血漿內(nèi)酯素、基質(zhì)金屬蛋白酶-9水平與風(fēng)濕性心臟瓣膜病患者心肌重構(gòu)的關(guān)系

朱開蒙，宋兵，梁富祥，趙潤敏

風(fēng)濕性心臟瓣膜病是臨床上較為常見的自身免疫性疾病之一，患者發(fā)病早期普遍無典型癥狀，隨著病情的不斷進展會出現(xiàn)雙下肢水腫、心慌氣短及咳粉紅色泡沫痰等，如不給予及時有效的治療，會導(dǎo)致患者死亡[1]。其中心肌重構(gòu)是風(fēng)濕性心臟瓣膜病患者的晚期重要病理改變，也是導(dǎo)致疾病進展和患者預(yù)后不良的重要原因[2]。目前關(guān)于心肌重構(gòu)的發(fā)病機制仍未完全明確，相關(guān)研究表明心臟細胞外基質(zhì)降解、炎癥反應(yīng)、血管損傷以及內(nèi)皮功能紊亂在心肌重構(gòu)中起到重要作用。基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）家族在維持心臟細胞外基質(zhì)比例的動態(tài)平衡中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用，可能參與心肌重構(gòu)的過程[3]。另有研究報道顯示[4]，內(nèi)酯素（visfatin）在炎癥反應(yīng)、血管損傷以及內(nèi)皮功能紊亂等病理過程中起著重要作用。但關(guān)于血漿visfatin在風(fēng)濕性心臟瓣膜病患者中的表達相關(guān)研究并不多見。本研究通過研究血漿visfatin、MMP-9水平與風(fēng)濕性心臟瓣膜病患者心肌重構(gòu)的關(guān)系，旨在為風(fēng)濕性心臟瓣膜病患者心肌重構(gòu)的防治提供參考依據(jù)，現(xiàn)作以下報道。

1 資料與方法

1.1 研究對象 以2016年2月至2018年2月于蘭州大學(xué)第一醫(yī)院心外科收治風(fēng)濕性心臟瓣膜病患者73例作為研究組。納入標(biāo)準(zhǔn)[5]：①所有患者均經(jīng)影像學(xué)檢查確診為風(fēng)濕性心臟瓣膜病，且均擇期行雙瓣機械瓣置換術(shù)治療；②入院前均未接受任何相關(guān)治療；③年齡≥40歲；④臨床病歷資料無缺失。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并冠心病、心房纖顫、糖尿病以及血液系統(tǒng)疾病者；②伴有肝、腎等臟器功能嚴(yán)重損害者；③存在精神疾病或交流溝通障礙者；④正參與其他研究者。其中男性36例，女性37例，年齡42～78歲，平均年齡（61.32±10.25）歲；體質(zhì)指數(shù)（BMI）17.7～24.3 kg/m2，平均BMI指數(shù)（20.77±2.15）kg/m2。另取同期于我院進行體檢的健康人員50例作為對照組。其中男性26例，女性24例，年齡41～76歲，平均年齡（61.27±10.18）歲；BMI 17.6～24.5 kg/m2，平均BMI（20.81±2.18）kg/m2。兩組上述各項指標(biāo)對比，差異不大（P＞0.05），具有可比性。所有人員已知情同意，且醫(yī)院倫理委員會予以批準(zhǔn)。

1.2 研究方法 ①血漿visfatin、MMP-9水平檢測：分別采集所有人員的清晨空腹靜脈血10ml，以3000r/min離心20min，取血漿保存于-80℃冰箱中待檢。采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測血漿visfatin、MMP-9水平，具體操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書內(nèi)進行，相關(guān)試劑盒均購自上海酶聯(lián)生物科技有限公司。②心肌細胞直徑測量：研究組患者在術(shù)中不影響治療情況下取心肌組織立即放入福爾馬林中固定24 h，制成蠟塊標(biāo)本，將組織蠟塊進行連續(xù)切片，切片厚度為5 μm，隨后予以染色、封固處理，最后于顯微鏡下觀察心肌細胞間質(zhì)所占視野的比例情況。于顯微鏡下攝片，以計算機Image-Proplus圖像分析系統(tǒng)測量心肌細胞直徑。每張切片隨機選擇高倍鏡視野5個，并以視野中近似正圓形，且含有細胞核的最大心肌細胞進行測量，取其平均值作為切片心肌細胞直徑。③心肌膠原容積分?jǐn)?shù)測定：對心肌細胞予以Masson染色，于400倍光鏡下觀察膠原纖維的分布以及含量情況，所有標(biāo)本均隨機選擇高倍鏡視野5個，以IPP6.0圖像分析系統(tǒng)測量心肌細胞膠原纖維面積在整個組織面積中所占的百分比，取切片平均值即為心肌膠原容積分?jǐn)?shù)。④分組：將研究組患者按照術(shù)前超聲心動圖檢查結(jié)果分為A組（左室舒張末期前后徑≥50 mm）40例，B組（左室舒張末期前后徑＜50 mm）33例。

1.3 觀察指標(biāo) 對比研究組與對照組患者血漿visfatin、MMP-9水平，A組與B組血漿visfatin、MMP-9水平，心肌細胞直徑、心肌膠原容積分?jǐn)?shù)水平，分析風(fēng)濕性心臟瓣膜病血漿visfatin、MMP-9水平與心肌細胞直徑、心肌膠原容積分?jǐn)?shù)水平的相關(guān)性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 本研究數(shù)據(jù)均通過SPSS 20.0軟件予以檢測分析，計數(shù)資料通過（n，%）表示，進行χ2檢驗。計量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間均數(shù)比較采用t檢驗。風(fēng)濕性心臟瓣膜病血漿visfatin、MMP-9水平與心肌細胞直徑、心肌膠原容積分?jǐn)?shù)水平的關(guān)系予以Pearson相關(guān)性分析。P＜0.05表示有顯著性差異。

2 結(jié)果

2.1 研究組與對照組血漿visfatin、MMP-9水平對比 研究組血漿visfatin、MMP-9水平高于對照組水平（P均＜0.05）（表1）。

表1 研究組與對照組血漿visfatin、MMP-9水平對比（±s）

表1 研究組與對照組血漿visfatin、MMP-9水平對比（±s）

注：visfatin：內(nèi)酯素；MMP-9：基質(zhì)金屬蛋白酶-9

組別 例數(shù) v i s f a t i n M M P-9研究組 7 3 4 3.1 2±8.3 4 2 4.0 5±7.1 8對照組 5 0 2 4.6 8±9.0 1 1 7.3 4±9.4 0 t值 - 1 1.6 5 7 4.4 8 4 P值 - 0.0 0 0 0.0 0 0

2.2 A組與B組血漿visfatin、MMP-9水平對比 A組血漿visfatin、MMP-9水平高于B組水平（P均＜0.05）（表2）。

2.3 A組與B組心肌細胞直徑、心肌膠原容積分?jǐn)?shù)水平對比 A組心肌細胞直徑、心肌膠原容積分?jǐn)?shù)水平高于B組水平（P均＜0.05）（表3）。

2.4 風(fēng)濕性心臟瓣膜病血漿visfatin、MMP-9水平與心肌細胞直徑、心肌膠原容積分?jǐn)?shù)水平的相關(guān)性分析 經(jīng)Pearson相關(guān)性分析可得：風(fēng)濕性心臟瓣膜病血漿visfatin、MMP-9水平與心肌細胞直徑、心肌膠原容積分?jǐn)?shù)水平均呈正相關(guān)關(guān)系（P均＜0.05）（表4）。

表2 A組與B組血漿visfatin、MMP-9水平對比（±s）

表2 A組與B組血漿visfatin、MMP-9水平對比（±s）

注：visfatin：內(nèi)酯素；MMP-9：基質(zhì)金屬蛋白酶-9

組別 例數(shù) visfatin MMP-9 A組 40 46.11±6.37 26.80±7.22 B組 33 39.78±8.24 22.11±6.98 t值 - 7.701 4.804 P值 - 0.000 0.013

表3 A組與B組心肌細胞直徑、心肌膠原容積分?jǐn)?shù)水平對比（±s）

表3 A組與B組心肌細胞直徑、心肌膠原容積分?jǐn)?shù)水平對比（±s）

組別 例數(shù) 心肌細胞直徑（μm） 心肌膠原容積分?jǐn)?shù)（%）A組 4034.01±5.12 14.21±0.07 B組 3327.73±6.48 12.56±0.05 t值- 7.626 4.247 P值- 0.000 0.021

表4 風(fēng)濕性心臟瓣膜病血漿visfatin、MMP-9水平與心肌細胞直徑、心肌膠原容積分?jǐn)?shù)水平的相關(guān)性分析

3 討論

風(fēng)濕性心臟瓣膜病又稱為風(fēng)心病，主要是指由風(fēng)濕性炎癥導(dǎo)致的瓣膜損害，常見二尖瓣受累。心肌重構(gòu)主要是指心臟結(jié)構(gòu)的重整，包括心肌細胞生物學(xué)、形態(tài)學(xué)的改變以及心肌功能和結(jié)構(gòu)完整性的改變[6,7]。心肌重構(gòu)早期表現(xiàn)為適應(yīng)性、代償性的改變，包括心肌細胞肥大、心肌細胞外基質(zhì)重構(gòu)等，而隨著壓力超負荷以及缺血損傷等應(yīng)激作用的持續(xù)，會導(dǎo)致神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)被激活，從而促進部分細胞因子的產(chǎn)生、釋放，進一步激活細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)，最終導(dǎo)致心肌細胞凋亡或壞死，引發(fā)心臟功能失代償[8,9]。因此，對心肌重構(gòu)進行早期診斷和治療顯得尤為重要，是改善風(fēng)濕性心臟瓣膜病患者預(yù)后的重要途徑。

Visfatin是一種重要的脂肪因子，有研究報道顯示[10]，在有明顯癥狀的頸動脈粥樣斑塊患者血漿中，visfatin水平顯著增加，提示了visfatin可能參與了動脈粥樣硬化斑塊脫落過程。以往認為，心肌細胞不具有分裂以及再生的能力，因此一旦遭到破壞將會永久缺失，并被纖維化的瘢痕組織所替代[11]。然而，隨著近年來相關(guān)研究的逐漸深入，具有調(diào)節(jié)肌肉組織再生能力的MMPs開始受到廣泛關(guān)注。MMP-9是MMPs的重要成員，它是一種鋅依賴的金屬蛋白內(nèi)切酶，已有研究報道發(fā)現(xiàn)[12,13]，MMP-9主要參與細胞外基質(zhì)降解過程，在血管重構(gòu)以及血管內(nèi)皮損傷等病理過程發(fā)揮著重要作用[14]。本研究結(jié)果表明，研究組血漿visfatin、MMP-9水平相比對照組較高。這提示了風(fēng)濕性心臟瓣膜病患者血漿visfatin、MMP-9水平存在明顯高表達，兩者可能在該病的發(fā)生、發(fā)展過程中起著至關(guān)重要的作用。此外，A組血漿visfatin、MMP-9水平相比B組較高。這與徐璐等人的研究報道相符[15,16]，說明了隨著風(fēng)濕性心臟瓣膜病患者心肌重構(gòu)程度的逐漸升高，血漿visfatin、MMP-9表達水平隨之升高。分析原因，筆者認為visfatin可通過促進煙酰胺腺嘌呤二核苷酸的生物合成，從而增強了脫乙?；饔?，繼而增強了血管平滑肌的生存能力，有利于促進血管平滑肌成熟與血管的重構(gòu)。且visfatin作為一種前炎性因子，可通過協(xié)同血管緊張素Ⅱ促進心肌肥厚，從而導(dǎo)致心臟功能的改變。另有研究報道顯示[17]，MMP-9可通過促進心臟細胞外基質(zhì)的降解，從而導(dǎo)致心肌細胞間隙被其他不具有正常結(jié)構(gòu)的結(jié)締組織以及纖維組織填充，進一步促進了心肌重構(gòu)的發(fā)生。另外，A組心肌細胞直徑、心肌膠原容積分?jǐn)?shù)水平相比B組較高。究其原因，筆者認為可能隨著心肌重構(gòu)程度的不斷升高，風(fēng)濕性心臟瓣膜病患者心功能損傷越嚴(yán)重有關(guān)。本文進一步經(jīng)Pearson相關(guān)性分析可得：風(fēng)濕性心臟瓣膜病血漿visfatin、MMP-9水平與心肌細胞直徑、心肌膠原容積分?jǐn)?shù)水平均呈正相關(guān)關(guān)系。這提示了血漿visfatin、MMP-9水平與心肌重構(gòu)存在密切相關(guān)。臨床工作中可能通過聯(lián)合檢測風(fēng)濕性心臟瓣膜病患者血漿visfatin、MMP-9水平，從而明確其心肌重構(gòu)情況，進一步為臨床相關(guān)防治方案的制定提供指導(dǎo)作用。

綜上所述，風(fēng)濕性心臟瓣膜病患者血漿visfatin、MMP-9水平與心肌重構(gòu)關(guān)系密切，其中visfatin可能直接導(dǎo)致心肌細胞肥厚，進一步介導(dǎo)心肌重構(gòu)，而MMP-9可能是通過改變心肌膠原含量，從而參與心肌重構(gòu)的發(fā)生、發(fā)展過程。這為臨床風(fēng)濕性心臟瓣膜病患者心肌重構(gòu)的診斷、治療提供了新的靶點和思路，值得臨床重點關(guān)注。