中藥特征圖譜技術(shù)在中藥鑒定中的應(yīng)用

范長(zhǎng)啟 孫兆祥

【摘 要】我國中藥材市場(chǎng)種類繁多，但在中藥材市場(chǎng)中有相當(dāng)一部分藥材長(zhǎng)期處于同名異物或者同物異名的狀態(tài)，缺乏規(guī)范化、系統(tǒng)化的歸納整理，甚至于部分藥材存在以假亂真、以次充好的現(xiàn)象。因此，設(shè)立合理、行之有效的鑒別方法是極其必要的。而中藥特征圖譜技術(shù)的應(yīng)用，則是基于中藥材鑒別的實(shí)際出發(fā)，給予藥材適當(dāng)性處理后，采用生物化學(xué)分析儀器，對(duì)藥材中的各種成分群體共有峰進(jìn)行圖譜標(biāo)識(shí)。這項(xiàng)圖譜標(biāo)識(shí)技術(shù)是一種綜合型可量化的特征鑒別技術(shù)手段，不僅能高效的鑒別藥材的真?zhèn)我约安顒e，而且還能有效的評(píng)價(jià)中藥材質(zhì)量的均一性以及穩(wěn)定性等。

【關(guān)鍵詞】中藥特征;圖譜技術(shù);中藥鑒定

【中圖分類號(hào)】R284.1【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B【文章編號(hào)】1005-0019（2019）23-0-02

隨著各項(xiàng)化學(xué)分析設(shè)備以及生物分析科技的產(chǎn)生以及發(fā)展，中藥的特征圖譜技術(shù)的形成也日趨完善，各種類中藥材的特征圖譜也系統(tǒng)性、全面化的建立，給予中藥材快速準(zhǔn)確的建立提供參考依據(jù)。中藥特征圖譜技術(shù)又被稱之為中藥指紋圖譜，指的是中藥材經(jīng)過相應(yīng)得處理之后，經(jīng)生物分析儀以及化學(xué)檢測(cè)儀進(jìn)行鑒定，以此獲取各種成分群體共有峰的特征圖譜，是目前可量化、綜合性鑒別中藥材真?zhèn)?、?yōu)良、均一的重要實(shí)施方法，并且在藥材市場(chǎng)質(zhì)量鑒定評(píng)級(jí)上具有良好的穩(wěn)定性能。中藥特征圖譜技術(shù)一般有兩類即化學(xué)特征圖譜與生物特征圖譜，其中化學(xué)特征圖譜主要是經(jīng)色譜法以及光譜法給予藥材相應(yīng)的化學(xué)性質(zhì)鑒定，而生物特征圖譜則是采用分子標(biāo)記方法對(duì)中藥材遺傳性生物特征行相應(yīng)得鑒定分析[1]。

1 化學(xué)特征圖譜于中藥材中的應(yīng)用

化學(xué)成分特征圖譜包括色譜特征圖譜以及光譜特征圖譜，較多以色譜法、光譜法等技術(shù)手段進(jìn)行鑒定分析。

1.1 色譜分析法 （1）薄層色譜法（TLC）：TLC具有快速經(jīng)濟(jì)、操作簡(jiǎn)單易行等顯著特點(diǎn)，為中藥材的鑒定提供直觀形象的熒光及可見光色譜圖，除此之外更能與數(shù)碼處理以及色譜掃描相配合，以此獲取不同層次的輪廓圖譜及相關(guān)的積分?jǐn)?shù)據(jù)，應(yīng)用于中藥材鑒別中較為適合。依據(jù)相關(guān)的文獻(xiàn)資料，采用薄層色譜分析法對(duì)甘草進(jìn)行相應(yīng)得研究，以此獲得其特征圖譜，并結(jié)合化學(xué)統(tǒng)計(jì)學(xué)中成分相似度判定以及聚類分析等方法，就得到的圖譜行相應(yīng)得研究分析。對(duì)15批次的藥材進(jìn)行研究表明，野生以及人工種植的正品甘草具有95%以上的相似度。產(chǎn)自內(nèi)蒙古省寶山鎮(zhèn)及阿拉善盟額濟(jì)納旗的甘草，其特征圖譜的最高峰峰值高于其他樣品。因此TLC能有效鑒定藥材的質(zhì)量以及真?zhèn)?。?）高效液相色譜法（HPLC）：HPLC的特點(diǎn)為分離效果好、高精密度以及高準(zhǔn)確性等，是目前化學(xué)分析中較為常用的一種方法，能高效的鑒定中藥特征。與TLC相對(duì)比，具有色譜穩(wěn)定、重現(xiàn)性好以及不易受外界因素影響等顯著特性。相關(guān)的研究文獻(xiàn)中，對(duì)10個(gè)不同批次的茱萸行研究，并應(yīng)用HPLC行色譜分析，明顯的發(fā)現(xiàn)有7個(gè)特征圖譜相似度超過95%，2個(gè)相似度小于90%，判定這兩個(gè)的為假冒品，因此應(yīng)用HPLC能顯著顯示正品及假冒品之間的差異，以此將假冒品鑒定出來。（3）氣相色譜法：主要鑒別中藥材中的揮發(fā)性成分。相關(guān)的研究中對(duì)于高良姜揮發(fā)油進(jìn)行分析，采用氣相色譜法分離其100余個(gè)化學(xué)成分，選取其中的11個(gè)成分組成一個(gè)群體形成特征圖譜的共有峰。通過比對(duì)，于特征圖譜地道藥材明顯比藥材市場(chǎng)中的高良姜具有極高的相似度，且于高良姜近緣植物的特征圖譜相對(duì)比，存在明顯的差異性，因此氣相色譜法所出的特征圖譜具有較高的專屬性[2]。

1.2 光譜分析法 （1）紅外光譜法：其又被稱之為紅外分光光度分析法。其應(yīng)用于中藥材，主要是將藥材中各類化學(xué)成分在紅外光譜中相互疊加，如若藥材的化學(xué)成分較穩(wěn)定，則其紅外光譜也較穩(wěn)定。有學(xué)者基于紅外光譜法對(duì)50中山藥進(jìn)行分析，并結(jié)合模式識(shí)別技術(shù)，對(duì)山藥中道地藥材、非道地藥材行相應(yīng)得識(shí)別，以及檢驗(yàn)相應(yīng)的紅外特征圖譜，得到的結(jié)果為模式識(shí)別的分類效果較好，紅外光譜法明顯的鑒別道地藥材，具有較好的指紋特性。（2）核磁共振譜（NMR）：就NMR而言，是目前對(duì)中藥材中有機(jī)化合物結(jié)構(gòu)鑒定的主要核心手段。根據(jù)其依據(jù)NMR上吸收峰的位置以及強(qiáng)度，對(duì)化合物的分子結(jié)構(gòu)行相應(yīng)得研究，并依據(jù)植物品種特性標(biāo)準(zhǔn)提取物，顯示皆存有特征圖譜，表明與植物品種存在基本對(duì)應(yīng)關(guān)系，不會(huì)發(fā)生混淆情況，以此實(shí)現(xiàn)中藥材品種鑒別以及化學(xué)分類[3]。

2 生物特征圖譜

2.1 隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA（RAPD）技術(shù) 利用隨機(jī)選定或合成的單一引物，于低溫度條件下，采用隨機(jī)的方式與DNA模板行相應(yīng)得配對(duì)，以此擴(kuò)增序列獲取DNA特征圖譜，同時(shí)給予分析對(duì)象基因組DNA應(yīng)用多態(tài)分析[4]。

2.2 限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性分析（PCR-RFLP）技術(shù) PCR-RFLP分析在最初的應(yīng)用中，主要用于分析鑒定藥材的品種。PCR-RFLP分析的基本原理是：有效利用特定的限制性內(nèi)切酶切開基因組DNA，獲取形態(tài)各異的DNA片斷，并采用凝膠電泳組成各類條帶，后經(jīng)印記雜交以及放射自顯影，從而揭示DNA的多態(tài)性。RFLP的主要優(yōu)點(diǎn)是標(biāo)記量較大，在等位基因之間呈顯著的共顯性，并有效區(qū)別純合基因型以及雜合基因型，且環(huán)境對(duì)其的影響較小。

綜上所述，在中藥材鑒定中，應(yīng)用中藥特征圖譜技術(shù)能有效的鑒定中藥材的真?zhèn)?，質(zhì)量，藥效以及類目等，并予以藥材市場(chǎng)中的假冒偽劣強(qiáng)有力的打擊，為中藥材的鑒定提供一定的參考，為提升藥材市場(chǎng)中中藥材的質(zhì)量奠定堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn)

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基于特征圖譜及多指標(biāo)成分含量的云南重樓野生與栽培品比較研究[J].中國中藥雜志，2017，42（15）：3011-3016.