動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心的實(shí)踐報(bào)告

蘇華彬

時(shí)間飛逝，在過(guò)去的一個(gè)多月的實(shí)習(xí)時(shí)間里，有三個(gè)不同的實(shí)踐感悟，分別是：?jiǎn)挝慌c學(xué)校的區(qū)別，外派工作的體驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)方法總結(jié)。這三個(gè)方面是我這次實(shí)踐真真切切體會(huì)到的有感己悟，亦是我這段不同人生經(jīng)歷的最寶貴的記憶。

（一）單位與學(xué)校

2019年5月20日，從學(xué)校懷著忐忑與激動(dòng)的心情乘著大巴來(lái)到中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心，這是我第二次來(lái)到這個(gè)地方。第一次我是被我們單虎教授派過(guò)來(lái)為他的一個(gè)項(xiàng)目蓋章簽字，因?yàn)楫?dāng)時(shí)只是在前面的辦公樓瀏覽，覺(jué)得這個(gè)地方很有園林之美的韻味。

這次我隨老師前往后面的實(shí)驗(yàn)樓，給我的感覺(jué)就是現(xiàn)代化與園林藝術(shù)的融合，在我們學(xué)校的話，園林藝術(shù)與現(xiàn)代高樓是涇渭分明的，在這建筑方面各有千秋。進(jìn)入實(shí)驗(yàn)樓，大家一起開了個(gè)短暫的會(huì)議，然后老師帶我們來(lái)到了我們實(shí)踐的目的地動(dòng)物產(chǎn)品安全檢測(cè)室。這里的第一感覺(jué)特別像我們做藥物化學(xué)實(shí)踐的實(shí)驗(yàn)室，老師帶我們參觀了所有的實(shí)驗(yàn)儀器，這里的實(shí)驗(yàn)條件比我們學(xué)校強(qiáng)太多了，像那種超高速低溫離心機(jī)我在學(xué)校見(jiàn)過(guò)兩臺(tái)，而且也有些年份了，但是在這里的儀器室我就見(jiàn)到了四臺(tái)，最老型號(hào)的和我們學(xué)校最新型號(hào)的是完全一樣的，這既給我了深深的震撼也讓我有點(diǎn)為學(xué)校感到悲哀。

其后師姐領(lǐng)我們?nèi)ニ奚岚差D好行李物品。宿舍分為兩個(gè)部分：前廳，臥室，衛(wèi)生間。師姐說(shuō)可以在前廳做飯吃（在過(guò)去的一個(gè)多月中我們沒(méi)有做過(guò)），衛(wèi)生間不大，但是可以解決除洗澡外的生活問(wèn)題，臥室是標(biāo)準(zhǔn)的八人間宿舍但是只有四個(gè)人住，很寬敞。在學(xué)校我們的宿舍是六人間，房間左面是一排桌子，右面是上下床，里面有一個(gè)小陽(yáng)臺(tái)可以晾曬衣服，相較來(lái)說(shuō)動(dòng)衛(wèi)中心的宿舍更大更方便，學(xué)校的宿舍小巧精致溫馨。中午去食堂吃飯，這里的早餐和中餐都是以自助的形式自由拿取，我這胖了5斤的肉就是這么吃出來(lái)的。

下午科室的老師做實(shí)驗(yàn)，我們?cè)谝慌杂^看學(xué)習(xí)。晚上我們坐著公交車去最近的超市采購(gòu)東西，在學(xué)校的話，宿舍周圍就可以買到所有物品，在生活方面這里不如學(xué)校便利。在單位感覺(jué)比在學(xué)校學(xué)習(xí)輕松很多，但是在輕松的同時(shí)意味著相對(duì)單調(diào)的生活，這里的生活就像三點(diǎn)一線的高中，我們?cè)谒奚?、食堂和?shí)驗(yàn)室中來(lái)回穿梭，在學(xué)校你可以感受各種各樣的校園活動(dòng)，可以是動(dòng)聽(tīng)的歌聲，可以是炫酷的舞姿，可以是讀書辯論，這些在這里都沒(méi)有，相對(duì)單調(diào)但是能讓人更專注的投入到工作，目的不相同，方式不相同，結(jié)果亦然不會(huì)相同。

（二）外派工作的體驗(yàn)

6月5日上午，我們跟隨老師做完上午的實(shí)驗(yàn)步驟，然后老師對(duì)我和我同學(xué)說(shuō)，這次因?yàn)槿耸植粔颍坏靡褜⒛銈z派出去采集做實(shí)驗(yàn)的樣品，我去青海，另一個(gè)去湖北，于是我倆懷著忐忑的心情，跟隨各自的帶隊(duì)老師于6月10日出發(fā)。

6月10日下午2時(shí)45分登上去青海的飛機(jī)，6月10日下午6時(shí)10分到達(dá)西寧的機(jī)場(chǎng)。由當(dāng)?shù)氐霓r(nóng)業(yè)廳接機(jī)到了西寧市的一家酒店安頓行李，在路上我感到頭有輕微的發(fā)脹感，不知是有高原反應(yīng)還是暈車，當(dāng)?shù)氐霓r(nóng)業(yè)廳人員接待吃了頓晚飯，我看到在傍晚8時(shí)30分的時(shí)候太陽(yáng)才漸漸西下，這也許是高海拔或是西部的原因吧，在飯桌上都是一群老江湖，在不經(jīng)意間就在套話，我這涉事未深的少年最好的應(yīng)對(duì)方式就是少說(shuō)話多吃飯。

高海拔地區(qū)比平原地區(qū)最大的區(qū)別就是缺少氧氣，喝了兩杯實(shí)在推不掉的酒我就不喝了，主要是怕出現(xiàn)危險(xiǎn)。晚上9時(shí)30分，我和帶隊(duì)的老師來(lái)到我的房間準(zhǔn)備第二天采樣所需要的物品，然后說(shuō)好第二天的分工之后，10時(shí)40分，老師回到自己的房間休息，我向去湖北的同學(xué)詢相關(guān)的情況，11時(shí)14分時(shí)我說(shuō)了一聲：明天酒醒了回我。

第二天7時(shí)10分，從睡夢(mèng)中起來(lái)，看了看手機(jī)，6時(shí)14分時(shí)他回了我一句：昨晚啥都不知道了。作為兩名還未畢業(yè)的大學(xué)生，這次行動(dòng)確實(shí)是對(duì)我們的一份磨煉！在省農(nóng)業(yè)廳的前輩們可能學(xué)校傳授的書面知識(shí)不如我們記得熟，但是在社會(huì)上的摸爬滾打所磨練出來(lái)為人處事能力遠(yuǎn)超過(guò)我們，大學(xué)能教我在社會(huì)上謀生的技能，我們與他們相差的是謀生的智慧，這是我們要一生學(xué)習(xí)的東西。

簡(jiǎn)單洗漱后，來(lái)到樓下，與老師一起吃的早餐并在微信上與當(dāng)?shù)丶s定上午9點(diǎn)去屠宰場(chǎng)取樣，但是9時(shí)27分當(dāng)?shù)氐娜瞬胚^(guò)來(lái)。在9時(shí)10分老師在其實(shí)已經(jīng)不太高興了，老師告訴我做事約定時(shí)間，絕對(duì)不能遲到，但是當(dāng)?shù)氐娜藖?lái)時(shí)候也是和顏悅色的并連說(shuō)沒(méi)事，我在這時(shí)候知道了什么叫做涵養(yǎng)。上午10時(shí)15分來(lái)到采樣的屠宰場(chǎng)，樣品集中在當(dāng)?shù)氐臋z測(cè)室，剛開始與老師合作有些生澀，在熟悉流程之后好了很多，我負(fù)責(zé)收集樣品，老師負(fù)責(zé)寫采集報(bào)告，上午11時(shí)15分奔赴下一個(gè)采集地點(diǎn)采集樣品，當(dāng)時(shí)天氣不太好，我們?nèi)サ氖钱?dāng)?shù)氐男竽辆郑诋?dāng)?shù)氐囊晃幌壬膸椭潞芸焱瓿闪朔謷ぷ?，吃了?jiǎn)單的一頓午飯后來(lái)到一個(gè)清真屠宰場(chǎng)，這里是采樣最最困難的地方。

第一次采集的時(shí)候，他們當(dāng)?shù)貙⑺械臉悠坊斓搅艘黄穑瑳](méi)辦法只能告訴當(dāng)?shù)氐娜说诙熘形缭賮?lái)采集。晚上回到酒店賓館將所有樣品整理好后，我跟老師一起去當(dāng)?shù)氐男〕越殖酝盹?。青海在我的印象里真的沒(méi)有什么特色，在我來(lái)青海之前唯一知道只有青海湖，在小吃街里可以看到來(lái)到四方的小吃，但是唯獨(dú)沒(méi)有青海的特色，感覺(jué)像我小時(shí)候的看到的《邯鄲學(xué)步》的故事，學(xué)會(huì)了四方的舞姿最后卻忘記了自己原來(lái)的樣子。

我現(xiàn)在還在求學(xué)階段，往后八年內(nèi)可能還是在求學(xué)之中，學(xué)四方之技，但是不能忘記自己，就像習(xí)總書記說(shuō)的不忘初心，這是我在社會(huì)中應(yīng)銘記的。第三天，我們?nèi)チ撕|市的采樣地點(diǎn)，這是當(dāng)?shù)氐囊粋€(gè)扶貧項(xiàng)目，它在村子的深處的艷陽(yáng)高照的地方，但是當(dāng)我們來(lái)到屋子里面的時(shí)候，明明沒(méi)有開冷氣但是卻能在屋子里感到?jīng)鲆猓芸焱瓿闪斯ぷ?，與當(dāng)?shù)氐睦习彘e聊，了解到當(dāng)?shù)氐男竽羴?lái)源于新疆，但是從他口中得到消息，近年因?yàn)榉侵挢i瘟造成豬肉產(chǎn)量減少，但是豬肉需求不減反增，造成豬肉價(jià)格上漲，利益幾乎成倍增加，如果利益超過(guò)百分之三百，一些人會(huì)突破任何底線，非洲豬瘟現(xiàn)在治療技術(shù)還不健全，最重要的手段是進(jìn)行防控，控制傳染源的交通是重要的防控一環(huán)，但是在利益面前偷渡運(yùn)豬真的會(huì)出來(lái)，世事難料啊，這個(gè)犯罪成本很低，控制不起來(lái)就會(huì)造成封鎖線突破，希望在這個(gè)特殊時(shí)期能有些特殊的手段吧。

聊了一會(huì)兒后，因?yàn)闀r(shí)間已經(jīng)不早了，我們?nèi)チ水?dāng)?shù)氐囊患绎堭^吃飯，這里是西寧的最特色小吃的地方，我們?cè)谶@里吃了釀皮和綠面飯。這里的人也喜歡吃辣，但是他們的偏向于干粉辣，就是吃完之后感覺(jué)在嘴里黏上干粉的感覺(jué)，我問(wèn)當(dāng)?shù)乩习鍨槭裁聪襁@種特色的飯店為什么這么少，他回答說(shuō)這里的人跟喜歡來(lái)自中國(guó)四方的食物，其他的我沒(méi)多問(wèn)，每個(gè)地方都有每個(gè)地方的長(zhǎng)處與難處。

中午吃完飯后，我們來(lái)到了昨天采樣的清真屠宰場(chǎng)，這次所有樣品都分好類了，但是就是樣品太少了，最少的羊尿只有幾滴，沒(méi)辦法，在詢問(wèn)過(guò)領(lǐng)導(dǎo)之后我們將物品收集起來(lái)算是完成了任務(wù)。因?yàn)闀r(shí)間還早，在將樣品冷凍之后，我們順路去了藏藥文化博物館，見(jiàn)識(shí)了獨(dú)特的藏醫(yī)文化，在保護(hù)獨(dú)特的非物質(zhì)文化遺產(chǎn)上國(guó)家還是高度重視的，江澤民主席后的主席和總理都先后視察了這里。

在6月14日下午6：50分，我們安全回到了青島，說(shuō)來(lái)也奇怪，我在青海沒(méi)事，到了家里卻感覺(jué)頭暈，可能氧氣濃度對(duì)那時(shí)候的我太高了吧。這次出差與其說(shuō)是工作，更多的像是一場(chǎng)修煉旅行。老人常說(shuō)紅塵練心對(duì)我們年輕人很重要，但是這場(chǎng)試煉一旦開始了，就沒(méi)有結(jié)束，這是一場(chǎng)用一生來(lái)答復(fù)的考試，沒(méi)有什么標(biāo)準(zhǔn)的對(duì)與錯(cuò)，只有值得還是不值得。

（三）實(shí)驗(yàn)方法總結(jié)

在中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心過(guò)去的六周中，我們主要學(xué)到的實(shí)驗(yàn)主要是從豬肝或是豬尿中檢測(cè)多藥物的殘留，其中的主要方法分為兩個(gè)：

第一種方法適用于檢測(cè)瘦肉精在內(nèi)的多藥物殘留。

在實(shí)驗(yàn)的最開始設(shè)置空白對(duì)照組，可設(shè)空白豬肝對(duì)照或是試劑空白對(duì)照，同時(shí)設(shè)置基質(zhì)校正樣品，此項(xiàng)操作就是在設(shè)置的空白豬肝里加入標(biāo)準(zhǔn)品，此項(xiàng)操作又稱為添加回收，目的是在液相色譜儀中形成標(biāo)準(zhǔn)，從而與樣品進(jìn)行比較檢測(cè)是否超標(biāo)。

其后每個(gè)樣品中加入8ml乙酸乙酯提取液，同時(shí)每個(gè)樣品中加入1ml氨水，乙酸乙酯能提取出樣品中的藥物，氨水的目的是是調(diào)節(jié)樣品的PH，因?yàn)樵谠诔醪教幚碇惺沁M(jìn)行液液萃取的，PH對(duì)具有酸堿性的物質(zhì)的溶解性或分配系數(shù)影響很大，調(diào)節(jié)PH使組分在水相中處于中性分子狀態(tài)，或是達(dá)到兩性分子的等電點(diǎn)，水溶性降低易被有機(jī)溶劑萃取，而這里的有機(jī)溶劑就是乙酸乙酯。

在加入乙酸乙酯和氨水后，分別用渦動(dòng)儀渦動(dòng)，其后用振動(dòng)儀振動(dòng)，這個(gè)步驟的目的是讓試劑與樣品充分混合。

其后采用高速低溫離心機(jī)8000-11000r離心6分鐘，在4攝氏度下提取上清液，但是樣品中的藥物可能還沒(méi)有提取完全，需要再次提取。

在離心后的提取物中加入8ml乙酸乙酯，再加入0.5ml氨水，用渦動(dòng)儀渦動(dòng)，用振動(dòng)儀振動(dòng)，再次用相同條件的離心機(jī)離心，將兩次上清液合并，此次是將樣品中的所有藥物混合。

其后將合并的上清液放到氮吹儀上氮吹，這個(gè)步驟是將多余的物質(zhì)吹掉，同時(shí)將藥物進(jìn)行吹干濃縮。

在吹干后拿出樣品，用3ml的8：2的千分之一的甲酸水比乙腈溶液進(jìn)行復(fù)溶，其后用渦動(dòng)儀渦動(dòng)使溶劑與藥物充分混合后，放入高速低溫離心機(jī)8000-11000r離心6分鐘，在4攝氏度下提取上清液。因?yàn)榻酉聛?lái)就是應(yīng)用反相固相萃取法，復(fù)溶液也是樣品通過(guò)的SPE小柱的溶劑，在反相SPE中是藥物保留的條件必須是水、緩沖液或是低濃度的乙腈或甲醇這是為什么采用這種復(fù)溶液的原因。在加入樣品之前要將MCX或是PCX小柱活化（兩種小柱均為陽(yáng)離子交換小柱）采用3ml甲醇，3ml純水，3ml千分之一的甲酸水進(jìn)行活化，這三種試劑作用分別是甲醇作為有機(jī)溶劑過(guò)柱活化，純水起到平衡的作用，而甲酸水是用來(lái)進(jìn)行調(diào)節(jié)小柱的PH，PH值在這固相萃取中由為重要，他是保證離子化的的必要條件。其后檢測(cè)樣品的PH值，樣品的PH值必須要小于其PKA兩個(gè)單位，目的是保證其帶電荷。用千分之一的甲酸水緩沖溶液調(diào)節(jié)完成后加入小柱內(nèi)，其后用3ml純水，3ml甲醇進(jìn)行淋洗，目的是為了除去不需要的組分或雜質(zhì)。其后將小管進(jìn)行抽干，用3ml百分之五的氨化甲醇進(jìn)行洗脫，選取百分之五的氨化甲醇的原因是因?yàn)橄疵撊芤罕仨毚笥谄銹KA的兩個(gè)單位，目的是中和分析物的電荷。

其后再次進(jìn)行氮吹，這個(gè)步驟是將多余的物質(zhì)吹掉，同時(shí)將藥物進(jìn)行吹干濃縮。

之后在空白豬肝樣品加入標(biāo)準(zhǔn)品，這個(gè)步驟是基質(zhì)矯正曲線，是為了在液相中調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)曲線的，其后采用1ml的9：1的千分之一甲酸水比乙腈溶液進(jìn)行復(fù)溶，其后用渦動(dòng)儀渦動(dòng)使溶劑充分溶合，采用這種溶液進(jìn)行復(fù)溶是因?yàn)檫@種溶液在液相分析儀中能穩(wěn)定出現(xiàn)數(shù)值。將復(fù)溶之后的溶液過(guò)濾膜裝進(jìn)檢測(cè)小瓶，這是為了去除雜質(zhì)，保證樣品澄清。

第二種方法是檢測(cè)大環(huán)內(nèi)酯和喹諾酮類藥物。

在實(shí)驗(yàn)的最開始設(shè)置空白對(duì)照組，可設(shè)空白豬肝對(duì)照或是試劑空白對(duì)照，同時(shí)設(shè)置基質(zhì)校正樣品，此項(xiàng)操作就是在設(shè)置的空白豬肝里加入標(biāo)準(zhǔn)品，此項(xiàng)操作又稱為添加回收，目的是在液相色譜儀中形成標(biāo)準(zhǔn)，從而與樣品進(jìn)行比較檢測(cè)是否超標(biāo)。

其后每個(gè)樣品加入8ml0.1mol每升的磷酸鹽提取液，因?yàn)樵谪i肝樣品中藥物易溶解在這種提取液，其后每個(gè)樣品加入2.5gNacl，其目的是采用鹽析，使樣品在離心過(guò)程中沉淀，使上清液更加澄清。

在加入磷酸鹽提取液和鹽后，分別用渦動(dòng)儀渦動(dòng)，其后用振動(dòng)儀振動(dòng)，這個(gè)步驟的目的是讓試劑與樣品充分混合。

其后采用高速低溫離心機(jī)8000-11000r離心6分鐘，在4攝氏度下提取上清液，但是樣品中的藥物可能還沒(méi)有提取完全，需要再次提取。

在離心后的提取物中加入8ml磷酸鹽提取液后，用渦動(dòng)儀渦動(dòng)，用振動(dòng)儀振動(dòng)，再次用相同條件的離心機(jī)離心，將兩次上清液合并，此次是將樣品中的所有藥物混合。

其后將在樣品上清液中加入16微升甲酸，調(diào)節(jié)上清液的PH值，樣品的PH值必須要小于其PKA兩個(gè)單位，目的是保證其帶電荷。其后采用高速低溫離心機(jī)8000-11000r離心6分鐘，在4攝氏度下提取上清液4ml.

在加入樣品之前要將MCX或是PCX小柱活化（兩種小柱均為陽(yáng)離子交換小柱）采用3ml甲醇，3ml純水，3ml千分之一的甲酸水進(jìn)行活化，這三種試劑作用分別是甲醇作為有機(jī)溶劑過(guò)柱活化，純水起到平衡的作用，而甲酸水是用來(lái)進(jìn)行調(diào)節(jié)小柱的PH。將提取的4ml上清液倒入小管內(nèi)，其后用3ml純水，3ml甲醇進(jìn)行淋洗，目的是為了除去不需要的組分或雜質(zhì)。其后將小管進(jìn)行抽干，用3ml百分之五的氨化甲醇進(jìn)行洗脫，選取百分之五的氨化甲醇的原因是因?yàn)橄疵撊芤罕仨毚笥谄銹KA的兩個(gè)單位，目的是中和分析物的電荷。

其后再次進(jìn)行氮吹，這個(gè)步驟是將多余的物質(zhì)吹掉，同時(shí)將藥物進(jìn)行吹干濃縮。

之后在空白豬肝樣品加入標(biāo)準(zhǔn)品，這個(gè)步驟是基質(zhì)矯正曲線，是為了在液相中調(diào)整標(biāo)準(zhǔn)曲線的，其后采用1ml的9：1的千分之一甲酸水比乙腈溶液進(jìn)行復(fù)溶，其后用渦動(dòng)儀渦動(dòng)使溶劑充分溶合，采用這種溶液進(jìn)行復(fù)溶是因?yàn)檫@種溶液在液相分析儀中能穩(wěn)定出現(xiàn)數(shù)值。將復(fù)溶之后的溶液過(guò)濾膜裝進(jìn)檢測(cè)小瓶，這是為了去除雜質(zhì)，保證樣品澄清。

這兩種方法是我學(xué)習(xí)的兩種檢測(cè)方法，上面詳細(xì)描述了豬肝藥物檢測(cè)方法，豬尿的檢測(cè)是做合并上清液之后的步驟。不同的是在活化中應(yīng)用千分之五的甲酸水，在淋洗的時(shí)候應(yīng)用百分之三十的甲醇水，在最后復(fù)溶的時(shí)候應(yīng)用8：2千分之一的甲酸水比乙腈溶液。

其實(shí)在上述的過(guò)程中有很多的精確加入或是配置的藥品，我問(wèn)過(guò)老師，為什么加入這種比例或是濃度的溶劑，老師說(shuō)這是在不斷改進(jìn)中，逐漸改變一個(gè)變量總結(jié)出來(lái)的方法。實(shí)驗(yàn)是枯燥的，在嘗試中改變是創(chuàng)造新方法的必要條件，這給了我啟發(fā)，以后我在我的研究生生涯中，是不是可以應(yīng)用這種思路去創(chuàng)作或是構(gòu)思我的實(shí)驗(yàn)或是屬于我自己的實(shí)驗(yàn)方法，現(xiàn)在唯一的遺憾就是沒(méi)有把液相分析儀的技術(shù)學(xué)熟，這是我以后做實(shí)驗(yàn)必要學(xué)習(xí)的內(nèi)容，下周師姐會(huì)帶我們學(xué)習(xí)，一定要加油，為了自己將來(lái)，奮斗吧。

在這一個(gè)月中，我出現(xiàn)很多失誤，有很多的不足，這讓我看清我有哪些需要強(qiáng)化，有哪些需要改正。我是一個(gè)不斷進(jìn)行嘗試與探索的青年，去過(guò)最發(fā)達(dá)的國(guó)家旅行，也去過(guò)最基層的農(nóng)村調(diào)研。但是這次實(shí)踐是最特別的記憶，在這里我真正應(yīng)用自己的所學(xué)去觀察了這個(gè)我未來(lái)可能投身的行業(yè)。我們青年在社會(huì)面前還很稚嫩，但是我們還有比別人年輕的資本，我們會(huì)在不斷學(xué)習(xí)中改進(jìn)與成長(zhǎng)，我們擁有無(wú)限的可能。

感謝老師給我這次實(shí)踐的機(jī)會(huì)，在這里學(xué)習(xí)的道理，我終身受益。