研究詳細(xì)報(bào)道每一種ROS清除劑所分解的具體ROS組分，實(shí)際上本研究還不能完全將這些ROS清除劑的具體功能細(xì)分，在未來的研究中我們期望能有更多相關(guān)的研究成果來填補(bǔ)這些不足，以期能更詳細(xì)的探究細(xì)菌對抗生素耐受的具體機(jī)制，為新藥靶的發(fā)現(xiàn)及新藥的開發(fā)提供理論基礎(chǔ)。