溫度對烏蘇里擬鲿受精孵化及仔魚生長的影響

周明華，余祥勝，強曉剛，史文競

（1.盱眙縣淮河鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)技術(shù)服務(wù)站，江蘇 淮安 211707；2.淮安市水產(chǎn)技術(shù)指導(dǎo)站，江蘇 淮安 223001；3.淮陰師范學院生命科學學院，江蘇 淮安 223300）

烏蘇里擬鲿（Pseudobagrus ussuriensis）為鲿科，擬鲿屬魚類，廣泛分布于黑龍江、珠江，洪澤湖、太湖等水域[1,2]。烏蘇里擬鲿肉質(zhì)細嫩、味道鮮美、市場價值高，受到廣大消費者和養(yǎng)殖戶的歡迎[3]。但是近年來，由于人們的大肆捕撈及環(huán)境污染的日益加重，野生資源日益減少，目前在很多自然分布區(qū)都已很難捕獲野生個體[4]。目前，已有較多關(guān)于烏蘇里擬鲿的相關(guān)研究報道，但大多數(shù)研究集中于人工繁殖[5-9]，苗種培育[10-12]，營養(yǎng)生理[13]，遺傳學[3,14-17]等方面，對于胚胎發(fā)育的研究亦有少量報道[18,19]。

溫度是一種重要的環(huán)境脅迫因子，溫度對于魚類的胚胎發(fā)育[20]及生長[21-23]有重要的影響。溫度通過影響魚類體內(nèi)消化酶的活性及對食物的消化吸收率，從而影響魚類的代謝反應(yīng)速率，進而影響魚類的胚胎發(fā)育、存活和生長。高溫還會增加魚類細胞中的氧化還原壓力，降低魚類的免疫能力，從而導(dǎo)致魚類的疾病甚至死亡[21]。在適溫范圍內(nèi)，溫度可以通過促進魚類新陳代謝速率的提高，從而影響魚類的存活和生長[24]。Hofmann和Fischer[25]對江鱈的研究中指出，在一定的溫度范圍內(nèi)，升高溫度可以提高魚類的攝食率和生長率，從而促進生長；而當溫度超過最適溫度范圍后，隨著溫度的升高，生長率會逐漸下降。

目前，溫度對烏蘇里擬鲿胚胎發(fā)育及生長影響的相關(guān)研究還嚴重不足。烏蘇里擬鲿的最適溫度范圍為24～32℃，故該試驗共設(shè)置24、26、28和32℃四個溫度組，研究溫度對烏蘇里擬鲿胚胎發(fā)育及胚后30 d的生長的影響，以期為烏蘇里擬鲿的苗種培育提供理論指導(dǎo)。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗用親魚來自淮安市水產(chǎn)技術(shù)指導(dǎo)站，選擇體表光滑勻稱、無病癥、有較強活力、體格健壯、體質(zhì)量較大、性腺發(fā)育成熟的個體，作為試驗用親魚。雌雄分開，暫養(yǎng)于水泥池中，等待催產(chǎn)。

1.2 試驗設(shè)計

試驗共設(shè)置24、26（對照組）、28和32℃四個溫度梯度，采用武漢瑞華儀器所生產(chǎn)的HP 1 000 GS型智能人工氣候箱對溫度進行控制。試驗持續(xù)至烏蘇里擬鲿仔魚胚后30 d，胚胎發(fā)育期間統(tǒng)計受精率及孵化率，仔魚出膜后每隔5 d挑選50尾仔魚，測量體長、體質(zhì)量，并據(jù)此計算生長率。出膜后，挑選500尾活力良好的仔魚分開飼養(yǎng)，30 d后，統(tǒng)計烏蘇里擬鲿仔魚的存活率。試驗期間所用養(yǎng)殖容器是規(guī)格為60 cm×40 cm×20 cm的塑料水箱。試驗共2次重復(fù)。

1.3 催產(chǎn)及人工授精

選擇絨毛膜促性腺激素（HCG）、人工合成丘腦下部促黃體素釋放激素類似物（LRH-A）、馬來酸地歐酮（DOM），這3種常用的催產(chǎn)激素處理雌、雄親魚，雌魚采用二次注射法，雄魚采用一次注射法。催產(chǎn)藥物的具體用法用量及人工授精方法，參考文獻[2]，人工授精后將受精卵放入人工氣候箱的塑料水箱中孵化。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

采用Microsoft Excel 2016及SPSS 16.0數(shù)據(jù)統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析。

2 試驗結(jié)果

2.1 溫度對烏蘇里擬鲿受精孵化的影響

溫度對烏蘇里擬鲿受精孵化的影響見表1。由表1可知，對照組（26℃）受精率最高為95.6%，低溫（24℃）、對照（26℃）、中溫組（28℃）之間的受精率差異不具統(tǒng)計學意義，均超過92%；而高溫組（32℃）的受精率顯著低于低、中溫及對照組，且差異具統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。對照組的孵化率最高，其次是中溫組，中溫組與對照組之間的孵化率差異不具統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；低、高溫組的孵化率均低于對照組，低、高溫組與對照組之間差異具統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。在0—30日齡的時間段內(nèi)，中溫組仔魚存活率最高，為76.2%；低、中溫及對照組的存活率均超過70%，低、中溫組與對照組之間差異不具統(tǒng)計學意義（P＞0.05）；高溫組的存活率低于70%，高溫組與中溫、對照組之間差異具統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。

表1 溫度對烏蘇里擬鲿受精率、孵化率及存活率（0—30日齡）的影響

2.2 溫度對烏蘇里擬鲿體長、體質(zhì)量的影響

烏蘇里擬鲿仔魚孵化后，5—30日齡各試驗組平均體長見圖1，結(jié)果顯示：低、中溫組，5—30日齡烏蘇里擬鲿體長增長與對照組無統(tǒng)計學意義差異（P＞0.05）。高溫組，5—20日齡烏蘇里擬鲿的體長增長較對照組小，10、15日齡的仔魚體長與對照組差異具統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；20—30日齡，烏蘇里擬鲿體長恢復(fù)正常，與對照組差異不具統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

圖1 溫度對烏蘇里擬鲿體長的影響（5—30日齡）

烏蘇里擬鲿仔魚孵化后，5—30日齡各試驗組平均體質(zhì)量見圖2，結(jié)果顯示：低、中溫組，5—30日齡烏蘇里擬鲿體質(zhì)量增加與對照組無統(tǒng)計學意義差異（P＞0.05）。高溫組，5—20日齡體質(zhì)量較對照組小，但僅于10日齡時，表現(xiàn)出具統(tǒng)計學意義差異（P＜0.05）；20—30日齡，烏蘇里擬鲿體質(zhì)量恢復(fù)正常，與對照組差異不具統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

2.3 溫度對烏蘇里擬鲿仔魚生長的影響

據(jù)各溫度梯度生長率的統(tǒng)計結(jié)果（圖3）可以發(fā)現(xiàn)：24～28℃范圍內(nèi)，烏蘇里擬鲿仔魚的生長率隨溫度升高而不斷增大；到32℃時，生長率反而下降，較28℃組的生長率低，28℃組的生長率是各試驗組中最高的。利用二次方程對烏蘇里擬鲿仔魚的生長率（AGR）進行擬合分析，得到擬合方程為：AGR=0.0225T-0.0004T2-0.2988(R2=0.8218)。通過對曲線求導(dǎo)計算極值的方法求得，水溫為28.125℃時，生長率AGR取得最大值，故推測0—30日齡的烏蘇里擬鲿仔魚生長的最適溫度為28.13℃。

圖3 溫度與烏蘇里擬鲿仔魚生長率之間的關(guān)系

3 討論分析

3.1 溫度對烏蘇里擬鲿受精、孵化、存活率的影響

根據(jù)表1，受精率、孵化率在26℃條件下達到最高，仔魚出膜后0～30 d，在28℃的條件下其存活率最高，而溫度過高對烏蘇里擬鲿的受精率、孵化率、存活率均有較大的影響（P＜0.05）。這與陳子桂等[18]的研究結(jié)果一致，其研究表明，烏蘇里擬鲿的受精率、孵化率在25.8℃的條件下為最高，；而存活率的最適溫度為25.8℃，這與該試驗結(jié)果不同，可能是因為兩次試驗的試驗時間不同，且試驗魚苗并非同一批次苗種。在魚類孵化的最適溫度范圍內(nèi)，胚胎的受精率、孵化率最高，而當溫度高/低于最適溫度，均會導(dǎo)致胚胎的畸形、死亡，導(dǎo)致存活率降低[13,26]。根據(jù)蔣明霞等[26]的研究發(fā)現(xiàn)，魚類孵化的最適溫度與存活的最適溫度可能出現(xiàn)不相同的情況，與該試驗結(jié)果相一致。高溫條件下，烏蘇里擬鲿的受精、孵化、存活率均較低，可能是因為烏蘇里擬鲿在較高的溫度條件下，精子活力降低，胚胎及胚后發(fā)育部分酶活性降低，導(dǎo)致體內(nèi)能量供應(yīng)不足，從而導(dǎo)致魚類受精率、孵化率、存活率降低。

3.2 溫度對烏蘇里擬鲿生長發(fā)育的影響

該試驗所采用的材料是從受精卵到30日齡的烏蘇里擬鲿仔魚，剛出膜的仔魚的體質(zhì)量與30日齡的仔魚的體質(zhì)量相比，其完全可以忽略不計。因此直接以控溫試驗結(jié)束后的體質(zhì)量與時間的比值作為生長率（AGR）的指標。

在最適溫度范圍內(nèi)，隨溫度升高，不僅完成各發(fā)育階段所需時間縮短，而且其開口時間也相應(yīng)提前[27-28]。該試驗中，中、高溫組的仔魚從受精卵到開口只需兩天的時間，而低溫組則要三天半的時間。在24～28℃范圍內(nèi)，隨著溫度的升高，烏蘇里擬鲿仔魚的生長率逐漸提高，而當溫度超過28℃時，烏蘇里擬鲿仔魚的生長率出現(xiàn)下降的趨勢。對黃顙魚[29]、羅非魚[30]、大鱗鲃[31]、軍曹魚[32]、大菱鲆[33]等的研究同樣表現(xiàn)出，隨著溫度升高，生長率呈先升高后降低的變化趨勢。究其原因，可能是因為在最適溫度下，幼魚的體內(nèi)環(huán)境與體外環(huán)境相適應(yīng)，調(diào)節(jié)機體適應(yīng)環(huán)境、維持生命活動的能量較少，用于生長的能量較多，因此幼魚的生長速率加快，轉(zhuǎn)化效率提升[34]；而當溫度高于魚類的最適溫度時，一方面高溫增加了魚體內(nèi)的能量消耗，另一方面高溫使魚體內(nèi)的消化酶活性改變，進而影響了魚類的攝食強度、消化吸收效率等生理機能和代謝水平，從而影響魚類的生長[35-37]。

4 結(jié)論

烏蘇里擬鲿的胚胎發(fā)育最適溫度為26℃，當水溫超過26℃時，會導(dǎo)致烏蘇里擬鲿的受精率、孵化率降低；烏蘇里擬鲿仔魚（0～30 d）的存活率、生長率，在28℃的條件下最高。利用二次方程對烏蘇里擬鲿仔魚（0～30 d）的生長率（AGR）與溫度的關(guān)系進行擬合分析，得到擬合方程為：AGR=0.0225T-0.0004T2-0.2988。通過求導(dǎo)推算極值的方法，得出烏蘇里擬鲿的最適生長發(fā)育溫度為28.13℃。