MS-222和丁香酚對(duì)暗紋東方鲀幼魚麻醉效果的比較研究

郝長(zhǎng)杰，莊 平，3，趙 峰，3，張 濤，3，黃曉榮，方可菲，蔣 俊

（1.水產(chǎn)科學(xué)國(guó)家級(jí)實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心，上海海洋大學(xué)，上海 201306；2.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院東海水產(chǎn)研究所，上海 200090；3.農(nóng)業(yè)農(nóng)村部東海與長(zhǎng)江口漁業(yè)資源環(huán)境科學(xué)觀測(cè)實(shí)驗(yàn)站，上海 200090）

暗紋東方鲀（Takifugu obscurus），俗稱河豚，隸 屬 鲀 形 目 （Tetraodontiformes），鲀 科（Tetraodontidae），東方鲀屬，屬江海洄游性魚類，主要分布于我國(guó)的黃海、渤海、東海和長(zhǎng)江中下游及其通江湖泊［1］。暗紋東方鲀具有個(gè)體大、生長(zhǎng)速度快、肉質(zhì)鮮嫩、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高等優(yōu)點(diǎn)，曾是長(zhǎng)江口及下游江段重要的漁業(yè)捕撈對(duì)象之一，目前已經(jīng)成為我國(guó)主要的養(yǎng)殖河鲀種類［2-3］。由于過(guò)度捕撈、環(huán)境污染等諸多因素，導(dǎo)致暗紋東方鲀天然資源嚴(yán)重衰退，20世紀(jì)80年代后已不能形成漁汛。增殖放流是恢復(fù)天然資源、維持生態(tài)平衡的重要手段之一［4-5］，但放流過(guò)程中標(biāo)志、運(yùn)輸?shù)拳h(huán)節(jié)會(huì)對(duì)魚體造成刺激和損傷，麻醉是減少魚體應(yīng)激反應(yīng)、提高放流成活率的重要技術(shù)手段。

麻醉劑因能夠起到一定的鎮(zhèn)定麻痹作用，被廣泛應(yīng)用到水產(chǎn)動(dòng)物的生產(chǎn)、運(yùn)輸?shù)阮I(lǐng)域［6］。目前，可用于水產(chǎn)動(dòng)物的麻醉劑種類繁多，有丁香酚、MS-222、苯唑卡因、2-苯氧乙醇等近30余種，其中在養(yǎng)殖和生產(chǎn)上使用最多的是MS-222和丁香酚［7-8］。MS-222是水產(chǎn)動(dòng)物中普遍認(rèn)為非常安全、有效的一種麻醉劑，在全世界范圍內(nèi)得到廣泛應(yīng)用；丁香酚提取自丁香樹(shù)的莖葉和花朵，其優(yōu)點(diǎn)是廉價(jià)易得，但具有較強(qiáng)的揮發(fā)性，藥效會(huì)隨著時(shí)間的延長(zhǎng)逐漸減弱［9-10］。目前，國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)暗紋東方鲀麻醉研究的相關(guān)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)研究MS-222和丁香酚兩種麻醉劑在不同濃度、不同水溫及麻醉后在空氣中不同的暴露時(shí)間對(duì)暗紋東方鲀幼魚麻醉效果的影響，以期為暗紋東方鲀的養(yǎng)殖生產(chǎn)、增殖放流等研究提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

本實(shí)驗(yàn)于2018年11月在中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院東海水產(chǎn)研究所實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)幼魚平均全長(zhǎng)（14.01±0.21）cm，平均體質(zhì)量（71.37±3.24）g，于12 m3循環(huán)水養(yǎng)池中暫養(yǎng)1月。實(shí)驗(yàn)用水為鹽鹵和曝氣自來(lái)水配制而成，水溫（15.90±0.10）℃，鹽度 8.50±0.10，pH 7.80±0.10，保持溶氧7.50 mg·L-1以上，實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前停食24 h。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥品

MS-222（北京格林恒興生物科技有限公司），水溶液呈弱酸性，為減少麻醉時(shí)產(chǎn)生的應(yīng)激反應(yīng)，使用時(shí)與碳酸氫鈉按質(zhì)量比1∶1混合溶于水。

丁香酚（國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司），幾乎不溶于水，為提高溶解效率，使用時(shí)按質(zhì)量比1∶5溶于酒精后再溶于水。

1.3 暗紋東方鲀幼魚麻醉及復(fù)蘇過(guò)程分期及預(yù)實(shí)驗(yàn)設(shè)置

實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，先進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。水溫（15.90±0.10）℃條件下，MS-222和丁香酚各設(shè)置10、20、30、40、50、60、70、80 mg·L-18個(gè)質(zhì)量濃度梯度組，每組10尾魚，各設(shè)2個(gè)平行，記錄魚的麻醉、復(fù)蘇時(shí)間并觀察最終麻醉狀態(tài)及復(fù)蘇情況。根據(jù)劉長(zhǎng)琳等［7］的研究，同時(shí)結(jié)合暗紋東方鲀幼魚自身的行為特征對(duì)整個(gè)過(guò)程進(jìn)行分期。

暴露時(shí)間梯度先進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，在水溫（15.90±0.10）℃條件下設(shè) 5、10、15、20、25 min 5個(gè)時(shí)間梯度。每組10尾魚，各設(shè)2個(gè)平行，觀察復(fù)蘇過(guò)程中的行為表現(xiàn)，記錄復(fù)蘇時(shí)間及成活率。基于以上預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果開(kāi)展以下實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。

1.4 MS-222和丁香酚對(duì)暗紋東方鲀幼魚麻醉及復(fù)蘇時(shí)間的確定

參考MARKING等［11］的研究結(jié)果，有效質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)為：實(shí)驗(yàn)用魚在3 min內(nèi)麻醉、5 min內(nèi)復(fù)蘇，且麻醉時(shí)間長(zhǎng)達(dá)15 min后成活率為100%。根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，設(shè)置MS-222濃度梯度為 100、110、120、130、140、150、160、170 mg·L-18個(gè)梯度組，丁香酚濃度梯度為50、60、70、80、90、100、110、120 mg·L-18個(gè)梯度組。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，先將魚放到實(shí)驗(yàn)桶中適應(yīng)到穩(wěn)定階段，再加入麻醉劑，每組放10尾魚，各設(shè)3個(gè)平行，實(shí)驗(yàn)時(shí)仔細(xì)觀察每條魚的活動(dòng)狀態(tài)及行為特征，到達(dá)麻醉6期時(shí)，及時(shí)撈出，放入潔凈的海水中復(fù)蘇。記錄每尾魚到達(dá)麻醉6期和復(fù)蘇4期時(shí)所需的時(shí)間及成活率。其中，麻醉時(shí)間是指麻醉劑放入實(shí)驗(yàn)桶中后實(shí)驗(yàn)魚到麻醉6期所用的時(shí)間；復(fù)蘇時(shí)間指魚放入潔凈海水中后到復(fù)蘇4期時(shí)所需要的時(shí)間。

1.5 MS-222和丁香酚在不同水溫下對(duì)暗紋東方鲀幼魚的麻醉效果

根據(jù)1.3和1.4實(shí)驗(yàn)結(jié)果，MS-222和丁香酚有效質(zhì)量濃度分別為120～140 mg·L-1和60～70 mg·L-1。選擇130 mg·L-1的 MS-222和60 mg·L-1的丁香酚進(jìn)行不同水溫對(duì)暗紋東方鲀幼魚麻醉及復(fù)蘇的影響實(shí)驗(yàn)。設(shè)置溫度梯度為：16、18、20、22、24℃，溫度用加熱棒調(diào)控，用數(shù)顯溫度計(jì)實(shí)時(shí)記錄水溫，保持溫度誤差≤0.10℃。每組10尾魚，各設(shè)3個(gè)平行，實(shí)驗(yàn)前先將魚放入實(shí)驗(yàn)桶中，緩慢提升水溫適應(yīng)到穩(wěn)定階段后分別放入對(duì)應(yīng)濃度的麻醉劑，記錄每尾魚麻醉和復(fù)蘇所需時(shí)間。

1.6 深度麻醉后空氣中不同暴露時(shí)間對(duì)暗紋東方鲀幼魚復(fù)蘇及成活率的影響

根據(jù) 1.3和 1.4實(shí)驗(yàn)結(jié)果，選擇 130 mg·L-1的MS-222和60 mg·L-1的丁香酚進(jìn)行空氣中不同暴露時(shí)間對(duì)暗紋東方鲀幼魚復(fù)蘇時(shí)間及成活率的影響實(shí)驗(yàn)。設(shè)置MS-222暴露時(shí)間梯度為：5、10、15、20、25、30 min，丁香酚暴露時(shí)間梯度為：2、4、6、8、10、12、15、20 min，并設(shè)對(duì)照組（未暴露），每組10尾魚，各設(shè)3個(gè)平行，實(shí)驗(yàn)水溫（15.90±0.10）℃。整個(gè)過(guò)程在濕潤(rùn)潔凈的毛巾上進(jìn)行，僅頭部露于空氣中，記錄復(fù)蘇時(shí)間及成活率。

1.7 數(shù)據(jù)處理

所得數(shù)據(jù)的分析和處理均采用Microsoft Excel和SPSS24.0統(tǒng)計(jì)軟件，并用單因素方差分析和Duncan法進(jìn)行顯著性分析和多重比較，描述性統(tǒng)計(jì)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD）表示，顯著性水平設(shè)為0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 暗紋東方鲀幼魚麻醉及復(fù)蘇過(guò)程行為特征的觀察及分期

暗紋東方鲀幼魚在MS-222和丁香酚兩種麻醉劑的作用下，在麻醉階段和復(fù)蘇階段具有明顯不同的行為特征。據(jù)此，可以區(qū)分不同的麻醉階段（表1）和復(fù)蘇階段（表2）。

由表3可知，當(dāng)MS-222在10～50 mg·L-1、丁香酚在10～20 mg·L-1時(shí)，幼魚的最終麻醉狀態(tài)始終保持在鎮(zhèn)定或輕度麻醉期，隨著麻醉劑濃度增加，麻醉程度加深，分別在60 mg·L-1和30 mg·L-1時(shí)進(jìn)入麻醉6期（延髓麻醉期）。

2.2 MS-222和丁香酚對(duì)暗紋東方鲀幼魚麻醉、復(fù)蘇時(shí)間及有效質(zhì)量濃度的確定

MS-222對(duì)暗紋東方鲀幼魚的麻醉效果如圖1所示：隨著MS-222質(zhì)量濃度的上升，幼魚的麻醉時(shí)間逐漸縮短，復(fù)蘇時(shí)間逐漸延長(zhǎng)。單因素方差分析可知：MS-222濃度為160 mg·L-1時(shí)，麻醉時(shí)間為（95.20±6.14）s，與 170 mg·L-1無(wú)顯著性差異（P＞0.05），復(fù)蘇時(shí)間各組均存在極顯著差異（P＜0.01）。MS-222的質(zhì)量濃度大于120 mg·L-1時(shí)，幼魚的平均麻醉時(shí)間小于3 min；MS-222的質(zhì)量濃度小于140 mg·L-1時(shí)，幼魚的平均復(fù)蘇時(shí)間小于5 min，且麻醉15 min后成活率為100%。根據(jù)MARKING等［11］有效質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)，得出MS-222對(duì)暗紋東方鲀幼魚的有效質(zhì)量濃度為120～140 mg·L-1。

從圖2可以看出，丁香酚對(duì)暗紋東方鲀幼魚的麻醉效果隨著質(zhì)量濃度的增加，麻醉時(shí)間逐漸縮短，復(fù)蘇時(shí)間逐漸延長(zhǎng)。單因素方差分析可知：50 mg·L-1時(shí)，幼魚的麻醉時(shí)間為（192.00±15.23）s，顯著高于其他組（P＜0.05），復(fù)蘇時(shí)間為（218.00±11.20）s，顯著低于其他組（P＜0.05）。120 mg·L-1時(shí)麻醉時(shí)間縮短到（75.40±3.50）s，與 110 mg·L-1無(wú)顯著性差異（P＞0.05），復(fù)蘇時(shí)間延長(zhǎng)到（494.60±11.93）s，極顯著高于其他組（P＜0.01）。同上麻醉時(shí)間小于3 min、復(fù)蘇時(shí)間小于5 min條件得出丁香酚對(duì)暗紋東方鲀幼魚的有效質(zhì)量濃度為60～70 mg·L-1。

表1 暗紋東方鲀幼魚麻醉過(guò)程的主要行為特征及分期Tab．1 Stages and main behavior characteristics of T．obscurus juveniles during anesthesia process

表2 暗紋東方鲀幼魚復(fù)蘇過(guò)程的主要行為特征及分期Tab．2 Stages and main behavior characteristics of T．obscurus juveniles during recovery process

表3 不同濃度MS-222和丁香酚對(duì)暗紋東方鲀幼魚的麻醉效果及程度分期Tab．3 Anesthetic effects and degree stages of different concentrations of MS-222 and clove oil on T．obscurus juveniles

圖1 不同濃度MS-222對(duì)暗紋東方鲀幼魚麻醉時(shí)間和復(fù)蘇時(shí)間的影響Fig．1 Effect of different MS-222 concentrations on anesthsesia time，recovery time in T．obscurus juveniles

圖2 不同濃度丁香酚對(duì)暗紋東方鲀幼魚麻醉時(shí)間和復(fù)蘇時(shí)間的影響Fig．2 Effect of different clove oil concentrations on anesthsesia time，recovery time in T．obscurus juveniles

2.3 兩種麻醉劑在不同水溫環(huán)境下對(duì)暗紋東方鲀幼魚麻醉效果的影響

從圖3可以看出，MS-222（130 mg·L-1）組隨著水溫的升高，麻醉時(shí)間和復(fù)蘇時(shí)間均逐漸縮短。單因素方差分析可知：麻醉時(shí)間溫度18℃組與16℃組無(wú)顯著性差異（P＞0.05），20℃組與22℃組無(wú)顯著性差異（P＞0.05），24℃組麻醉時(shí)間最短僅為（105.20±3.50）s，極顯著低于其他組（P＜0.01）；復(fù)蘇時(shí)間各組間均存在極顯著性差異（P＜0.01）。

圖3 不同水溫下MS-222對(duì)暗紋東方鲀幼魚麻醉效果的影響Fig．3 Anesthesia effect of MS-222 on T．obscurus juveniles in different temperatures

圖4表明，丁香酚（60 mg·L-1）組隨著水溫的升高，幼魚的麻醉和復(fù)蘇時(shí)間均逐漸縮短。麻醉時(shí)間各組間均存在顯著性差異（P＜0.05）；復(fù)蘇時(shí)間各組間均存在極顯著性差異（P＜0.01），24℃組復(fù)蘇時(shí)間已經(jīng)縮短到（157.00±6.99）s。

2.4 空氣中暴露時(shí)間對(duì)暗紋東方鲀幼魚復(fù)蘇效果的影響

由圖5可知，經(jīng)130 mg·L-1MS-222深度麻醉的幼魚，隨著在空氣中暴露時(shí)間的延長(zhǎng)，復(fù)蘇時(shí)間先縮短后延長(zhǎng)。單因素方差分析表明，復(fù)蘇時(shí)間各組間均存在顯著性差異（P＜0.05），幼魚在暴露20 min時(shí)復(fù)蘇時(shí)間為（204.58±6.23）s，與25 min組存在極顯著差異（P＜0.01），且自20 min后，復(fù)蘇時(shí)間的延長(zhǎng)趨勢(shì)明顯加快。

圖4 不同水溫下丁香酚對(duì)暗紋東方鲀幼魚麻醉效果的影響Fig．4 Anesthesia effect of clove oil on T．obscurus juveniles in different temperatures

圖5 空氣中暴露時(shí)間對(duì)MS-222深度麻醉暗紋東方鲀幼魚復(fù)蘇時(shí)間的影響Fig．5 Effect of air exposure time on recovery time in MS-222 deep anesthesia T．obscurus juveniles

由圖6可知，經(jīng)60 mg·L-1丁香酚深度麻醉的幼魚，隨著暴露時(shí)間的延長(zhǎng)，復(fù)蘇時(shí)間逐漸延長(zhǎng)。單因素方差分析表明，暴露4 min與6 min復(fù)蘇時(shí)間無(wú)顯著性差異（P＞0.05），其余各組間均存在顯著性差異（P＜0.05）。暴露6 min后，幼魚的復(fù)蘇時(shí)間明顯延長(zhǎng)，暴露15 min時(shí)幼魚的成活率為100%，但此時(shí)的復(fù)蘇時(shí)間已超過(guò)500 s，暴露20 min時(shí)幼魚成活率下降到80%。

圖6 空氣中暴露時(shí)間對(duì)丁香酚深度麻醉暗紋東方鲀幼魚復(fù)蘇時(shí)間的影響Fig．6 Effect of air exposure time on recovery time in clove oil deep anesthesia T．obscurus juveniles

3 討論

3.1 麻醉劑的作用機(jī)制與有效質(zhì)量濃度的確定

麻醉劑的主要作用是抑制腦皮質(zhì)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)，對(duì)機(jī)體產(chǎn)生一定的麻痹作用，從而在面對(duì)外界的刺激時(shí)，降低應(yīng)激，達(dá)到一定的保護(hù)作用［12］。一般的麻醉劑首先會(huì)抑制腦的皮質(zhì)（觸覺(jué)喪失期），再作用于基底神經(jīng)節(jié)與小腦（興奮期），最后作用于脊髓（麻醉期）［13-14］。它能夠在一定的時(shí)間內(nèi)使魚體維持在一個(gè)休眠狀態(tài)，低消耗，低應(yīng)激，新陳代謝緩慢，同時(shí)對(duì)氧氣的需求降低，二氧化碳及氨的排放也降低［15］。MS-222和丁香酚麻醉溶液首先通過(guò)魚的體表及鰓絲的呼吸作用進(jìn)入到魚體內(nèi)的血液循環(huán)系統(tǒng)，之后再經(jīng)過(guò)血液的運(yùn)輸作用傳導(dǎo)至腦部的中樞神經(jīng)系統(tǒng)，能夠｀在很短的時(shí)間內(nèi)使魚的活動(dòng)能力及反射能力受到抑制，且麻醉劑進(jìn)入魚體內(nèi)后不能被完全降解，主要聚集于肝臟和脾臟中，肌肉中含量很低［16-17］。

從實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出：隨著麻醉劑濃度的逐漸增加，暗紋東方鲀幼魚的麻醉時(shí)間逐漸縮短，復(fù)蘇時(shí)間逐漸延長(zhǎng)；MS-222和丁香酚濃度分別為60 mg·L-1和30 mg·L-1時(shí)，幼魚的最終麻醉程度能達(dá)到麻醉6期。即麻醉劑濃度越高，幼魚越容易麻醉而越不容易復(fù)蘇。這與彭寧東等［18］研究赤眼鱒（Spualiobarbus curriculus）幼魚和王秀華等［19］研究牙鲆（Paralichthys olivaceus）的研究結(jié)果一致。

MS-222和丁香酚對(duì)暗紋東方鲀幼魚的有效質(zhì)量濃度分別為120～140 mg·L-1與60～70 mg·L-1，與 胡 發(fā) 文 等［20］研 究 大 瀧 六 線 魚（Hexagrammos otakii）幼魚的研究結(jié)果不同，MS-222和丁香酚對(duì)大瀧六線魚幼魚的有效麻醉質(zhì)量濃度分別為 50～70 mg·L-1與 50～100 mg·L-1。這可能與兩種魚的生活習(xí)性、規(guī)格大小等有關(guān)，具體原因還需進(jìn)一步研究。不同種類的麻醉劑及相同種類不同濃度的麻醉劑對(duì)不同的魚麻醉效果不同，因此，須根據(jù)魚體的大小、種類、健康生理狀況，以及生活的水溫、水質(zhì)等來(lái)選擇最合適的麻醉劑。

3.2 水溫對(duì)深度麻醉暗紋東方鲀幼魚麻醉及復(fù)蘇時(shí)間的影響

水溫是影響麻醉效果的一個(gè)重要環(huán)境因子［21］。魚類為變溫動(dòng)物，在適宜溫度范圍內(nèi)，隨著水溫升高，魚的體溫也會(huì)升高，同時(shí)魚體內(nèi)也會(huì)發(fā)生一系列變化，細(xì)胞內(nèi)各種酶活性增強(qiáng)，各種生理生化反應(yīng)隨之增強(qiáng)，新陳代謝處于較高水平，耗氧量增加［22-23］。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：隨著水溫的升高，兩種麻醉劑的麻醉和復(fù)蘇時(shí)間均呈逐漸縮短趨勢(shì)，這與張民強(qiáng)等［24］等用MS-222對(duì)斑點(diǎn)叉尾鮰（Ictalurus punctatus）的研究結(jié)果不同，其結(jié)果為隨著溫度的升高，斑點(diǎn)叉尾鮰的復(fù)蘇時(shí)間明顯延長(zhǎng)。

暗紋東方鲀的最佳生存水溫為18～27℃，屬于暖水性魚類，對(duì)麻醉劑更為敏感［25-26］，推測(cè)隨著實(shí)驗(yàn)水溫的逐漸升高，暗紋東方鲀的耗氧量上升，呼吸頻率增加，與周圍水體交換量增加，攝入相同含量的麻醉劑耗時(shí)會(huì)減少，所以麻醉時(shí)間會(huì)縮短，這與李樂(lè)等［27］采用 MS-222對(duì)硬頭鱒（Oncorhynchus mykiss）幼魚的研究結(jié)果相似；由于水溫上升，體內(nèi)谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶等［28］都處在較高水平，肝臟對(duì)麻醉劑降解能力顯著提升，因此，相應(yīng)復(fù)蘇的時(shí)間也會(huì)縮短。在復(fù)蘇過(guò)程中觀察發(fā)現(xiàn)，在高水溫麻醉溶液中復(fù)蘇后的暗紋東方鲀幼魚活動(dòng)力明顯高于低水溫麻醉溶液中的，但其內(nèi)在機(jī)理還有待進(jìn)一步研究。以上研究結(jié)果也表明，水溫對(duì)魚體麻醉及復(fù)蘇效果的影響不僅與麻醉劑的種類有關(guān)，更與物種的差異性有關(guān)。

3.3 空氣中不同暴露時(shí)間對(duì)深度麻醉暗紋東方鲀幼魚復(fù)蘇時(shí)間的影響

暗紋東方鲀幼魚經(jīng)130 mg·L-1的MS-222和60 mg·L-1的丁香酚深度麻醉后，隨著在空氣中暴露時(shí)間的延長(zhǎng)，MS-222處理組幼魚復(fù)蘇時(shí)間先縮短后延長(zhǎng)，與COYLE等［29］研究MS-222對(duì)美洲鰣（Alosa sapidissima）的結(jié)果不同，其原因可能是美洲鰣應(yīng)激性強(qiáng)，耗氧量大，對(duì)麻醉劑等外界刺激極為敏感。丁香酚處理組幼魚復(fù)蘇時(shí)間隨暴露時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸延長(zhǎng)，這與趙艷麗等［30］研究丁香酚對(duì)大黃魚（Pseudosciaena crocea）的結(jié)果基本一致。

綜上所述：MS-222和丁香酚對(duì)暗紋東方鲀幼魚均具有良好的麻醉效果。結(jié)合實(shí)際情況，在暗紋東方鲀幼魚標(biāo)志放流過(guò)程中，建議在水溫20～24℃時(shí)使用120～140 mg·L-1的MS-222進(jìn)行麻醉，標(biāo)記操作過(guò)程控制在25 min以內(nèi)；由于使用丁香酚麻醉后的幼魚在空氣中的可暴露時(shí)間較短，因此不建議采用。若在養(yǎng)殖、生產(chǎn)運(yùn)輸?shù)绕渌I(lǐng)域，MS-222和丁香酚則均可選擇。本研究結(jié)果為暗紋東方鲀幼魚養(yǎng)殖、放流等研究中麻醉劑的合理使用提供了科學(xué)依據(jù)和技術(shù)支撐。麻醉是一個(gè)相對(duì)復(fù)雜的過(guò)程，魚體的大小、體質(zhì)量和水體鹽度、pH等都會(huì)對(duì)其效果產(chǎn)生影響。同時(shí)，麻醉劑對(duì)魚體耗氧率、排氨率、激素及酶活性等的影響還有待于進(jìn)一步研究。