血漿1，3-β-D葡聚糖在新生兒真菌性敗血癥早期診斷及療效判斷中的應(yīng)用

李芬 譚潭(通信作者) 徐玉娟 侯權(quán)芳 黃玲

423000南華大學(xué)附屬郴州市第一人民醫(yī)院，湖南郴州

作為一種新生兒時(shí)期的常見病，真菌性敗血癥的特征為癥狀缺乏典型性，發(fā)病率較高[1]。為驗(yàn)證這一方法的價(jià)值，本研究對86例新生兒進(jìn)行分析。

資料與方法

2017年8月-2018年12月收治 確診新生兒真菌性敗血癥43 例納入觀察組，另取同期分娩健康新生兒43例納入對照組。觀察組男25 例，女18 例，胎齡(38.8±2.7)周。對照組男26例，女17例，胎齡(38.7±2.6)周。兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，具有可比性。

方法：⑴診斷方法：①血常規(guī)檢查：分別采集兩組新生兒2 mL乙二胺四乙酸抗凝血，血小板水平、白細(xì)胞計(jì)數(shù)均以xs800i 希斯美康分析儀設(shè)備測定。檢測過程嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)操作程序完成，做好檢測期間的質(zhì)量控制。②真菌血培養(yǎng)檢查：以兒童樹脂瓶檢測兩組新生兒2 mL外周靜脈血，常規(guī)培養(yǎng)5 d。如標(biāo)本血培養(yǎng)結(jié)果呈陽性，以革蘭染色涂片處理后，轉(zhuǎn)種后置于37℃條件下持續(xù)培養(yǎng)24 h。根據(jù)培養(yǎng)后的科瑪嘉真菌顯色結(jié)果判斷菌種類型。如血培養(yǎng)結(jié)果呈陰性，則無需后續(xù)處理。③血漿1，3-β-D 葡聚糖檢查：以不含β-D葡聚糖的血漿采血管收集兩組新生兒1～2 mL 空腹靜脈血，按照400 g 標(biāo)準(zhǔn)持續(xù)離心處理10 min。離心后置于2～8℃冰箱內(nèi)保存待檢(4 h內(nèi)送檢)于樣品稀釋瓶內(nèi)混入0.1 mL血漿，充分混勻后，轉(zhuǎn)入75℃條件下靜置10 min，取出后冷卻至室溫。立即于2～8℃溫度下保存。于質(zhì)控品中混入0.5 mL 質(zhì)控品復(fù)溶液，置于漩渦混合器中持續(xù)混勻，取0.1 mL混合液置于樣品稀釋瓶內(nèi)，混勻并轉(zhuǎn)入75℃條件下靜置10 min，冷卻至室溫。⑵治療方法：真菌性敗血癥患兒均選用伏立康唑片治療。

評價(jià)方法：血漿1，3-β-D 葡聚糖含量正常參考值＜100.5 pg/mL；感染初期為100.5～151.5 pg/mL。

統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：數(shù)據(jù)采用SPSS 22.0 軟件分析；計(jì)數(shù)資料以[n(%)]表示，采用χ2檢驗(yàn)；計(jì)量資料以(±s)表示，采用t檢驗(yàn)；P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

兩組血常規(guī)水平比較：對照組血小板水平高于觀察組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。兩組白細(xì)胞計(jì)數(shù)水平對比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。見表1。

兩組血漿1，3-β-D 葡聚糖水平比較：對照組血漿1，3-β-D 葡聚糖水平為(82.34±12.93)pg/mL，低于觀察組的(157.46±15.18)pg/mL，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=23.96，P＜0.05)。

兩組真菌血培養(yǎng)結(jié)果比較：觀察組標(biāo)本中共分離出19 株真菌菌株，其中光滑念珠菌10株(52.63%)，白色念珠菌4株(21.05%)，克柔念珠菌3 株(15.79%)，近平滑念珠菌2株(10.53%)。

觀察組患兒治療前后血漿1，3-β-D葡聚糖水平比較：經(jīng)抗感染治療后，43 例患兒治療1周后僅1例無效，其余均好轉(zhuǎn)或痊愈。觀察組患兒治療后血漿1，3-β-D水平為(85.29±13.06)pg/mL低于治療前的(157.46±15.18)pg/mL，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

表1 兩組血常規(guī)水平比較(±s，×109/L)

表1 兩組血常規(guī)水平比較(±s，×109/L)

組別 n 血小板 白細(xì)胞計(jì)數(shù)對照組 43 190.16±35.72 9.02±3.26觀察組 43 139.05±38.19 9.83±3.31 t 7.19 0.23 P＜0.05 ＞0.05

討 論

近年來，我國新生兒真菌性敗血癥發(fā)病率逐年升高。這種感染性疾病主要與念珠菌屬真菌的感染機(jī)制有關(guān)[4]。從新生兒真菌性敗血癥的診斷方法來看，目前臨床確診患兒伴有真菌性敗血癥的常見方法包括：①真菌血培養(yǎng)結(jié)果：這一診斷方法雖可為醫(yī)師的臨床診斷工作提供良好的依據(jù)，但其耗時(shí)相對較長(初期培養(yǎng)需5d)。②血常規(guī)檢查：血常規(guī)檢查流程簡單易操作，可快速獲取診斷結(jié)果。但這種診斷方法檢測新生兒真菌性敗血癥的特異性水平偏低。

血漿1，3-β-D 葡聚糖廣泛分布于真菌細(xì)胞壁(接合菌、隱球菌不含這一成分)中[5]。采用這種方法診斷新生兒真菌性敗血癥患兒的原理為真菌性敗血癥患兒多因光滑念珠菌、白色念珠菌等進(jìn)入血液或深部組織中而發(fā)生感染。在真菌感染形成的同時(shí)，患兒體內(nèi)的吞噬細(xì)胞可經(jīng)消化、吞噬機(jī)制，促使真菌細(xì)胞壁大量釋放1，3-β-D葡聚糖[6]。本研究證實(shí)，觀察組血漿1，3-β-D 葡聚糖含量明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。

此外，本研究表明，患兒治療后血漿1，3-β-D 葡聚糖水平明顯低于治療前，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。原因?yàn)?，3-β-D 葡聚糖僅存在于真菌細(xì)胞壁中，經(jīng)抗感染治療消除患兒體內(nèi)的真菌后，大量1，3-β-D 葡聚糖可隨著患兒真菌的消除而消除。因此，如患兒的治療效果顯著，其治療后1，3-β-D 葡聚糖含量明顯下降；相反，如治療效果欠佳，可因體內(nèi)真菌感染的持續(xù)存在而導(dǎo)致患兒仍然有較高的1，3-β-D 葡聚糖含量水平。

綜上所述，宜于在新生兒真菌性敗血癥的早期診斷、預(yù)后評估中引入血漿1，3-β-D葡聚糖檢測方法。