組織印片DNA倍體對(duì)胃癌診斷、預(yù)后評(píng)估價(jià)值

熊利芬 朱文成

近年來(lái)，隨著我國(guó)國(guó)民經(jīng)濟(jì)的高速發(fā)展，胃腸疾病已經(jīng)成為我國(guó)的高發(fā)疾病，我國(guó)的胃癌患者已經(jīng)逐漸增多，據(jù)科學(xué)調(diào)查，胃癌已經(jīng)成為我國(guó)癌癥死亡的幾大原因之一，且呈上升趨勢(shì)[1]。作為臨床上常見的惡性腫瘤，胃癌有較高的致死率，因胃癌而死的患者可以占到所有惡性腫瘤的第3 名，對(duì)于胃癌患者最常用的治療方法就是手術(shù)，但是因?yàn)榛颊呔歪t(yī)時(shí)多數(shù)病情已經(jīng)是中晚期，錯(cuò)過(guò)了最佳的手術(shù)治療時(shí)間，因此，在其診斷是胃癌診治的關(guān)鍵。對(duì)于細(xì)胞核內(nèi)DNA 含量的檢測(cè)在臨床上已經(jīng)成為診斷腫瘤，鑒別腫瘤預(yù)后、判斷的一種非常重要的方法[1-3]。腫瘤的基因、細(xì)胞核內(nèi)的染色體倍體的改變和腫瘤細(xì)胞增殖的速度決定了腫瘤組織分化的程度以及腫瘤的惡化和預(yù)后[4-6]。為探究組織印片DNA 倍體分析對(duì)胃癌的診斷以及預(yù)后有何影響，作此報(bào)告如下：

1 資料與方法

1.1 患者資料

收集2015 年6 月—2018 年4 月期間我院接收的150 例胃癌進(jìn)行切除患者的標(biāo)本，其中男性有79 例，女性有71 例，年齡在32～82 歲之間，平均年齡（56.78±11.92）歲；經(jīng)過(guò)病理診斷結(jié)果顯示這150 例胃癌患者的標(biāo)本中，高度分化的有37 例，中度分化的有49 例，輕度分化的有64 例；通過(guò)對(duì)腫瘤周邊的胃粘膜分析，患慢性胃炎的患者有141 例，慢性萎縮性胃炎并且伴有非典型增生的有9 例。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）患者為胃癌需要進(jìn)行手術(shù)患者；（2）患者簽署相關(guān)同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）患者有相關(guān)的精神病史或者有精神病、腫瘤性疾病等病癥；（2）患者肝腎功能障礙。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本的采集 手術(shù)之后切除的胃癌組織進(jìn)行冰凍，與此同時(shí)將腫瘤組織切片放于載玻片上，然后再蓋上一層載玻片輕輕地按壓數(shù)次，使得腫瘤組織均勻的涂抹在載玻片上，從而獲得足夠的腫瘤細(xì)胞；用相同的方法，制備一張周圍非腫瘤組織的印片。

1.2.2 印片的染色及分析 用Feulgen-Thionin 對(duì)兩張組織印片進(jìn)行染色，然后用全自動(dòng)的細(xì)胞圖像分析系統(tǒng)對(duì)細(xì)胞核內(nèi)的DNA 倍體進(jìn)行分析。

1.3 觀察指標(biāo)

（1）觀察DNA 異倍體率與患者的年齡、性別以及腫瘤的大小是否有關(guān)。

（2）DNA 異倍體率與腫瘤的分化程度是否有關(guān)系。

（3）觀察癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)的深度是否對(duì)胃癌DNA 異倍體率有影響。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料以（%）表示，采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 DNA 異倍體率與年齡、性別、腫瘤大小的關(guān)系

不同年齡、性別、腫瘤大小患者的DNA 異倍體率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。胃癌DNA 異倍體率與年齡性別、腫瘤大小沒有明顯關(guān)系，詳見表1。

表1 DNA 異倍體率與年齡、性別、腫瘤大小的關(guān)系表 [例（%）]

2.2 DNA 異倍體率與腫瘤的分化程度的關(guān)系

不同分化程度患者DNA 異倍體率有明顯差異（P＜0.05），可見，腫瘤的分化程度對(duì)DNA 異倍體率有影響，詳見表2。

表2 DNA 異倍體率與腫瘤的分化程度的關(guān)系表 [例（%）]

2.3 胃癌DNA 異倍體率與癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及浸潤(rùn)深度的關(guān)系

不同轉(zhuǎn)移程度患者DNA 異倍體患者率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；不同浸潤(rùn)深度患者DNA 異倍體率差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＞0.05，詳見表3。

3 討論

正常的人體細(xì)胞大多為二倍體細(xì)胞，只是有極少量的細(xì)胞由于處于S 期容易受到外界和內(nèi)部的各種刺激導(dǎo)致基因發(fā)生突變、染色體發(fā)生移位和缺失，從而出現(xiàn)含有異倍體的細(xì)胞。根據(jù)相關(guān)的研究發(fā)現(xiàn)，只要是DNA 的含量發(fā)生很細(xì)微的異常變化，就有可能會(huì)使正常的細(xì)胞發(fā)生癌變，成為惡性腫瘤細(xì)胞[7]。

表3 胃癌DNA 異倍體率與癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及浸潤(rùn)深度的關(guān)系表 [例（%）]

盡早對(duì)胃癌進(jìn)行診斷以及接受良好的治療能夠提高胃癌的治愈率。當(dāng)細(xì)胞中出現(xiàn)DNA 異倍體時(shí)，這就提醒我們體內(nèi)有腫瘤的發(fā)生，病人的病理檢測(cè)結(jié)果顯示正常而有DNA 異倍體的組織，這可能是腫瘤細(xì)胞惡化的前兆[8-9]。通過(guò)病理來(lái)診斷惡性腫瘤是臨床上常用的也是最重要的診斷依據(jù)，但是這種方法判斷腫瘤細(xì)胞制片的時(shí)間較長(zhǎng)，同時(shí)因?yàn)獒t(yī)生自身的影響，容易造成漏診、誤診的現(xiàn)象[10]。

本次研究結(jié)果顯示，高分化胃癌的DNA 異倍體的發(fā)生率為62.16%，中分化胃癌的DNA 異倍體的發(fā)生率為87.76%，而低分化胃癌的DNA 異倍體的發(fā)生率為100.00%，兩相對(duì)比有明顯的差異（P＜0.05），分化的程度與DNA 異倍體率呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)，與二倍體率呈現(xiàn)正相關(guān)。通過(guò)這些結(jié)果能夠預(yù)示腫瘤細(xì)胞中含二倍體的患者比含有異倍體患者的預(yù)后效果好。

胃癌的轉(zhuǎn)移是造成患者死亡的最重要的原因，在治療上也是非常有難度的[11-13]?；颊叩牧馨徒Y(jié)是否轉(zhuǎn)移與患者的預(yù)后有很大關(guān)系，早期研究顯示，胃癌主要是通過(guò)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。本次研究分析了150 例腫瘤患者中淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移與DNA 倍體的關(guān)系，結(jié)果顯示，癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的有96 例，其中發(fā)現(xiàn)二倍體的有3（3.13%）例，有93（96.88%）例為異倍體；而癌淋巴結(jié)沒有轉(zhuǎn)移的有54 例，其中發(fā)現(xiàn)二倍體的有17（31.48%）例，有37（68.52%）例為異倍體。這就說(shuō)明，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與DNA 二倍體關(guān)系密切，并且異倍體出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的概率明顯比二倍體的大很多。所以在手術(shù)之前對(duì)患者的DNA 含量進(jìn)行測(cè)定有助于預(yù)測(cè)腫瘤淋巴結(jié)是否發(fā)生轉(zhuǎn)移，還能夠指導(dǎo)手術(shù)的治療，特別是在對(duì)腫瘤淋巴結(jié)徹底清除時(shí)。

通過(guò)DNA 倍體分析能夠更好地判斷胃癌的具體癥狀，對(duì)患者的預(yù)后有積極影響。