水中尸體腐敗及死后淹沒(méi)時(shí)間推斷研究進(jìn)展

（中南大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院法醫(yī)學(xué)系，湖南 長(zhǎng)沙 410013）

人類(lèi)尸體可在各種水環(huán)境中被發(fā)現(xiàn)，如江河、溪流、湖泊、沼澤、海洋、池塘及各種大型儲(chǔ)水容器等，常為交通、生產(chǎn)、工作、劃船、航海、游泳、水邊嬉戲時(shí)發(fā)生意外，他殺后拋尸，自殺，以及海嘯、洪水等自然災(zāi)害導(dǎo)致的死亡[1-3]，其中溺死最為常見(jiàn)。2004年全球溺死人數(shù)達(dá)38.8萬(wàn)[4]，2012年達(dá)37.2萬(wàn)，溺死已成為意外死亡的第三大死因[5]。水中尸體的腐敗不同于陸地尸體，目前針對(duì)水中尸體開(kāi)展的法醫(yī)學(xué)研究仍較少，但存在的問(wèn)題非常多。死亡時(shí)間（postmortem interval，PMI），即死者從死亡到被發(fā)現(xiàn)所經(jīng)歷的時(shí)間，一直是法醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)。對(duì)于水中尸體，死后淹沒(méi)時(shí)間（postmortem submersion interval，PMSI）即死者從入水到被發(fā)現(xiàn)所經(jīng)歷的時(shí)間，與其PMI基本一致（他殺后拋尸入水的案件除外），可為明確死者身份、推斷落水地點(diǎn)、劃定嫌疑人范圍提供偵查方向。本文綜述了目前水中尸體腐敗及PMSI推斷的國(guó)內(nèi)外研究進(jìn)展，為水中尸體的研究及實(shí)踐工作提供參考。

1 水中尸體腐敗分期

目前水中尸體腐敗分期尚未統(tǒng)一，根據(jù)尸體是否能夠上浮、尸體上是否有陸生嗜尸性昆蟲(chóng)活動(dòng)，存在兩大分類(lèi)方法。1972年，PAYNE等[6]以豬為模型，研究了夏季水箱中尸體腐敗過(guò)程，結(jié)合尸體在水中的位置、腐敗程度及陸生嗜尸性昆蟲(chóng)的活動(dòng)，首次將水中尸體腐敗過(guò)程分為6個(gè)階段：淹沒(méi)新鮮期（submerged fresh，SF）、漂浮早期（early floating，EF）、漂浮腐敗期（floating decay，F(xiàn)D）、腫脹變質(zhì)期（bloated deterioration，BD）、漂浮遺骸期（floating remains，F(xiàn)R）和沉沒(méi)遺骸期（sunken remains，SR）。由于陸生嗜尸性昆蟲(chóng)不能到達(dá)始終淹沒(méi)于水下的尸體，HAEFNER等[7]將始終淹沒(méi)在水下的尸體腐敗過(guò)程分為淹沒(méi)新鮮期（submerged fresh，SF）、漂浮早期（early floating，EF）、漂浮腐敗早期（early floating decay，EFD）、漂浮腐敗晚期（advanced floating decay，AFD）及沉沒(méi)遺骸期（sunken remains，SR）。水中尸體腐敗各階段尸體描述見(jiàn)表1～2。既往針對(duì)水中可上浮尸體的研究，有沿用PAYNE分期方法的[8-10]，也有刪減至5個(gè)階段的[11-13]，針對(duì)始終淹沒(méi)在水下的尸體研究均沿用HAEFNER分期方法[14-16]。

表1 水中可上浮尸體腐敗分期及描述

表2 始終淹沒(méi)水下尸體腐敗分期及描述

2 水中尸體腐敗的影響因素

水中尸體腐敗較陸地更為復(fù)雜，受到自身及其所處水環(huán)境的影響，可分為非生物因素和生物因素。非生物因素包括：水體的物理因素（水溫、光照），化學(xué)因素（溶解氧、酸堿度、鹽度、溶解有機(jī)質(zhì)），水文因素（水流方式、流速、水深），以及死者自身、穿著、是否負(fù)有重物等其他因素。生物因素包括昆蟲(chóng)、食肉動(dòng)物等。

2.1 非生物因素

物理因素中，水溫是水中尸體腐敗的重要影響因素，適度的水溫增高可促進(jìn)微生物活動(dòng)，加快腐敗速度，水溫降低，腐敗速度減慢[17]。在各類(lèi)水環(huán)境中，均發(fā)現(xiàn)冬季尸體腐敗比夏秋季慢[6，9，15-16]。溫度增高，尸體胃腸道內(nèi)細(xì)菌活動(dòng)增強(qiáng)，腐敗氣體產(chǎn)生加快，尸體上浮更早。光照可通過(guò)水溫變化而影響尸體腐敗。藻類(lèi)需要光進(jìn)行光合作用，光照會(huì)影響水中尸體藻類(lèi)定植。

化學(xué)因素中，溶解氧含量與水溫呈負(fù)相關(guān)，亦與水體是否污染、水流方式有關(guān)。對(duì)于水生昆蟲(chóng)，除少數(shù)（部分搖蚊）可適應(yīng)較低的溶解氧含量和污染水源[18]，絕大多數(shù)由于呼吸作用需較高含量的溶解氧。水中真菌隨溶解氧含量降低，呼吸作用降低，生長(zhǎng)緩慢[19]。低pH值會(huì)降低異養(yǎng)生物pH值敏感的酶活性，影響微生物群落構(gòu)成，減緩有機(jī)物腐敗速度[20]。藻類(lèi)有其適宜生長(zhǎng)的鹽度范圍，而硅藻可適應(yīng)各種惡劣水環(huán)境，在淡水、咸水、海水中廣泛分布[21]。蜉蝣僅存活于淡水中，石蛾等水生昆蟲(chóng)可存活在淡水、咸水中[18]。水生昆蟲(chóng)由于取食方式不同，分為碎食者（Shredders）、收集者（Collectors）、鏟食者（Scrappers）和捕食者（Predators）。碎食者取食水中的粗糙有機(jī)顆粒，如落葉、樹(shù)木、河岸植物的根莖葉片；收集者取食水中的細(xì)膩有機(jī)顆粒[18]。水體的溶解氧、pH值、鹽度、顆粒態(tài)有機(jī)物可能導(dǎo)致尸體上定植的水生昆蟲(chóng)、藻類(lèi)、微生物的差異。

水文因素中，在不同水流方式的水體中，尸體的移動(dòng)距離不同。在江河、溪流、海洋等流水系統(tǒng)中，尸體可移動(dòng)至距離入水點(diǎn)很遠(yuǎn)的位置[22-23]。DILEN[24]將尸體在流水系統(tǒng)中的移動(dòng)分為4個(gè)階段：下沉至水底、在水底移動(dòng)、上升至水面以及水面上漂移。海洋中的尸體移動(dòng)與流水系統(tǒng)相似[25]，而靜水系統(tǒng)中尸體主要為垂直移動(dòng)，無(wú)遠(yuǎn)距離的水平移位。水深不同，其水流速度亦不同：水表層流速最快，中層次之，底層流速明顯減慢[22]。降雨事件也可加快水流速度。流速較大時(shí)，湍流的剪切力可沖刷并剝離尸體軟組織，促進(jìn)尸體分解[7-8，26]，同時(shí)可剝離尸體表面定植的藻類(lèi)[7]。水愈深，日光愈難以穿透，水溫愈低，尸體腐敗速度愈慢。同時(shí)，水愈深，尸體承受的水壓愈大，可不上浮。

此外，死者自身脂肪與肌肉比例、骨質(zhì)密度與穿著導(dǎo)致的尸體比重差異均可影響尸體上浮的時(shí)間，比重較低者上浮較早，甚至自落水后一直漂浮在水面上。尸體如果負(fù)有重物，則可能整個(gè)腐敗過(guò)程始終發(fā)生在水下。死者的衣物可緩沖流水系統(tǒng)中尸體移動(dòng)與河床產(chǎn)生的摩擦，也可避免尸體被部分食肉非脊椎動(dòng)物取食。同時(shí)衣物可作為藻類(lèi)、微生物附著的非有機(jī)物基質(zhì)，為昆蟲(chóng)幼蟲(chóng)提供庇護(hù)所。一些小概率事件亦可能干擾水中尸體的腐敗過(guò)程，如船只螺旋槳損傷水中尸體[27]。

2.2 生物因素

昆蟲(chóng)因素。水中尸體上浮至水面后，常見(jiàn)的陸生嗜尸性昆蟲(chóng)可在暴露于水面上的尸體部位產(chǎn)卵[8，28]，幼蟲(chóng)和成蟲(chóng)取食尸體，消耗尸體軟組織，同時(shí)造成尸體上創(chuàng)口，細(xì)菌繁殖的面積增大，促進(jìn)尸體腐敗。尸體上創(chuàng)口可使尸體內(nèi)腐敗氣體泄漏，尸體漂浮時(shí)間縮短，下沉更早。

食肉動(dòng)物因素。除陸生嗜尸性昆蟲(chóng)可取食尸體水面上部分外，水中食肉動(dòng)物（脊椎動(dòng)物、非昆蟲(chóng)的非脊椎動(dòng)物）可取食尸體浸泡在水中的部位，造成尸體上創(chuàng)口，加快尸體分解速度，甚至可使尸體跳過(guò)部分腐敗階段[12]。此現(xiàn)象在海洋及咸水環(huán)境中更為顯著，海洋中常見(jiàn)的取食尸體的食肉動(dòng)物為海星、海螺[13]，咸水中魚(yú)、藍(lán)蟹、鱷龜以及水域附近的鷺也會(huì)取食水中尸體[15]。淡水中蝦蟹、水貂可取食水中尸體[12，29]。

3 水中尸體PMSI推斷

水中尸體的PMSI推斷具有重要意義。然而，由于水中尸體通常在處于漂浮階段時(shí)被發(fā)現(xiàn)[1]，部分尸體高度腐敗，且水中尸體腐敗受多種因素影響，PMSI推斷更為困難、復(fù)雜。國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)一些潛在的PMSI推斷指標(biāo)進(jìn)行了初步研究。

3.1 根據(jù)腐敗分期

已知水中尸體到達(dá)腐敗各階段所需時(shí)間的情況下，根據(jù)腐敗分期可倒推尸體PMSI。由于溫度為尸體腐敗的主要影響因素，累積度日（accumulated degree day，ADD）被引入水中尸體PMSI相關(guān)的研究。ADD是入水后（n天）日平均水溫（Ti）的總和，即[30]。根據(jù)腐敗各階段所需ADD來(lái)推斷PMSI，可較大程度減少溫度對(duì)結(jié)果的干擾（表3）。理論上，根據(jù)水中尸體形態(tài)估計(jì)腐敗分期，選取已獲得的相似地理環(huán)境、水體、季節(jié)的ADD資料作為參考，推斷ADD范圍，結(jié)合近期該水域日平均水溫可估計(jì)尸體入水時(shí)間范圍。然而目前腐敗分期資料均根據(jù)水中豬尸體腐敗實(shí)驗(yàn)獲得，豬尸體與人尸體體型等多方面存在差異，同時(shí)，尸體分期易受主觀因素和各種客觀因素影響，限制了其在實(shí)踐中的應(yīng)用。

表3 水中尸體腐敗各階段所需ADD （℃）

3.2 根據(jù)尸體現(xiàn)象

水中尸體有一些特有的尸體現(xiàn)象，如雞皮樣皮膚、漂婦樣變、尸蠟等，然而水中尸體亦有與陸地腐敗相似的尸體現(xiàn)象，這些尸體現(xiàn)象出現(xiàn)的時(shí)間點(diǎn)與進(jìn)展速度不同。周?chē)?guó)平[31]將150具溺死人類(lèi)尸體置于原現(xiàn)場(chǎng)或相同環(huán)境溫度的水中，觀測(cè)了不同溫度梯度下尸體的形態(tài)變化，如角膜混濁、尸僵緩解、尸綠、手腳皮膚套樣脫落、尸蠟等，并記錄這些尸體現(xiàn)象出現(xiàn)所需的時(shí)間，為依據(jù)尸體形態(tài)推斷PMSI提供了時(shí)刻表。BACCINO等[32]證實(shí)空氣及水環(huán)境中豬頭部（已證實(shí)豬頭部尸冷過(guò)程與整豬相似）溫度降低曲線均為指數(shù)曲線，且相同水溫和氣溫條件下，水中尸體較空氣中尸體冷卻快，溫度越低（＜20℃）該規(guī)律越顯著。該研究發(fā)現(xiàn)了靜水環(huán)境中尸冷與PMSI的指數(shù)關(guān)系，證明尸冷有推斷早期PMSI（約8h內(nèi)）的潛能。相同季節(jié)，湖泊中尸體冷卻至水溫需8 h，溪流中僅需3 h[8]。流水系統(tǒng)中，水的流動(dòng)可使尸冷加快，而流水環(huán)境中尸冷與PMSI的關(guān)系尚需進(jìn)一步系統(tǒng)研究。

近年來(lái)，結(jié)合水中尸體的尸體現(xiàn)象與ADD的PMSI推斷方法更加可靠。HEATON等[1]回溯河流內(nèi)發(fā)現(xiàn)的共187具人類(lèi)尸體資料，根據(jù)尸體形態(tài)，將頭部、軀干、四肢的腐敗程度分級(jí)。依據(jù)量表（表4）計(jì)算各部位水中腐敗分值，求和得到總體水中腐敗分值（total aquatic decomposition score，TADS）。排除ADD小于10℃的案例，TADS與ADD的回歸方程為T(mén)ADS=-3.706+7.778 log10ADD（R2=0.77）。de DONNO等[33]回溯海水中發(fā)現(xiàn)的68具人類(lèi)尸體資料，再次驗(yàn)證了該方程（R2=0.88），對(duì)于浸泡較久的尸體（PMSI＞30d），該方程準(zhǔn)確性有所下降（尸蠟的形成減緩了水中尸體腐?。`差約為12%～18%，但仍在可接受范圍內(nèi)。HUMPHREYS等[34]用相同評(píng)分方法檢測(cè)了水泥儲(chǔ)水池淡水中豬尸體TADS與ADD的關(guān)聯(lián)性（TADS=-13.746+4.8518ADD，R2=0.950 5）。van DAALEN等[35]回溯海水中發(fā)現(xiàn)的38具人類(lèi)尸體資料，將各部位水中腐敗分值簡(jiǎn)化至6個(gè)分值，證實(shí)TADS與PMSI具有顯著正相關(guān)（R2=0.82）。以上研究均證實(shí)可利用TADS推斷PMSI，使用該方法時(shí)需考慮尸蠟形成的干擾作用，對(duì)于水中腐敗較久、有尸蠟的尸體，建議酌情延長(zhǎng)PMSI預(yù)測(cè)值。

表4 尸體水中腐敗分值對(duì)照表

3.3 根據(jù)昆蟲(chóng)發(fā)育

嗜尸性昆蟲(chóng)泛指尸體上常發(fā)現(xiàn)的昆蟲(chóng)，在陸地環(huán)境中已被廣泛研究。陸生嗜尸性昆蟲(chóng)可分為尸食性（necrophagous）昆蟲(chóng)，雜食性（omnivorous）昆蟲(chóng)，尸食性昆蟲(chóng)的寄生蟲(chóng)和捕食者（parasitoids and predators），以及偶然出現(xiàn)的（adventitious）昆蟲(chóng)，基于尸食性蠅類(lèi)幼蟲(chóng)的生長(zhǎng)發(fā)育周期和嗜尸性昆蟲(chóng)的演替規(guī)律可以推斷陸地上尸體PMI[36]。在某些案件中，嫌疑人將尸體負(fù)重沉入水中，尸體不能浮出水面，陸生嗜尸性昆蟲(chóng)無(wú)法到達(dá)尸體。水中尸體浮出水面后，陸生嗜尸性昆蟲(chóng)可在尸體露出水面部分活動(dòng)[8-10，28]，如麗蠅（Diptera：Calliphoridae）、麻蠅（Diptera：Sarcophagidae）、家蠅（Diptera：Muscidae）、葬甲（Coleoptera：Silphidae）、閻甲（Coleoptera：Staphylinidae），這些陸生嗜尸性昆蟲(chóng)可作為水中尸體上浮的標(biāo)志[8]。水流的沖擊及天氣情況的干擾影響陸生嗜尸性昆蟲(chóng)成蟲(chóng)定殖，同時(shí)也干擾其蠅類(lèi)幼蟲(chóng)發(fā)育，絕大多數(shù)幼蟲(chóng)在化蛹前死亡，95%現(xiàn)場(chǎng)采集的幼蟲(chóng)在實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)過(guò)程中死亡[12]，絕大多數(shù)活蛹浸泡在水中3～4d后死亡[37-38]。陸地尸體上的昆蟲(chóng)證據(jù)可保存數(shù)月，而水中尸體上的蠅類(lèi)幼蟲(chóng)在死亡后易被水流沖走，在實(shí)際檢案中較難收集到完整的昆蟲(chóng)學(xué)數(shù)據(jù)。

法醫(yī)昆蟲(chóng)學(xué)家普遍認(rèn)為不存在真正意義上的尸食性水生昆蟲(chóng)，單純依靠水生昆蟲(chóng)推斷PMSI尚不成熟。絕大多數(shù)水生昆蟲(chóng)以藻類(lèi)、腐殖質(zhì)、微生物、有機(jī)顆粒為食，少部分水生昆蟲(chóng)為食肉昆蟲(chóng)，可取食尸體或其他昆蟲(chóng)[39]。相較取食尸體并在尸體上產(chǎn)卵、生長(zhǎng)發(fā)育的陸生尸食性昆蟲(chóng)（如麗蠅、麻蠅），水環(huán)境中沒(méi)有專(zhuān)性尸食性昆蟲(chóng)，水生昆蟲(chóng)主要將尸體作為庇護(hù)所或取食尸體上生長(zhǎng)的藻類(lèi)、生物膜，即使水生昆蟲(chóng)取食尸體也是偶然事件[40]。搖蚊（Diptera：Chironomidae）[8，41-44]、蜉蝣（Ephemeroptera）[41，43]幼蟲(chóng)為水中尸體上的常見(jiàn)昆蟲(chóng)，取食尸體表面上的藻類(lèi)、微生物和細(xì)有機(jī)顆粒物。石蛾（Trichoptera）取食植物葉片和根莖，可將尸體作為基底，用絲構(gòu)建“房屋”，幼蟲(chóng)發(fā)育過(guò)程中蛻去的外骨骼可黏附在該結(jié)構(gòu)上，HASKELL等[40]猜想這個(gè)結(jié)構(gòu)可能為推斷PMSI提供線索。WALLACE等[45]在溪流肢解尸體案例中發(fā)現(xiàn)了沼石蛾P(guān)ycnopsyche guttifer和 Pycnopsyche lepida（Trichoptera：Limnephilidae）幼蟲(chóng)及其管狀結(jié)構(gòu)“房屋”，沼石蛾幼蟲(chóng)已經(jīng)進(jìn)入休眠期的初始階段，依據(jù)沼石蛾的生長(zhǎng)發(fā)育規(guī)律，推斷拋尸入水時(shí)間約為四月底到五月底。

腐敗各階段水生昆蟲(chóng)在尸體上均有出現(xiàn)，但未發(fā)現(xiàn)某個(gè)腐敗階段特有的水生昆蟲(chóng)物種及明顯的演替規(guī)律，且目前水生昆蟲(chóng)發(fā)育周期與演替研究數(shù)據(jù)較少。KEIPER等[42]采集了溪流中大鼠尸體上的水生昆蟲(chóng)，搖蚊幼蟲(chóng)數(shù)量隨PMSI呈先增加后減少的趨勢(shì)，約于浸泡20 d時(shí)達(dá)到峰值，尸體上搖蚊Orthocladius幼蟲(chóng)的出現(xiàn)表明PMSI超過(guò)13 d。HOBISCHAK等[12]鑒定了池塘和溪流中豬尸體上的水生昆蟲(chóng)，池塘中沼石蛾、黽蝽（Hemiptera：Gerridae）幼蟲(chóng)和泥甲（Coleoptera：Dryopidae）成蟲(chóng)與尸體顯著相關(guān)，溪流中搖蚊幼蟲(chóng)與尸體顯著相關(guān)。BARRIOS等[8]記錄了淡水湖泊和溪流中豬尸體上的昆蟲(chóng)演替，湖泊中豬尸體上觀察到較豐富的搖蚊、蜻科（Odonata：Libellulidae）、蜓科（Odonata：Aeshnidae）幼蟲(chóng)，劃蝽（Hemiptera：Corixidae）、仰泳蝽（Hemiptera：Notonectidae）成蟲(chóng)與水龜蟲(chóng)（Coleoptera：Hydrophilidae）成蟲(chóng)和幼蟲(chóng)，溪流中豬尸體上觀察到較豐富的搖蚊、蚋科（Diptera：Simuliidae）幼蟲(chóng)與水龜蟲(chóng)成蟲(chóng)。

3.4 根據(jù)生物膜

尸體或其他基質(zhì)淹沒(méi)在水中后，體表可逐漸形成生物膜（biofilm）。生物膜是指附著于基質(zhì)表面由胞外聚合物（extracellular polymeric substance，EPS）包裹的有三維結(jié)構(gòu)的微生物群體，包括細(xì)菌、真菌、藻類(lèi)和原生動(dòng)物[46]。生物膜中EPS能協(xié)助微生物抵抗環(huán)境變化[47-48]，獲取以及儲(chǔ)存營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[49-51]，產(chǎn)生酶類(lèi)分解有機(jī)質(zhì)[52-53]。生物膜附著的基質(zhì)類(lèi)型影響生物膜的群落構(gòu)成及能量代謝，如巖石上生物膜中藻類(lèi)為主要成分，營(yíng)養(yǎng)代謝多為自養(yǎng)，而腐敗植物上生物膜有大量真菌群落，營(yíng)養(yǎng)代謝多為異養(yǎng)[54-55]。生物膜形成過(guò)程中，微生物群落存在演替規(guī)律，生物膜結(jié)構(gòu)也由簡(jiǎn)單逐漸變復(fù)雜。初始時(shí)水中的特殊細(xì)菌和尸體皮膚固有的細(xì)菌構(gòu)成生物膜的底層，隨著浸泡時(shí)間的延長(zhǎng)，細(xì)絲狀藻類(lèi)附著在生物膜上[50]。在生物膜成熟時(shí)，大型藻類(lèi)和真菌參與其構(gòu)成。尸體腹腔破潰后，尸體內(nèi)部的細(xì)菌也參與構(gòu)成生物膜。生物膜群落構(gòu)成及多樣性、結(jié)構(gòu)復(fù)雜性與浸泡時(shí)間存在關(guān)聯(lián)，尸體上生物膜有推斷PMSI的潛能，但地理位置、季節(jié)、光照等因素會(huì)影響生物膜群落構(gòu)成，將其應(yīng)用于實(shí)踐時(shí)需以本地水域?yàn)楸尘伴_(kāi)展多季節(jié)研究。

細(xì)菌是水中尸體上最早的定植者，在生物膜形成整個(gè)過(guò)程中始終存在。DICKSON等[15]首次觀測(cè)了海洋中豬頭部腐敗過(guò)程中的細(xì)菌演替規(guī)律，證實(shí)腐敗晚期的細(xì)菌與初始時(shí)在很大程度上不同，秋季和冬季豬尸體細(xì)菌群落構(gòu)成不同。在秋季實(shí)驗(yàn)中，希瓦氏菌屬、氣單孢菌屬、肉桿菌屬僅在第7天出現(xiàn)，擬桿菌目的新屬Genus 8從第5天開(kāi)始出現(xiàn)，海單胞菌屬和擬桿菌目的新屬Genus 2、Genus 4從第10天開(kāi)始出現(xiàn)，研究證實(shí)某些僅在特定時(shí)間出現(xiàn)和存在的菌屬可用于特定PMSI推斷。BENBOW等[16]首次使用Roche 454 GS FLX高通量測(cè)序技術(shù)，證實(shí)了淡水溪流中豬尸體皮膚上的生物膜細(xì)菌群落隨浸泡時(shí)間有顯著變化（P＜0.05），夏冬兩季的生物膜細(xì)菌群落有差異（P=0.006），然而兩季的豬尸體上的生物膜細(xì)菌群落演替有相似規(guī)律。在門(mén)水平，均發(fā)現(xiàn)變形菌門(mén)相對(duì)豐度逐漸降低，厚壁菌門(mén)相對(duì)豐度逐漸增高。在屬水平，細(xì)菌群落構(gòu)成更為復(fù)雜：夏季優(yōu)勢(shì)菌屬由初始時(shí)的假單胞菌屬、嗜冷桿菌屬、愛(ài)文菌屬，第7天變?yōu)榭死撞鷮?、嗜冷桿菌屬、檸檬酸桿菌屬，第14天變?yōu)閯?dòng)膠菌屬、梭菌屬、脫氯單胞菌屬、Desulfosporomusa屬，第21天變?yōu)樗缶鷮?、腸球菌屬、乳桿菌屬；冬季優(yōu)勢(shì)菌屬由初始時(shí)的嗜冷桿菌屬、假單胞菌屬、腸球菌屬，第14天變?yōu)槿闂U菌屬，第28天變?yōu)镻roteocatella屬、梭菌屬、韋榮球菌屬，第42天變?yōu)轫f榮球菌屬、梭菌屬。在夏季，豬尸體水中腐敗速度更快，豬尸體上的生物膜細(xì)菌群落演替速度也更快。LANG等[56]使用自動(dòng)核糖體間隔基因分析（automated ribosomal intergenic spacer analysis，ARISA）技術(shù)對(duì)比夏季兩條淡水河流中豬尸體與瓷磚上生物膜細(xì)菌群落，再次證實(shí)生物膜附著的基質(zhì)類(lèi)型是影響群落構(gòu)成的主要因素，尸體與瓷磚上生物膜的細(xì)菌群落顯著不同（P＜0.000 1）；地理位置不同的兩條溪流水質(zhì)也不同，可影響生物膜細(xì)菌群落的構(gòu)成（P＜0.0001）。尸體與瓷磚上生物膜的細(xì)菌群落均顯示出與PMSI相關(guān)的演替規(guī)律，0～3 d、7～14 d、17～24 d的細(xì)菌群落聚為3個(gè)獨(dú)立的簇，考慮第3～7天與第14～17天發(fā)生了明顯的群落變化。第一次變化（3～7d）是豬尸體皮膚固有的細(xì)菌群落轉(zhuǎn)變?yōu)橐原h(huán)境為基礎(chǔ)的生物膜細(xì)菌群落，第二次變化（14～17 d）是尸體上生物膜的細(xì)菌群落演替，第一次轉(zhuǎn)變較第二次轉(zhuǎn)變更顯著。

藻類(lèi)和硅藻除應(yīng)用于鑒定水中尸體死亡原因、協(xié)助指認(rèn)犯罪嫌疑人與死亡現(xiàn)場(chǎng)外，明確尸體上已知生長(zhǎng)階段的藻類(lèi)或其他水生植物所需的生長(zhǎng)時(shí)間，可用于推斷PMSI[57-61]。KEIPER等[42]的實(shí)驗(yàn)表明，溪流中大鼠尸體上1周即可形成明顯的藻類(lèi)膜。CASAMATTA等[60]首次鑒定了溪流中大鼠尸體上定植的藻類(lèi)物種，浸泡3周內(nèi)藻類(lèi)物種（尤其是鼓藻）逐漸增加并達(dá)到穩(wěn)定，鼓藻可作為PMSI推斷的潛在指標(biāo)。HAEFNER等[7]研究了兩條溪流內(nèi)豬尸體與瓷磚上藻類(lèi)的生長(zhǎng)情況，浸泡40d內(nèi)藻類(lèi)生長(zhǎng)（葉綠素a生成）與時(shí)間成正比，且豬尸體上藻類(lèi)生長(zhǎng)較瓷磚上顯著增多（P＜0.005）。ZIMMERMAN等[14]驗(yàn)證了兩個(gè)咸水池塘內(nèi)豬尸體與瓷磚上硅藻的多樣性與PMSI的規(guī)律，豬尸體上硅藻的多樣性與PMSI成反比（P＜0.05），即尸體在水中浸泡越久，尸體上硅藻種類(lèi)越少，而瓷磚上沒(méi)有發(fā)現(xiàn)相似規(guī)律；豬尸體上硅藻種類(lèi)與瓷磚上不完全相同，兩個(gè)池塘內(nèi)豬尸體上的硅藻種類(lèi)也不完全相同。

3.5 根據(jù)理化方法

國(guó)內(nèi)學(xué)者亦研究過(guò)具有推斷PMSI潛能的物理化學(xué)指標(biāo)。卜俊等[61-62]證實(shí)水中大鼠尸體血、肺、肝組織內(nèi)腐敗揮發(fā)性產(chǎn)物乙醇、正丁醇含量隨PMSI逐漸增高，3種檢材中肺組織為最佳，將乙醇與正丁醇結(jié)合檢驗(yàn)準(zhǔn)確性更好，且乙醇、正丁醇量的變化規(guī)律在不同水質(zhì)浸泡的尸體中無(wú)顯著差別，即該法具有一定的普遍適用性。唐谷等[63]研究了水中大鼠尸體軟組織生物力學(xué)性狀隨PMSI的時(shí)序性變化，其原理為組織自溶或腐敗會(huì)破壞軟組織的結(jié)構(gòu)，反映抗拉能力、彈性、韌性的參數(shù)極限載荷、應(yīng)變、最大應(yīng)力隨之降低。該研究發(fā)現(xiàn)皮膚、肌肉、小腸、結(jié)腸等軟組織的生物力學(xué)參數(shù)均存在隨PMSI或快或慢的下降期與平臺(tái)期，并總結(jié)了各類(lèi)軟組織生物力學(xué)參數(shù)適宜推斷PMSI的窗口期。

4 總結(jié)與展望

目前國(guó)內(nèi)外針對(duì)水中尸體開(kāi)展的法醫(yī)學(xué)研究明顯少于陸地尸體研究，仍然沒(méi)有可以準(zhǔn)確推斷PMSI的方法，然而對(duì)水中尸體腐敗相關(guān)研究的需求日益增長(zhǎng)。HEATON等提出的水中尸體腐敗分值系統(tǒng)及PMSI推斷公式在根據(jù)國(guó)內(nèi)水中尸體驗(yàn)證、修正后，有望直接應(yīng)用于法醫(yī)學(xué)鑒定實(shí)踐。生物膜在活體或尸體落水后才逐漸形成，起到水中“時(shí)鐘”的作用，利用尸體上的生物膜進(jìn)行水中尸體PMSI推斷值得進(jìn)一步深入研究。Daubert規(guī)則指出，作為科學(xué)證據(jù)的理論或技術(shù)是否可靠應(yīng)從以下4個(gè)方面進(jìn)行判斷：該理論或技術(shù)是否可以被重復(fù)檢驗(yàn)，是否被同行評(píng)估過(guò)或已公開(kāi)出版，已知的或潛在的錯(cuò)誤率是否可以被接受，是否被相關(guān)科學(xué)團(tuán)體所接受以及接受的程度[64]。今后水中尸體的法醫(yī)學(xué)相關(guān)研究也應(yīng)以Daubert規(guī)則為指導(dǎo)，更加注重研究的準(zhǔn)確度及可信度，從而為法庭提供更加可靠的證據(jù)。