南瓜多糖的提取及其抗氧化活性研究進(jìn)展

劉 穎 梁 盈 林親錄

LIU Ying 1，2 LIANG Ying 1，2 LIN Qin－lu 1，2

魯 倩1，2 田明慧1，2 朱鳳霞1，2

LU Qian 1，2 TIAN Ming－h(huán)ui 1，2 ZHU Feng－xia 1，2

（1.中南林業(yè)科技大學(xué)，湖南 長(zhǎng)沙 410004；2.稻谷及副產(chǎn)物深加工國(guó)家工程實(shí)驗(yàn)室，湖南 長(zhǎng)沙 410004）

（1.Center South University of Forestry ＆ Technology，Changsha，Hunan 410004，China；2.National Engineering Laboratory for Rice and By－product Deep Processing，Changsha，Hunan 410004，China）

南瓜又名麥瓜、番瓜、倭瓜、金冬瓜，為葫蘆科屬植物，含有淀粉、蛋白質(zhì)、胡蘿卜素、維生素VB、VC和鈣、磷等營(yíng)養(yǎng)成分，不僅具有較高的食用價(jià)值，還具有良好的降血糖、降血壓、防癌保健等藥用價(jià)值［1］。其中的主要成分為南瓜多糖。南瓜多糖是一種非特異性免疫增強(qiáng)劑，能提高機(jī)體免疫功能，促進(jìn)細(xì)胞因子生成，通過(guò)活化補(bǔ)體等途徑對(duì)免疫系統(tǒng)發(fā)揮多方面的調(diào)節(jié)作用［2］。南瓜多糖具有降血糖、降血脂、抗癌、抗氧化等作用［3－6］，此外，它還可以清除機(jī)體在代謝過(guò)程中產(chǎn)生的多種自由基包括超氧陰離子自由基（O）、羥自由基（·OH）及其活性衍生物H2O2等［7］。文章擬以南瓜多糖為研究對(duì)象，對(duì)近年來(lái)國(guó)內(nèi)外在南瓜多糖分離提取技術(shù)、抗氧化活性及分子修飾對(duì)其抗氧化功能帶來(lái)的影響等方面的研究進(jìn)行概括闡述，以期為尋找和開(kāi)發(fā)一種新型的天然抗氧化劑提供理論參考。同時(shí)也為南瓜多糖在食品和醫(yī)藥方面的應(yīng)用研究提供理論依據(jù)。

1 南瓜多糖的提取方式

1.1 熱水浸提法

熱水浸提法是一種常用提取方法，其操作簡(jiǎn)單，但耗時(shí)長(zhǎng)，得率低。游見(jiàn)明［8］對(duì)南瓜多糖的熱水浸提工藝進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果表明，在料液比1∶12（m∶V），提取溫度65℃下提取150 min，南瓜多糖的提取率為2.1%左右。王強(qiáng)等［9］將南瓜于65℃下進(jìn)行干燥，粉碎得南瓜皮粉，再在液料比25∶1（V∶m），提取溫度95℃熱水中提取2次，每次提取2 h，并采用Sevage法脫蛋白（8次），其南瓜多糖得率為3.52%。推測(cè)前者提取率略低的原因可能是材料未經(jīng)過(guò)預(yù)處理，導(dǎo)致南瓜多糖溶出不充分；此外，原料來(lái)源不同也可能是造成提取率不同的原因之一。

1.2 超聲輔助法

超聲輔助法是在不改變提取物生物活性的前提下，先利用超聲波破壞植物細(xì)胞壁，來(lái)縮短提取時(shí)間，但因設(shè)備限制難以規(guī)?；a(chǎn)。向燦輝［10］以80℃下干燥、粉碎制備的南瓜粉為原料，對(duì)其多糖的超聲輔助提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明，在低功率，提取溫度80℃，提取時(shí)間6 h的條件下，南瓜多糖的提取率為5.32%。王強(qiáng)等［9］以于65℃下干燥、粉碎制備的南瓜皮粉為原料，對(duì)其多糖的超聲輔助提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明，在功率600 W，提取溫度65℃，提取次數(shù)2次，每次提取時(shí)間1 h的條件下，南瓜多糖的提取率約為4.43%。二者存在差異的原因可能是在高功率的超聲處理下，南瓜中的糖類成分有所流失（如單糖、低聚糖等小分子物質(zhì)），造成得率減少。當(dāng)然原料來(lái)源不同也可能是造成提取率不同的原因之一。

1.3 微波輔助法

微波輔助法同樣可以縮短提取時(shí)間，但也因設(shè)備原因，難以實(shí)現(xiàn)規(guī)?；a(chǎn)。趙二勞等［11］對(duì)南瓜多糖的微波輔助提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化，得出最佳的提取工藝為料液比1∶110（m∶V），微波功率360 W，提取時(shí)間3 min。該條件下南瓜多糖的提取率可達(dá)3.54%。王強(qiáng)等［9］以于65℃下干燥、粉碎制備的南瓜皮粉為原料，在功率600 W條件下微波處理6 min，并進(jìn)行Sevage法脫蛋白（8次），其南瓜多糖的得率為4.52%。上述試驗(yàn)說(shuō)明，原料來(lái)源、微波功率、微波作用時(shí)間均可能會(huì)對(duì)南瓜多糖的提取率造成影響。

1.4 酶法

酶提取法是一種較為有效的提取方法，它可分解細(xì)胞壁使多糖更易析出，且可以降解蛋白質(zhì)，具有條件溫和、雜質(zhì)易除和得率高等優(yōu)點(diǎn)。常用的酶有纖維素酶、木瓜蛋白酶、果膠酶等。于翠芳等［12］采用纖維素酶對(duì)南瓜多糖的酶法提取條件進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果表明，在料液比1∶30（m∶V），纖維素酶濃度0.7%，提取溫度50℃，冷凍時(shí)間30 h的條件下，南瓜多糖的提取率為12.15%。孫婕等［13］對(duì)南瓜多糖的復(fù)合酶法提取工藝進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果表明：采用纖維素酶1.0%，果膠酶1.5%，木瓜蛋白酶1.0%的復(fù)合酶，在溫度40℃，p H 4.6，料液比1∶30（m∶V），時(shí)間30 min條件下南瓜多糖的提取率可達(dá)到20.13%。前者僅采用纖維素酶，而后者采用纖維素酶、果膠酶及木瓜蛋白酶，其提取率約是前者的1.65倍，且操作更簡(jiǎn)便。說(shuō)明多種酶協(xié)同提取效果優(yōu)于單一酶。

1.5 其他方法

緩凍可以使植物細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生冰晶，使細(xì)胞組織易受損破碎，能強(qiáng)化多糖的提取，且不會(huì)破壞物質(zhì)結(jié)構(gòu)和性質(zhì)。于斐等［14］研究表明緩凍處理可以有效提高南瓜多糖得率。向燦輝等［10］將于80℃下干燥制備的南瓜粉凍結(jié)處理24 h后，取出迅速融化，并于80℃下提取6 h，經(jīng)脫色和脫蛋白處理后，南瓜多糖得率為5.74%；而在凍融提取法的基礎(chǔ)上輔以超聲處理南瓜多糖提取率為6.05%。丁宏偉等［15］對(duì)微波輔助超聲提取南瓜多糖的工藝條件進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明，在料液比1∶4（m∶V），微波處理3 min，超聲處理30 min，溫度70℃的條件下，南瓜多糖的提取率為3.65%。刁文超等［16］對(duì)超聲波協(xié)同復(fù)合酶法提取南瓜多糖的工藝條件進(jìn)行了優(yōu)化。結(jié)果表明，其最佳的工藝條件為功率440 W、提取溫度51.5℃、液料比7∶1（V∶m）、p H 4.4，此條件下，南瓜多糖的得率為4.39%。上述研究表明，微波、超聲、酶法協(xié)同提取時(shí)，可能對(duì)南瓜多糖結(jié)構(gòu)和性質(zhì)產(chǎn)生了破壞，導(dǎo)致其得率下降。

綜上所述，原料不同導(dǎo)致的提取率差異不大，但不同方法所帶來(lái)的提取率差異較為明顯。如表1所示，酶法提取南瓜多糖的得率最高，其次是超聲波輔助法，提取率最低的是傳統(tǒng)水浴法。這是因?yàn)樵谒l件下，無(wú)法破壞細(xì)胞壁，導(dǎo)致南瓜多糖不能完全釋放出來(lái)。與單一提取方法相比，超聲協(xié)同復(fù)合酶法卻沒(méi)有復(fù)合酶法提取率高，這可能是由于超聲對(duì)酶造成結(jié)構(gòu)破壞，導(dǎo)致酶活性部分喪失，故提取率下降。微波與超聲波協(xié)同使用沒(méi)有單獨(dú)提取得率高，這是因?yàn)槲⒉ㄌ幚砗笃茐牧酥参锏募?xì)胞壁，使大量的多糖流出，再用超聲處理就會(huì)導(dǎo)致多糖結(jié)構(gòu)的破壞，而無(wú)法被收集。相比較幾種提取方法，凍融輔助法相較其他協(xié)同方法是最為理想的方式，該方式提取率高，不破壞多糖結(jié)構(gòu)，且提取率成本低。

表1 不同方法提取南瓜多糖的比較Table 1 Comparison of different methods to extract Pumpkin Polysaccharide

2 南瓜多糖體外抗氧化活性

2.1 消除自由基的能力

自由基的清除是利用氧自由基的氧化或還原性質(zhì)，使反應(yīng)體系中的某種反應(yīng)物發(fā)生氧化或還原反應(yīng)，生成物在紫外或（和）可見(jiàn)光范圍內(nèi)某一特定波長(zhǎng)下具有最大吸收峰，通過(guò)測(cè)定反應(yīng)體系在這一波長(zhǎng)下的吸光度的變化，間接測(cè)定氧自由基的含量。其常用方法有DPPH（1，1－二苯基－2－三硝基苯肼）法、水楊酸法、超氧陰離子法等。孫婕等［6］在用不同方法提取的南瓜多糖進(jìn)行清除羥自由基試驗(yàn)時(shí)得出：相同質(zhì)量濃度下，復(fù)合酶法提取所得的南瓜多糖清除羥基自由基（OH·）的能力最強(qiáng)，在南瓜多糖濃度0.3 mg／m L時(shí)清除率為40%左右，在1.8 mg／m L時(shí)可達(dá)83.2%。在清除超氧陰離子試驗(yàn)中，濃度為20 mg／m L時(shí)，酶法提取的多糖清除率可達(dá)62.3%。丁宏偉等［15］采用微波輔助超聲技術(shù)提取南瓜多糖，并測(cè)定南瓜多糖對(duì)·OH、O及DPPH自由基的清除效果。結(jié)果顯示，不同濃度南瓜多糖對(duì)自由基均有較好的清除效果，特別是4 mg／m L以上時(shí)，清除效果顯著，清除超氧陰離子的效果最為顯著。綜上所述，不同提取方法對(duì)南瓜多糖清除自由基能力的效果不同，酶法提取的能力最強(qiáng)，而采用微波輔助超聲提取清除超氧陰離子的效果最好。

2.2 還原能力

測(cè)定物質(zhì)還原能力一般采用FRAP法，其中Fe3＋吡啶三吖嗪可被樣品中還原物質(zhì)還原為二價(jià)鐵形式，呈現(xiàn)出藍(lán)色，并于593 nm處具有最大吸收，根據(jù)吸光度大小計(jì)算樣品的抗氧化活性的強(qiáng)弱。李筱泉等［17］通過(guò)FRAP法測(cè)定了南瓜多糖的總還原能力。發(fā)現(xiàn)隨著多糖濃度的增加，總還原能力逐漸增強(qiáng)。當(dāng)南瓜多糖濃度為8 mg／m L時(shí)，其總還原能力相當(dāng)于0.66 mmo L／L Fe2＋。刁文超等［18］用 FRAP法測(cè)定南瓜多糖的總還原能力，得出南瓜粗多糖的總還原能力為0.182 mmo L／g，說(shuō)明南瓜多糖具有一定的還原能力。

2.3 離體抗氧化活性能力

目前篩選及評(píng)價(jià)抗氧化活性成分的體外試驗(yàn)方法主要包括化學(xué)測(cè)定法和細(xì)胞模型法［19］?；瘜W(xué)測(cè)定法主要通過(guò)化學(xué)方法測(cè)定樣品對(duì)脂類物質(zhì)氧化的抑制能力，或?qū)θ斯ど勺杂苫那宄芰?，繼而進(jìn)行活性評(píng)價(jià)。而以細(xì)胞培養(yǎng)為基礎(chǔ)的活性篩選模型是用來(lái)研究藥物分配進(jìn)入細(xì)胞膜、藥物吸收、與載體或酶等生物大分子相互作用以及清除細(xì)胞內(nèi)氧自由基的有效方法，能更準(zhǔn)確地闡述在生物體內(nèi)的抗氧化反應(yīng)機(jī)理［20］。李俊麗［21］研究了南瓜多糖體外抗氧化活性能力，發(fā)現(xiàn)南瓜多糖可抑制紅細(xì)胞的氧化損傷，保護(hù)紅細(xì)胞膜；當(dāng)南瓜多糖濃度為625～2 500μg／m L在415 nm下紅細(xì)胞溶血率為68.08%～34.99%，溶血率隨多糖濃度的增加而降低。同時(shí)，不同劑量的南瓜多糖可以抑制小鼠肝中的丙二醛（MAD）含量，在濃度為2 500μg／m L其 MDA抑制率可達(dá)64.09%，抑制率與多糖濃度呈正相關(guān)。研究南瓜多糖對(duì)Vc＋Fe2＋誘導(dǎo)小鼠肝線粒體腫脹抑制作用過(guò)程中，當(dāng)南瓜多糖濃度達(dá)3.75 mg／m L時(shí)，幾乎可以完全抑制Vc＋Fe2＋誘導(dǎo)作用，其變化與正常組一致。王運(yùn)強(qiáng)［22］在溫度為80，60，40，20℃水浴條件下提取南瓜中的多糖（pumpkin polysaccharide，PP），得到4種水溶性南瓜多糖 PP4、PP3、PP2和PP1，經(jīng)小鼠體外抗氧化試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)南瓜多糖濃度的逐漸增大，對(duì)小鼠肝勻漿自發(fā)性脂質(zhì)過(guò)氧化抑制能力逐漸加強(qiáng)。其中抑制能力最強(qiáng)的是PP1。當(dāng)4種水溶性南瓜多糖濃度均為2 mg／m L時(shí)，對(duì)小鼠肝線粒體腫脹有抑制作用。效果最顯著的也是PPl。推測(cè)是由于溫度過(guò)高對(duì)南瓜多糖提取造成負(fù)影響，造成其活性物質(zhì)的部分損失，導(dǎo)致其細(xì)胞內(nèi)清除自由基的能力降低，因此低溫提取條件得到的南瓜多糖脂質(zhì)過(guò)氧化抑制能力最強(qiáng)。

3 南瓜多糖的體內(nèi)抗氧化活性研究

3.1 南瓜多糖的消化率

南瓜中所含果膠為天然的低甲氧果膠，在沒(méi)有糖存在的情況下可以形成穩(wěn)定的凝膠，保護(hù)胃粘膜，加快潰瘍面愈合，對(duì)消化道潰瘍具有一定療效。另一方面南瓜所含成分（如多糖、膳食纖維等）能促進(jìn)膽汁分泌，加強(qiáng)胃腸蠕動(dòng)，幫助食物消化［23］。金暉等［24］探討了南瓜多糖在體外模擬人工胃液中的動(dòng)態(tài)變化過(guò)程，發(fā)現(xiàn)隨胃酸與胃酶作用時(shí)間的延長(zhǎng)，還原糖的量緩慢增加，高效凝膠滲透色譜結(jié)果顯示作用30 min時(shí)出現(xiàn)小分子糖，其還原糖量為0.259 8μg／μL，作用90 min時(shí)大分子量多糖出現(xiàn)明顯變化，得出南瓜多糖在攝入人體30 min內(nèi)就被人體所消化吸收，而同樣條件下紅薯淀粉在人工胃液中的還原糖量為0.087 55μg／μL，可以推測(cè)出南瓜多糖是較易被人體消化吸收的［25］。

3.2 動(dòng)物試驗(yàn)

眾所周知，隨著年齡的增長(zhǎng)，體內(nèi)自由基含量增多，T細(xì)胞受損，免疫功能下降，導(dǎo)致衰老，同時(shí)帶來(lái)心腦血管疾病的隱患。研究發(fā)現(xiàn)某些多糖既可以從整體上提高機(jī)體的免疫功能［26］；又可以抑制脂質(zhì)過(guò)氧化、增強(qiáng)機(jī)體對(duì)自由基的清除能力［27］，延緩衰老［28］，抑制心腦血 管疾病的發(fā)生［29］。朱 紅艷等［30］建立了用胰島素和高糖來(lái)誘導(dǎo)的胰島素抵抗脂肪細(xì)胞模型，并驗(yàn)證南瓜多糖對(duì)胰島素抵抗脂肪細(xì)胞是否具有保護(hù)作用。結(jié)果表明，南瓜多糖可以增加胰島素抵抗脂肪細(xì)胞對(duì)葡萄糖的消耗，而胰島素抵抗脂肪細(xì)胞中PPARγ表達(dá)明顯低于正常對(duì)照組。說(shuō)明南瓜多糖可能通過(guò)提高PPARγ的表達(dá)來(lái)改善胰島素抵抗脂肪細(xì)胞模型的胰島素抵抗性。潘洪志等［31］采用灌胃的方式來(lái)觀察染鉛小鼠抗氧化系統(tǒng)的改變及南瓜提取物對(duì)抗氧化酶系統(tǒng)的影響。結(jié)果得出鉛中毒可以引起小鼠過(guò)氧化損傷，南瓜多糖可以減輕鉛中毒引起的脂質(zhì)過(guò)氧化，提高小鼠機(jī)體的抗氧化能力。劉穎等［32］將糖尿病大鼠根據(jù)血糖和體重隨機(jī)分為糖尿病組和南瓜多糖組，同時(shí)與正常組進(jìn)行對(duì)照，并分別給予蒸餾水和南瓜多糖灌胃，每周測(cè)量體重1次，4周后測(cè)定大鼠的血清總膽固醇、空腹血糖、高密度脂蛋白、甘油三酯、游離脂肪酸和低密度脂蛋白的含量。結(jié)果表明，糖尿病組大鼠的高密度脂蛋白、甘油三酯、游離脂肪酸和低密度脂蛋白含量顯著增加，血液中高密度脂蛋白含量明顯降低，補(bǔ)充南瓜多糖后，甘油三酯、總膽固醇、游離脂肪酸和低密度脂蛋白含量明顯降低，而高密度脂蛋白含量升高，南瓜多糖的降脂效果明顯。證明南瓜多糖能夠有效預(yù)防心腦血管疾病的發(fā)生。

4 通過(guò)分子修飾提高南瓜多糖的抗氧化活性

南瓜多糖除本身具有抗氧化功效外，將其分子進(jìn)行適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)修飾后得到的多糖較修飾前具有更高的活性或者產(chǎn)生新的活性。

4.1 羧甲基化

甲基化方法是分析多糖及其綴合物中糖結(jié)構(gòu)和性質(zhì)的重要方法，可將多糖中各種單糖結(jié)構(gòu)中的游離羥基全部甲基化，并將甲基化多糖進(jìn)行水解得到部分甲基化的單糖，通過(guò)分析水解后的單糖，來(lái)推測(cè)多糖分子中各單糖間連接位置［33］。多糖甲基化方法很多，如Purdie法、Cicanu法、Menzies法、Haworth法、Hakomori法及液氨甲基化等。柳紅等［34］采用超聲輔助法提取南瓜多糖并對(duì)其進(jìn)行分離和羧甲基化；鄰苯三酚自氧化法測(cè)定羧甲基南瓜多糖對(duì)超氧陰離子自由基的清除作用，結(jié)果證明羧甲基化后的南瓜多糖具有更好的抗氧化活性。

4.2 硫酸化

在結(jié)構(gòu)修飾中，硫酸酯化是一個(gè)頗為有效的修飾手段，多糖大分子中單糖的某些羥基用硫酸根取代，進(jìn)而加強(qiáng)了多糖分子的固有生物活性。但其穩(wěn)定性還需進(jìn)一步研究。謝佳等［35］采用氯磺酸—吡啶法，對(duì)南瓜粗多糖和分離得到的南瓜PP1多糖進(jìn)行硫酸酯化，結(jié)果表明水提南瓜多糖、水提南瓜AP1多糖（采用十六烷基三甲基溴化銨沉淀法，即CTAB法沉淀得到南瓜多糖為南瓜AP1多糖）、硫酸酯化水提南瓜多糖、硫酸酯化水提南瓜AP1多糖南瓜多糖均能有效清除·OH，隨著濃度的上升，清除效果愈明顯，且采用水法提取的南瓜粗多糖對(duì)·OH清除作用明顯優(yōu)于另外3種多糖。而南瓜AP1多糖和南瓜粗多糖對(duì)O的清除作用不顯著，但經(jīng)硫酸酯化的多糖可以有效清除O，且呈量效關(guān)系?？踪坏龋?6］采用三氧化硫—吡啶法對(duì)南瓜多糖PL2－1進(jìn)行硫酸酯化修飾，但硫酸酯化修飾取代度不高。其原因可能是南瓜多糖的游離羥基不多，供硫酸酯化的機(jī)會(huì)較低。

4.3 磷酸化

多糖不僅本身具有多種生物活性，它們的衍生物也具有獨(dú)特的作用。磷酸酯是多糖衍生物中重要的一類，也是研究多糖構(gòu)效關(guān)系的重要組成部分，對(duì)開(kāi)發(fā)多糖藥物具有深遠(yuǎn)意義。常用于多糖磷酸化的試劑有：三氯氧磷、磷酸及其酸酐、磷酸鹽等。吳瓊等［37］用三氯氧磷（POCl3）對(duì)銀耳多糖進(jìn)行處理，并在60℃恒溫水浴鍋中反應(yīng)40 min，分離得到了4種磷酸化銀耳多糖。銀耳多糖中羥基的取代度越大，溶解性越好，并進(jìn)行體外清除自由基試驗(yàn)，結(jié)果表明，修飾后的銀耳多糖與修飾前的相比清除DPPH自由基能力明顯增強(qiáng)。由此推測(cè)南瓜多糖也可做類似修飾來(lái)改變其分子結(jié)構(gòu)，進(jìn)而提高或改變其化學(xué)性質(zhì)和生理活性，為今后的應(yīng)用提供了方向。

從上述結(jié)果可以看出無(wú)論是經(jīng)過(guò)羧甲基化、硫酸酯化還是磷酸化都提高了南瓜多糖體外清除自由基的作用。硫酸酯化與多糖中游離羥基含量有關(guān)，而磷酸化產(chǎn)物結(jié)構(gòu)可控性較差，增加了難度。多糖的硫酸酯化和磷酸化同為聚陰離子修飾，卻因其合成方面的瓶頸而沒(méi)有得到廣泛而系統(tǒng)的研究。而羧甲基化制備過(guò)程簡(jiǎn)單，試劑成本低，產(chǎn)物無(wú)毒性等特點(diǎn)，是一種比較理想的衍生方法。

5 展望

多糖為非細(xì)胞毒性物質(zhì)，藥物質(zhì)量可通過(guò)化學(xué)手段進(jìn)行控制，并且毒副作用小，在醫(yī)藥學(xué)研究領(lǐng)域有著相當(dāng)廣闊的應(yīng)用前景。由于南瓜多糖成本低廉，操作簡(jiǎn)單深受企業(yè)的青睞，為其開(kāi)發(fā)利用提供了廣闊的市場(chǎng)。目前對(duì)其研究報(bào)道主要集中在降血糖、降血脂方面，而對(duì)南瓜多糖抗氧化活性及其作用機(jī)制的研究還未見(jiàn)詳細(xì)報(bào)道，其體內(nèi)水平、動(dòng)物水平、細(xì)胞水平及分子水平的抗氧化活性機(jī)理的研究均不透徹，還有待進(jìn)一步深入探討。此外，關(guān)于南瓜多糖結(jié)構(gòu)修飾及其帶來(lái)的影響還不夠清晰，對(duì)南瓜多糖進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾而改變其抗氧化性、溶解性等其他功能性質(zhì)，也是后續(xù)的研究方向之一。

1 王宏偉，徐雅琴.南瓜功能成分研究進(jìn)展［J］.食品與機(jī)械，2004，20（4）：55～57.

2 王昱，李海燕，張世忠.南瓜功能成分的研究及其發(fā)展［J］.天津農(nóng)業(yè)科學(xué)，2010，16（5）：133～135.

3 羅雙群，張桂紅，陳海偉，等.南瓜功能特性研究進(jìn)展［J］.糧食與油脂，2012（4）：47～49.

4 ?；燮?南瓜多糖的降血脂作用研究［J］.生物學(xué)雜志，2008，25（3）：57～59.

5 包曉瑋，常永志，朱金芳，等.南瓜及紅甜菜多糖對(duì)小鼠免疫功能的影響［J］.食品研究與開(kāi)發(fā)，2011，32（8）：126～129.

6 孫婕，申娟利，呂靈娟，等.3種提取方法對(duì)南瓜多糖得率及抗氧化性質(zhì)的影響［J］.農(nóng)產(chǎn)品加工，2011（8）：38～40.

7 趙賀華.氧自由基的概念與臨床醫(yī)學(xué)的意義［J］.中國(guó)保健營(yíng)養(yǎng)，2013（1）：72.

8 游見(jiàn)明，李光輝.南瓜多糖的提取工藝研究［J］.現(xiàn)代食品科技，2005，21（2）：107～108，99.

9 王強(qiáng)，李貴節(jié)，周雅琳，等.提取方式對(duì)南瓜皮粗多糖化學(xué)組成及抗氧化活性的影響［J］.食品科學(xué)，2013，34（14）：118～121.

10 向燦輝，王文君，鄧鎮(zhèn)濤.四種不同方法對(duì)南瓜多糖提取率的影響［J］.廣西輕工業(yè)，2010（7）：18，52.

11 趙二勞，房彩琴，張海容.微波輔助提取南瓜多糖的研究［J］.山西大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2006，29（2）：187～189.

12 于翠芳，李潔慧，張名愛(ài)，等.纖維素酶法提取南瓜多糖的工藝研究［J］.食品工業(yè)，2012（3）：50～52.

13 Sun Jie，Yn Guo you，Cgen lan ying.Exatrection of pumpkin polysaccharide by complex enzyme method and its antioxidant research［J］.Agricultural Biotechnology，2010，11（5）：34～37.

14 于斐，李全宏.低溫提取南瓜多糖的理化性質(zhì)及清除DPPH自由基作用［J］.食品研究與開(kāi)發(fā)，2011，32（4）：28～31.

15 丁宏偉，李志香，蔡云飛，等.微波輔助超聲提取南瓜多糖及其抗氧化性研究［J］.食品研究與開(kāi)發(fā)，2012，33（12）：35～39.

16 刁文超，王然，王鳳舞，等.超聲波協(xié)同復(fù)合酶法提取南瓜多糖工藝優(yōu)化［J］.食品科學(xué)，2012，33（18）：14～20.

17 李筱泉，何群，練惠輝，等.南瓜粉的功能研究［J］.食品科學(xué)，2008（10）：55～58.

18 刁文超，吳，昊，楊紹蘭，等.南瓜多糖的分離純化及抗氧化活性研究［J］.中國(guó)食品學(xué)報(bào)，2012，12（11）：24～31.

19 劉微微，任虹，曹雪麗，等.天然產(chǎn)物抗氧化活性體外評(píng)價(jià)方法研究進(jìn)展［J］.食品科學(xué)，2010，31（17）：415～418.

20 源瀚祺，黃慶華，李嬈玲.通過(guò)細(xì)胞模型體外評(píng)價(jià)抗氧化活性實(shí)驗(yàn)方法研究綜述［J］.廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào)，2012，28（2）：208～211.

21 李俊麗.南瓜種質(zhì)資源遺傳多樣性與多糖多樣性的研究［D］.武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，2006.

22 王運(yùn)強(qiáng).南瓜水溶性多糖的結(jié)構(gòu)表征及生物活性的研究［D］.武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，2009.

23 楊亮.固定化酵母制備南瓜保健酒的工藝研究［D］.石家莊：河北科技大學(xué)，2012.

24 金暉，張則鳴，張擁軍，等.人工胃液作用南瓜多糖的體外模擬研究［J］.食品科技，2012，37（4）：178～181.

25 張錦勝，金志強(qiáng)，劉玉環(huán)，等.核磁共振及其成像技術(shù)研究抗性淀粉和普通淀粉體外消化的影響［J］.食品科學(xué)，2009，30（15）：99～103.

26 賈林，陸金健，周文雅，等.桔梗多糖對(duì)環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)的免疫抑制小鼠的免疫調(diào)節(jié)［J］.食品與機(jī)械，2012，28（3）：112～114.

27 邱松山，周天，姜翠翠.無(wú)花果粗多糖提取工藝及抗氧化活性研究［J］.食品與機(jī)械，2011，27（1）：40～42.

28 王斌，連賓.食藥用真菌多糖的研究與應(yīng)用［J］.食品與機(jī)械，2005，21（6）：96～100.

29 牛文，趙云峰，徐承水.海帶多糖生物活性的研究進(jìn)展［J］.科技信息，2008（22）：343，345.

30 朱紅艷，孟國(guó)良，周素蘭，等.PPARγ與胰島素抵抗及其南瓜多糖干預(yù)研究［J］.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2013，24（2）：369～370.

31 潘洪志，郭守利.南瓜提取物對(duì)老鼠鉛誘導(dǎo)的脂質(zhì)過(guò)氧化及抗氧化酶活力的影響［J］.齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院，2002，23（10）：1 081～1 082.

32 劉穎，王濤，金宏，等.南瓜多糖對(duì)糖尿病大鼠血糖和血脂的影響［J］.中國(guó)應(yīng)用心理學(xué)雜志，2006，22（3）：358～361.

33 李波，蘆菲.多糖的甲基化方法及圖譜解析［J］.天然產(chǎn)物開(kāi)發(fā)與研究，2012，24（1）：79～83

34 柳紅，張靜.用氣相色譜和紅外光譜對(duì)羧甲基化南瓜多糖結(jié)構(gòu)的研究［J］.光譜實(shí)驗(yàn)室，2008，25（3）：313～318.

35 謝佳，張靜，柳紅.南瓜多糖硫酸酯化衍生物的制備及抗氧化研究［J］.食品工業(yè)科技，2008，29（9）：60～62.

36 孔倩，周婷，葛佳.南瓜多糖硫酸酯化修飾與結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性關(guān)系研究［J］.食品科技，2009，34（4）：160～166.

37 吳瓊，代永剛.磷酸酯化修飾堿溶性銀耳多糖的研究［J］.食品科技，2010，35（3）：75～77.