富硒乳酸菌中藥制劑對育肥豬免疫、抗氧化能力的影響

高 暢，吳貴富，李抒柏，張 敏，金英海

（延邊大學農學院，吉林延吉 133000）

中藥添加劑是將中藥成分與中藥理論和飼料營養(yǎng)理論相結合而制成的純天然飼料添加劑，其主要成分為多糖、苷類、揮發(fā)油、蛋白質和無機鹽等[1]。中藥添加劑除提供藥物作用，還可為畜禽提供豐富的營養(yǎng)，對畜禽的生長、疾病防控及副產品品質均有良好的促進作用。乳酸菌能改善胃腸道內菌群結構，可用于機體預防和治療腹瀉以及其他腸道疾病。乳酸菌在代謝過程中產生的大量有機酸可以有效降低動物日糧的堿值，增加飼料的適口性和可消化率，提高動物對飼料的利用效率，為畜禽生產創(chuàng)造更多的經濟效益[2]。富硒乳酸菌利用乳酸菌微生物的富集特性將無機硒同化為有機硒，提高機體對硒的吸收利用率，降低無機硒的毒性。硒能影響乳酸菌生長、蛋白質表達，還能刺激乳酸菌相關酶的活性，因此富硒乳酸菌活性更高[3]。大量研究表明，富硒乳酸菌、大棗、山楂等中藥成分均可提高機體免疫力，促進動物消化[4-8]，且益生菌與中藥聯(lián)合使用具有良好的協(xié)同作用，可促進動物生長[9-10]。

本試驗以杜×長×大三元雜交育肥豬為研究對象，探討富硒乳酸菌中藥制劑（LSTCM）對育肥豬免疫力及血清、組織中抗氧化能力的影響，為LSTCM 在畜牧生產上的應用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料 試驗材料包括富硒乳酸菌[11]（占飼料添加劑的6.3%，延邊大學營養(yǎng)試驗室自制）、神曲、山楂（輝縣市躍輝食品有限公司）、紅棗（滄州星盛食品有限公司）、桔梗（延吉西市場）、白術（毫州市眾益堂中藥材銷售有限公司），將上述成分過40 目篩后，按一定比例混合制成LSTCM，飼料添加劑隨配隨用。

1.2 試驗設計及飼養(yǎng)管理 選擇體況良好、遺傳性狀相同、體重（57±1.50）kg、4 月齡杜×長×大三元育肥豬60 頭，試驗場地在圖們市富巖養(yǎng)殖場。試驗采用單因素變量控制，分為4 個組，每組3 個重復，每個重復5 頭豬。對照組飼喂基礎日糧，0.1%、0.3%、0.5% 組分別在基礎日糧中添加0.1%、0.3%、0.5% LSTCM，其中LSTCM 中硒含量為100 mg/kg。預試期10 d，正試期60 d。

基礎日糧由康地飼料有限公司提供，其原料組成及營養(yǎng)成分見表1。在整個試驗期間，各組育肥豬在同一豬舍，每個重復飼養(yǎng)于1 欄，保持光照和溫度適宜，合理通風，自由采食和飲水，觀察每組育肥豬生長和健康情況，隨著體重增長適量增加飼喂量，遵循豬場常規(guī)管理條例。

表1 基礎日糧組成及營養(yǎng)成分

1.3 樣品采集

1.3.1 血樣采集 試驗結束后，各組隨機選取6 頭育肥豬（每個重復選擇2 頭接近平均體重的豬），在晨飼前用采血器對其進行頸下采血，血液在常溫下靜置20 min后，3 000 r/min 離心，將獲得的血清儲存在-80℃冰箱中備用。

1.3.2 肉樣采集 在育肥豬屠宰前空腹12 h，保證其充足飲水。屠宰后，取第6～7 肋骨處背最長肌1 kg，并采集各組同一部位的肝臟和左腎，儲存在-80℃冰箱中備用。

1.4 指標檢測 免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM）含量采用免疫比濁法測定；總抗氧化能力（T-AOC）與谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性采用比色法測定；超氧化物歧化酶（SOD）活性采用黃嘌呤氧化物酶測定；丙二醛（MDA）含量采用硫代巴比妥酸法測定。測定所需試劑盒及檢測結果均來自北京華英生物技術研究所。

1.5 統(tǒng)計分析 試驗數(shù)據(jù)用Excel 軟件整理，并用SPSS 17.0 統(tǒng)計軟件進行ANOVA 分析，結果表示為平均值±標準差，P＜0.05 表示差異顯著，P＜0.01 表示差異極顯著。

2 結果

2.1 LSTCM 對育肥豬血清免疫指標的影響 由表2 可得，與對照組相比，各試驗組血清中IgA、IgM 和IgG含量均有增加。其中，0.3%、0.5% 組血清中IgA 均高于對照組和0.1% 組（P＜0.01）；0.3%、0.5% 組血清中IgM 和IgG 含量均高于對照組（P＜0.05）。

表2 LSTCM 對育肥豬血清免疫指標的影響 g/L

2.2 LSTCM 對育肥豬血清、組織器官抗氧化指標的影響

2.2.1 LSTCM 對育肥豬血清中抗氧化指標的影響 由表3 可以看出，與對照組相比，0.3%、0.5%LSTCM 組血清T-AOC、SOD、GSH-Px 活性極顯著增強，MDA 含量均極顯著下降。0.1%LSTCM 組血清T-AOC、SOD、GSH-Px 活性較對照組分別提高了16.44%（P＞0.05）、8.29%（P＜0.05）、23.22%（P＜0.01），MDA 含 量 降低了28.99%（P＜0.05）。各試驗組間，0.3%LSTCM 組血清中T-AOC 高于0.1%LSTCM 組（P＜0.01），SOD與GSH-Px 活性高于0.1%、0.5%LSTCM 組（P＜0.01），MDA 含量低于0.1%、0.5%LSTCM 組（P＜0.05）。

2.2.2 LSTCM 對育肥豬組織器官中抗氧化指標的影響從表4 可知，與對照組相比，0.3%、0.5%LSTCM 組肌肉、肝臟、腎臟中及0.1%LSTCM 組肌肉中的T-AOC均極顯著提高，0.1%組肝臟中T-AOC 顯著提高。各試驗組間相比，0.3%LSTCM 組肌肉、肝臟、腎臟中T-AOC均高于0.1%、0.5% LSTCM 組（P＜0.01 或P＜0.05）。

表3 LSTCM 對育肥豬血清抗氧化指標的影響

表4 LSTCM 對育肥豬組織器官中抗氧化指標的影響

0.3%LSTCM 組肌肉、肝臟、腎臟中SOD 均高于對照組與0.1%LSTCM 組（P＜0.01），除肝臟中SOD外均高于0.5%LSTCM 組（P＜0.05），0.5%LSTCM 組肌肉、肝臟中SOD 高于對照組與0.1%LSTCM 組（P＜0.05或P＜0.01）。

0.3%LSTCM 組肌肉、肝臟中GSH-Px 均高于對照組和0.1%、0.5% LSTCM 組（P＜0.01 或P＜0.05），0.3%、0.5%LSTCM 組腎臟中GSH-Px 高于對照組（P＜0.05），對照組與0.1%LSTCM 組間均無顯著差異。

0.3%LSTCM 組肌肉中MDA 均極顯著低于其他組，肝臟中MDA 顯著低于對照組，腎臟中MDA 極顯著低于對照組與0.1%LSTCM 組。

3 討 論

3.1 LSTCM 對育肥豬血清免疫的影響 IgA、IgG、IgM 都是血清中重要的免疫指標，三者中IgG 含量最多，且持續(xù)時間久，主要對機體內的病毒、病菌起免疫作用[12]；IgA 則對機體的黏膜免疫作用效果顯著；IgM 是最先產生的體液免疫蛋白，其作用時間短。鄒糧澤[13]試驗表明，富硒乳酸菌能增強仔豬的免疫及抗氧化能力。趙燕飛等[14]研究表明，白術通過調控抗菌肽PR-39 和Protegrin-1 的表達從而增強仔豬免疫能力。本試驗中，添加LSTCM 后育肥豬血清中免疫球蛋白含量較對照組均有增加，表明LSTCM 可加強育肥豬的免疫力。

3.2 LSTCM 對育肥豬血清、組織抗氧化指標的影響T-AOC、SOD、GSH-Px、MDA 均是反映抗氧化性能的重要指標。機體的抗氧化系統(tǒng)可分為酶促反應系統(tǒng)和非酶促反應系統(tǒng)，SOD 和GSH-Px 是酶促反應系統(tǒng)中清除自由基的主要生物酶，可通過將活性氧分子轉化為無毒化合物使機體免受氧化應激和組織損傷[15]。SOD 能破壞超氧自由基并形成H2O2，GSH-Px 及CAT將H2O2分解為水和氧，并防止羥基自由基的形成[16]。MDA 具有細胞毒性，是脂質過氧化的標志，其含量增多意味著機體細胞膜和肝組織被氧化受損[17]。硒在抗氧化和提高機體免疫力方面有著重要作用，是GSH 的重要組成部分，隨GSH 一起通過分解機體內過氧化物途徑，保護細胞膜不被氧化，清除自由基，提高機體抗氧化性。李樂等[18]試驗表明，不同劑量的富硒乳酸菌能不同程度地增強蛋雞血清、肝臟的抗氧化能力。韓東魁等[19]研究發(fā)現(xiàn)，給延邊黃牛日糧中添加負離子中藥復合制劑能提高其抗氧化能力。本試驗結果顯示，與對照組相比，LSTCM 試驗組均能增強血清、組織與器官中T-AOC、SOD 和GSH-Px 活性，同時降低MDA 含量，表明LSTCM 可增強機體抗氧化能力、降低氧化損傷。

4 結 論

本試驗結果顯示，在育肥豬日糧中添加LSTCM 能顯著增強育肥豬的免疫能力和血清及組織中的抗氧化能力。綜合分析，LSTCM 添加量為0.3%時最佳。