生姜與醋泡姜抗氧化、抑菌和抗腫瘤活性比較研究

田程飄,朱偉偉,宋雅玲,牛思琪,申利群,2,*,吳愛群,*

(1.廣西民族大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院,廣西南寧 530006;2.廣西林產(chǎn)化學(xué)與工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣西南寧 530006)

生姜(ZingiberofficinaleRose)是姜科屬多年生單子葉草本植物的根莖,作為特產(chǎn)經(jīng)濟(jì)作物在我國的中部、東南部至西南各省廣為栽培,數(shù)千年以來一直被廣泛用于日常生活中,并且在傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中也被大量使用了幾百年[1]。近年來,由于具有眾多重要的藥理作用,生姜受到食品和制藥行業(yè)的關(guān)注日益增加。生姜中所含的多種活性成分如黃酮類、姜黃素、姜辣素等具有開胃健脾、抗氧化、殺菌、抑制腫瘤等多種活性[2]。在民間,人們常采用醋泡的方法對(duì)生姜進(jìn)行炮制后食用,口感更為美味可口[3]。根據(jù)中醫(yī)理論,醋泡姜具有保護(hù)胃、抗炎、暖肺等功效,可減少水痰,控制嘔吐,抗酸,抑菌[4-5],它可用于治療感冒、減肥。養(yǎng)肝也是醋泡姜的重要作用之一,中醫(yī)講究五味配五臟,酸配肝,醋[6]就是一種酸性食材,它有養(yǎng)肝補(bǔ)肝的作用,而生姜性熱,它能溫補(bǔ)肝陽,平時(shí)人們食用醋泡姜時(shí),酸辣適中,對(duì)食管和胃沒有什么明顯傷害,且可以提高肝功能。諸多的保健作用和極佳口感使得醋泡生姜已作為一種倍受認(rèn)可的功能食品廣為流傳。目前對(duì)生姜的研究報(bào)道很多,但對(duì)醋泡后的生姜研究甚少[3],關(guān)洪全等[4]研究生姜與醋酸協(xié)同抗菌作用,發(fā)現(xiàn)生姜與較低濃度的醋酸組合后,對(duì)抗菌活性表現(xiàn)出一定的協(xié)同作用。

為更好地開發(fā)利用醋泡生姜這一功能食品。本研究測(cè)定醋泡生姜提取物的DPPH自由基、ABTS+自由基、羥基自由基(·OH)清除率及總還原力,對(duì)金黃色葡萄球菌、枯草桿菌、大腸桿菌、肺炎克雷伯氏菌和白色念珠菌的抗菌活性以及對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞、人肝癌細(xì)胞、卵巢癌細(xì)胞的抗腫瘤活性,為進(jìn)一步研究利用生姜提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

姜的鮮根莖 廣西南寧市羅文市場(chǎng);75%乙醇、無水乙醇 國藥集團(tuán);冰乙酸 成都科隆;抗壞血酸(VC)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2-聯(lián)氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二銨鹽(ABTS)、硫酸亞鐵、水楊酸、過氧化氫、鐵氰化鉀、三氯乙酸、三氯化鐵等 均為國產(chǎn)分析純;細(xì)菌培養(yǎng)基、真菌培養(yǎng)基、DMEM培養(yǎng)基、1640培養(yǎng)基、胎牛血清、胰蛋白酶EDTA消化液、磷酸鹽緩沖液 生化試劑;供試真菌和細(xì)菌 北納創(chuàng)聯(lián)生物技術(shù)有限公司;人結(jié)腸癌細(xì)胞(human colon cancer cell,HCT116) 上海中喬新舟生物科技有限公司;人肝癌細(xì)胞(human liver cancer cell,HepG2) 溫州醫(yī)科大學(xué);卵巢癌細(xì)胞(ovarian carcinoma cells,Skov3) 廣西醫(yī)科大學(xué)。

GO全波長酶標(biāo)儀 Thermo Multiskan Go(Thermo Lab systems公司);生化培養(yǎng)箱 江蘇華安設(shè)備有限公司;YXQ-100SII立式壓力蒸汽滅菌鍋 上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠;CKX41倒置顯微鏡 日本Olympus公司;KA-1000低速離心機(jī) 上海安亭科學(xué)儀器廠;3111 5% CO2及飽和濕度孵化箱 美國Thermo Fisher scientific公司;SW-CJ-1F超凈臺(tái) 江蘇蘇凈;96孔培養(yǎng)板 蘇州海貍。

1.2 供試樣品的制備

取新鮮生姜洗凈,晾干表面水分,切成薄片(厚度為0.2～0.4 cm)[7],稱取500 g,參考市售食醋含乙酸約為3%,用350 mL 3%冰乙酸剛好沒過生姜進(jìn)行醋泡,室溫25 ℃下密封放置7d。濾出生姜放入磨口圓底燒瓶中,加蒸餾水至沒過生姜,用揮發(fā)油提取裝置,進(jìn)行6 h的水蒸汽蒸餾提取得到揮發(fā)油。濾去水后加入75%乙醇[8-10]300 mL,85 ℃水浴回流1 h,減壓回收濾液后得到醋泡生姜乙醇提取浸膏。另未醋泡的生姜進(jìn)行同樣提取,得生姜揮發(fā)油和生姜乙醇提取浸膏。

1.3 指標(biāo)測(cè)定方法

1.3.1 抗氧化活性測(cè)定

1.3.1.1 對(duì)DPPH自由基清除能力的測(cè)定 參照文獻(xiàn)[11],稍作修改,即配制系列濃度各樣品溶液(生姜油和醋泡姜姜油0.4、0.6、0.8、1.0、2.0、4.0、6.0 mg/mL,生姜乙醇提取物和醋泡姜乙醇提取物0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、2.0、4.0 mg/mL,抗壞血酸0.005、0.010、0.020、0.030、0.040、0.050 mg/mL),1 mmol/L DPPH乙醇溶液。取96孔板,每孔加入150 μL DPPH乙醇溶液和樣品溶液50 μL,振蕩混勻后,室溫避光放置30 min,于517 nm波長處測(cè)定吸光度,記為A1;以150 μL無水乙醇代替DPPH,同法測(cè)定吸光度,記為A2,以樣品溶劑代替樣品,同法測(cè)定吸光度,記為A0。以抗壞血酸溶液作為陽性對(duì)照,測(cè)定DPPH自由基清除率。

DPPH自由基清除率(%)=[(A0-A1+A2)/A0]×100

1.3.1.2 ABTS+自由基清除能力的測(cè)定 參照文獻(xiàn)[12],稍作改變,配制系列濃度各樣品溶液(生姜油和醋泡姜姜油0.05、0.10、0.20、0.40、0.60、0.80、1.00 mg/mL,生姜乙醇提取物和醋泡姜乙醇提取物0.05、0.10、0.15、0.20、0.25、0.30、0.35、0.50 mg/mL,抗壞血酸0.005、0.010、0.015、0.020、0.025、0.030、0.035、0.040 mg/mL),取7 mmol/L的ABTS+與1.4 mmol/L的過硫酸鉀溶液等體積混合均勻,避光放置16 h,臨用前用蒸餾水稀釋至吸光度為0.7±0.02,得ABTS工作液。取工作液150 μL、樣品溶液50 μL,置于96孔板孔中,反應(yīng)6 min后于734 nm波長處測(cè)定吸光度,記為A1;以溶劑代替樣品,同法測(cè)定吸光度,記為A0;以150 μL去離子水代替ABTS,同法測(cè)得各樣品對(duì)照組的吸光度,記為A2。以抗壞血酸為陽性對(duì)照品,測(cè)定ABTS自由基清除率。

ABTS自由基清除率(%)=[(A0-A1+A2)/A0]×100

1.3.1.3 對(duì)羥自由基(·OH)清除能力的測(cè)定 利用Fenton反應(yīng)[13-14],在100 μL 9 mmol/L的水楊酸-乙醇溶液中依次加入100 μL 9 mmol/mL 硫酸亞鐵和1 mg/mL的樣品提取物或0.2 mg/mL的抗壞血酸溶液(100、200、300、400、500、600和700 μL,生姜各樣品在體系中濃度為0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7 mg/mL,抗壞血酸0.02、0.04、0.06、0.08、0.10、0.12、0.14 mg/mL),接著補(bǔ)充去離子水至1.4 mL,最后加入100 μL 8 mmol/L的H2O2啟動(dòng)反應(yīng),37 ℃水浴反應(yīng)15 min后于510 nm處測(cè)吸光度A1,以去離子水替代樣品同法測(cè)得A0,以去離子水代替H2O2測(cè)得各樣品的對(duì)照A2。以抗壞血酸為對(duì)照,測(cè)定羥自由基(·OH)清除率。

·OH清除率(%)=[(A0-A1+A2)/A0]×100

1.3.1.4 還原能力的測(cè)定 配制系列樣品溶液生姜油和醋泡姜姜油0.8、1.0、2.0、4.0、6.0 mg/mL,生姜乙醇提取物和醋泡生姜乙醇提取物0.03、0.05、0.10、0.30、0.50、1.00 mg/mL,抗壞血酸0.01、0.02、0.04、0.06、0.08、0.10 mg/mL),參照文獻(xiàn)[15]配制各反應(yīng)試劑,在EP管中加入500 μL pH=6.6的磷酸鹽緩沖溶液,200 μL樣品溶液,500 μL 1%鐵氰化鉀立刻混勻后于50 ℃反應(yīng)20 min,取出加入500 μL 10%三氯乙酸,混勻反應(yīng)10 min,取出500 μL,加入500 μL H2O,100 μL 0.1%三氯化鐵溶液,靜置10 min,于700 nm波長處測(cè)定吸光度。以抗壞血酸為陽性對(duì)照品,測(cè)定各吸光度,用于表示還原能力的強(qiáng)度。

1.3.2 抑菌活性的測(cè)定 通過采用微量肉湯稀釋法來測(cè)定生姜提取物的最低抑菌濃度(MIC)[16]。采用微量二倍稀釋法,在聚乙烯96孔板上進(jìn)行:96孔板上每兩行作為一個(gè)樣品的平行試驗(yàn),從A1開始為第一孔,從左到右,從上到下;每個(gè)板上1～11孔為樣品,第12孔為培養(yǎng)基空白對(duì)照,每板留三孔加培養(yǎng)基和供試菌各100 μL作為驗(yàn)證,每個(gè)板只能加一種菌;大腸桿菌(G-),金黃色葡萄球菌(G+),枯草芽孢桿菌(G+)用LA肉湯培養(yǎng)基,肺炎克雷伯氏菌(G-)用MHA培養(yǎng)基,白色念珠菌用PDA培養(yǎng)基。用微量加液器加液,第2～11孔每孔加含2% DMSO的無菌培養(yǎng)基100 μL,往1號(hào)孔和2號(hào)孔中加入100 μL已配好的母液,依次對(duì)第1～11孔做梯度稀釋。在每孔中加入100 μL的檢驗(yàn)菌菌液,每孔菌數(shù)為5×104個(gè)。在1～11孔的樣品最終濃度分別生姜乙醇提物和醋泡姜乙醇提物:1000、500、250、125、62.5、31.25、15.625、7.8125、3.9063、1.9531和0.9766 μg/mL;生姜油和醋泡姜姜油:5000、2500、1250、625、312.5、156.25、78.13、39.06、19.53、9.77和4.89 μg/mL。檢驗(yàn)菌為金黃葡萄球菌、肺炎克雷伯氏菌等的置于37 ℃培養(yǎng)24 h,白色念珠菌的放30℃。培養(yǎng)結(jié)束后,比較檢測(cè)組與空白對(duì)照組渾濁度差異,無可見細(xì)菌生長即液體相對(duì)澄清且無沉淀的孔內(nèi)所含的藥物濃度即為最低抑菌濃度(MIC值)。

1.3.3 抗腫瘤活性測(cè)定 將凍存的HCT116、HepG2和Skov3細(xì)胞取出在38 ℃水浴加熱,1 min內(nèi)使其完全融化,加入到培養(yǎng)基混勻離心棄去上清液,加入適量培養(yǎng)基后接種于細(xì)胞瓶置37 ℃、5% CO2、飽和濕度的培養(yǎng)箱培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)細(xì)胞生長到對(duì)數(shù)期后用含10%胎牛血清的培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,細(xì)胞密度控制在1×105個(gè)·mL-1左右細(xì)胞懸液,以每孔1×104個(gè)細(xì)胞的密度接種于96孔培養(yǎng)板,每孔100 μL。置37 ℃、5% CO2、飽和濕度的培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 h,觀察細(xì)胞大概長滿96孔板的80%～90%即可上藥。處理細(xì)胞:按試驗(yàn)設(shè)計(jì)共分4組,分別為生姜油、醋泡姜油、生姜乙醇提取物和醋泡姜乙醇提取物用藥組。吸去孔內(nèi)培養(yǎng)基后用藥組加入濃度為200、100、50、25、12.5 μg·mL-1的各提取物溶液;同時(shí)設(shè)定調(diào)零孔,每組5個(gè)復(fù)孔,繼續(xù)培養(yǎng)48 h。呈色:培養(yǎng)48 h后取出培養(yǎng)板,吸去上清液,每孔加入20 μL的MTT溶液(5 mg·mL-1),37 ℃繼續(xù)培養(yǎng)4 h后,小心吸去孔內(nèi)的培養(yǎng)上清液。每孔再加入100 μL二甲亞砜(DMSO),振蕩10 min,使結(jié)晶物充分溶解。比色:選擇490 nm波長,在自動(dòng)酶標(biāo)儀上測(cè)定各孔吸光度(A)值。細(xì)胞抑制率=[(Ac-As)/(Ac-Ab)]×100,其中,As:實(shí)驗(yàn)孔,含有細(xì)胞的培養(yǎng)基,MTT,藥物;Ac:對(duì)照孔,含有細(xì)胞的培養(yǎng)基,MTT,沒有加藥的培養(yǎng)基;Ab:空白孔,不含細(xì)胞和藥物的培養(yǎng)基,MTT[17]。

1.4 數(shù)據(jù)處理

各實(shí)驗(yàn)均重復(fù)進(jìn)行3次?？寡趸瘜?shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel 2010軟件計(jì)算平均值和標(biāo)準(zhǔn)差,Origin Pro 9作圖,計(jì)算IC50;抗腫瘤實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表示為Mean±SD,采用Graphpad prism 6.0軟件計(jì)算出IC50值,用Excel 2010軟件計(jì)算平均值和標(biāo)準(zhǔn)差。

2 結(jié)果與分析

2.1 抗氧化活性測(cè)定結(jié)果

2.1.1 姜提取物對(duì)DPPH自由基的清除作用 由圖1可看出生姜油和醋泡姜姜油對(duì)DPPH自由基的清除率在0.4～6 mg/mL的范圍內(nèi)與濃度成正相關(guān)。隨樣品濃度的增加,生姜油對(duì)DPPH自由基的清除率由19.89%上升至59.68%,醋泡姜姜油對(duì)DPPH自由基的清除率由20%上升至56.24%,兩者相差不大(IC50分別為4.67和4.9 mg/mL)。生姜乙醇提取物在0.1～0.8 mg/mL的范圍內(nèi)隨濃度的增加,清除率由35.8%上升至52%,而后趨于平緩而不變,IC50為0.67 mg/mL,與夏樹林等[18]的研究結(jié)果相符(IC50為0.8 mg/mL,且高于此濃度后,清除率趨于平緩),弱于唐仕榮等[19]的研究的研究結(jié)果(IC50為0.076 mg/mL);醋泡姜乙醇提取物在0.1～2 mg/mL之間隨濃度的增加,對(duì)DPPH自由基的清除率為增強(qiáng)趨勢(shì),清除率由27.41%上升至60.12%,隨后亦趨于平緩,IC50為1.25 mg/mL;最終在2、4 mg/mL濃度下醋泡姜乙醇提取物較生姜乙醇提取物清除DPPH自由基效果均好一些。而抗壞血酸在0.005～0.05 mg/mL的范圍內(nèi),清除率由24.24%上升至83%,IC50為0.018 mg/mL。綜上,對(duì)于清除DPPH自由基活性的效果,抗壞血酸?生姜乙醇提取物>醋泡姜乙醇提取物>生姜油≈醋泡姜姜油。

圖1 樣品濃度對(duì)DPPH自由基清除效果的影響Fig.1 Effects of samples concentrations on DPPH free radical scavenging ability

2.1.2 姜提取物對(duì)ABTS+自由基的清除作用 由圖2所示,隨著樣品濃度的增加,其對(duì)ABTS+自由基的清除率均呈上升趨勢(shì),清除率與樣品濃度成正相關(guān)。其中,生姜油在0.05～1 mg/mL的范圍內(nèi)隨濃度的增加,對(duì)ABTS+自由基的清除率由10.38%上升至70.08%;而醋泡姜姜油的清除率則由14.07%上升至71.179%。比較得出醋泡姜姜油(IC50為0.52 mg/mL)對(duì)ABTS+自由基的清除能力略強(qiáng)于生姜油(IC50為0.59 mg/mL)。生姜乙醇提取物在0.05～0.25 mg/mL之間隨濃度的增加,對(duì)ABTS+自由基的清除率明顯增強(qiáng),清除率由34.78%上升至90.16%,而后變緩,最終為90.81%;醋泡姜乙醇提取物在0.05～0.25 mg/mL之間隨濃度的增加,對(duì)ABTS+自由基的清除率明顯增強(qiáng)。清除率由34.66%上升至88.19%,而后變緩,最終為90.62%;兩個(gè)乙醇提取物對(duì)ABTS+自由基的清除能力差異不明顯(IC50分別為0.07和0.08 mg/mL)。綜合得出,四種提取物清除ABTS+自由基能力:抗壞血酸>生姜乙醇提取物≈醋泡姜乙醇提取物>醋泡姜姜油>生姜油。

圖2 樣品濃度對(duì)ABTS+自由基清除效果的影響Fig.2 Effects of samples concentrations on ABTS+ free radical scavenging ability

2.1.3 姜提取物對(duì)羥自由基(·OH)的清除作用 由圖3可知,醋泡姜姜油對(duì)羥自由基(·OH)的清除作用明顯優(yōu)于生姜油,在0.1～0.7 mg/mL的濃度范圍內(nèi),清除率由23.76%上升至92.2%,IC50為0.28 mg/mL,而生姜油在相同的最大濃度下僅是達(dá)到81.67%,且其IC50為0.42 mg/mL,弱于醋泡姜姜油。兩個(gè)乙醇提取物的清除作用較弱,在相同濃度下,生姜乙醇提取物的清除率由13.81%上升至54.7%;醋泡姜乙醇提取物的清除率則由15.04%上升至50.58%,上升趨勢(shì)較緩慢;比較得出兩個(gè)乙醇提取物清除羥自由基(·OH)效果相差不顯著(IC50分別為0.65和0.69 mg/mL)。抗壞血酸在0.02～0.14 mg/mL的濃度范圍內(nèi),清除率由14.36%上升至100%,IC50為0.07 mg/mL。綜上可知,對(duì)于羥自由基(·OH)的清除作用抗壞血酸>醋泡姜姜油>生姜油>生姜乙醇提取物≈醋泡姜乙醇提取物。

圖3 樣品濃度對(duì)羥自由基(·OH)清除效果的影響Fig.3 Effects of samples concentrations on hydroxyl free radical scavenging ability

2.1.4 姜提取物還原力的測(cè)定 由圖4可知,在一定濃度范圍內(nèi),隨樣品濃度的升高,總還原力呈上升趨勢(shì)。其中,生姜油在0.8～6 mg/mL的范圍內(nèi),吸光度由0.129上升至0.327;在相同濃度下,醋泡姜姜油吸光度由0.128上升至0.391;由此得出,一定濃度范圍內(nèi),醋泡姜姜油的還原力強(qiáng)度優(yōu)于生姜油。生姜乙醇提取物總還原力在0.03～1 mg/mL的范圍內(nèi)與濃度成正相關(guān),但0.03～0.3 mg/mL變化較緩,0.5～1 mg/mL急劇上升,吸光度由0.121上升至0.204,1 mg/mL時(shí)為0.421;醋泡姜姜乙醇提取物在0.03～1 mg/mL濃度區(qū)間內(nèi),吸光度由0.117上升至0.447。綜上可知,醋姜油和醋姜乙醇提取物還原力的強(qiáng)度優(yōu)于生姜油與生姜乙醇提取物,但均差于抗壞血酸。

圖4 樣品濃度對(duì)總還原力的影響Fig.4 Effects of samples concentrations on total reducing power

2.2 姜提取物對(duì)各供試菌的MIC

生姜提取物對(duì)各供試菌的最低抑菌濃度見表1～表4。由此可知,生姜提取物對(duì)金黃色葡萄球菌、枯草桿菌和肺炎克雷伯氏菌抑菌濃度各不相同,最低抑菌濃度(MIC)分別為156.25、500、250 μg/mL。隨著提取物濃度的增加,其抑菌活性也逐漸增強(qiáng)。四種樣品中,對(duì)金黃色葡萄球菌抑制效果最好的是醋泡姜姜油,MIC為156.25 μg/mL,而乙醇提取物的均為1000 μg/mL,對(duì)枯草芽孢桿菌和肺炎克雷伯氏菌抑制效果最好的為生姜乙醇提取物和醋泡姜乙醇提取物,MIC分別為500和250 μg/mL,高于李鐘美[20]的研究結(jié)果,可能是其所用樣品為溶劑提取混合物,而本研究的提取分成了揮發(fā)油和樹脂兩部分?？梢娚崛∥锱c醋泡姜提取物均具有一定的抑菌作用。醋泡姜姜油對(duì)金黃色葡萄球菌和肺炎克雷伯氏菌的抑制作用均優(yōu)于生姜油,推測(cè)醋酸作用于生姜對(duì)抑菌效果起到了一定的協(xié)同作用,即醋泡可在一定程度上增強(qiáng)生姜的抑菌效果。

表1 生姜油對(duì)不同細(xì)菌生長的抑制情況Table1 Inhibition of growth of different bacteria by ginger oil

表2 醋泡姜姜油對(duì)不同細(xì)菌生長的抑制情況Table 2 Inhibition of growth of different bacteria by vinegar ginger oil

表3 生姜乙醇提取物對(duì)不同細(xì)菌生長的抑制情況Table 3 Inhibition of growth of different bacteria by ginger ethanol extract

表4 醋泡姜乙醇提取物對(duì)不同細(xì)菌生長的抑制情況Table 4 Inhibition of growth of different bacteria by vinegar ethanol extract

2.3 MTT法檢測(cè)出姜提取物對(duì)腫瘤細(xì)胞的增殖抑制作用

采用MTT法檢測(cè)四個(gè)姜提取物對(duì)HCT116、HepG2和Skov3三種人腫瘤細(xì)胞的增殖抑制作用,結(jié)果如表5所示,各個(gè)姜提取物對(duì)HCT116、HepG2和Skov3都有一定的增殖抑制作用。作用24 h時(shí),觀察到抑制作用仍不明顯,孔內(nèi)液體仍帶培養(yǎng)基原來的淺紫色,說明用藥組尚未開始起作用,推測(cè)可能是樣品為混合物,其主要抗腫瘤成分含量相對(duì)較少的原因。作用48h后呈色,96孔板上顏色呈梯度,藥物濃度越大的顏色越淺,原因是藥物濃度大抑制作用強(qiáng),存活細(xì)胞少,其代謝物少而與MTT呈色淺。其中在HCT116的增殖抑制作用實(shí)驗(yàn)中,生姜乙醇提取物的效果最為突出[(49.4±1.42) μg/mL],Gan等[21]在研究人結(jié)腸癌細(xì)胞HCT116中發(fā)現(xiàn),6-姜烯酚透過下調(diào)細(xì)胞周期蛋白cyclinB、cdc25C、cdkl和紡錘體裝配蛋白cdc20、mad2和survivin的表達(dá),造成G2/M期周期阻滯的不可逆轉(zhuǎn),促使細(xì)胞死亡;姜油、醋泡姜姜油、生姜乙醇提取物、醋泡姜乙醇提取物四個(gè)樣品對(duì)Skov3的抑制效果較好,其IC50分別為(38.37±0.66)、(39.90±1.37)、(48.18±1.3)和(48.79±1.24) μg/mL。即醋泡生姜和生姜對(duì)卵巢癌(Skov3)細(xì)胞有一定的抑制作用。

表5 四種姜提取物對(duì)HCT116、HepG2和Skov3的IC50(μg/mL)Table 5 IC50 of four ginger extracts to HCT116,HepG2 and Skov3 cells(μg/mL)

3 結(jié)論

本研究比較分析了生姜與醋泡姜的抗氧化、抑菌與抗腫瘤活性其中,醋泡姜姜油的清除ABTS+自由基、羥自由基(·OH)能力和還原能力均強(qiáng)于生姜油,生姜乙醇提取物與醋泡姜乙醇提取物抗氧化能力相差不顯著,總體上其乙醇提取物的抗氧化效果稍優(yōu)于其揮發(fā)油。

在微量肉湯稀釋法評(píng)價(jià)四個(gè)生姜提取物的抑菌實(shí)驗(yàn)中,抑菌效果最佳的是醋泡姜姜油,其對(duì)金黃色葡萄球菌的MIC為156.25 μg/mL,其次是兩個(gè)乙醇提取物對(duì)枯草芽孢桿菌和肺炎克雷伯氏菌抑制效果,MIC分別為500和250 μg/mL;實(shí)驗(yàn)表明四個(gè)生姜樣品均具有較強(qiáng)的抑菌效果,醋泡姜姜油對(duì)金黃色葡萄球菌和肺炎克雷伯氏菌的增殖抑制作用均明顯強(qiáng)于生姜油,推測(cè)是醋泡對(duì)生姜抑菌成分產(chǎn)生了影響。在MTT法測(cè)定生姜提取物對(duì)HCT116、HepG2和Skov3三個(gè)腫瘤細(xì)胞的試驗(yàn)中,四個(gè)姜提取物均體現(xiàn)出一定的增殖抑制作用,以生姜乙醇提取物對(duì)HCT116的增殖抑制作用最為突出[(49.4±1.42) μg/mL],四種姜提取物對(duì)Skov3均有良好的抑制效果,此結(jié)果可以為醋泡生姜的研究開發(fā)提供一定的參考。