溫度對(duì)烏蘇里擬鲿受精孵化及仔魚生長(zhǎng)的影響

周明華，余祥勝，強(qiáng)曉剛，史文競(jìng)

（1.盱眙縣淮河鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)技術(shù)服務(wù)站，江蘇 淮安 211707；2.淮安市水產(chǎn)技術(shù)指導(dǎo)站，江蘇 淮安 223001；3.淮陰師范學(xué)院生命科學(xué)學(xué)院，江蘇 淮安 223300）

烏蘇里擬鲿（Pseudobagrus ussuriensis）為鲿科，擬鲿屬魚類，廣泛分布于黑龍江、珠江，洪澤湖、太湖等水域[1,2]。烏蘇里擬鲿肉質(zhì)細(xì)嫩、味道鮮美、市場(chǎng)價(jià)值高，受到廣大消費(fèi)者和養(yǎng)殖戶的歡迎[3]。但是近年來，由于人們的大肆捕撈及環(huán)境污染的日益加重，野生資源日益減少，目前在很多自然分布區(qū)都已很難捕獲野生個(gè)體[4]。目前，已有較多關(guān)于烏蘇里擬鲿的相關(guān)研究報(bào)道，但大多數(shù)研究集中于人工繁殖[5-9]，苗種培育[10-12]，營(yíng)養(yǎng)生理[13]，遺傳學(xué)[3,14-17]等方面，對(duì)于胚胎發(fā)育的研究亦有少量報(bào)道[18,19]。

溫度是一種重要的環(huán)境脅迫因子，溫度對(duì)于魚類的胚胎發(fā)育[20]及生長(zhǎng)[21-23]有重要的影響。溫度通過影響魚類體內(nèi)消化酶的活性及對(duì)食物的消化吸收率，從而影響魚類的代謝反應(yīng)速率，進(jìn)而影響魚類的胚胎發(fā)育、存活和生長(zhǎng)。高溫還會(huì)增加魚類細(xì)胞中的氧化還原壓力，降低魚類的免疫能力，從而導(dǎo)致魚類的疾病甚至死亡[21]。在適溫范圍內(nèi)，溫度可以通過促進(jìn)魚類新陳代謝速率的提高，從而影響魚類的存活和生長(zhǎng)[24]。Hofmann和Fischer[25]對(duì)江鱈的研究中指出，在一定的溫度范圍內(nèi)，升高溫度可以提高魚類的攝食率和生長(zhǎng)率，從而促進(jìn)生長(zhǎng)；而當(dāng)溫度超過最適溫度范圍后，隨著溫度的升高，生長(zhǎng)率會(huì)逐漸下降。

目前，溫度對(duì)烏蘇里擬鲿胚胎發(fā)育及生長(zhǎng)影響的相關(guān)研究還嚴(yán)重不足。烏蘇里擬鲿的最適溫度范圍為24～32℃，故該試驗(yàn)共設(shè)置24、26、28和32℃四個(gè)溫度組，研究溫度對(duì)烏蘇里擬鲿胚胎發(fā)育及胚后30 d的生長(zhǎng)的影響，以期為烏蘇里擬鲿的苗種培育提供理論指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)用親魚來自淮安市水產(chǎn)技術(shù)指導(dǎo)站，選擇體表光滑勻稱、無病癥、有較強(qiáng)活力、體格健壯、體質(zhì)量較大、性腺發(fā)育成熟的個(gè)體，作為試驗(yàn)用親魚。雌雄分開，暫養(yǎng)于水泥池中，等待催產(chǎn)。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)共設(shè)置24、26（對(duì)照組）、28和32℃四個(gè)溫度梯度，采用武漢瑞華儀器所生產(chǎn)的HP 1 000 GS型智能人工氣候箱對(duì)溫度進(jìn)行控制。試驗(yàn)持續(xù)至烏蘇里擬鲿仔魚胚后30 d，胚胎發(fā)育期間統(tǒng)計(jì)受精率及孵化率，仔魚出膜后每隔5 d挑選50尾仔魚，測(cè)量體長(zhǎng)、體質(zhì)量，并據(jù)此計(jì)算生長(zhǎng)率。出膜后，挑選500尾活力良好的仔魚分開飼養(yǎng)，30 d后，統(tǒng)計(jì)烏蘇里擬鲿仔魚的存活率。試驗(yàn)期間所用養(yǎng)殖容器是規(guī)格為60 cm×40 cm×20 cm的塑料水箱。試驗(yàn)共2次重復(fù)。

1.3 催產(chǎn)及人工授精

選擇絨毛膜促性腺激素（HCG）、人工合成丘腦下部促黃體素釋放激素類似物（LRH-A）、馬來酸地歐酮（DOM），這3種常用的催產(chǎn)激素處理雌、雄親魚，雌魚采用二次注射法，雄魚采用一次注射法。催產(chǎn)藥物的具體用法用量及人工授精方法，參考文獻(xiàn)[2]，人工授精后將受精卵放入人工氣候箱的塑料水箱中孵化。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

采用Microsoft Excel 2016及SPSS 16.0數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 溫度對(duì)烏蘇里擬鲿受精孵化的影響

溫度對(duì)烏蘇里擬鲿受精孵化的影響見表1。由表1可知，對(duì)照組（26℃）受精率最高為95.6%，低溫（24℃）、對(duì)照（26℃）、中溫組（28℃）之間的受精率差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，均超過92%；而高溫組（32℃）的受精率顯著低于低、中溫及對(duì)照組，且差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。對(duì)照組的孵化率最高，其次是中溫組，中溫組與對(duì)照組之間的孵化率差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；低、高溫組的孵化率均低于對(duì)照組，低、高溫組與對(duì)照組之間差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。在0—30日齡的時(shí)間段內(nèi)，中溫組仔魚存活率最高，為76.2%；低、中溫及對(duì)照組的存活率均超過70%，低、中溫組與對(duì)照組之間差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；高溫組的存活率低于70%，高溫組與中溫、對(duì)照組之間差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

表1 溫度對(duì)烏蘇里擬鲿受精率、孵化率及存活率（0—30日齡）的影響

2.2 溫度對(duì)烏蘇里擬鲿體長(zhǎng)、體質(zhì)量的影響

烏蘇里擬鲿仔魚孵化后，5—30日齡各試驗(yàn)組平均體長(zhǎng)見圖1，結(jié)果顯示：低、中溫組，5—30日齡烏蘇里擬鲿體長(zhǎng)增長(zhǎng)與對(duì)照組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異（P＞0.05）。高溫組，5—20日齡烏蘇里擬鲿的體長(zhǎng)增長(zhǎng)較對(duì)照組小，10、15日齡的仔魚體長(zhǎng)與對(duì)照組差異具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；20—30日齡，烏蘇里擬鲿體長(zhǎng)恢復(fù)正常，與對(duì)照組差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

圖1 溫度對(duì)烏蘇里擬鲿體長(zhǎng)的影響（5—30日齡）

烏蘇里擬鲿仔魚孵化后，5—30日齡各試驗(yàn)組平均體質(zhì)量見圖2，結(jié)果顯示：低、中溫組，5—30日齡烏蘇里擬鲿體質(zhì)量增加與對(duì)照組無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異（P＞0.05）。高溫組，5—20日齡體質(zhì)量較對(duì)照組小，但僅于10日齡時(shí)，表現(xiàn)出具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義差異（P＜0.05）；20—30日齡，烏蘇里擬鲿體質(zhì)量恢復(fù)正常，與對(duì)照組差異不具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2.3 溫度對(duì)烏蘇里擬鲿仔魚生長(zhǎng)的影響

據(jù)各溫度梯度生長(zhǎng)率的統(tǒng)計(jì)結(jié)果（圖3）可以發(fā)現(xiàn)：24～28℃范圍內(nèi)，烏蘇里擬鲿仔魚的生長(zhǎng)率隨溫度升高而不斷增大；到32℃時(shí)，生長(zhǎng)率反而下降，較28℃組的生長(zhǎng)率低，28℃組的生長(zhǎng)率是各試驗(yàn)組中最高的。利用二次方程對(duì)烏蘇里擬鲿仔魚的生長(zhǎng)率（AGR）進(jìn)行擬合分析，得到擬合方程為：AGR=0.0225T-0.0004T2-0.2988(R2=0.8218)。通過對(duì)曲線求導(dǎo)計(jì)算極值的方法求得，水溫為28.125℃時(shí)，生長(zhǎng)率AGR取得最大值，故推測(cè)0—30日齡的烏蘇里擬鲿仔魚生長(zhǎng)的最適溫度為28.13℃。

圖3 溫度與烏蘇里擬鲿仔魚生長(zhǎng)率之間的關(guān)系

3 討論分析

3.1 溫度對(duì)烏蘇里擬鲿受精、孵化、存活率的影響

根據(jù)表1，受精率、孵化率在26℃條件下達(dá)到最高，仔魚出膜后0～30 d，在28℃的條件下其存活率最高，而溫度過高對(duì)烏蘇里擬鲿的受精率、孵化率、存活率均有較大的影響（P＜0.05）。這與陳子桂等[18]的研究結(jié)果一致，其研究表明，烏蘇里擬鲿的受精率、孵化率在25.8℃的條件下為最高，；而存活率的最適溫度為25.8℃，這與該試驗(yàn)結(jié)果不同，可能是因?yàn)閮纱卧囼?yàn)的試驗(yàn)時(shí)間不同，且試驗(yàn)魚苗并非同一批次苗種。在魚類孵化的最適溫度范圍內(nèi)，胚胎的受精率、孵化率最高，而當(dāng)溫度高/低于最適溫度，均會(huì)導(dǎo)致胚胎的畸形、死亡，導(dǎo)致存活率降低[13,26]。根據(jù)蔣明霞等[26]的研究發(fā)現(xiàn)，魚類孵化的最適溫度與存活的最適溫度可能出現(xiàn)不相同的情況，與該試驗(yàn)結(jié)果相一致。高溫條件下，烏蘇里擬鲿的受精、孵化、存活率均較低，可能是因?yàn)闉跆K里擬鲿在較高的溫度條件下，精子活力降低，胚胎及胚后發(fā)育部分酶活性降低，導(dǎo)致體內(nèi)能量供應(yīng)不足，從而導(dǎo)致魚類受精率、孵化率、存活率降低。

3.2 溫度對(duì)烏蘇里擬鲿生長(zhǎng)發(fā)育的影響

該試驗(yàn)所采用的材料是從受精卵到30日齡的烏蘇里擬鲿仔魚，剛出膜的仔魚的體質(zhì)量與30日齡的仔魚的體質(zhì)量相比，其完全可以忽略不計(jì)。因此直接以控溫試驗(yàn)結(jié)束后的體質(zhì)量與時(shí)間的比值作為生長(zhǎng)率（AGR）的指標(biāo)。

在最適溫度范圍內(nèi)，隨溫度升高，不僅完成各發(fā)育階段所需時(shí)間縮短，而且其開口時(shí)間也相應(yīng)提前[27-28]。該試驗(yàn)中，中、高溫組的仔魚從受精卵到開口只需兩天的時(shí)間，而低溫組則要三天半的時(shí)間。在24～28℃范圍內(nèi)，隨著溫度的升高，烏蘇里擬鲿仔魚的生長(zhǎng)率逐漸提高，而當(dāng)溫度超過28℃時(shí)，烏蘇里擬鲿仔魚的生長(zhǎng)率出現(xiàn)下降的趨勢(shì)。對(duì)黃顙魚[29]、羅非魚[30]、大鱗鲃[31]、軍曹魚[32]、大菱鲆[33]等的研究同樣表現(xiàn)出，隨著溫度升高，生長(zhǎng)率呈先升高后降低的變化趨勢(shì)。究其原因，可能是因?yàn)樵谧钸m溫度下，幼魚的體內(nèi)環(huán)境與體外環(huán)境相適應(yīng)，調(diào)節(jié)機(jī)體適應(yīng)環(huán)境、維持生命活動(dòng)的能量較少，用于生長(zhǎng)的能量較多，因此幼魚的生長(zhǎng)速率加快，轉(zhuǎn)化效率提升[34]；而當(dāng)溫度高于魚類的最適溫度時(shí)，一方面高溫增加了魚體內(nèi)的能量消耗，另一方面高溫使魚體內(nèi)的消化酶活性改變，進(jìn)而影響了魚類的攝食強(qiáng)度、消化吸收效率等生理機(jī)能和代謝水平，從而影響魚類的生長(zhǎng)[35-37]。

4 結(jié)論

烏蘇里擬鲿的胚胎發(fā)育最適溫度為26℃，當(dāng)水溫超過26℃時(shí)，會(huì)導(dǎo)致烏蘇里擬鲿的受精率、孵化率降低；烏蘇里擬鲿仔魚（0～30 d）的存活率、生長(zhǎng)率，在28℃的條件下最高。利用二次方程對(duì)烏蘇里擬鲿仔魚（0～30 d）的生長(zhǎng)率（AGR）與溫度的關(guān)系進(jìn)行擬合分析，得到擬合方程為：AGR=0.0225T-0.0004T2-0.2988。通過求導(dǎo)推算極值的方法，得出烏蘇里擬鲿的最適生長(zhǎng)發(fā)育溫度為28.13℃。