納米硒和大蒜油對公兔生長、養(yǎng)分消化和精液品質的影響

隨著我國家兔產業(yè)迅速發(fā)展，急需在應用研究方面得到相應突破。隨著納米技術的應用，納米顆?？梢宰鳛槿占Z中微量礦物質的補充來源，這些微量礦物質具有一些不同于普通礦物質的新特性（張南南等，2017）。硒是動物生長、繁殖、激素生成、生理參數和代謝及體內外器官必不可少的微量元素。硒可以以有機、無機或納米顆粒的形式進行補充，但硒納米粒子與其他硒源相比具有效率相當、生物利用度高、催化效率高、吸附能力強、毒性低等特點（付學鋒等，2008）。硒可以提高動物生產性能和抗氧化狀態(tài)，大蒜油具有促進生長、繁殖、激素分泌和動物新陳代謝的功能。飼糧中添加0.5 g/kg大蒜油對家兔睪丸重量、抗氧化狀態(tài)和睪酮激素有積極影響（El-Desoky N等，2017）。大蒜油還可以改善家兔免疫反應，降低血脂和肝臟的脂質過氧化，增加肝臟抗氧化活性。家兔日糧硒水平具有很大差異，添加水平從0.05～0.4 mg/kg（Amer等，2019）。關于硒在雄性家兔營養(yǎng)中的生物學價值有待進一步研究。本研究主要比較了納米硒或大蒜油及二者組合對雄性家兔營養(yǎng)物質消化率、精液質量、睪酮和血液代謝物的影響，以期為其在雄性家兔中的應用提供依據。

1 材料與方法

1.1 試驗動物、日糧和飼養(yǎng)管理 將160只新西蘭白兔（120日齡、雄性、普通級）隨機分為4組，每組40只（10只/重復）。試驗動物生產許可證：SCXK（魯）20150001，試驗動物質量合格證：0002026。對照組飼喂基礎日糧，大蒜油組在基礎日糧中添加600 mg/kg大蒜油，納米硒組在基礎日糧中添加0.4 mg/kg納米硒，大蒜油+納米硒組在基礎日糧中添加0.4 mg/kg納米硒和600 mg/kg大蒜油，試驗從家兔120日齡開展到180日齡。日糧配方及營養(yǎng)水平見表1。采用不銹鋼代謝籠（寬×長×高：44 cm×50 cm×35 cm），配置自動飲水器和手動喂料機，在整個試驗期間，試驗環(huán)境每天光照12 h，黑暗12 h，室內自然通風，室內溫度26～31℃，相對濕度為45%～65%。在試驗周期內，每周稱量一次家兔體重，記錄每周飼料用量，試驗結束后計算日增重、日采食量和料重比。

表1 日糧原料組成及營養(yǎng)成分

1.2 養(yǎng)分消化試驗 試驗結束前4 d開展消化試驗，每組選擇20只兔子隨機單獨在代謝籠中飼養(yǎng)，糞便和尿液分離。4 d內每天記錄采食量，并收集每個代謝籠兔子的糞便，匯總、稱重，-20℃保存。糞便樣品在60℃干燥48 h，同時收集飼料樣品。飼料和糞樣用于分析常規(guī)養(yǎng)分。

養(yǎng)分消化率%=（養(yǎng)分攝入量-糞養(yǎng)分含量）/養(yǎng)分攝入量×100。

1.3 精液質量與血液指標 試驗結束時采用假陰道收集家兔精液，記錄體積，用伊紅美藍染色法對200個精子細胞進行計數，評估活精子、死精子和異常精子占比。完整或部分紫紅色的精子細胞判定為死精，沒有染色的精子細胞判定為活精。采用光學顯微鏡，在100×放大倍數下，對精液標本在多個視野下進行直線運動精子百分率的判定。每個重復選擇10只家兔耳緣靜脈采血10 mL，分離血清，樣品用于測定尿素氮、尿素、肌酸酐和睪酮水平以及谷丙轉氨酶（ALT）、谷草轉氨酶（AST）活力。

1.4 統計分析 數據統計分析采用2×2方差分析的方法，試驗中兩個主因素是納米硒和大蒜油，利用SAS軟件一般線性模型分析納米硒、大蒜油的主要作用，以及納米硒與大蒜油之間的相互作用。用Ducan’s法進行多重比較，P＜0.05表示差異顯著，0.05＜P＜0.1表示有差異顯著趨勢。

2 結果與分析

2.1 生長性能 由表2可知，在整個試驗期間，動物沒有死亡，總體健康狀況良好，與不添加硒組相比，添加納米硒組動物的末重和日增重均顯著增加（P＜0.05）。各處理組對采食量無顯著影響（P＞0.05），但與不添加硒組相比，添加納米硒組的料重比得到顯著改善（P＜0.05）。

2.2 養(yǎng)分消化 在試驗周期內（120～180 d），日糧添加納米硒、大蒜油或其組合對公兔的干物質、有機物、粗蛋白質和粗纖維消化率均有影響（表3）。日糧單獨添加納米硒顯著提高粗脂肪消化率（P＜0.05），增加干物質、有機物、粗蛋白質和粗纖維的消化率，但與不添加硒組相比，這些項目的影響均不顯著（P＞0.05）。日糧單獨添加大蒜油與未添加組相比顯著提高干物質、有機物、粗蛋白質、粗脂肪、粗纖維消化率（P＜0.05）。此外，納米硒與大蒜油對干物質、有機物、粗蛋白質、粗脂肪和粗纖維消化率的影響具有顯著交互作用（P＜ 0.05）。

表2 納米硒和大蒜油對公兔生長性能的影響

2.3 精液質量 由表4可知，在試驗結束時，日糧添加納米硒、大蒜油或其組合均顯著增加兔子的精液量、精子存活率和精子活力（P＜0.05）。納米硒與大蒜油對精液量有顯著影響（P＜0.05），但對精子存活率無顯著影響（P＞0.05）。納米硒、大蒜油及其組合對精液pH無顯著影響（P＞0.05）。與不添加硒和大蒜油的雄性家兔相比，添加硒和大蒜油的雄性家兔精子異常率顯著降低（P＜0.05）。但納米硒與大蒜油對雄性家兔精子異常率具有顯著交互作用趨勢（P=0.06）。

2.4 血液生化指標 由表5可知，飼喂納米硒或大蒜油或兩者混合飼料的兔子，與未添加組相比，血清ALT和AST活性顯著降低（P＜0.05）。與未添加硒組相比，添加納米硒、大蒜油或其組合對家兔血清尿素氮、尿素和肌酸酐均顯著降低（P＜0.05）。另一方面，大蒜油和納米硒對血清肌酸酐水平的影響無顯著交互效應（P＞0.05）。日糧同時添加大蒜油和納米硒較單獨添加這兩種物質顯著提高了血清睪酮水平（P＜0.05），同時大蒜油和納米硒對血清睪酮水平的影響具有顯著交互效應（P＜0.05）。

表3 納米硒和大蒜油對雄性家兔養(yǎng)分消化率的影響

表4 納米硒和大蒜油對雄性家兔精液質量的影響

表5 納米硒和大蒜油對雄性家兔血液生化指標的影響

3 討論

硒具有重要的生物學功能，是正常動物生長繁殖所必需的元素，可以調控機體能量、蛋白質合成、代謝及氧化應激。目前關于家兔對硒的需要量推薦標準不一，如De Blas報道，在家兔飼料中添加少量硒（0.05 mg/kg）是可行的，而Strucklec等（1994）報道，在雌性新西蘭白兔日糧中添加0.1和0.3 mg/kg的硒可以促進生長，提高繁殖性能。本研究中，在日糧中添加0.4 mg/kg納米硒再補充大蒜油可以提高公兔的體重，這種作用可能與納米硒單獨或與大蒜油聯合使用可提高營養(yǎng)物質消化率的能力有關。硒和植物源添加劑可體現出抗氧化活性，改善了日糧營養(yǎng)物質的消化和吸收（Mahima等，2012），從而提高本研究中家兔的生長性能和生產效率。

關于納米硒或硒源對家兔營養(yǎng)物質消化率的影響，目前相關試驗研究還很有限。日糧添加0.4 mg/kg納米硒可以顯著改善雄性家兔干物質、有機物、粗蛋白質、粗脂肪的消化率，其原因可能與硒提高家兔抗熱應激能力有關。此外，Saleh等（2013）的研究顯示，與對照組相比，在家兔日糧中添加亞麻仁油和0.3 mg/kg硒可顯著提高蛋白質消化率和能量利用率，分別達到20%和11%。但與本研究中沒有添加大蒜油的處理組比較，添加大蒜油也可以提高家兔養(yǎng)分消化率，同時納米硒與大蒜油對養(yǎng)分消化率的影響具有交互效應。

在試驗結束時收集的精液中，納米硒組在精液量、精子存活率和精子活力各方面均有顯著提高。硒通過提高精子質量和數量來改善繁殖性能和 抗氧化應激（Abdulrashid 和 Juniper，2016）。與熱應激條件下的對照組相比，添加硒后公兔的精液量、運動性、精子濃度、活精子數和正常精子數均顯著增加（Kamel，2012）。在本研究中，與未添加大蒜油組相比，在60 d的試驗日糧中添加大蒜油可以增加精液量、精子存活率和精子活力。大蒜油對精液量和精子質量的積極影響可能是通過抗氧化防御機制，如調節(jié)細胞色素P450酶（Ghalehkandi，2014）。

此外，日糧添加納米硒顯著降低了血清尿素、肌酸酐、尿素氮、谷丙轉氨酶和谷丙轉氨酶活性，并提高血清睪酮水平，這些結果表明，納米硒可以改善家兔的肝腎功能，從而減輕環(huán)境高溫的不利影響，這與Kamel（2012）的結果一致。

4 結論

日糧單獨添加0.4 mg/kg納米硒或600 mg/kg大蒜油或其混合物可以提高公兔營養(yǎng)物質消化率、改善肝臟和腎臟功能及精液質量，大蒜油和納米硒對上述指標的改善作用具有交互效應。