皮下注射豬瘟疫苗對(duì)抗體水平變化的研究

陳德根

安溪縣畜禽屠宰監(jiān)督管理站 福建安溪 362400

近年來，關(guān)于豬瘟防疫的研究受到越來越多的關(guān)注。隨著社會(huì)生產(chǎn)力的不斷提高，對(duì)動(dòng)物的免疫技術(shù)要求也相對(duì)提高，對(duì)于豬瘟的防疫要求更是嚴(yán)謹(jǐn)，最好是一經(jīng)免疫就能準(zhǔn)確有效地杜絕該病。所以，有些豬場(chǎng)就只能對(duì)整個(gè)豬場(chǎng)的仔豬進(jìn)行多次免疫，只是這樣一來就加大了養(yǎng)殖場(chǎng)的豬瘟疫苗成本。為更好地預(yù)防該病，豬場(chǎng)應(yīng)制定好相應(yīng)的免疫程序，而監(jiān)測(cè)皮下注射疫苗后的豬瘟抗體水平變化，能夠更好、更準(zhǔn)確地控制該病的暴發(fā)流行。

監(jiān)測(cè)抗體水平可以彌補(bǔ)疫苗免疫程序的不足，更適合對(duì)豬瘟進(jìn)行防控。對(duì)某豬場(chǎng)同一天出生的21日齡仔豬以不同頭份豬瘟疫苗進(jìn)行皮下注射與肌肉注射，每7 d采血1次，檢測(cè)血清豬瘟抗體，記錄數(shù)據(jù)制成表格或折線圖，進(jìn)行分析。通過對(duì)豬瘟疫苗皮下注射與肌肉注射后抗體水平變化的比較，為豬場(chǎng)豬瘟免疫程序設(shè)計(jì)的合理性和實(shí)用性提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)仔豬 40頭21日齡杜長(zhǎng)大健康仔豬，由某規(guī)模豬場(chǎng)提供。

1.2 供試疫苗 CSFV弱毒疫苗，廣東永順生物制藥股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：(2017)190591084。

1.3 主要儀器和試劑 （盒） GO全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀，Thermo Multiskan公司；豬瘟IgG抗體檢測(cè)試劑盒，購(gòu)自韓國(guó)安捷動(dòng)物診斷試劑有限公司，Lot：4413PO001。

1.4 動(dòng)物分組 試驗(yàn)開始前1 d對(duì)40頭仔豬采血，分別在每頭仔豬打上耳牌。在分組前先用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)試劑盒對(duì)40頭仔豬檢測(cè)血清中豬瘟IgG抗體，根據(jù)測(cè)得的試驗(yàn)豬的抗體水平，將所有40頭仔豬分為8組（A～H組），每組5頭，每組仔豬平均抗體水平相近。

1.5 疫苗免疫注射和采血 在試驗(yàn)開始后按設(shè)計(jì)方案分別進(jìn)行豬瘟疫苗免疫注射，方案見表1。分別在第 0 d、7 d、14 d、21 d、28 d、35 d 對(duì) 40 頭試驗(yàn)豬進(jìn)行采血。將豬保定，首先用酒精棉球?qū)σM(jìn)行采血的部位進(jìn)行消毒，用一次性注射器前腔靜脈采血5 mL，進(jìn)行按壓止血；采血完畢 后將血液放入低速離心機(jī)內(nèi)進(jìn)行離心，得到分離的血清。將分離的血清置于2～8℃環(huán)境下并送實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。

表1 豬瘟弱毒疫苗免疫接種方案

1.6 樣品血清抗體檢測(cè) 每次直接用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)試劑盒檢測(cè)40份血清豬瘟IgG抗體。

2 結(jié)果與分析

對(duì)6次采血分離所得的480份血清用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)試劑盒檢測(cè)，計(jì)算每組5頭仔豬的抗體PI值平均數(shù)（見表 2、圖 1）。試驗(yàn)期 0～14 d，8組仔豬的平均抗體水平均有不同程度的下降；但在試驗(yàn)期14～35 d，除皮下注射對(duì)照組（D組）和肌肉注射對(duì)照組（H組）的平均抗體水平仍然下降外，其余6個(gè)試驗(yàn)組（A、B、C 組和 E、F、G 組）均不同程度上升，其中3個(gè)肌肉注射試驗(yàn)組（E、F、G組）的抗體水平均明顯低于3個(gè)皮下注射試驗(yàn)組 （A、B、C組）。皮下注射0.5頭份豬瘟疫苗試驗(yàn)組的抗體水平比肌肉注射2頭份豬瘟疫苗試驗(yàn)組的抗體水平高。

試驗(yàn)的時(shí)間跨度是從仔豬21日齡（傳統(tǒng)一免時(shí)間）至56日齡（傳統(tǒng)二免時(shí)間），檢測(cè)結(jié)果表明，免疫后0～14 d，8個(gè)組的抗體水平下降，與仔豬母源抗體水平的增長(zhǎng)和下降一致。免疫后14～35 d，皮下注射組和肌肉對(duì)照組的抗體開始增長(zhǎng)，除兩組持續(xù)降低外，皮下注射的仔豬血清抗體水平均優(yōu)于肌肉注射組。即使皮下注射0.5頭份豬瘟疫苗，抗體水平也高于2.0頭份肌肉注射組。從試驗(yàn)結(jié)果來看，有些意外的是肌肉注射的三個(gè)試驗(yàn)組（D、F、F組）中，肌肉注射2.0頭份豬瘟疫苗的抗體水平一直最低，而肌肉注射0.5頭份豬瘟疫苗的抗體水平最高，引起這一現(xiàn)象的原因可能是在試驗(yàn)期間人為操作導(dǎo)致的試驗(yàn)誤差，需要進(jìn)一步探討和研究。

表2 豬瘟IgG抗體檢測(cè)結(jié)果

圖1 不同時(shí)間各組豬瘟IgG抗體比較圖

從總體上看，豬瘟免疫抗體水平維持在較高水平，PI平均值均在70以上，呈逐漸上升的趨勢(shì)。

3 結(jié) 論

皮下注射方式的豬瘟疫苗接種量，僅需肌肉注射方式的1/4（或更少）即可達(dá)到同樣的免疫效果。