HPV在子宮內(nèi)膜癌中的陽性表達(dá)及基因分型

韋靜，韋有生，馬婭芬，歐婷瑜，徐喜鳳，龐春紅，邱銳#，余夏

南寧市第二人民醫(yī)院1婦科，3檢驗(yàn)科，南寧530000

2廣西醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院婦瘤科，南寧530000

子宮內(nèi)膜癌是好發(fā)于子宮內(nèi)膜的一種上皮性惡性腫瘤，是女性生殖系統(tǒng)三大惡性腫瘤之一，對女性身體健康造成嚴(yán)重威脅。因此針對子宮內(nèi)膜癌展開有效的篩查，給予及時(shí)干預(yù)及有效的治療，降低子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病率，是目前臨床研究的重點(diǎn)。人乳頭狀瘤病毒（human papilloma virus，HPV）感染與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展具有密切關(guān)系。研究指出，HPV感染與女性生殖器病變密切相關(guān)[1]。因此，本研究探討HPV在子宮內(nèi)膜癌患者中的陽性表達(dá)情況及基因分型，旨在為臨床診斷與治療子宮內(nèi)膜癌提供參考，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取2016年5月至2018年5月在南寧市第二人民醫(yī)院進(jìn)行子宮病變檢查的女性640例。納入標(biāo)準(zhǔn)：均進(jìn)行子宮病變檢查。排除標(biāo)準(zhǔn)：①宮頸脫落細(xì)胞檢查異常者；②有宮頸手術(shù)史者；③妊娠期女性；④合并其他婦科腫瘤者。640例患者均為女性，年齡23～62歲，平均（39.42±7.98）歲。子宮病變篩查中，子宮病變患者362例（子宮內(nèi)膜增生124例，子宮肌瘤176例，子宮內(nèi)膜癌62例）；無子宮病變者278例。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)審批通過，所有研究對象及家屬均對本研究知情同意并簽署知情同意書。

1.2 HPV檢測方法

所有研究對象均進(jìn)行HPV檢測。檢查前72 h內(nèi)不能對外陰和陰道進(jìn)行沖洗及使用藥物，正在月經(jīng)期的女性在月經(jīng)結(jié)束后的72 h再進(jìn)行檢查，檢查前24 h內(nèi)無性行為。采用美國Digene公司的第2代雜交捕獲試驗(yàn)的采樣工具包收集受檢者脫落的子宮內(nèi)膜細(xì)胞，將其置入專用試管中，4℃保存待檢測標(biāo)本，7天內(nèi)完成標(biāo)本檢測。檢測方法：①將檢測標(biāo)本置入雜交液中進(jìn)行HPV雜交，并加入顯色劑進(jìn)行顯色，觀察到藍(lán)紫色圓點(diǎn)則表明HPV陽性表達(dá)。②提取陽性檢測標(biāo)本中的人類乳頭狀瘤病毒DNA（human papilloma virus DNA，HPV-DNA）。③應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reaction，PCR）對陽性檢測標(biāo)本中的HPVDNA進(jìn)行基因擴(kuò)增；基因擴(kuò)增后的HPV-DNA進(jìn)行染色及洗膜等處理，最后采用凱普HPV-DNA試劑盒（廣東凱普生物科技股份有限公司）與核酸分子快速雜交基因分型試劑盒（廣東凱普生物科技股份有限公司）進(jìn)行基因分型檢測。

1.3 觀察指標(biāo)

比較不同類型子宮病變患者（子宮內(nèi)膜增生、子宮肌瘤和子宮內(nèi)膜癌）及無子宮病變者的HPV陽性率；統(tǒng)計(jì)不同年齡段（23～30歲、31～40歲、41～50歲、51～62歲）子宮病變患者的HPV陽性率，以及HPV陽性表達(dá)的子宮內(nèi)膜癌患者的HPV基因分型。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 19.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示；計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HPV陽性率的比較

278例無子宮病變者的HPV陽性率為7.55%（21/278），362例子宮病變患者的HPV陽性率為28.45%（103/362）；其中，子宮內(nèi)膜增生患者的HPV陽性率為29.03%（36/124），子宮肌瘤患者的HPV陽性率為16.48%（29/176），子宮內(nèi)膜癌患者的HPV陽性率為61.29%（38/62），3種類型子宮病變患者的HPV陽性率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=6.756，P＜0.01）。子宮內(nèi)膜癌患者的HPV陽性率明顯高于無子宮病變者及子宮內(nèi)膜增生和子宮肌瘤患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=102.069、17.954、45.522，P＜0.01）。不同類型子宮內(nèi)膜增生、不同部位子宮肌瘤及不同分化程度子宮內(nèi)膜癌患者的HPV陽性率比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。（表1）

表1 不同類型子宮病變患者的HPV陽性情況

2.2 不同年齡段子宮病變患者的HPV陽性率

362例子宮病變患者中，23～30歲患者的HPV陽性率為38.46%（30/78），31～40歲患者的HPV陽性率為25.78%（33/128），41～50歲患者的HPV陽性率為21.71%（28/129），51～62歲患者的HPV陽性率為44.44%（12/27），不同年齡段子宮病變患者的HPV陽性率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=7.010，P＜0.01）。

2.3 HPV陽性表達(dá)的子宮內(nèi)膜癌患者的HPV基因分型

38例HPV陽性子宮內(nèi)膜癌患者的基因分型中，HPV16陽性率為73.68%（28/38），HPV52陽性率為44.74%（17/38），HPV58陽性率為 39.47%（15/38），HPV53陽性率為23.68%（9/38），HPV68陽性率為15.79%（6/38），HPV39陽性率為10.53%（4/38）。

3 討論

HPV是一種沒有包膜的小型雙鏈環(huán)狀DNA病毒，其致病范圍較廣（從泌尿生殖系統(tǒng)到頭頸部）[2-3]，低危型HPV主要與尖銳濕疣等疾病有關(guān)，一般不會(huì)導(dǎo)致惡性病變，而高危型HPV如HPV16、18、52、58主要與子宮內(nèi)膜癌、生殖器癌、皮膚癌和宮頸癌等惡性腫瘤有關(guān)[4-5]。HPV16是臨床較為常見的高危型HPV，對子宮內(nèi)膜細(xì)胞的黏附或浸潤能力較強(qiáng)，HPV16陽性表達(dá)能夠促進(jìn)子宮內(nèi)膜細(xì)胞的增殖，抑制其細(xì)胞凋亡，HPV58和HPV52的陽性表達(dá)也易引發(fā)子宮內(nèi)膜癌[6-7]。研究報(bào)道，HPV的致癌性與其E6與E7基因編碼蛋白促使抑癌基因失活及癌基因激活密切相關(guān)[8-9]。目前，研究證明HPV存在于子宮內(nèi)膜組織中，HPV檢測對早期發(fā)現(xiàn)和預(yù)防子宮內(nèi)膜癌具有重要的臨床意義[10-11]。研究顯示，HPV陽性表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生具有密切關(guān)系，可能是引發(fā)子宮內(nèi)膜癌的重要因素[12]。本研究中，362例子宮病變患者的HPV陽性率為28.45%；其中，23～30歲患者的HPV陽性率為38.46%，31～40歲患者的HPV陽性率為25.78%，41～50歲患者的HPV陽性率為21.71%，51～62歲患者的HPV陽性率為44.44%，不同年齡段子宮病變患者的HPV陽性率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。分析原因主要由于性接觸是HPV感染的主要途徑，因此HPV陽性率在23～30歲的女性中較高。而50歲以上的女性多處于絕經(jīng)期，性激素水平顯著降低，導(dǎo)致機(jī)體的免疫功能較弱，因此是HPV感染的第二個(gè)高峰期。

本研究結(jié)果顯示，無子宮病變者的HPV陽性率為7.55%，子宮內(nèi)膜增生患者的HPV陽性率為29.03%，子宮肌瘤患者的HPV陽性率為16.48%，子宮內(nèi)膜癌患者的HPV陽性率為61.29%；子宮內(nèi)膜癌患者的HPV陽性率明顯高于無子宮病變者及子宮內(nèi)膜增生患者和子宮肌瘤患者，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。但在不同類型子宮內(nèi)膜增生、不同部位子宮肌瘤及不同分化程度子宮內(nèi)膜癌患者的HPV陽性率比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。表明HPV可能只參與子宮病變的發(fā)生，對子宮病變的類型及進(jìn)展無影響，但未來仍需進(jìn)一步深入研究。子宮內(nèi)膜癌患者中HPV陽性表達(dá)的基因分型中，HPV16陽性率最高（73.68%），表明HPV16在子宮內(nèi)膜癌患者HPV陽性表達(dá)中具有高分布率。盡管目前對于子宮內(nèi)膜癌與HPV陽性之間的相關(guān)性具有較大的爭議，但加強(qiáng)HPV檢測對預(yù)防及治療女性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤具有重要的意義。

綜上所述，子宮內(nèi)膜癌患者的HPV陽性率較高，且以HPV16分型為主，臨床上應(yīng)采取相應(yīng)措施進(jìn)行預(yù)防。