高譽欣 張晟寧 王浩
摘? 要:目的對比不同飼養(yǎng)環(huán)境對Wistar大鼠血常規(guī)和血生化數(shù)據(jù)的影響。方法用獸用全自動血液細胞分析儀和全自動生化分析儀測不同飼養(yǎng)環(huán)境下大鼠的血常規(guī)與血液生化數(shù)據(jù)。結(jié)果普通開放環(huán)境飼養(yǎng)的大鼠與IVC屏障環(huán)境飼養(yǎng)的大鼠血常規(guī)六項數(shù)據(jù)中(HB、RBC、WBC、中性、淋巴、單核)WBC 差異及其顯著(P <0.01),其余幾項數(shù)據(jù)差異無顯著性(P >0.05);生化九項數(shù)據(jù)中,TP、ALB、UREA、TC差異有顯著性(P <0.05),ALT、AST、Crea、Glu、TG差異無顯著性(P >0.05)。結(jié)論不同飼養(yǎng)環(huán)境對大鼠血常規(guī)與血生化數(shù)據(jù)有一定影響。
關(guān)鍵詞:飼養(yǎng)環(huán)境;Wistar大鼠;血常規(guī);血生化
實驗動物結(jié)果受多種因素的不同影響,主要是遺傳因素和環(huán)境因素的綜合結(jié)果。其中環(huán)境可分為外環(huán)境和內(nèi)環(huán)境。外環(huán)境是指實驗動物設(shè)施以外的環(huán)境。內(nèi)環(huán)境是指實驗動物的生活環(huán)境。實驗動物一生都生活在一個人工控制的環(huán)境下,失去了較為廣泛的適應(yīng)環(huán)境的能力。影響實驗動物的環(huán)境因素主要有以下幾點:物理因素、化學(xué)因素、生物因素和人為因素。本次試驗旨在研究不同飼養(yǎng)環(huán)境對實驗動物血常規(guī)和血生化數(shù)據(jù)的影響。
1? 材料和方法
1.1? 動物來源
成年(8~10周齡)wistar雄性大鼠20只。由濟南朋悅實驗動物繁育有限公司提供【SCXK(魯)2014 0007】。
1.2? 飼養(yǎng)環(huán)境
普通開放環(huán)境與屏障環(huán)境? 【SYXK(魯)2018 0007】。
1.3? 主要試驗儀器及試劑
1.3.1? 主要試驗儀器
BC-2800Vet 獸用全自動血液細胞分析儀,BS-190全自動生化分析儀,臺式低速自動平衡離心機
1.3.2? 主要試劑
試劑:均購自深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司。
血常規(guī):獸用血液細胞分析儀用溶血劑,Lot:2015101501;獸用清洗液,Lot:2015102401;獸用血液細胞分析儀用稀釋液,Lot:2015091201。
血生化:谷丙轉(zhuǎn)氨酶ALT,Lot:140116004,IFCC法;谷草轉(zhuǎn)氨酶 AST,140215026,IFCC法;總蛋白TP,Lot:140815023,雙縮脲法;白蛋白ALB,Lot:140916001,溴甲酚綠法;尿素氮UREA,Lot:141316003,紫外-谷氨酸脫氫酶法;肌酐CREA,Lot:141016003,改良Jaff法;葡萄糖Glu,Lot:141516003,葡萄糖氧化酶法;總膽固醇TC,Lot:141616003,氧化酶法;甘油三酯TG,Lot:141716002,氧化酶法。
1.4? 試驗方法
1.4.1? 將大鼠隨機分為兩組,每組10只,單籠單只飼養(yǎng)。第一組在屏障環(huán)境內(nèi)飼養(yǎng),水、飼料、墊料、籠具高壓滅菌處理,每3d更換一次墊料;第二組在普通開放式環(huán)境下飼養(yǎng),水、飼料、墊料、籠具不經(jīng)過高壓滅菌處理直接使用,每5d更換一次墊料。
1.4.2? 飼養(yǎng)四周以后,將大鼠禁食16小時(不禁水)
1.4.3? 標(biāo)記并稱重大鼠。根據(jù)體重腹腔注射1%戊巴比妥鈉麻醉,腹主動脈取血,EDTA-Na2抗凝測血常規(guī)。另取一管血液,40分鐘后,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘,吸取上層血清,備做血生化檢測。
1.5? 統(tǒng)計方法
雙因素方差分析法
2? 結(jié)果
2.1? 血常規(guī)
HB? P值 0.570;RBC? P值 0.903;WBC? P值 0.000;
中性粒細胞P值0.581;淋巴細胞P值0.169;單核粒細胞P值0.957
2.2血生化
ALT? P值0.545;AST? P值0.975;TP? P值0.002;ALB? P值0.002;UREA? P值0.020;
Crea? P值0.904;Glu? P值0.858;TC? P值0.018;TG? P值0.676
3討論
3.1? 實驗動物被稱為生命科學(xué)領(lǐng)域中的活試劑,即是生命科學(xué)的研究對象,又是科學(xué)研究的載體,其各項生理數(shù)據(jù)、生化指標(biāo)的準(zhǔn)確性對生命科學(xué)研究具有重要意義。
3.2? 本實驗對不同飼養(yǎng)環(huán)境下Wistar大鼠的血常規(guī)、血液生化值進行了對比,結(jié)果顯示普通開放環(huán)境飼養(yǎng)的大鼠與屏障環(huán)境飼養(yǎng)的大鼠血常規(guī)六項數(shù)據(jù)中(HB、RBC、WBC、中性、淋巴、單核)WBC 差異及其顯著(P <0.01),其余幾項數(shù)據(jù)差異無顯著性(P >0.05);生化九項數(shù)據(jù)中,TP、ALB、UREA、TC差異有顯著性(P <0.05),ALT、AST、Crea、Glu、TG差異無顯著性(P >0.05)。
3.3實驗進行到第三周開始,普通飼養(yǎng)環(huán)境下的各只大鼠,頸部、頭部陸續(xù)出現(xiàn)抓傷,被毛脫落,皮膚裸露,嚴(yán)重的有出血等現(xiàn)象。加之血常規(guī)中白細胞均值高于潔凈環(huán)境白細胞均值,差異極其顯著(P <0.01),懷疑是由于普通環(huán)境內(nèi)細菌等微生物數(shù)量過高引起。因此在實驗中應(yīng)嚴(yán)格按照要求在符合實驗的環(huán)境中飼養(yǎng)實驗動物,以排除非實驗因素的影響,使實驗結(jié)果更加客觀準(zhǔn)確。