青海樂都牦牛暴發(fā)炭疽疫情的診斷流行病學(xué)調(diào)查與控制

林元清,王謝忠,沈艷麗,胡廣衛(wèi),闞 威,崔海龍,蔡全珍,何 煒,楊毅青,蔡金山

(1.青海省動物疫病預(yù)防控制中心,青海 西寧810001;2.樂都區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心,青海 樂都810700)

炭疽是由炭疽芽孢桿菌引起的一種急性、熱性、敗血性傳染病,主要易感動物為羊、牛、驢等食草動物及雜食和肉食動物,人也易感。主要傳染源是病畜,及被芽孢污染的土壤、牧草、水源等。主要通過消化道、呼吸道和皮膚傷口等途徑感染。牦牛感染多表現(xiàn)為急性猝死、天然孔出血、血凝不良和可視黏膜發(fā)紺、便血以及皮膚、黏膜發(fā)生炭疽癰等。病理變化特點是敗血癥、實質(zhì)器官變性、腫大、出血性壞死性炎癥。2017 年10 月,青海省動物疫病預(yù)防控制中心收到樂都區(qū)送檢的一份急性死亡的病牛血液樣品,經(jīng)實驗室診斷為炭疽。確診為炭疽疫情后立即組織專家和技術(shù)人員趕赴現(xiàn)場及時開展了調(diào)查和疫情處置指導(dǎo)工作,在實施封鎖、移動控制、疫情排查、撲殺、消毒、無害化處理及緊急免疫等措施后,疫情得到及時控制。

1 疫情處理法規(guī)依據(jù)

此次炭疽疫情嚴(yán)格按照《炭疽防治技術(shù)規(guī)范》進行指導(dǎo)和處置疫情。

2 疫情處置過程

2.1 病例定義 本病潛伏期一般為1~5 d,若感染較輕,則潛伏期可能較長。為擴大病例搜索范圍,本次調(diào)查病例定義為:10 月10 日至11 月3 日,疫點周圍3 km 范圍內(nèi)突發(fā)不明原因死亡的牛、羊、馬、驢、豬等易感動物。

2.2 現(xiàn)場調(diào)查和病例搜索 調(diào)查組于11 月3 日組織專家趕赴疫區(qū)開展現(xiàn)場調(diào)查,調(diào)查發(fā)病和死亡情況,查看同群動物健康狀況,采集養(yǎng)殖戶和周邊地區(qū)地理信息、易感動物存欄等情況,組織人員對周邊地區(qū)進行疫情排查,搜索病例和死亡牛尸體。

2.3 實驗室診斷 對送檢的3 份牛病料采用細菌學(xué)檢測方法(涂片鏡檢、分離培養(yǎng)、動物接種試驗)和分子生物學(xué)檢測方法(PCR)進行實驗室檢驗。

2.4 流行病學(xué)調(diào)查 開展緊急流行病學(xué)調(diào)查,調(diào)查發(fā)病過程和流行趨勢,發(fā)病范圍及病例分布。調(diào)查當(dāng)?shù)睾椭苓叺貐^(qū)炭疽歷史上流行情況及疫病防控相關(guān)信息,開展疫情排查及追蹤溯源。

2.5 控制措施 封鎖疫區(qū),設(shè)立檢查消毒站,隔離及控制易感動物的流動。開展對疫點內(nèi)的圈舍、草場、道路等進行徹底消毒。撲殺病牛并對死亡牛尸體及污染物進行無害化處理。對疫點、疫區(qū)及受威脅區(qū)的牛開展緊急免疫。

3 結(jié)果

3.1 臨床診斷及疫情處置 海東市樂都區(qū)壽樂鎮(zhèn)某村牧戶飼養(yǎng)的牦牛,從2017 年10 月21 日陸續(xù)發(fā)生突然死亡,發(fā)病牛多為成年牛,營養(yǎng)狀況良好。病牛主要癥狀為食欲廢絕,尸僵不全,尸體鼻孔和肛門出血。截止26 日共發(fā)病死亡15 頭,下午逐級上報,對死亡牛尸體就地掩埋。27 日樂都區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心技術(shù)人員赴現(xiàn)場進行核查處置,對死亡牛尸體采集血液樣品進行無害化處理。11 月3日,青海省動物疫病預(yù)防控制中心確診為牦牛炭疽疫情,立即指導(dǎo)當(dāng)?shù)叵嚓P(guān)部門采取措施。截止疫情控制,累計發(fā)病21 頭,死亡18 頭,撲殺病牛3 頭。

3.2 實驗室檢驗

3.2.1 細菌形態(tài)學(xué)檢測 采集全樣品進行涂片鏡檢。將全血接種于普通營養(yǎng)瓊脂37 ℃培養(yǎng),24 小時后長出扁平、灰白色、邊緣不整齊的火焰狀大菌落。對單個菌落進行涂片、染色、鏡檢,美藍染色油鏡下可見深藍色呈竹節(jié)狀排列的中央有橢圓形芽孢的長鏈粗大桿菌,革蘭染色后油鏡下觀察可見革蘭陽性呈竹節(jié)狀排列中央有橢圓形芽孢的長鏈粗大桿菌(見圖1~2)。

3.2.2 PCR 檢測 對全血樣品采用北京世紀(jì)元亨動物防疫技術(shù)有限公司生產(chǎn)的炭疽桿菌PCR檢測試劑盒進行炭疽核酸檢測,結(jié)果為陽性(394 bp)(見圖3)。

圖1 培養(yǎng)物美藍染色

圖2 培養(yǎng)物革蘭染色

圖3 分離桿菌DNA 擴增電泳圖

3.3 流行病學(xué)調(diào)查

3.3.1 空間分布 疫點位于海東市樂都區(qū)北部山區(qū),地理位置偏僻,距離樂都區(qū)政府所在地約30 km。疫點所在村三面環(huán)山,只一條鄉(xiāng)村公路進出,自然屏障良好,方圓8 km 內(nèi)村落較少,只有3 個自然村。該村共75 戶牧戶,疫點附近只2 戶牧戶,位于兩山腳溝壑西側(cè),兩戶相距約200 m。此次疫情涉及的21 個病例均來自1 戶牧戶。

3.3.2 群間分布 發(fā)病牧戶家中牦牛存欄220 頭,圈養(yǎng)及牧場放牧,另有羊83 只、馬1 匹、豬3 頭。有個4 圈舍,其中牛圈1 個、羊圈1 個、豬舍1 棟,圈養(yǎng)和放牧范圍會有交叉,偶爾會混群放牧。此次炭疽疫情發(fā)生在牛,且全部為牦牛,其他動物均未發(fā)病。累計發(fā)病21 頭,死亡18 頭,緊急撲殺3 頭,發(fā)病率6.84%,死亡率6.19%,致死率90.48%。目前該村存欄牛4 967 頭、羊5 713 頭、豬49 頭、馬48 匹。鄰近兩村存欄牛4 150 頭、羊8 310 只、豬202 頭、馬68匹、騾57 頭。所在鎮(zhèn)現(xiàn)存欄牛19 336 頭、羊44 610只、豬3 221 頭、馬681 匹、驢321 頭、騾1 520 匹。調(diào)查以上存欄動物均未發(fā)現(xiàn)疑似病例。

3.3.3 時間分布 10 月21 日疫情發(fā)生后發(fā)病數(shù)呈急劇上升趨勢,10 月25 日達到頂峰,至26 日共發(fā)病死亡15 頭,后呈逐漸下降趨勢,10 月28、29 日未發(fā)生新發(fā)病例。10 月30 日新發(fā)病3 頭,其中1 頭死亡,11 月4 日撲殺發(fā)病牛2 頭。后逐漸趨于穩(wěn)定,未發(fā)生新病例,至11 月9 日,新發(fā)病2 頭,其中1頭死亡,撲殺1 頭。11 月10 日后無新發(fā)病例(見圖4)。發(fā)病過程基本符合動物傳染病流行規(guī)律,在采取封鎖、移動監(jiān)管、消毒、疫點內(nèi)動物撲殺及無害化處理、疫區(qū)和受威脅區(qū)易感動物的炭疽緊急免疫接種等工作后,疫情趨于穩(wěn)定并得到控制。

3.3.4 疫源分析 經(jīng)調(diào)查,該村牛、羊天然草場放牧,發(fā)病的養(yǎng)殖戶自繁自養(yǎng),近年來未從外地引進牛。該村不屬于炭疽自然疫源地,以往沒有發(fā)現(xiàn)炭疽疑似病例,未開展炭疽免疫工作。此次疫情初步分析懷疑為個別牛感染環(huán)境中微量炭疽桿菌侵入機體造成發(fā)病,并在易感牛群中迅速擴散造成疫情暴發(fā)。

圖4 疫情流行曲線

3.3.5 疫情監(jiān)測 1949 年至今,樂都區(qū)共19 個鄉(xiāng)24 個村發(fā)生羊和馬炭疽疫情,共發(fā)病351 頭(只),死亡227 頭(只),致死率64.67%,歷史未發(fā)生牛炭疽疫情。1977 年至今畜間未發(fā)生炭疽疫情。經(jīng)調(diào)查,疫點村及臨近鄉(xiāng)鎮(zhèn)以往未發(fā)生炭疽疫情。2006 年至2017 年,全省共65 個縣80個鄉(xiāng)鎮(zhèn)發(fā)生畜間炭疽疫情,累計發(fā)病815 頭(只),病死409 頭(只),平均致死率50.18%,樂都周邊互助、民和等地區(qū)歷史上多次發(fā)生畜間炭疽疫情。2017 年只有稱多縣于3 月份報告牦牛炭疽疫情1 起,發(fā)病5 頭,死亡2 頭,共124 頭易感動物(見表1~2)。

表1 樂都區(qū)炭疽疫情發(fā)生情況統(tǒng)計

表2 青海省炭疽疫情統(tǒng)計

3.4 控制措施 疫情確診后省動物疫控中心第一時間進行反饋,并組織專家趕赴疫區(qū),開展緊急流行病學(xué)調(diào)查及疫病排查,在當(dāng)?shù)劓?zhèn)召開防控工作會議,指導(dǎo)疫情處置。11 月4 日區(qū)人民政府發(fā)布疫區(qū)封鎖通告,由區(qū)農(nóng)業(yè)執(zhí)法大隊和當(dāng)?shù)劓?zhèn)派出所在疫區(qū)邊緣設(shè)立消毒檢查站,封鎖疫區(qū)限制易感動物及其產(chǎn)品流動,對出入車輛進行消毒。撲殺3 頭病牛,對前期掩埋的死亡牛尸體進行重新焚燒、掩埋和消毒處理,并對污染物進行無害化處理。調(diào)撥大型城市消毒專用車每天對疫點內(nèi)的圈舍、草場、道路等進行徹底消毒。于11 月5 日開始對疫點、疫區(qū)及受威脅區(qū)的9 023 頭牛進行緊急免疫,阻止畜間疫情的進一步蔓延。指導(dǎo)做好人員防護并密切觀察,衛(wèi)生部門調(diào)查相關(guān)接觸和疫區(qū)內(nèi)人員,均未發(fā)現(xiàn)感染。12 月6 日,經(jīng)省動物疫控中心組織專家進行評估和考核后,由區(qū)人民政府解除疫區(qū)封鎖。

4 疫情處置體會

4.1 此次疫情由于防疫員和牧戶缺乏相關(guān)知識,對炭疽診斷和防控了解有限,未能及時逐級上報,發(fā)病初期還以梭菌性疾病進行診治,人獸共患病炭疽應(yīng)及時上報。初步診斷和正確處置具有極其重要的公共衛(wèi)生意義,能夠有效阻止向人間傳播。

4.2 農(nóng)牧民群眾病死動物無害化處理意識淡薄,若炭疽桿菌污染環(huán)境,并被氧化形成具有感染性的芽孢,易形成持久的自然疫源地,需要嚴(yán)格按照有關(guān)要求做好消毒及無害化處理等工作,并在當(dāng)?shù)孛磕陮σ赘袆游镞M行炭疽免疫接種,繼續(xù)做好疫情排查、監(jiān)測和流行病學(xué)調(diào)查等工作。

4.3 青海省在重點地區(qū)實施炭疽計劃免疫,據(jù)統(tǒng)計,2017 年全省共免疫各類牲畜882.9 萬頭(只)。每年在全省范圍內(nèi)采集曾發(fā)生過炭疽疫情地區(qū)的土樣、毛樣進行監(jiān)測,2017 年共對1 360 份土樣、毛樣進行炭疽檢測,結(jié)果均為陰性。

4.4 各地仍存在病死畜及污染場地不能得到及時銷毀和徹底消毒及免疫密度低等問題。另外農(nóng)牧民群眾對炭疽的危害認(rèn)識不足,缺乏防范意識,常擅自處理病死畜尸體,甚至剝皮食肉,污染環(huán)境。全省每年均有炭疽零星散發(fā),需要進一步加大監(jiān)測、流行病學(xué)調(diào)查、消毒滅源和免疫等炭疽防控工作力度。

4.5 疫情處置過程中要密切監(jiān)視有關(guān)人員身體反應(yīng),向群眾宣傳炭疽的危害及防治常識,進一步提高農(nóng)牧民群眾的防病意識,并做好輿論宣傳引導(dǎo)工作。