臨床分離洋蔥伯克霍爾德菌的耐藥譜分析

解春寶 羅江蓉* 羅天華 喻 華 黃文芳

（1 四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院·四川省人民醫(yī)院，四川 成都 610072；2 四川省成都市雙流縣協(xié)和社區(qū)衛(wèi)生服務(wù)中心，四川 成都 610072）

洋蔥伯克霍爾德菌（Burkholderia cepacia）是非發(fā)酵革蘭陰性桿菌中的一種。由于該菌廣泛存在于醫(yī)院環(huán)境中，其主要感染免疫功能較低或者是免疫功能受損的患者，據(jù)文獻[1]報道該菌多重耐藥現(xiàn)象嚴重，臨床醫(yī)師可選的治療該菌的藥物有限。因此本文旨在通過研究本院臨床分離的該菌的耐藥譜，了解和掌握該菌耐藥現(xiàn)狀，為臨床醫(yī)師合理使用抗菌藥物以及深入研究洋蔥伯克霍爾德菌的耐藥機制提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 菌株來源：收集四川省人民醫(yī)院臨床科室2015年7月至2016年6月分離的所有洋蔥伯克霍爾德菌，去除相同患者信息的重復(fù)株。

1.2 抗生素：亞胺培南、阿米卡星、左旋氧氟沙星、頭孢他啶、頭孢唑林、頭孢吡肟、頭孢曲松、氨芐西林、哌拉西林/他唑巴坦、氨曲南、慶大霉素、環(huán)丙沙星、呋喃妥因、妥布霉素和復(fù)方新諾明共15種抗菌藥物。

1.3 儀器與試劑：儀器與試劑來源如下。法國生物梅里埃：全自動微生物分析儀VITEK-2、VITEK-2配套的藥敏試驗板、麥氏比濁儀。上海博迅實業(yè)有限公司：生物安全柜。法國Heraeus：CO2培養(yǎng)箱。鄭州安圖綠科生物公司：血平板。江蘇康健醫(yī)療用品有限公司：一次性接種環(huán)。

1.4 方法：采用法國生物梅里埃公司的全自動微生物分析儀VITEK-2對菌株進行鑒定，利用VITEK-2配套藥敏試驗板檢測15種藥物對洋蔥伯克霍爾德菌的最低抑菌濃度。根據(jù)美國臨床和實驗室標準協(xié)會（CLSI）提供的MIC解釋標準來判斷洋蔥伯克霍爾德菌對被測藥物的敏感程度。收集和匯總所有細菌藥敏試驗結(jié)果，綜合分析本院洋蔥伯克霍爾德菌的耐藥譜。

2 結(jié)果

2.1 標本類型分布：本實驗共收集洋蔥伯克霍爾德菌30株，其標本類型分布如下：1株為傷口分泌物、1株為尿道分泌物、2株為腹腔引流液、4株為支氣管灌洗液、22株為痰液。

2.2 藥敏結(jié)果：耐藥譜分析發(fā)現(xiàn)本研究中的30株洋蔥伯克霍爾德菌均呈現(xiàn)出多重耐藥現(xiàn)象。對碳青霉烯類抗生素（本研究中的亞胺培南）的耐藥率為96.7%。對一代頭孢菌素類抗生素頭孢唑林的耐藥率較高，為100%。對三代（頭孢他啶）和四代（頭孢吡肟）頭孢菌素類抗生素的敏感性較高，其敏感率分別為100%、96.7%。對氨基糖苷類抗生素的耐藥率均為96.7%。對呋喃妥因和氨芐西林的耐藥率也高達100%。對復(fù)方制劑哌拉西林/他唑巴坦和復(fù)方新諾明的敏感性較高。其具體情況見表1。

表1 30株洋蔥伯克霍爾德菌的藥敏試驗結(jié)果[n（%）]

3 討 論

洋蔥伯克霍爾德菌（Burkholderia cepacia）是非發(fā)酵革蘭陰性桿菌中的一種，分布廣泛，是一種較為常見的條件致病菌。據(jù)文獻[1]報道由于該菌廣泛存在于醫(yī)院環(huán)境中，主要感染免疫功能低下及受損的患者，且該菌多重耐藥現(xiàn)象嚴重。研究[2]數(shù)據(jù)顯示洋蔥伯克霍爾德菌的臨床檢出率呈逐年上升趨勢且對多種常用藥物的耐藥性不斷增加，給臨床治療帶來了很大的困難。

本研究中收集的四川省人民醫(yī)院的30株洋蔥伯克霍爾德菌標本主要類型是痰液標本，分離的細菌均呈現(xiàn)出多重耐藥現(xiàn)象。對本研究中的碳青霉烯類抗生素亞胺培南的敏感率較低，耐藥率為96.7%。對一代頭孢菌素類抗生素頭孢唑林的耐藥率較高，為100%。對氨基糖苷類抗生素的耐藥率均為96.7%。據(jù)文獻[3-4]報道洋蔥伯克霍爾德菌具有很高的固有耐藥，該菌對氨基糖苷類、一代及二代頭孢菌素、抗假單胞菌青霉素、多粘菌素等呈固有耐藥。本研究中的洋蔥伯克霍爾德菌對三代（頭孢他啶）和四代（頭孢吡肟）頭孢菌素類抗生素的敏感性較高，其敏感率分別為100%、96.7%。對氨芐西林和呋喃妥因的耐藥率高達100%。對復(fù)方制劑哌拉西林/他唑巴坦和復(fù)方新諾明的敏感性較高。本研究結(jié)果與文獻[5-6]報道的臨分離的洋蔥伯克霍爾德菌呈現(xiàn)多重耐藥譜的結(jié)果較一致。綜上所述，本院洋蔥伯克霍爾德菌的多重耐藥現(xiàn)象嚴重，這給臨床醫(yī)師提出了嚴峻的挑戰(zhàn)。該菌的耐藥機制復(fù)雜，包括產(chǎn)生多種水解酶（如金屬β-內(nèi)酰胺酶、頭孢菌素酶）、外排泵系統(tǒng)、膜孔蛋白缺失、膜通透性下降等。因此為了更好的預(yù)防和控制我院洋蔥伯克霍爾德菌所導(dǎo)致的感染，需進一步研究洋蔥伯克霍爾德菌的耐藥機制和分子流行病學(xué)特征。