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    幾丁質(zhì)合成抑制劑氟啶脲對(duì)家蠶的毒性試驗(yàn)*

    2019-10-18 05:44:22楊一平戴建忠陳偉國(guó)孫海燕林蔚紅錢秋杰
    蠶桑通報(bào) 2019年3期
    關(guān)鍵詞:幾丁質(zhì)家蠶噴藥

    楊一平,戴建忠,陳偉國(guó),孫海燕,林蔚紅,張 芬,錢秋杰

    (海寧市蠶桑技術(shù)服務(wù)站,浙江 海寧 314400)

    幾丁質(zhì)合成抑制劑是一種能夠抑制昆蟲幾丁質(zhì)合成的新型殺蟲劑,由于昆蟲的外表皮由幾丁質(zhì)構(gòu)成,一旦幾丁質(zhì)合成受阻,昆蟲長(zhǎng)不出新的表皮或生長(zhǎng)異常,從而不能完成蛻皮、化蛹,影響昆蟲的正常發(fā)育,最終導(dǎo)致死亡。幾丁質(zhì)合成抑制劑屬于昆蟲生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑類殺蟲劑,其作用機(jī)制獨(dú)特,與有機(jī)磷、氨基甲酸酯、擬除蟲菊酯等殺蟲劑之間無(wú)交互抗性,對(duì)靶標(biāo)生物具有較高的選擇性,對(duì)人畜毒性很低,被譽(yù)為第4代殺蟲劑。幾丁質(zhì)合成抑制劑從20世紀(jì)70年代初發(fā)現(xiàn)以來(lái),在短短幾十年時(shí)間得到快速發(fā)展,商品化和在開(kāi)發(fā)的化合物已有30多個(gè),其中除蟲脲、殺鈴脲、氟苯脲、氟蟲脲、氟啶脲、氟鈴脲、氟螨脲、虱螨脲、氟環(huán)脲、雙二氟蟲脲、雙三氟蟲脲和多氟脲等十多個(gè)苯甲酰脲類殺蟲劑投入市場(chǎng),主要用于防治蔬菜、果樹(shù)、棉花等作物的鱗翅目、雙翅目、鞘翅目害蟲[1~5]。

    氟啶脲(chlorfluazuron),又名抑太保、定蟲隆、定蟲脲,化學(xué)名稱為1-[3,5-二氯-4-(3-氯-5-三氯甲基-2-吡啶氧基)苯基]-3-(2,6-二氧苯甲?;╇錥6~7]。為掌握氟啶脲對(duì)家蠶的毒性特點(diǎn),減少中毒損失,為中毒事故診斷提供參考,我們開(kāi)展了相關(guān)試驗(yàn),現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

    1 材料與方法

    1.1 供試材料

    1.1.1 供試農(nóng)藥

    50 g/L氟啶脲乳油,寧波石原金牛農(nóng)業(yè)科技有限公司生產(chǎn),農(nóng)藥登記證號(hào)PD20082732;77.5%敵敵畏乳油,南通江山農(nóng)藥化工股份有限公司生產(chǎn),農(nóng)藥登記證號(hào)PD85105-2。

    1.1.2 家蠶品種

    “白玉×秋豐”,浙江省海寧市新興蠶種制造有限公司生產(chǎn)。

    1.1.3 供試桑樹(shù)

    海寧市蠶桑技術(shù)服務(wù)站試驗(yàn)桑園,“強(qiáng)桑1號(hào)”,4年生,中干樹(shù)型養(yǎng)成,每667 m2桑園栽植800株。

    1.2 試驗(yàn)方法

    1.2.1 氟啶脲對(duì)家蠶的急性食下毒性測(cè)定

    經(jīng)預(yù)備試驗(yàn),將50 g/L氟啶脲乳油稀釋成5~7個(gè)梯度濃度,取適熟桑葉分別浸入不同濃度藥液中1 min后取出,自然晾干后置于保鮮盒內(nèi),各濃度處理用20頭3齡起蠶供試,以清水處理為空白對(duì)照,重復(fù)3次,在26.5℃±1℃、相對(duì)濕度75%~85%的恒溫室內(nèi)飼養(yǎng)。24 h后改用新鮮無(wú)毒桑葉繼續(xù)飼養(yǎng)至5齡,每天調(diào)查幼蟲中毒死亡率。采用DPS統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)藥液質(zhì)量濃度對(duì)數(shù)與幼蟲死亡率概率值進(jìn)行線性回歸分析[8],求出致死中濃度(LC50)和95%置信限。在試驗(yàn)過(guò)程中觀察記錄中毒癥狀。

    1.2.2 氟啶脲對(duì)家蠶的熏蒸毒性測(cè)定

    50 g/L氟啶脲乳油稀釋成100倍(500 mg/L)、1000倍(50 mg/L)和10000倍(5 mg/L),以77.5%敵敵畏乳油10000倍(77.5 mg/L)為農(nóng)藥對(duì)照,以清水為空白對(duì)照。取各處理濃度藥液1 mL均勻涂于培養(yǎng)皿內(nèi),將其放入高60 cm、直徑36 cm、容積為60 L的聚乙烯塑料桶底部,桶內(nèi)放置塑料藍(lán),分別給入3齡起蠶和5齡起蠶各30頭,并喂飼新鮮無(wú)毒桑葉,每個(gè)處理重復(fù)3次。塑料桶用雙層蓋密封后放置于30℃±1.0℃的恒溫室內(nèi),熏蒸24 h后取出,調(diào)查中毒死亡蠶頭數(shù),更換新鮮無(wú)毒桑葉后繼續(xù)飼養(yǎng),觀察中毒死亡情況。

    1.2.3 氟啶脲在桑葉上的殘留毒性測(cè)定

    50 g/L氟啶脲乳油稀釋成1000倍(50 mg/L)、2000倍(25 mg/L)和4000倍(12.5 mg/L)3種濃度,每種濃度稀釋液分別噴桑樹(shù)各40株,不同濃度處理間設(shè)2行桑樹(shù)作為隔離保護(hù)。枝條頂端最大葉位以上用標(biāo)簽標(biāo)記,防止采摘噴藥后新生長(zhǎng)的桑葉。噴藥后間隔一定時(shí)間采摘桑葉喂飼3齡起蠶和5齡起蠶,各試驗(yàn)小區(qū)供試30頭蠶,重復(fù)3次,持續(xù)喂飼處理桑葉直至供試蠶中毒死亡或結(jié)繭為止,調(diào)查計(jì)算死亡率。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 氟啶脲對(duì)家蠶的急性毒性及中毒癥狀

    采用浸葉法測(cè)定50 g/L氟啶脲乳油對(duì)3齡起蠶的急性食下毒性,添毒24 h的毒力回歸方程為Y=7.2202+2.9663 X,相關(guān)系數(shù)0.9723,LC50為0.1785 mg/L,95%置信限0.0911 mg/L~0.2334 mg/L。參照2014年發(fā)布的《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則第11部分:家蠶急性毒性試驗(yàn)》附錄A“農(nóng)藥對(duì)家蠶的毒性等級(jí)劃分”[9],50 g/L氟啶脲乳油對(duì)家的毒性等級(jí)為劇毒(LC50≤0.5 mg/L)。在試驗(yàn)濃度下,添毒1 d~2 d供試蠶食桑正常,未見(jiàn)中毒癥狀;添毒2 d~3 d時(shí)部分蠶表皮破裂,逐漸死亡;能夠進(jìn)入3眠的蠶,到4齡起蠶后部分個(gè)體食桑緩慢,體色發(fā)黃,少量吐液,蠶體縮短縮小,并陸續(xù)死亡;繼續(xù)飼養(yǎng)到5齡期,死亡蠶仍在增多。盡管添毒時(shí)間僅24 h,但氟啶脲對(duì)家蠶的毒性作用延后2個(gè)齡期仍有表現(xiàn)。氟啶脲對(duì)家蠶的典型癥狀是表皮破裂,多出現(xiàn)在蠶體背部第一和第二腹節(jié)間。

    2.2 氟啶脲對(duì)家蠶的熏蒸毒性

    50 g/L氟啶脲乳油100倍、1000倍和10000倍稀釋液,分別熏蒸處理3齡起蠶和5齡起蠶24 h,然后繼續(xù)飼養(yǎng)至結(jié)繭,均無(wú)中毒癥狀和死亡蠶,發(fā)育進(jìn)度與空白對(duì)照無(wú)明顯差異;而對(duì)照農(nóng)藥77.5%敵敵畏乳油10000倍稀釋液熏蒸處理3齡起蠶,24 h內(nèi)全部中毒死亡,表明50 g/L氟啶脲乳油在試驗(yàn)濃度下對(duì)家蠶無(wú)明顯的熏蒸毒性。

    2.3 氟啶脲在桑葉上的殘留毒性

    從表1可見(jiàn),至噴藥后65 d采摘50 g/L氟啶脲乳油1000倍、2000倍、4000倍藥液處理的桑葉,喂飼3齡起蠶的死亡率仍達(dá)到100%,表明氟啶脲在桑葉上的殘留毒性很長(zhǎng)。但不同間隔時(shí)間的毒性反應(yīng)有所區(qū)別,噴藥后30 d以內(nèi)的桑葉喂飼3齡起蠶,大多表現(xiàn)為眠蠶蛻皮困難而死;噴藥后30 d以上的桑葉喂飼3齡起蠶,即使能夠發(fā)育至眠起,但4齡起蠶后食桑明顯偏少或不食桑,蠶體色發(fā)黃,逐漸死亡。

    表1 50 g/L氟啶脲乳油對(duì)3齡起蠶死亡率Table 1 Mortality Rate of Newly Exuviated 3rd Instar Silkworm Larvae Treated by 50 g/l Chlorfluazuron Emulsifiale Oil

    表2 50 g/L氟啶脲乳油對(duì)5齡起蠶死亡率Table 2 Mortality Rate of Newly Exuviated 5th Instar Silkworm Larvae Treated By 50 g/l Chlorfluazuron Emulsifiale Oil

    表2為50 g/L氟啶脲乳油1000倍、2000倍、4000倍藥液處理的桑葉喂飼5齡起蠶,噴藥后42 d時(shí)的死亡率幾乎都是100%,基本不能正常結(jié)繭;噴藥后52 d和65 d的死亡率仍相當(dāng)高,未死亡個(gè)體能夠結(jié)繭,但多為薄皮繭,且均不能化蛹。

    3 小結(jié)與討論

    本試驗(yàn)結(jié)果表明,50 g/L氟啶脲乳油對(duì)家蠶3齡起蠶的LC50為0.1785 mg/L,毒性等級(jí)為劇毒。中毒蠶食桑緩慢,體色發(fā)黃,少量吐液,蠶體縮短縮小,表皮易破裂,毒性作用較慢,但延后2個(gè)齡期仍有表現(xiàn)。氟啶脲對(duì)家蠶無(wú)明顯的熏蒸毒性。氟啶脲在桑葉上的毒性殘留很長(zhǎng),試驗(yàn)濃度下65 d仍可使3齡蠶死亡率達(dá)到100%,5齡蠶少數(shù)未死亡蠶即使吐絲結(jié)繭,但不能化蛹。

    幾丁質(zhì)合成抑制劑主要有苯甲酰脲類、噻二嗪類、三嗪胺類這3類,以苯甲酰脲類的研究最早也最成熟,開(kāi)發(fā)出的商品最多[10],我國(guó)自主開(kāi)發(fā)的這類產(chǎn)品稱為滅幼脲類殺蟲劑[11]。在山東、蘇北蠶區(qū),滅幼脲類農(nóng)藥被廣泛應(yīng)用于飛防美國(guó)白蛾,致使同樣屬于鱗翅目昆蟲的家蠶深受其害,部分地區(qū)蠶桑生產(chǎn)受到毀滅性打擊[12]。四川省用含有滅幼脲的農(nóng)藥防治林業(yè)害蟲,污染桑葉導(dǎo)致家蠶中毒[13]。周麗霞等[14]觀察了滅幼脲對(duì)家蠶的典型中毒癥狀是,幼蟲環(huán)節(jié)處變薄、出血,血液氧化沿環(huán)節(jié)形成線狀黑斑,體發(fā)育不齊,中毒蠶體軀瘦小,嚴(yán)重者環(huán)節(jié)處暴裂,體內(nèi)內(nèi)容物迸出,甚至可以看見(jiàn)中腸內(nèi)的綠色食片,蠶體上象是背了一個(gè)大包袱;也有的稍一觸動(dòng),蠶體就發(fā)生暴裂。李云芝等[15]試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),滅幼脲對(duì)各齡家蠶的毒性反應(yīng)不盡一致,大蠶期會(huì)出現(xiàn)病斑、表皮破裂,內(nèi)臟流出等癥狀。戴建忠等[16]、孫海燕等[17]測(cè)定虱螨脲和氟鈴脲對(duì)家蠶的毒性,均出現(xiàn)表皮損傷等癥狀。由此可見(jiàn),滅幼脲、虱螨脲、氟鈴脲和氟啶脲這些苯甲酰脲類幾丁質(zhì)合成抑制劑對(duì)家蠶具有相似的典型癥狀。

    氟啶脲作用機(jī)理獨(dú)特,因抑制昆蟲表皮幾丁質(zhì)合成,使幼蟲不能正常蛻皮與變態(tài)而導(dǎo)致死亡,因此藥效作用比其他化學(xué)殺蟲劑緩慢,一般要在施藥3天后才開(kāi)始死亡[3,7]。曾慧花等[18]試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),除蟲脲對(duì)中華稻蝗在6 d后才能出現(xiàn)顯著的致死作用和生長(zhǎng)抑制作用。陳麗萍等[19]測(cè)定氟鈴脲對(duì)家蠶的急性毒性,添毒2 d的LC50>200 mg/L,添毒8 d后調(diào)查的LC50為0.1384 mg/L。因此,測(cè)定幾丁質(zhì)合成抑制劑對(duì)家蠶的急性毒性,檢查試驗(yàn)結(jié)果的時(shí)間要比常規(guī)殺蟲劑更長(zhǎng)。

    幾丁質(zhì)合成抑制劑藥效緩慢,持效期長(zhǎng),且與多數(shù)殺蟲劑無(wú)交互抗性的特點(diǎn),因此與多種農(nóng)藥復(fù)配后普遍具有較高的協(xié)同增效作用和速效性,延緩害蟲抗藥性,擴(kuò)大防治譜,降低用藥成本,減輕環(huán)境壓力[20~21]。

    氟啶脲等幾丁質(zhì)合成抑制劑在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和環(huán)境衛(wèi)生中的應(yīng)用將越來(lái)越廣泛,在蠶桑生產(chǎn)地區(qū)需注意避免桑園受到此類農(nóng)藥的污染。

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