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    菜心吸收和積累土壤中5種多環(huán)芳烴規(guī)律

    2019-10-18 09:24:13梁勇生龍明華巫桂芬張會敏喬雙雨
    江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2019年15期

    梁勇生 龍明華 巫桂芬 張會敏 喬雙雨

    摘要:采用萘(Nap)、菲(Phe)、熒蒽(Flt)、苯并(a)芘(BaP)和茚并(1,2,3-cd)芘(InP)5種不同苯環(huán)數(shù)的多環(huán)芳烴(PAHs)混合溶液施入土壤,制成不同濃度PAHs污染土壤盆栽種植菜心,研究菜心對土壤中不同種類PAHs的吸收和積累規(guī)律。結(jié)果表明,菜心根部、莖部、葉片中的PAHs含量隨著PAHs處理濃度的增加而升高;菜心植株內(nèi)不同部位的PAHs含量表現(xiàn)為:根部>葉片>莖部;菜心葉片中的PAHs含量在定植后17 d內(nèi)快速上升,17~24 d上升速度明顯減慢,定植后24 d低濃度處理和CK葉片中的PAHs含量出現(xiàn)下降趨勢。菜心植株中低環(huán)類PAHs(2~3個(gè)苯環(huán))的含量占PAHs總量的77.61%~90.3%,高環(huán)類PAHs(4~6個(gè)苯環(huán))的含量占PAHs總量的9.70%~22.39%。菜心植株對土壤中5種PAHs的富集能力大小為Phe>Nap>Flt>BaP>InP,菜心根部對BaP和InP的富集能力遠(yuǎn)大于莖部和葉片。

    關(guān)鍵詞:菜心;多環(huán)芳烴;吸收;積累;規(guī)律

    中圖分類號:X171.5

    文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A

    文章編號:1002-1302(2019)15-0162-04

    多環(huán)芳烴(PAHs)是環(huán)境中普遍存在的一類持久性有機(jī)污染物,土壤是PAHs的主要載體之一。植物吸收環(huán)境中的PAHs途徑一是通過植物根系的吸附作用吸收土壤溶液中的PAHs;二是PAHs以氣態(tài)和顆粒態(tài)通過大氣沉降作用附著在植物葉片上,通過葉片角質(zhì)層和氣孔等途徑進(jìn)入植物體內(nèi)。土壤中的有機(jī)污染物可被根部吸收,在蒸騰作用下,隨蒸騰流沿木質(zhì)部向莖部和葉片傳輸[1]。土壤的污染程度、肥料施用方式和肥料的品種都會影響菜心中的PAHs含量[2]。但也有研究表明,蔬菜植株中PAHs的含量與土壤的PAHs濃度不相關(guān),菜心植株中積累的PAHs總量大多不是由根系吸收和運(yùn)輸?shù)?,空氣中PAHs也會影響菜心植株中PAHs的含量[3]。PAHs很難從植物根部向莖部和葉片運(yùn)輸[4]。此外,PAHs的種類眾多,化學(xué)性質(zhì)也各不相同,低苯環(huán)的PAHs具有不穩(wěn)定性和揮發(fā)性,而高苯環(huán)的PAHs容易被土壤中的膠體和有機(jī)質(zhì)吸附。為了弄清楚菜心等蔬菜作物對土壤中不同種類的PAHs吸收和積累的規(guī)律,本研究以菜心為材料進(jìn)行對比盆栽試驗(yàn),采用不同濃度的5種苯環(huán)數(shù)的PAHs混合溶液處理土壤,分析PAHs在菜心根部、莖部、葉片內(nèi)的積累情況,研究結(jié)果可為解釋菜心吸收和積累土壤PAHs的機(jī)理提供理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 供試材料

    供試菜心(Brassica rapa syn. campestris L. ssp. chinensis var. utilis Tsen et Lee)品種為四九甜脆菜心,生長周期為35~40 d,由柳州市興旺蔬菜良種經(jīng)營部提供。供試土壤為菜園土,取樣地點(diǎn)為廣西大學(xué)農(nóng)學(xué)院蔬菜試驗(yàn)基地,采用五點(diǎn)取樣法,取0~20 cm耕作層土壤,去除土壤中的碎石和植物殘根,在蔬菜大棚內(nèi)攤平晾干,敲碎后過5 mm篩集中備用。土壤的主要理化性狀為:pH值6.2,有機(jī)質(zhì)含量10.3 g/kg,速效氮含量65.5 mg/kg,速效磷含量15.8 mg/kg,速效鉀含量 70.2 mg/kg。土壤中的16種優(yōu)控PAHs總含量為 103.46 μg/kg。

    1.2 試驗(yàn)方法

    試驗(yàn)采用完全隨機(jī)設(shè)計(jì),設(shè)4個(gè)處理濃度,從16種優(yōu)控PAHs中選擇Nap(苯環(huán)數(shù)2)、Phe(苯環(huán)數(shù)3)、Flt(苯環(huán)數(shù)4)、BaP(苯環(huán)數(shù)5)、InP(苯環(huán)數(shù)6)等5種PAHs等量溶于丙酮配制成PAHs混合溶液,添加入土壤的PAHs總量分別為:0(CK未添加外源PAHs,其PAHs含量為土壤本身所含有的量)、1 000(T1)、2 000(T2)、5 000 μg/kg(T3),用長×寬×高規(guī)格為46 cm×21 cm×15 cm的泡沫箱種植,每箱裝土 10 kg,種植菜心6株,每個(gè)處理重復(fù)3次。

    1.3 栽培管理和采樣方法

    試驗(yàn)于2016年9—10月在廣西大學(xué)農(nóng)學(xué)院蔬菜基地蔬菜大棚內(nèi)進(jìn)行。將菜心種子播種于育苗盤,用基質(zhì)培養(yǎng)至3葉齡時(shí),選取長勢較一致菜心幼苗定植到各處理土壤中,定植后10 d開始采樣,測定菜心葉片中PAHs的含量,以后每7 d采樣1次,共采樣3次,每次葉片采樣于09:00—10:00進(jìn)行,各處理隨機(jī)選取2株菜心采集第1張至第4張真葉,第3次采樣分別采集所有處理的根、莖樣品,用大塑料封口袋裝取,冰盒保溫,防止菜心葉片、根和莖樣品失水萎蔫,帶回實(shí)驗(yàn)室,用去離子水沖洗,用濾紙輕輕地吸干上邊的水分,然后冷凍干燥,裝入牛皮紙信封,放進(jìn)-20 ℃冰箱中避光保存?zhèn)溆?,測定菜心植株樣品中的PAHs含量。待測土壤則用四分法取樣,實(shí)驗(yàn)室內(nèi)冷凍干燥,先放在-80 ℃冰箱1 h,之后樣品取出放在冷凍干燥機(jī)中,抽真空低溫干燥48~72 h,最后過60目篩,裝入塑料袋放入-20 ℃冰箱避光保存?zhèn)溆谩?/p>

    1.4 試驗(yàn)測定的項(xiàng)目及方法

    土壤中的PAHs總量和菜心植株中的PAHs含量的提取和測定,參照高彥征等的方法[5]稍作修改。高效液相色譜儀(美國Waters2695)的色譜條件如下:專用液相色譜柱(美國SUPELCOSILTM LC-PAH,250 mm×4.6 mm,5 μm)溫度 30 ℃,進(jìn)樣量30 μL,PDA檢測器(美國Waters2998)波長 254 nm,流動相為乙腈和水,每個(gè)樣品運(yùn)行時(shí)間35 min,采用梯度洗脫、流速變化的方式,依據(jù)物質(zhì)的保留時(shí)間定性,定量方法用標(biāo)準(zhǔn)曲線法。

    1.5 數(shù)據(jù)處理和分析

    菜心根、莖、葉片對土壤中PAHs的生物富集系數(shù)用BCF來計(jì)算:BCFr=Croot/Csoil;BCFs=Cstem/Csoil;BCFl=Cleaf/Csoil。式中:BCFr為根的生物富集系數(shù);BCFs為莖的生物富集系數(shù),BCFl為葉片的生物富集系數(shù);Croot為根中PAHs的濃度,Cstem為莖中PAHs的濃度;Cleaf為葉片中PAHs的濃度;Csoil為土壤中PAHs的殘留濃度。采用Microsoft Office 2016以及SPSS 19.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理與分析,用Duncans法進(jìn)行顯著性檢驗(yàn)(P<0.05)。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 菜心植株不同部位吸收積累土壤PAHs的差異

    菜心植株內(nèi)不同部位的PAHs總含量可以反映一段時(shí)間內(nèi)菜心對污染土壤中PAHs的吸收積累情況。由圖1可見,在同一個(gè)處理濃度下,菜心植株內(nèi)不同部位的PAHs含量均為根部>葉片>莖部。CK中根部、莖部、葉片之間的PAHs含量差異不顯著,隨著處理濃度的增加,根部的PAHs含量顯著高于莖部和葉片,處理T1和T2的莖部、葉片PAHs含量差異不顯著,當(dāng)土壤的PAHs處理濃度為5 000 μg/kg時(shí),菜心根部的PAHs含量達(dá)792.80 μg/kg,葉片中的PAHs含量為379.68 μg/kg,均顯著高于莖部的189.46 μg/kg;此外,菜心根部、莖部、葉片中的PAHs含量隨著處理濃度的增加而升高。

    葉片是菜心的主要食用部分,菜心葉片中不同時(shí)期的PAHs含量可以反映葉片對土壤中PAHs的吸收速度。 圖2

    表明,處理17、24 d菜心葉片中的PAHs含量顯著高于10 d,各處理間17、24 d菜心葉片中的PAHs含量差異不顯著。CK和T1處理24 d的菜心葉片PAHs含量低于處理17 d的,差異不顯著;T2和T3處理中24 d菜心葉片PAHs含量高于 17 d,差異也不顯著。這說明菜心葉片中的PAHs含量在定植后17 d內(nèi)快速上升,17~24 d上升速度明顯減慢,CK和處理T1葉片中的PAHs含量出現(xiàn)下降趨勢。

    2.2 不同濃度PAHs污染土壤菜心葉片5種PAHs的含量

    不同種類PAHs的物理化學(xué)性質(zhì)各不相同,因而有必要了解它們各自在葉片中的吸收、積累情況。如表1所示,菜心葉片中的Nap、Phe、Flt、BaP和InP含量隨著處理濃度的增加而增加。定植后24 d,CK和T1處理葉片中Nap和Phe的含量差異不顯著,T1和T2處理葉片中Nap的含量差異不顯著。T2和T3處理葉片中InP的含量差異不顯著,說明在這2個(gè)處理間增加處理濃度,不能顯著增加菜心葉片中InP的含量。此外,T3處理葉片中Nap和Phe的含量遠(yuǎn)大于Flt、BaP和InP,CK葉片中未檢測到BaP和InP。

    2.3 不同濃度PAHs污染土壤菜心莖部5種PAHs的含量

    由表2可知,菜心莖部Nap、Phe和Flt的含量隨著處理濃度的增加而增加,且各處理間差異顯著。處理T1與處理T2之間BaP和InP的含量差異不顯著,高濃度處理T3中BaP和InP的含量顯著高于其他處理,CK中未檢測到BaP和InP,各處理莖部Nap、Phe和Flt的含量遠(yuǎn)大于BaP和InP的含量,說明隨著處理濃度的增加,BaP和InP在莖部的積累量增加不大。

    2.4 不同濃度PAHs污染土壤菜心根部5種PAHs的含量

    由表3可知,菜心根部Nap和Phe的含量隨著處理濃度的增加而增加,且各處理間差異顯著。CK與T1處理中Flt的含量差異不顯著,高濃度處理T3中Flt和InP的含量都顯著高于其他處理,T1與T2處理之間BaP和InP的含量差異不顯著,說明在這2個(gè)處理間增加處理濃度,并不能顯著增加菜心根部對BaP和InP的吸收。處理T2與處理T3之間BaP的含量差異不顯著,說明隨著處理濃度的增加,根部對BaP吸收積累量增加很少。T3處理根部的BaP和InP的含量遠(yuǎn)高于同一處理下莖部和葉片中的含量,說明根部對不同類型的PAHs吸收量各不相同,BaP和InP在根部的積累量遠(yuǎn)大于其在莖部和葉片中的積累量。

    2.5 菜心植株中不同種類PAHs的含量及其在各部位中的占比

    由表4和表5可知,不同濃度處理下,菜心植株中低環(huán)類PAHs(2~3個(gè)苯環(huán))的含量占PAHs總量的77.61%~90.3%(表4),高環(huán)類PAHs(4~6個(gè)苯環(huán))的含量占PAHs總量的9.70%~22.39%(表5)。除CK外,同一處理濃度下,低環(huán)類PAHs和高環(huán)類PAHs在根部中的含量都要大于其在莖部和葉片中的含量。說明菜心吸收和積累的PAHs主要是土壤中的低環(huán)類PAHs,而根部是菜心吸收和積累土壤中PAHs的主要器官。

    和吸附,并在植物體內(nèi)積累,尤其是在污染水源和土壤附近種植的作物,很可能通過食物鏈在生物體內(nèi)積累[8]。所以,植物吸收積累的PAHs含量同時(shí)受PAHs在土壤和大氣中的濃度影響。

    本研究在蔬菜大棚中進(jìn)行,降低外部大氣環(huán)境中的PAHs對試驗(yàn)的影響。結(jié)果表明,在不同濃度PAHs處理土壤后,菜心根、莖、葉中的PAHs含量隨著處理濃度的增加而升高,這與Gao等的研究結(jié)果[9-10]相吻合;菜心植株內(nèi)不同部位的PAHs含量為根部>葉片>莖部,與Wang等的研究結(jié)果[11-12]類似。這可能是因?yàn)镻AHs作為脂溶性物質(zhì),能在植物體內(nèi)積累,植物吸收積累脂溶性物質(zhì)PAHs的程度與植物脂肪含量密切相關(guān)[13]。植物根部菲和芘含量與其脂含量呈正相關(guān)關(guān)系[14]。有研究表明,PAHs從根部運(yùn)輸進(jìn)入葉片主要存儲在葉片的維管束和海綿組織中,而很少分配在其他組織中[15]。且菜心是須根系植物,接觸土壤的表面積更大,吸收富集的能力更強(qiáng)。而葉片接觸空氣的面積較大,PAHs可以通過葉片的角質(zhì)層進(jìn)入植物體,因而葉片富集PAHs的能力也較強(qiáng)[16]。

    本研究中菜心葉片中不同時(shí)期的PAHs含量出現(xiàn)動態(tài)變化,表現(xiàn)為菜心葉片中的PAHs含量在定植后17 d內(nèi)快速上升,17~24 d上升速度明顯減慢,定植后24 d低濃度處理和CK葉片中的PAHs含量出現(xiàn)下降趨勢。Brady等研究結(jié)果表明,車前草能夠吸收苯并(a)芘,且吸收過程主要在最初 24 h 內(nèi),24 h后會達(dá)到平衡[17],這與本研究結(jié)果相似。而葉片中的PAHs含量在定植后24 d出現(xiàn)下降趨勢,可能是由于菜心地上部分生物量不斷增大,但葉片中的PAHs含量在達(dá)到一定濃度后增加的量很少,所以PAHs的含量總體出現(xiàn)下降趨勢。

    3.2 不同苯環(huán)數(shù)的PAHs在菜心根部、莖部和葉片中的積累

    低環(huán)類的PAHs在水中的溶解度較大,且具有易揮發(fā)性;高環(huán)類的PAHs水溶性較小,也不容易揮發(fā)。這就導(dǎo)致了不同苯環(huán)數(shù)的PAHs在植物的根部、莖部和葉片中的含量也各不相同。蒽主要積累在高羊茅根系細(xì)胞壁、細(xì)胞器和細(xì)胞液中[18]。Kang等研究了黑麥草根系對菲和芘的吸收和積累,表明菲和芘剛開始吸附在細(xì)胞壁上,然后通過細(xì)胞膜,最后達(dá)到細(xì)胞器和細(xì)胞液中[19]。PAHs在油麥菜、菜心、四季青和花紅莧菜4種蔬菜的土壤-蔬菜界面上的遷移中,低環(huán)類PAHs較高環(huán)類PAHs更具有生物有效性,蔬菜對土壤中低環(huán)類PAHs生物富集系數(shù)較大,4種蔬菜樣品中,低環(huán)類PAHs的比重較大[20]。

    本試驗(yàn)結(jié)果表明,不同PAHs濃度處理下,菜心植株中低環(huán)類PAHs(2~3個(gè)苯環(huán))的含量占PAHs總量的77.61%~90.30%,高環(huán)類PAHs(4~6個(gè)苯環(huán))的含量占PAHs總量的9.70%~22.39%。熊冠男等研究指出,卷心菜中低環(huán)類PAHs占有優(yōu)勢地位,比重都在60%以上[21],這與本試驗(yàn)結(jié)果一致。另外,菜心吸收和積累的PAHs主要是土壤中的低環(huán)類PAHs,而根部是吸收和積累土壤中PAHs的主要器官,高環(huán)類的BaP和InP在根部的含量要遠(yuǎn)大于其在莖部和葉片中的含量,BaP和InP在莖部和菜心葉片中的含量很小。Wild等研究表明,低環(huán)類PAHs的揮發(fā)性和溶解性比高環(huán)類PAHs更強(qiáng),因此在植物根部和葉片中分布占有優(yōu)勢,低環(huán)類PAHs的水溶性大于高環(huán)類PAHs,所以更容易被植物體吸收[22],這與本研究結(jié)果相似。

    本研究結(jié)果中,PAHs在菜心根部、莖部和葉片的生物富集系數(shù)大小表明,菜心植株對土壤中5種PAHs的富集能力大小為Phe>Nap>Flt>BaP>InP,BaP和InP在根部的生物富集系數(shù)比莖部和葉片的要大1個(gè)數(shù)量級,菜心根部對BaP和InP的富集能力要遠(yuǎn)大于莖部和葉片。這可能是因?yàn)楦攮h(huán)類PAHs容易與土壤中的有機(jī)質(zhì)結(jié)合成較為穩(wěn)定的膠體[23-24],且高環(huán)類PAHs的水溶性很小,很難從土壤中通過植物根系運(yùn)輸富集到莖部和葉片中。

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