鄭州市婦幼保健院(450012)任志敏 陳慧萍 古雅麗
宮頸癌為現(xiàn)今女性群體中較為常見的惡性腫瘤,而宮頸鱗狀上皮病變(squamous intraepithelial lesion,SIL)在其發(fā)病中起到了重要作用[1]。病理學(xué)檢測為SIL診斷中的“金標(biāo)準”,但因缺乏客觀依據(jù),SIL的組織病理學(xué)診斷將受病理科醫(yī)師的主觀性及彼此間可變性因素影響,極易影響診斷結(jié)果,造成誤診或過度治療現(xiàn)象。目前生物學(xué)標(biāo)志物在SIL診斷中逐漸應(yīng)用,可為組織病理學(xué)診斷提供確切信息,其中p16作為抑癌基因,其在細胞周圍調(diào)控中發(fā)揮了重要作用,Ki-67屬于增殖細胞標(biāo)記物,免疫組化染色陽性則可判定細胞增殖活躍[2][3]。鑒于此,本研究將分析p16、Ki-67聯(lián)合應(yīng)用在SIL診斷中的應(yīng)用價值?,F(xiàn)報告如下。
1.1 一般資料 將2017年1~12月我院治療的宮頸各類病變患者117例作為研究對象,患者自愿參與,人乳頭瘤狀病毒(HPV-DNA)基因檢測、液基薄層細胞學(xué)(TCT)檢測結(jié)果異常,且經(jīng)蘇木素-伊紅染色(hematoxylin eosin,HE)病理檢測確診為慢性宮頸炎、宮頸上皮鱗狀化生、低級別鱗狀上皮病變(low-grade squamous intraepithelial lesions,LSIL)、CIN1-2、高級別鱗狀上皮病變(high-grade squamous intraepithelial lesions,HSIL) 患者各26例、4例、61例、10例、16例,其中年齡23~76歲,平均年齡(36.85±3.62)歲,入選病例均未實施放、化療治療。
1.2 方法 應(yīng)用免疫組織S-P法對入選者Ki-67、p16蛋白表達進行測定,其中兔抗人單克隆Ki-67抗體、小鼠抗人單體克隆P16抗體均由上?;蚩萍脊煞萦邢薰咎峁?,其中組織陽性對照為確診的陽性鱗癌組織切片。通過半定量方法分析免疫組化染色相應(yīng)細胞分布與強度,其中陽性細胞在基底層附近1~2層細胞分布為“+”;陽性細胞在上皮內(nèi)<1/3部位分布為“++”;在上皮內(nèi)<2/3部位分布為“+++”;在上皮細胞內(nèi)≥2/3處分布為“++++”。Ki-67陽性細胞呈棕黃色顆粒狀,定位于細胞核,但Ki-67陽性細胞僅在副基底層、基底層時分布可判定為陰性;若Ki-67陽性細胞于上皮的上2/3分布則可判定為陽性;p16陽性細胞呈棕黃色顆粒狀,定位于細胞核或細胞質(zhì),但若細胞核未著色,僅出現(xiàn)細胞質(zhì)著色可診斷為陰性;宮頸良性病變:Ki-67、p16均為陰性,LSIL(CIN1):Ki-67(++)、p16(+)和(++);HSIL(CIN2-3):Ki-67、p16≥(+++)。
1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計學(xué)軟件,計數(shù)資料以百分數(shù)和例數(shù)表示,比較采用χ2檢驗,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2.1 Ki-67、p16檢測結(jié)果 通過觀察Ki-67、p16檢測結(jié)果對原病理診斷情況進行修訂,其中宮頸上皮鱗狀化生中的4例患者更正診斷1例為HSIL,慢性宮頸炎中的26例患者仍診斷為慢性宮頸炎,LSIL中的61例患者中41例患者為LSIL,其余患者(16例)更正診斷HSIL,CIN1-2中的4例患者更正診斷為為LSIL、6例更正診斷為HSIL,HSIL中的14例患者診斷仍為HSIL,2例患者更正診斷為LSIL,而Ki-67、p16免疫組化染色更正診斷前、后HSIL、LSIL患者占比比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=8.518,P=0.004)。
2.2 Ki-67、p16診斷效能 LSIL患者中p16檢測均為陰性,陽性率為0.00%(0/51),HSIL病例中僅有1例患者p16檢測呈陰性,其余均為陽性,陽性率為97.30%(36/37),LSIL、HSIL患者中的p16陽性率對比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=83.975,P=0.000)。Ki-67在LSIL、HSIL陽性率分別為21.57%(11/51)、67.57%(25/37),LSIL、HSIL患者中的Ki-67陽性率對比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=18.769,P=0.000)。而將Ki-67、p16聯(lián)合用于HSIL檢測中的敏感度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值見附表。
附表 Ki-67聯(lián)合p16檢測結(jié)果(%)
宮頸癌發(fā)病、進展屬于一個漸進過程,故強化對癌前病變、早期宮頸癌的診斷及進展進行預(yù)測極為重要。增殖作為細胞特別是腫瘤細胞的主要生物行為,其在惡性腫瘤發(fā)病中發(fā)揮了重要作用,其中與細胞增殖相關(guān)的標(biāo)志物在腸癌、乳腺癌、胃癌等惡性腫瘤中均有過度表達現(xiàn)象,而在女性生殖道腫瘤病變中也具備了上述特征[4]。
p16基因?qū)儆诩毎芷谡{(diào)控基因,可利用成視網(wǎng)膜細胞瘤蛋白質(zhì)通路而對細胞增殖、細胞周期進展進行控制。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn),若細胞被HPV-DNA感染,可導(dǎo)致其細胞中的HPV腫瘤蛋白E7對成視網(wǎng)膜細胞瘤蛋白質(zhì)功能造成損傷,進而可影響轉(zhuǎn)錄因子與其間的結(jié)合作用,促使細胞增殖失調(diào),p16蛋白過表達[5]。Ki-67屬于細胞增殖標(biāo)志物,而Ki-67分布于宮頸鱗狀上皮部位與SIL病變級別間具有密切聯(lián)系,可作為SIL病變級別判斷中的敏感指標(biāo),同時其免疫組化檢測也多被臨床用于判斷多種腫瘤的增殖活性中。郭艷敏[6]等研究中將Ki-67、p16用于宮頸鱗狀上皮病變及慢性宮頸炎診斷中,其研究結(jié)果得出,Ki-67、p16聯(lián)合檢測可改善宮頸鱗狀上皮病變及慢性宮頸炎診斷效能,提升病變分級診斷率,是宮頸癌早期篩查的有效手段。本次研究結(jié)果得出,p16、Ki-67在HSIL、LSIL患者中的陽性率對比差異顯著,而將Ki-67、p16免疫組化染色更正診斷前、后的HSIL、LSIL病例占比比較也存在較大的差異性,同時兩者聯(lián)合檢測特異度較高,由此可見,Ki-67、p16可作為SIL診斷中的敏感指標(biāo),利于對SIL進行篩查,并可對SIL分級情況進行預(yù)測,以良好判斷SIL病變進展,降低漏診、誤診幾率,減少患者過度治療現(xiàn)象。
綜上所述,可將p16、Ki-67聯(lián)合檢測作為SIL中的輔助診斷方法,這利于預(yù)測宮頸病變的進展,提升宮頸病變診斷的效能。