茶葉中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留測(cè)定方法的改進(jìn)

□ 孫紅英 臨沭縣檢驗(yàn)檢測(cè)中心

當(dāng)下，殘留有機(jī)磷農(nóng)藥已成為亟待解決的問題，為解決茶葉中農(nóng)藥殘留問題，相關(guān)研究人員需要研制出低毒高效的農(nóng)藥試劑，同時(shí)檢測(cè)部門還應(yīng)進(jìn)一步提升有機(jī)磷農(nóng)藥殘留檢測(cè)水平，防止被污染的茶葉進(jìn)入市場(chǎng)，損害人們身體健康。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

本實(shí)驗(yàn)所使用的試劑和材料：有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液（1 000 mg/L）；乙二胺-N-丙基硅烷、石墨化炭黑、十八烷基硅烷鍵合硅膠；乙腈、丙酮、乙酸、無水乙酸鈉、無水MgSO4（均為分析純）；茶鮮葉樣品（取自當(dāng)?shù)啬巢鑸@）。

1.2 儀器與設(shè)備

本次進(jìn)行測(cè)定時(shí)所使用的儀器與設(shè)備主要有：氣相色譜儀、超聲波清洗器、離心機(jī)、渦旋振蕩器與氮吹儀。其中，氣相色譜儀選用配有FPD檢測(cè)器的7890B型氣相色譜儀、高速離心機(jī)選用TG16-WS型、渦旋振蕩器選用VM-10 型、氮吹儀選用HSC-24B型氮吹儀、超聲波清洗器型號(hào)選用KQ-500DE型。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

首先分別取7種1.0 mL有機(jī)磷農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品（1 000 mg/L）置于20 mL容量瓶?jī)?nèi)，用丙酮制備成濃度為50 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液。取0.5 mL敵敵畏標(biāo)準(zhǔn)溶液、2.0 mL樂果和2.0 mL三唑磷標(biāo)準(zhǔn)溶液、剩余4種有機(jī)磷標(biāo)準(zhǔn)溶液各1.0 mL，置于10 mL容量瓶中，之后使用丙酮定容，將制備完成的混合標(biāo)準(zhǔn)液置于冰箱內(nèi)（冰箱溫度應(yīng)保持在4 ℃）。稱取5.0 g攪碎的待測(cè)定茶葉樣品置于離心管內(nèi)，之后添加10 mL乙酸溶液，使用超聲提取（15 min），添加1 g MgSO 溶液，在900r/min條件下進(jìn)行離心（4 min），完成后取4 mL上層提取液，倒入裝有0.1 g C18、0.15 g PSA、0.12 g GCB和0.3 g MgSO4的離心管中，并在相同條件下持續(xù)離心5 min，完成后再取上層清液2 mL倒入試管，在50 ℃水浴條件下用氮吹儀吹干，丙酮定容至1 mL后混合，過0.22 μm有機(jī)系濾膜上機(jī)檢測(cè)。

2 結(jié)果與分析

2.1 提取條件的選擇

首先在待測(cè)定茶葉樣品中添加100 μL7種混合標(biāo)準(zhǔn)試劑農(nóng)藥溶液，由于本文中測(cè)定的7種有機(jī)磷農(nóng)藥具有弱酸性，因此在進(jìn)行測(cè)定實(shí)驗(yàn)時(shí)比較了乙腈、乙酸-乙腈溶液對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響。通過實(shí)驗(yàn)得出：乙腈和乙酸-乙腈提取溶液對(duì)上述7種機(jī)磷農(nóng)藥提取效率基本一致，都能滿足分析方法要求，但相比乙腈提取液，乙酸-乙腈提取溶液的雜質(zhì)含量較少，故最終選用乙酸-乙腈溶液作為提取溶液[1]。

2.2 提取方式的選擇

振蕩提取方式操作簡(jiǎn)單，但需要很長(zhǎng)時(shí)間才能達(dá)到更好的回收率，且效率低下。勻漿提取方式速度較快且效果好，一般只需幾分鐘即可完成，但在提取大量樣品時(shí)要花費(fèi)大量時(shí)間，且在連續(xù)提取過程中，如果高速均質(zhì)器刀頭清潔不達(dá)標(biāo)則極易造成樣品之間出現(xiàn)交叉污染，進(jìn)而造成測(cè)定結(jié)果精確度大打折扣。相比于振蕩、勻漿兩種提取方式，超聲波提取方式更加簡(jiǎn)單、可操作性更強(qiáng)、效率與精確度更高，且整個(gè)提取過程不用安排專門的操作人員進(jìn)行看護(hù)，在進(jìn)行大批量樣品處理時(shí)優(yōu)勢(shì)更加顯著[2]。因此，本實(shí)驗(yàn)采用超聲波提取方法。但在實(shí)際應(yīng)用中超聲波會(huì)產(chǎn)生熱量，不利于保持分析的靈敏度和準(zhǔn)確度，故在實(shí)驗(yàn)過程中分別分析了5～20 min超聲時(shí)間下有機(jī)磷農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)液提取的效果，為確保實(shí)驗(yàn)效果進(jìn)行平行試驗(yàn)3次。圖1為不同超聲時(shí)間條件下對(duì)茶葉中7種有機(jī)磷農(nóng)藥的回收率影響。從圖1中可以看出，當(dāng)超聲時(shí)間為10～20 min時(shí)，回收率達(dá)到70%以上，且此時(shí)平行性良好，故最終確定超聲時(shí)間為15 min。

2.3 凈化條件的選擇

該實(shí)驗(yàn)把DSPE方法作為凈化雜質(zhì)的手段，因?yàn)椴枞~含有甾醇、脂肪酸以及色素等雜質(zhì)，因此利用PSA將提取物中的糖、脂肪酸以及色素等物質(zhì)去除，利用C18將提取物中的甾醇去除，利用GCB將提取物中的色素物質(zhì)去除。取4.0 mL帶測(cè)定茶葉提取物，加入100 μL 7種有機(jī)磷農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，混合均勻，渦旋凈化，通過對(duì)各種凈化劑去除提取樣品雜質(zhì)以及目標(biāo)農(nóng)藥的吸附狀況，最終確定選擇150 mg C18、150 mg PSA和 120 mg GCB進(jìn)行固相萃取凈化。

2.4 基質(zhì)效應(yīng)

在利用GC方法對(duì)樣品中的農(nóng)藥殘留進(jìn)行分析時(shí)，非常容易受到基質(zhì)效應(yīng)的影響，故本文在實(shí)驗(yàn)過程中對(duì)比分析了相同濃度的丙酮混合標(biāo)準(zhǔn)溶液和基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液，有機(jī)磷農(nóng)藥基質(zhì)的峰面積明顯高于丙酮混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的峰面積，因此，定量時(shí)采用空白樣品的化液稀釋標(biāo)樣。

圖1 不同超聲時(shí)間對(duì)茶葉中有機(jī)磷農(nóng)藥回收率的影響

2.5 線性范圍和檢出限

在標(biāo)準(zhǔn)色譜條件下測(cè)定7種有機(jī)磷農(nóng)藥的線性范圍、回歸方程等，結(jié)果見表2。從表2中可以得出，7種有機(jī)磷農(nóng)藥在各自濃度范圍內(nèi)線性良好。

2.6 方法的準(zhǔn)確度和精密度

稱取茶葉樣品5.0 g，分別加入50、100、500 μL 7種有機(jī)磷農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)原液，攪拌均勻后靜置1 h，作5個(gè)水平樣，以檢查結(jié)果的準(zhǔn)確性。結(jié)果顯示，7種有機(jī)磷農(nóng)藥的平均回收率為77.7%～98.2%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.4%～8.7%，滿足標(biāo)準(zhǔn)要求。

表2 7種有機(jī)磷農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)曲線、線性范圍、相關(guān)系數(shù)、檢出限和定量限

2.7 實(shí)際樣品分析

通過文章中所建立的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留測(cè)定方法，作者檢測(cè)了從當(dāng)?shù)夭鑸@隨機(jī)采集的16份茶鮮葉中有機(jī)磷農(nóng)藥的殘留量。結(jié)果表明，16份樣品中均未檢出有機(jī)磷農(nóng)藥殘留。

3 結(jié)語

茶葉的安全問題受到越來越多的關(guān)注，農(nóng)藥殘留問題是茶葉安全的重要內(nèi)容，除需要加強(qiáng)農(nóng)藥使用管理、推廣使用高效低毒農(nóng)藥外，還要制定符合我國國情的茶農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)。此外，還應(yīng)結(jié)合先進(jìn)、高效、便捷、自動(dòng)化的前處理技術(shù)，研制出更多的農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)和快速篩選檢測(cè)技術(shù)，使中國的茶葉農(nóng)藥殘留監(jiān)測(cè)能力達(dá)到國際先進(jìn)水平。