干化學(xué)法與全自動(dòng)血球儀檢測(cè)血紅蛋白的結(jié)果比較分析

李丹

（生一（蘇州）生物科技有限公司 江蘇蘇州 215000）

1 前言

血紅蛋白偏低常與貧血或出血性疾病密切相關(guān)，血紅蛋白濃度不合理上升會(huì)產(chǎn)生血細(xì)胞增多癥。對(duì)兒童而言，不管是入園檢測(cè)還是入學(xué)檢測(cè)都是評(píng)估是否出現(xiàn)貧血的重要內(nèi)容。 常用的血紅蛋白檢測(cè)方式包括干化學(xué)法和全自動(dòng)血球儀檢測(cè)， 但兩種方式在數(shù)值評(píng)定上存在差異，嚴(yán)重制約后續(xù)診療[1]。 本文對(duì)干化學(xué)法與全自動(dòng)血球儀檢測(cè)血紅蛋白的結(jié)果進(jìn)行了比較分析。

2 資料與方法

2.1 一般資料

選取生一（蘇州）生物科技有限公司體檢中心2016 年6 月—2018 年6 月進(jìn)行體檢50 名兒童作為研究對(duì)象，根據(jù)不同檢測(cè)方式將研究對(duì)象分為觀察組和對(duì)照組，每組25 名。 對(duì)照組男性12 名，女性13 名，年齡6~12 歲，平均年齡（8.02+2.34）歲；觀察組男性14 名，女性11 名，平均年齡7~14歲，年齡（9.05+1.23）歲。 兩組兒童身體狀況良好，比較兩組兒童年齡、性別等基本資料差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

2.2 方法

對(duì)照組采用干化學(xué)法測(cè)量，取兒童末梢血10 μL，將其放置在試紙中央，待試紙條加樣區(qū)充滿(mǎn)血液后，其在反應(yīng)膜上擴(kuò)散迅速，紅細(xì)胞被溶解，將血紅蛋白充分釋放后轉(zhuǎn)化為高鐵血紅蛋白。 利用血紅蛋白分析儀在525 nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)反應(yīng)終點(diǎn)的顏色值和血紅蛋白濃度的反射系數(shù)進(jìn)行計(jì)算。

觀察組采用全自動(dòng)血球儀測(cè)量， 保證兒童手掌溫暖，護(hù)理人員輕柔地按摩其無(wú)名指或中指指尖。首檢部位應(yīng)用醫(yī)用酒精消毒，使用無(wú)菌紗布擦干，并充分消毒指尖。 將采血針裝好且扎針深度通過(guò)采血筆調(diào)整后，進(jìn)行采樣。 當(dāng)樣本量為15 μL 時(shí)，采血量為最佳。此時(shí)將血滴于檢測(cè)試條上的測(cè)試孔。將橡膠氣囊套在采血管上。 確認(rèn)將檢測(cè)試紙條從檢測(cè)紙包裝中拿出，且保證檢測(cè)試紙無(wú)破損，將最后一滴血滴注在檢測(cè)試紙上；加注樣本采用移液槍進(jìn)行。加注樣本時(shí)避免測(cè)試孔與槍頭接觸，使用密封好的試紙條，將檢測(cè)試紙條插入全自動(dòng)血球儀托架上，試紙孔朝上，當(dāng)正確插入檢測(cè)試紙條后， 使用全自動(dòng)血球儀進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)儀會(huì)以燈閃爍為標(biāo)示告知準(zhǔn)備樣本檢測(cè)，需在120 s 緩沖時(shí)間內(nèi)將血樣滴入。 使用全自動(dòng)血球儀時(shí)，在檢測(cè)試紙條插入后，將其放置在平穩(wěn)的工作臺(tái)上，禁止將血液直接黏附在血液分析儀上，儀器上必須一直插著檢測(cè)試紙條，測(cè)試孔禁止用手指接觸，血液不可過(guò)量滴加，檢測(cè)試紙完全蓋滿(mǎn)即可，不允許在檢測(cè)試紙上重復(fù)滴加血液，不可重復(fù)實(shí)驗(yàn)。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)與指標(biāo)

2.3.1 判斷標(biāo)準(zhǔn)

分析比較兩種檢查血紅蛋白濃度、 紅細(xì)胞指標(biāo)濃度。

2.3.2 干化學(xué)法性能指標(biāo)

（1）外觀。 檢測(cè)試紙條應(yīng)光潔無(wú)毛刺，正面的加樣區(qū)應(yīng)潔凈無(wú)污點(diǎn)。

（2）物理性狀。 試紙條寬度：（15.0±0.5）mm。

（3）準(zhǔn)確性。 血紅蛋白區(qū)間為40～100 g/L，絕對(duì)偏差不可超過(guò)10 g/L；血紅蛋白區(qū)間為101～200 g/L，相對(duì)偏差不可超過(guò)10%；線性為40～200 g/L，相關(guān)系數(shù)r 值不可低于0.98。

（4）重復(fù)性。 血紅蛋白區(qū)間為40～100 g/L，檢驗(yàn)結(jié)果的標(biāo)準(zhǔn)差（SD）不可超過(guò)8 g/L；血紅蛋白區(qū)間為101～200 g/L，檢測(cè)結(jié)果的變異系數(shù)（CV）不可超過(guò)8%。

（5）批間差。 3 批血紅蛋白檢測(cè)試紙條的批間差不可超過(guò)15%。

（6）穩(wěn)定性。 按說(shuō)明書(shū)的儲(chǔ)存條件儲(chǔ)存，原包裝存放的檢測(cè)試紙條有效期為12 個(gè)月；取到效期后1 個(gè)月內(nèi)的產(chǎn)品，檢測(cè)結(jié)果應(yīng)符合要求。

2.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS21.0 軟件統(tǒng)計(jì)所有數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，t 檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用百分率（%）表示，χ2檢驗(yàn)，P＜0.05 表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

全自動(dòng)血球分析儀法檢測(cè)血紅蛋白濃度、 紅細(xì)胞壓積結(jié)果明顯優(yōu)于干化學(xué)法測(cè)定結(jié)果，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。 詳見(jiàn)表1。

表1 兩種方式檢測(cè)血紅蛋白濃度、紅細(xì)胞壓積結(jié)果比較（±s）

表1 兩種方式檢測(cè)血紅蛋白濃度、紅細(xì)胞壓積結(jié)果比較（±s）

注：t 為t 檢驗(yàn)中成對(duì)樣本的樣本值；P 為χ2 檢驗(yàn)中假設(shè)為真時(shí)的概率。

組別樣本數(shù) 血紅蛋白濃度（g/L） 紅細(xì)胞壓積（%）全自動(dòng)血球分析儀干化學(xué)法25 25 t P 119.64+31.23 108.34+29.13 7.313＜0.05 38.23+8.32 30.23+3.21 9.032＜0.05

4 討論

本次實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示，全自動(dòng)血球分析儀法檢測(cè)血紅蛋白濃度、紅細(xì)胞壓積結(jié)果明顯優(yōu)于干化學(xué)法測(cè)定結(jié)果，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。分析其結(jié)果可能是：（1）干化學(xué)法采集的末梢血可能未在試紙條中央，導(dǎo)致檢查結(jié)果誤差；同時(shí)計(jì)算公式難以精準(zhǔn)測(cè)量，導(dǎo)致數(shù)值偏小[2]。 （2）兩種檢測(cè)方式存在差異，干化學(xué)法是通過(guò)公式計(jì)算得出，而全自動(dòng)血球分析儀是通過(guò)血紅蛋白分析儀的光學(xué)檢測(cè)頭可自動(dòng)檢測(cè)膜上反射光的強(qiáng)度與血紅蛋白濃度成反比得出。血紅蛋白分析儀會(huì)在30 s 內(nèi)計(jì)算并顯示總血紅蛋白的濃度并得出結(jié)果，因此，測(cè)量血紅蛋白準(zhǔn)確性更高。（3）血紅蛋白分析儀進(jìn)樣為單通道，不適合大樣本檢測(cè)，血液采集后應(yīng)立即檢測(cè)，久置標(biāo)本會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。（4）相關(guān)研究顯示，干化學(xué)法檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確度較全自動(dòng)血球分析儀低，可能是高血漿體滲透壓引發(fā)的，高水平的血漿蛋白和血脂可能導(dǎo)致血紅蛋白指標(biāo)異常增高，而多項(xiàng)疾病影響的高白細(xì)胞血癥可能造成檢測(cè)結(jié)果偏差。

5 結(jié)語(yǔ)

綜上所述，血紅蛋白采用全自動(dòng)血球儀檢查準(zhǔn)確度較高，判斷血紅蛋白等指標(biāo)，應(yīng)以全自動(dòng)血球儀為準(zhǔn)，干化學(xué)法為輔。