栽培配方對杏鮑菇子實體生長的影響

朱傳進

栽培配方對杏鮑菇子實體生長的影響

朱傳進

（古田縣食用菌研發(fā)中心，福建 寧德 352200）

將雜木屑、麩皮、玉米粉、米糠、碳酸鈣等常見栽培原料及兩種新原料——大豆糖蜜和豆餅粉，按照不同比例設置5種杏鮑菇工廠化栽培配方。通過測定各配方菌絲生長速度、不同生長階段相關酶活性、子實體性狀、生物學效率等系列指標，探究得到最優(yōu)配方：棉籽殼50%、雜木屑15%、麩皮25%、大豆糖蜜5%、玉米粉5%，表現(xiàn)菌絲生長速度快、酶活性強、生物學效率高。

杏鮑菇；栽培配方；酶活性；生物學效率

杏鮑菇（Pleurotus eryngii）又名刺芹側耳，菇體具有杏仁香味，肉質肥厚，口感鮮嫩，營養(yǎng)豐富，并具有降血脂、降膽固醇、抗癌、防治心血管病、促進胃腸消化、增強機體免疫能力等功效，在食用菌市場中占據(jù)重要地位[1～6]。

杏鮑菇工廠化栽培以米糠、玉米粉、麩皮等為主要氮源，以玉米芯、木屑、棉籽殼等為主要碳源。而大豆糖蜜是生產大豆?jié)饪s蛋白過程中，醇溶部分物質，經濃縮處理后的產品，因富含糖類物質，顏色和流動性類似于蜂蜜而得名。其含有大量的大豆異黃酮及大豆低聚糖等，是酵母發(fā)酵的較好營養(yǎng)物質之一，也是價格低廉的飼料原料。豆餅粉是采用壓榨法提取油后的大豆剩余物粉碎而成，含有豐富的蛋白質，可以提供充足的氮源。本研究通過利用大豆糖蜜、豆餅粉、棉籽殼、不同粗細雜木屑等調整優(yōu)化杏鮑菇栽培配方營養(yǎng)構成，以期獲得更優(yōu)的栽培效果。

1 材料與方法

1.1 材料

（1）供試菌株。杏鮑菇菌株Ple-tm為福建農林大學（古田）菌業(yè)研究院實驗室保藏菌種。

（2）供試培養(yǎng)基。母種為PDA加富培養(yǎng)基：葡萄糖20 g、馬鈴薯200 g、酵母粉3 g、蛋白胨3 g、KH2PO41.5 g、MgSO4?7H2O 1.5 g、維生素B10.01 g、瓊脂20 g，加水至1 000 mL，pH自然。

栽培培養(yǎng)基配方設5個，各配方含水量均為60%～65%。

配方1為常用配方（對照）：雜木屑（細）35%、麩皮15%、玉米芯32.5%、玉米粉5%、米糠10%、碳酸鈣1.5%、石灰1%。同時也用作原種培養(yǎng)基。

配方2：雜木屑（粗）35%、麩皮15%、玉米芯32.5%、玉米粉5%、米糠10%、碳酸鈣1.5%、石灰1%。

配方3：棉籽殼50%、雜木屑（粗）15%、麩皮25%、豆餅粉5%、玉米粉5%。

配方4：棉籽殼48.5%、雜木屑（粗）35%、麩皮10%、玉米粉5%、石灰1.5%。

首先應用分子模擬方法，構建正確的二維或三維分子結構，采用構象分析、分子力學等方法獲得最優(yōu)化的構象；采用拓撲學方法、量子力學方法等計算化合物的分子結構特征參數(shù)，獲取分子的結構信息，進行分子結構描述。

配方5：棉籽殼50%、雜木屑（粗）15%、麩皮25%、大豆糖蜜5%、玉米粉5%。

1.2 方法

將保存于4 ℃的杏鮑菇母種在無菌條件下接到 PDA加富培養(yǎng)基平板上，25 ℃恒溫培養(yǎng)直至長滿后轉接至原種袋制備原種。

（1）不同培養(yǎng)基上杏鮑菇菌絲生長速度的測定。根據(jù)5個配方配置相應的栽培培養(yǎng)基，采用瓶口直徑5.5 cm，高9 cm規(guī)格的栽培瓶，每瓶裝料量為濕料200 g（干料約78 g）。裝瓶后高壓121 ℃滅菌3 h，取杏鮑菇菌絲健壯的原種袋，在無菌的條件下轉接于各栽培培養(yǎng)基上，每配方接種20瓶，栽培袋置于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中避光養(yǎng)菌。培養(yǎng)至10天、20天時測量記錄各配方菌絲生長速度。

（2）粗酶液的制備。按照杏鮑菇的生長發(fā)育情況，生長期10天、20天、30天，后熟期結束（35天），原基期，出蕾期各取一次樣，共6次樣。取樣后將栽培瓶中栽培料取出揉碎，混勻，精確稱取10 g，加入50 mL水，26 ℃，120 r/min 搖床2 h。8 000 r/min，4 ℃離心15 min。上清液即為粗酶液。

（3）酶活的測定。杏鮑菇的酶活測定方法參照文獻[11,12]進行。木聚糖酶，采用DNS法；纖維素酶，采用濾紙法；漆酶，采用ABTS法[7～10]；木質素過氧化酶，采用黎蘆醇氧化速率法；錳過氧化物酶，采用愈創(chuàng)木酚法，按3.1 mL反應體系。

（4）出菇試驗。菌絲滿瓶并后熟一周后開蓋，用經滅菌的藥匙輕輕刮去表面的老菌塊、菌皮和氣生菌絲。浸水2 h并倒掉多余水分，放入15 ℃、濕度90%的出菇培養(yǎng)箱中避光培養(yǎng)。

待長出原基后，溫度和濕度保持不變，設置500～1 000 lx散射光繼續(xù)培養(yǎng)。菇蕾高度3 cm左右時疏蕾，每瓶保留品相優(yōu)良的菇蕾3～4個，其余去除。待子實體成熟時，采收、記錄子實體形態(tài)、大小、顏色、菌柄長度、菌蓋大小、軟硬度等；稱重、計算生物學效率（生物學效率=子實體質量/培養(yǎng)料干重×100%）。

（5）數(shù)據(jù)采集與分析。5種栽培配方中分別隨機選取3瓶進行1～10天、11～20天的菌絲生長速度測定；按照杏鮑菇的生長發(fā)育情況，于生長期10天、20天、30天，后熟期結束（35天），原基期，以及出蕾期各取3瓶測定酶活；采收時隨機選擇3瓶測定出菇性狀。

2 結果與分析

2.1 菌絲生長速度

表1 各配方前20天的菌絲平均生長速度

2.2 酶活

（1）木聚糖酶。對5個配方菌絲萌發(fā)期、半滿期、滿瓶期、后熟期、原基期、出蕾期6個時期的培養(yǎng)料進行木聚糖酶測定，結果只有配方5在菌絲萌發(fā)期與半滿期出現(xiàn)了酶活，分別為16.9±1.43 U/mL和26.9±0.62 U/mL，其余配方均未檢出，說明只有配方5在滿袋前產生木聚糖酶，證明其可分解木聚糖。

（2）纖維素酶。5種配方在杏鮑菇生長發(fā)育過程中纖維素酶酶活測定結果顯示有增有減，且變化幅度不定。對比分析發(fā)現(xiàn)，配方5的纖維素酶活性顯著較高，平均吸光度值最高，為3.24±0.62；其他各配方（1、2、3、4）的纖維素酶活性基本上處于同一水平，平均吸光度值分別為2.94±0.48、2.10±0.32、2.74±0.69、2.58±0.57。說明配方5可以利用的纖維素水平更高（表2）。

A—配方1；B—配方2；C—配方3；D—配方4；E—配方5。

圖1 5個配方杏鮑菇菌絲的生長情況（接種第20天）

表2 纖維素酶酶活測定結果 （單位：U/mL）

（3）漆酶。漆酶酶活測定結果顯示，5種配方均為出蕾期時活性最低，整個過程呈現(xiàn)先上升后下降趨勢，配方2、3變化幅度較小，配方5、4分別在接種第20天和第30天達到最高水平，分別為41.8±6.35 U/mL和51.6±9.62 U/mL（表3）。平均吸光度值則以配方5最大，為18.80±2.19。其他各配方（1、2、3、4）的平均吸光度值分別為11.42±1.86、12.23±0.94、8.65±1.74、14.70±3.21。

表3 漆酶酶活測定結果 （單位：U/mL）

（4）木質素過氧化物酶。木質素過氧化物酶測定結果，各配方在6個階段的變化不一，在特定時期下存在不同程度的增加或減少。其中，以配方1的木質素過氧化物酶活性較高（表4），且木質素過氧化物酶的平均吸光度值也最大，為43.27±8.56；其次是配方5，平均吸光度值為37.50±2.37；配方4、3、2平均吸光度值分別為27.28±3.26、16.55±0.75和16.15±2.87。

表4 木質素過氧化物酶酶活測定結果（單位：U/mL）

（5）錳過氧化物酶。錳過氧化物酶測定結果，各配方在不同時期的酶活性大體上呈拋物線狀，5種配方在菌絲萌發(fā)期均無酶活性，滿瓶期均有酶活性，而其余階段總存在某個配方無酶活性，只有配方5在萌發(fā)期后各期測定均存在酶活性。結合平均吸光度分析可知，配方5的平均吸光度值最高，為1.72±0.32，說明其錳過氧化物酶活性高（表5）。錳過氧化物酶平均吸光度值配方1、2、3、4分別為1.24±0.32、0.71±0.16、1.05±0.25、1.13±0.16。

3 出菇試驗

3.1 產量指標和生物學效率

5個配方子實體形態(tài)基本無差異（圖2），均為傘狀，菌柄白色，菌蓋淺褐色，質感硬實。柄寬和柄長等指標相差不大（表6），配方1、2菌柄直徑較小，配方5菌柄最短；菌蓋直徑，除配方3外，其余配方均在5 cm以上，其中配方1、5最大。生物學效率配方5明顯優(yōu)于其他配方，達到83.32%。

表5 錳過氧化物酶酶活測定結果 （單位：U/mL）

注：各配方萌發(fā)期錳過氧化物酶酶活測定結果均為0U/mL。

3.2 產量和生物學效率

5種配方生物學效率以配方5和配方3優(yōu)于其他配方，子實體的柄粗和柄長相差不大，菌蓋直徑，除配方3之外，其余配方均在5 cm以上，其中配方1和5菌蓋直徑最大（表6）。

表6 各配方杏鮑菇產量與子實體性狀

3 結論與討論

5種配方酶活力測定以及出菇試驗結果顯示，栽培效果以添加大豆糖蜜的配方5（棉籽殼50%、雜木屑15%、麩皮25%、大豆糖蜜5%、玉米粉5%）較優(yōu)。本實驗中，配方3和5的生物學效率遠高于配方1、2和4。從配方組成看，配方3和5的雜木屑含量相同，遠低于其他3個配方，而麩皮含量遠高于其他3個配方，說明在一定范圍內，雜木屑含量越低，麩皮含量越高，菌絲生長越好，生物學效率越高。這與王鵬等和班立桐等的研究結果相一致[13,14]。

A—配方1；B—配方2；C-配方3；D—配方4； E—配方5

圖2 子實體形態(tài)

添加玉米芯的配方1、2生物學效率低于添加棉籽殼的配方3、5，配方4在配方3的基礎上利用雜木屑替換15%的麩皮，產量反而低于配方1、2?？梢钥闯隼妹拮褮ぷ鳛樵耘嗔铣龉疆a量優(yōu)于玉米芯，麩皮含量的減少會導致含氮量過低，出菇產量降低，這與車星星等的研究結論[15]有所不同。配方3含有特殊組分的豆餅粉，配方5含有特殊組分的大豆糖蜜，添加豆餅粉或大豆糖蜜都可大幅度提高菌體生長速度和生物學效率，從而使其他組分的影響變小，導致結果不同；配方4未添加特殊組分，生物學效率低于配方3、5。

添加豆餅粉或大豆糖蜜可提高杏鮑菇生物學效率，且添加大豆糖蜜則比添加豆餅粉效果更好。工廠化栽培杏鮑菇添加大豆糖蜜的最佳配方值得進一步深入研究。

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Effects of different cultivation components on the growth offruiting bodies

Zhu Chuanjin

(Edible Fungi Research and Development Center of Gutian, Gutian 350002, China)

In this experiment, the common cultivated mats of mixed wood chips, wheat bran, corn flour, rice bran and calcium carbonate were prepared according to different proportions and try to add two new components including soybean molasses and soybean meal, mixed to form five kinds of cultivation formula. Growth rate, lignin degrading enzyme system and related enzyme activity, yield, growth cycle, biological efficiency and other indicators were determined to explore the different cultivation ofat different growth stages of enzyme activity and fruiting body growth (yield, growth cycle etc.). The results showed that the best cultivation formula was 50% of cottonseed hull, 15% of chunk wood, 25% of bran, 5% of soybean molasses and 5% of corn flour.

cultivated substrate;i; fruit body growth; enzyme activity; growth cycle

S646

B

2095-0934（2019）05-331-05

福建省發(fā)改委農業(yè)五新工程項目（閩發(fā)改委投資[2012]931號）；福建省自然基金杰出青年項目（NO. 2014J060 10）；福建省食用菌產業(yè)重大研發(fā)平臺（2014N2101）；食用菌產業(yè)農技推廣服務體系建設（KNJ-153011-3）

朱傳進（1969—），男，大專，農藝師，主要從事食用菌生物技術及應用研究。E-mail：2992056713@qq.com。