乳清粉對湖羊羔羊瘤胃組織發(fā)育的影響

王毅，王婕姝，劉建國，田斌，陳亮

（1.蘭州市畜牧獸醫(yī)研究所，蘭州 730050；2.吉林省蠶業(yè)科學研究院，吉林 132299）

目前，我國舍飼肉羊養(yǎng)殖普遍采用60日齡左右斷奶的生產方式。由于母羊泌乳量在羔羊出生后3～4周開始下降[1]，且此時羔羊采食量較小、消化飼草料能力較低，顯然僅靠母乳供應營養(yǎng)已不能滿足其生長發(fā)育的需要。過分依戀母乳可造成采食營養(yǎng)物質不足、養(yǎng)分消化率低、消化器官發(fā)育滯后、斷奶應激大等問題[2～4]；母乳不足時，羔羊會出現(xiàn)異食癖等諸多問題，而早期補飼是預防這一現(xiàn)象的有效措施。幼齡反芻動物較早采食固體飼料可有效提高其采食量、促進消化器官生長，降低死亡率和發(fā)病率，給哺乳羔羊補飼固體飼料是促進羔羊生長和瘤胃功能發(fā)育的重要策略。因此，羔羊開食料的使用越來越受到重視。

飼料級乳清粉一般含有61%～70%的乳糖和2%～12%的粗蛋白質，適口性好，作為必不可少的能量來源在早期斷奶仔豬日糧中已廣泛應用[5]。雖然，目前我國對羔羊的早期斷奶及代乳料已有研究，但在將乳清粉作為羔羊早期固體補飼顆粒飼料添加方面研究較少。為了探索解決湖羊羔羊的成活問題、促進母羊增產增效，本課題組在已有早期羔羊強制補飼試驗研究與飼喂模式基礎上，研究在強制補飼開食料中添加不同比例的乳清粉對瘤胃組織形態(tài)發(fā)育的影響，以期為乳清粉在羔羊早期斷奶中的實踐應用提供理論指導。

1 材料與方法

1.1 試驗動物及設計

采用單因子完全隨機試驗設計，選擇出生健康、生長發(fā)育正常的湖羊羔羊30只，按組間初生重（3.49±0.46kg）相近原則分為3個處理組。A組在出生后7d開始補飼1號開食料（含5%的乳清粉），B組在出生后7d開始補飼2號開食料（含2%的乳清粉），C組作為對照組在出生后7d開始補飼3號開食料（不含乳清粉）。每個處理組10個重復，每個重復1只，分組后，試驗羔羊初生重經(jīng)方差分析檢驗，差異不顯著（P＞0.05）。

1.2 飼養(yǎng)管理及飼糧配方

試驗羔羊按組分欄飼養(yǎng)，母羊隨羔羊分群，母羊飼喂全混合日糧（青貯玉米30%，燕麥草10%，大麥草10%，玉米35%，豆粕5%，胡麻渣2.5%，麩皮5%，預混料2.5%；營養(yǎng)水平為DE 9.41 MJ/kg，CP13.90%，Ca 0.36%，P 0.42%）。試驗于2018年6～7月在蘭州市七里河區(qū)萬山養(yǎng)殖種植農民專業(yè)合作社養(yǎng)殖基地內進行，各組間飼養(yǎng)管理條件完全一致。試驗羔羊7日齡開始在強制隔離補飼欄（由項目組設計，實用新型專利公開號：CN207612865U）內食槽添加飼喂開食料進行補飼，試驗組補飼采用少喂勤添的方法，補料槽中始終有開食料。在7～15d時，逐漸延長羔羊在補飼欄內時間，從15d起，除10:30～12:00和20:30～22:00總計3h時長自由哺乳外，其余時間羔羊均被強制隔離于補飼欄內。圈舍每兩周徹底消毒1次。

1.3 開食料配方及營養(yǎng)水平

開食料配方及營養(yǎng)水平見表1。乳清粉由荷蘭紐維德公司生產，為牛乳來源。補飼開食料采用平模制粒機加工制作成顆粒飼料，壓縮比1:6，顆粒直徑2～2.5mm。

表1 開食料配方及營養(yǎng)水平（干物質基礎）

1.4 樣品采集及試驗方法

試驗羔羊分別于21和42日齡屠宰采樣，每組在每個時間點隨機屠宰3只羔羊。頸部放血屠宰后立即剖腹，取出瘤胃，采集瘤胃背囊、腹囊組織樣品各3塊，所有樣品均投入4%多聚甲醛溶液中固定，用于制作組織切片及光學顯微鏡觀察。從固定好的組織樣品取材，經(jīng)不同濃度乙醇逐級脫水，二甲苯透明，浸蠟，進行石蠟包埋。然后每個樣品均制作3張切片，切成5μm的切片，貼片烘片后，用蘇木精-伊紅（H.E）染色，中性樹膠封片。每張切片選3個典型視野（組織完整），用Imagevie軟件數(shù)碼顯微系統(tǒng)觀察瘤胃的組織學形態(tài)并測量瘤胃腹囊、背囊乳頭長度和寬度及肌層的厚度。

1.5 數(shù)據(jù)處理

用SPSS 19.0 統(tǒng)計分析軟件對數(shù)據(jù)進行獨立樣本T檢驗，試驗結果以Mean±SE表示。P＜0.05作為差異顯著的判斷標準。

2 結果與分析

2.1 乳清粉對21日齡及42日齡羔羊瘤胃乳頭高度發(fā)育的影響

由表2可知，21日齡羔羊瘤胃背囊乳頭高度A組與B組差異不顯著，A組顯著高于C組（P＜0.05）。且瘤胃背囊乳頭高度在三個試驗組之間表現(xiàn)為A組＞B組＞C組。瘤胃腹囊乳頭高度的變化在三組之間表現(xiàn)為差異不顯著（P＞0.05）。42日齡羔羊瘤胃背囊乳頭高度A組極顯著高于B、C組（P＜0.05），B組與C組差異不顯著（P＞0.05）。瘤胃腹囊乳頭高度三組間差異不顯著（P＞0.05）。結果顯示，A、B兩組乳清粉的添加均增加了42日齡羔羊瘤胃背囊腹囊乳頭高度。

表2 乳清粉對21日齡及42日齡羔羊瘤胃乳頭高度的影響

2.2 乳清粉對21日齡及42日齡羔羊瘤胃乳頭寬度發(fā)育的影響

由表3可知，21日齡羔羊瘤胃背囊乳頭寬度C組極顯著低于A組（P＜0.05），在三組間C組最低。而瘤胃腹囊乳頭寬度，以A組最高，B組最低。42日齡羔羊瘤胃背囊乳頭寬度B組極顯著高于A組及C組（P＜0.05）。瘤胃腹囊乳頭寬度的變化在各組之間表現(xiàn)為差異不顯著（P＞0.05）。

表3 乳清粉對21日齡及42日齡羔羊瘤胃乳頭寬度的影響

2.3 乳清粉對21日齡及42日齡羔羊瘤胃黏膜上皮角化層厚度變化的影響

由表4可知，21日齡羔羊瘤胃黏膜上皮角化層厚度，在三組之間表現(xiàn)為差異不顯著（P＞0.05），且瘤胃黏膜上皮角化層厚度背囊以B組最厚，腹囊以A組最厚。42日齡羔羊瘤胃腹囊黏膜上皮角化層厚度B組顯著高于A組（P＜0.05）。

表4 乳清粉對21日齡及42日齡羔羊瘤胃黏膜上皮角化層厚度變化的影響

2.4 乳清粉對21日齡及42日齡羔羊瘤胃黏膜肌層厚度變化的影響

由表5可知，21日齡羔羊瘤胃背囊黏膜肌層厚度的變化在三組之間表現(xiàn)為差異不顯著（P＞0.05），腹囊黏膜肌層厚度C、B組顯著高于A組（P＜0.05）。42日齡羔羊瘤胃背囊黏膜肌層厚度B組顯著低于A組、C組（P＜0.05）。瘤胃腹囊黏膜肌層厚度C組極顯著高于B組（P＜0.05）。

表5 乳清粉對21日齡及42日齡羔羊瘤胃黏膜肌層厚度變化的影響

3 討論

3.1 乳清粉對羔羊瘤胃乳頭發(fā)育的影響

羔羊瘤胃的黏膜層形成許多的乳頭，隨著羔羊的生長和粗飼料的添加，瘤胃的黏膜乳頭開始發(fā)育。在哺乳期，羔羊的乳頭處于完全不發(fā)育狀態(tài)，當飼料中混入粗飼料或精料以及瘤胃內發(fā)酵開始時，瘤胃的乳頭迅速增大。瘤胃乳頭高和乳頭寬等形態(tài)學結構，決定了瘤胃上皮對養(yǎng)分吸收和離子的轉運能力[6～8]。本研究比較了在強制補飼開食料中添加不同含量的乳清粉對21日齡和42日齡羔羊瘤胃發(fā)育的影響，結果在21日齡時A組與B組差異不顯著，說明5%與2%乳清粉對羔羊瘤胃早期發(fā)育影響不大。但在42日齡時，瘤胃背囊乳頭高度A組極顯著高于B組和C組，說明5%乳清粉對羔羊瘤胃發(fā)育有較好作用。A、B兩組添加乳清粉開食料增加了21日齡羔羊瘤胃背囊和42日齡羔羊瘤胃腹囊乳頭寬度。有研究[9～11]發(fā)現(xiàn)，隨精飼料的增加，瘤胃乳頭寬顯著降低，瘤胃乳頭寬度與粗飼料攝入量呈正相關，也有研究報道[12,13]乳頭寬度與長度呈負相關。影響乳頭變化的原因很多，本試驗中21日齡B組乳頭寬度低的原因可能是長度增加所引起的。

3.2 乳清粉對羔羊瘤胃黏膜上皮角化層及肌層厚度變化的影響

羔羊瘤胃胃壁主要由黏膜、黏膜下層、肌層和漿膜四部分組成。有資料顯示，瘤胃黏膜上皮角質層厚度變化的原因主要是精料中的干物質較多，而干物質不僅需要在瘤胃中發(fā)酵、分解，同時需要瘤胃強烈收縮和舒張來完成機械消化，促使瘤胃黏膜角化層增厚；而肌層厚度變化也可能是因為胃壁在消化時進行強烈的機械性消化，使胃壁的肌肉得到運動，從而使得肌層厚度發(fā)生變化[14,15]。三種不同的補飼料對21日齡羔羊瘤胃黏膜上皮角化層厚度均沒有顯著影響，A、B組添加乳清粉補飼均增加了42日齡羔羊瘤胃黏膜上皮角化層厚度，相比較之下，B組補飼對羔羊瘤胃黏膜上皮角化層厚度的刺激較好，可能是因為隨日齡增加采食量逐漸增加，固體飼料的采食可以提高瘤胃的運動水平，促進瘤胃乳頭較硬角化程度高[16]。

4 結論

飼喂開食料能夠促進瘤胃發(fā)育，且出生后7日齡開始補飼含5%乳清粉的開食補飼料對瘤胃組織發(fā)育促進作用明顯。