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    一例由豬流行性腹瀉病毒變異株引發(fā)仔豬腹瀉的診斷與治療

    2019-10-21 05:58:56
    養(yǎng)豬 2019年5期
    關(guān)鍵詞:流行性豬群變異

    周 政

    (湘潭縣易俗河鎮(zhèn)農(nóng)技農(nóng)機畜牧水產(chǎn)推廣服務中心,湖南 湘潭 411228)

    在生豬養(yǎng)殖過程中,仔豬腹瀉是較為常見的臨床疾病,其臨床表現(xiàn)主要包括腹瀉、消瘦和脫水等,1周齡內(nèi)哺乳仔豬發(fā)病后死亡率可高達100%[1]。引起仔豬腹瀉的病因有很多,其中豬流行性腹瀉病毒(PEDV)、豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)和豬輪狀病毒(PRoV)是較為常見的,可以引起仔豬腹瀉,而豬德爾塔冠狀病毒也是近期發(fā)現(xiàn)可以導致仔豬腹瀉的新型冠狀病毒[2]。PEDV感染仔豬后可導致病豬出現(xiàn)嘔吐、水樣腹瀉、消瘦等臨床癥狀,且伴發(fā)高死亡率[3-4]。但由于其臨床癥狀與其它病毒性腹瀉類似,臨床和病理變化診斷無法確診,需要借助實驗室診斷技術(shù)對病因進行確診,以進行針對性地治療和防控。

    2018年4月初,筆者所在的湖南省湘潭縣某規(guī)?;B(yǎng)豬場暴發(fā)仔豬腹瀉,10日齡內(nèi)仔豬出現(xiàn)持續(xù)性水樣腹瀉、嘔吐和極度消瘦的臨床癥狀,排出糞便為黃色,后期為黑色且?guī)в行任兜募S便,伴有極高的死亡率,養(yǎng)殖戶使用多種抗菌藥后仍然無效。最終確診為PEDV變異株感染所引起,經(jīng)過緊急處理措施后,疫情得到有效控制,疾病的診斷和治療過程如下。

    1 發(fā)病情況

    2018年4月初,湘潭縣易俗河鎮(zhèn)某規(guī)?;i場(存欄母豬100頭左右)部分欄舍仔豬發(fā)生水樣腹瀉、食欲差等臨床癥狀,養(yǎng)殖戶以為是細菌性疾病感染所導致,故使用常規(guī)抗菌藥物(恩羅沙星)對發(fā)病豬群進行治療,但效果較差。在治療期間,其它仔豬群也陸續(xù)發(fā)生較嚴重的腹瀉,且7日齡內(nèi)發(fā)病豬群死亡率接近100%。值得注意的是,該豬場其它發(fā)育階段豬群未出現(xiàn)明顯的臨床癥狀,說明該豬場未發(fā)生繁殖障礙性傳染病,如豬偽狂犬病、豬繁殖與呼吸綜合征等。

    2 臨床癥狀與病理變化

    通過對發(fā)病豬群臨床癥狀進行觀察,發(fā)病的豬群主要是仔豬和保育豬,病豬消瘦、腹瀉、脫水和畏寒,在產(chǎn)床可見仔豬嘔吐物和水樣腹瀉糞便。通過對死亡和瀕臨死亡的仔豬進行病理解剖,發(fā)現(xiàn)被解剖的仔豬均出現(xiàn)較為明顯的病理變化,如豬小腸腸壁變薄、腸內(nèi)有未消化的凝乳塊,且內(nèi)容物有腥臭味,但明顯的病理變化主要集中在腸道,其它主要臟器未發(fā)生明顯臨床癥狀。

    基于對豬群的發(fā)病特點、臨床癥狀和病理變化的觀察,我們初步判定該場豬群腹瀉病可能是由于流行性腹瀉病毒、傳染性胃腸炎病毒、輪狀病毒或其它腹瀉性病毒所導致。為了對發(fā)病原因進行確診,我們將腹瀉仔豬送至湖南農(nóng)業(yè)大學動物醫(yī)學院實驗室進行病原診斷。

    3 實驗室病原診斷

    將發(fā)病仔豬無菌解剖,取小腸內(nèi)容物入無菌試管內(nèi),加入適合的滅菌PBS溶液后充分混勻,反復凍融3次后,4℃高速離心(13 000 r/min)5 min,取上清液按照試劑盒說明書提取DNA/RNA,逆轉(zhuǎn)錄后獲得cDNA,應用RT-PCR技術(shù)對樣品進行病原檢測,發(fā)現(xiàn)為PEDV陽性(圖1),豬傳染性胃腸炎病毒和豬輪狀病毒陰性。

    圖1 被檢樣品PEDV-N基因部分序列RT-PCR檢測結(jié)果

    為了確定該豬場暴發(fā)的PEDV毒株是否為變異株,我們挑選1個樣品的S1基因高變區(qū)序列進行擴增與測序(圖2),同時將獲得的序列進行Blast分析。結(jié)果顯示,擴增的PEDV毒株S1基因部分片段大小為1 503 bp;Blast分析結(jié)果顯示,該毒株與GenBank收錄的變異株相似性為97.3%~99.8%,與PEDV CV777疫苗株同源性較低,僅為93.6%,說明該豬場流行的PEDV為變異株。

    圖2 本次研究PEDV分離株S1基因部分序列RT-PCR擴增結(jié)果

    4 治療與防控

    通過進一步對病原進行試驗技術(shù)診斷,最終可以確診為該豬場仔豬腹瀉是由于PEDV變異株感染所引起,需要采取緊急的處理措施,以降低豬群的死亡率,減少養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟損失。

    4.1 緊急疫苗接種

    由于該豬場對豬群免疫接種的腹瀉疫苗為“腹瀉三聯(lián)活疫苗”,其中PEDV疫苗株來源為CV777毒株,而該豬場發(fā)生的是PEDV變異株暴發(fā),傳統(tǒng)的CV777疫苗株對豬群提供保護力有限,而豬群若繼發(fā)其它免疫抑制性疾病可導致免疫接種效果差,使豬群雖然接種基于CV777毒株研發(fā)的弱毒疫苗仍然暴發(fā)PED(豬流行性腹瀉)。因此,我們選用武漢科前生物股份有限公司生產(chǎn)的“科瀉寧(豬傳染性胃腸炎/豬流行性腹瀉二聯(lián)滅活疫苗)”和“科腹凈(豬傳染性胃腸炎/流行性腹瀉二聯(lián)弱毒疫苗)”對豬群進行緊急接種免疫,這兩種疫苗是基于PEDV變異株所進行研發(fā)的,對PEDV變異株的防控具有較好的效果。其具體免疫防控措施參考疫苗廠家提供建議進行。

    4.2 有效的防控措施

    對無法挽救的發(fā)病豬群進行撲殺并無害化處理,將發(fā)病初期的豬群和健康豬群進行隔離,并緊急免疫接種疫苗;對全場進行消毒和衛(wèi)生清理,用不同消毒機制的消毒劑對豬舍地面、器具、墊料和運輸車輛等進行定期消毒;對豬舍內(nèi)的飼料和飲水等進行病原檢測,確定無PEDV污染后方可進行飼喂或投飲;在飲水中加入適量的多維或食鹽,提高豬群免疫力,或防止病豬腹瀉而脫水死亡;在豬群的飼料中加入適量的抗生素(如阿莫西林),防止繼發(fā)細菌性感染等。

    該豬場嚴格實施以上免疫程序和防控措施后,筆者于10日后回訪,該豬場PED疫情明顯好轉(zhuǎn),仔豬的發(fā)病率和死亡率均下降。1個月后,豬場負責人表示豬場出現(xiàn)腹瀉的案例較少,且腹瀉的原因多是細菌感染所致,不是PEDV感染所引起。

    5 小結(jié)與討論

    在生豬養(yǎng)殖過程中,仔豬易出現(xiàn)腹瀉、發(fā)熱等臨床癥狀,若養(yǎng)殖戶未及時干預和治療,該病會迅速波及其它健康仔豬群,導致較高的發(fā)病率和死亡率,特別是由細菌或病毒所引起的疾病。導致仔豬腹瀉的病因較為復雜,如細菌、寄生蟲、病毒感染、天氣變化和其它因素,但多為病原感染所導致,特別是病毒性感染,能導致仔豬腹瀉的病毒多為PEDV等冠狀病毒感染。豬流行性腹瀉在我國分布廣泛,且對養(yǎng)豬業(yè)危害嚴重,2010年以來我國學者從暴發(fā)豬流行性腹瀉的豬場分離出的PEDV多為變異株,其基因組與PEDV CV777疫苗株存在很大的差異,使得部分豬場即使接種免疫了CV777弱毒疫苗仍然暴發(fā)流行性腹瀉,并引起仔豬腹瀉和大批量死亡,給豬場造成巨大經(jīng)濟損失[5-6]。因此,為有效防控豬流行性腹瀉的發(fā)生與流行,豬場可選擇基于PEDV變異株研發(fā)的弱毒疫苗或滅活苗對豬群進行免疫接種,若發(fā)生腹瀉等臨床癥狀,及時將病料樣本送至專業(yè)實驗室進行診斷,確定導致該病發(fā)生的原因,然后有針對性地治療和進一步預防等。

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