一款膠原蛋白復(fù)合粉改善皮膚水分人體試食實(shí)驗(yàn)研究

摘要：目的：探討膠原蛋白復(fù)合粉對(duì)人體皮膚水分的改善情況。 方法：將受試者隨機(jī)分為試食組和對(duì)照組，試食組服用受試物，對(duì)照組服用安慰劑。采用自身與組間兩種對(duì)照設(shè)計(jì)，分別服用膠原蛋白復(fù)合粉和安慰劑30天，再次測(cè)定受試者皮膚水分。 結(jié)果：試食組皮膚水分平均增加2.70±2.21，與對(duì)照組比較具有顯著差異（P<0.001），其中42例皮膚水發(fā)增加，有效率為84.00%;對(duì)照組有20例皮膚水分增加，有效率為40.00%，試食組有效率高于對(duì)照組（P<0.001），試食膠原蛋白復(fù)合粉后，各項(xiàng)生化檢測(cè)指標(biāo)均未見明顯異常變化，亦無(wú)過(guò)敏及其它不良反應(yīng)。 結(jié)論：該款膠原蛋白復(fù)合粉具有改善皮膚水分功能作用。

關(guān)鍵詞：膠原蛋白;庫(kù)拉索蘆薈凝膠凍干粉;透明質(zhì)酸鈉;皮膚水份;人體試驗(yàn)

KEY WORDS： Collagen; Aloe veragel freeze-dried powder; Sodium hyaluronate; Skin moisture; Human test

1 引言

膠原蛋白（collagen）是一種非水溶性纖維狀的含糖蛋白質(zhì)，來(lái)自于脊椎動(dòng)物的結(jié)締組織。膠原蛋白不僅是脊椎動(dòng)物細(xì)胞外間質(zhì)的重要成分，而且是其體內(nèi)含量最為豐富的蛋白質(zhì)。在人體內(nèi)，膠原蛋白對(duì)皮膚具有保水、保濕以及保持彈性等重要作用[1]。另外有研究表明，口服膠原蛋白對(duì)真皮和表皮均具有改善作用，因其吸收利用率好，易于擴(kuò)散到皮膚的深層和表層，從而使角質(zhì)層水分得以提高，達(dá)到表皮細(xì)胞活性提高、皮膚膚質(zhì)提升的作用[2]。本款膠原蛋白復(fù)合粉除膠原蛋白外，還含有具有保濕作用的庫(kù)拉索蘆薈凝膠凍干粉（Aloe vera gel freeze-dried powder）和透明質(zhì)酸鈉（Sodium hyaluronate）。本研究將幾款具有補(bǔ)水保濕作用的原料制成粉劑產(chǎn)品，按照《保健食品檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)技術(shù)規(guī)范》的方法進(jìn)行功能學(xué)評(píng)價(jià)，對(duì)人體進(jìn)行改善皮膚水份功能實(shí)驗(yàn)研究，為開發(fā)同類型的膠原蛋白保健食品提供實(shí)驗(yàn)支持。

2 材料和方法

2.1 受試物

膠原蛋白復(fù)合粉，粉劑，淡黃色粉末，本品的主要成分及含量為膠原蛋白（66.7%）、庫(kù)拉索蘆薈凝膠凍干粉（0.8%）、透明質(zhì)酸鈉（0.6%）。核準(zhǔn)凈含量：4.5g/袋，人體推薦量為每日1次，每次1袋，服用量為4.5g/日。安慰劑除功效成分外，在劑型、口感、外觀和包裝上與受試物一致。

2.2 受試對(duì)象

按自愿原則選擇30-50歲，皮膚水分≤12的受試者

2.2.1 診斷標(biāo)準(zhǔn)

前額眉間皮膚水分≤12，無(wú)炎癥、痛癢等癥狀。

2.2.2 納入者標(biāo)準(zhǔn)

凡前額眉間皮膚水分≤12的自愿受試者，經(jīng)體檢合格均可進(jìn)行試食觀察。

2.2.3 排除者標(biāo)準(zhǔn)

2.2.3.1 年齡在30歲以下或者50歲以上者，妊娠或者哺乳期婦女，對(duì)本保健品過(guò)敏者。

2.2.3.2 合并有心肝腎和造血系統(tǒng)等嚴(yán)重原發(fā)性疾病，精神疾病患者。

2.2.3.3 不符合納入標(biāo)準(zhǔn)，未按規(guī)定用受試物，無(wú)法判定功效或資料不全影響功效或安全性判斷者。

2.3 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與分組

采用自身前后對(duì)照和組間對(duì)照兩種形式。104名受試者隨機(jī)分為試食組和對(duì)照組，試食組服用受試物，對(duì)照組服用安慰劑。

2.4 服用劑量和時(shí)間

每日1次，每次1袋，服用限量為4.5g/日，連續(xù)30天，受試者在試食期間停止服用有關(guān)改善皮膚水分的藥物或者其他保健品及化妝品，不改變?cè)瓉?lái)的飲食習(xí)慣，正常飲食。

2.5 儀器與試劑

CA-500型血球計(jì)數(shù)儀（日本產(chǎn)），BM-200尿十項(xiàng)分析儀（美國(guó)產(chǎn)），日立7100全自動(dòng)生化分析儀（日本產(chǎn)），Skin Analyzer SHP88儀（德國(guó)產(chǎn)），生化試劑盒全部由中生公司提供。

2.6 觀察指標(biāo)

以下觀察指標(biāo)實(shí)驗(yàn)前后各檢查一次。

2.6.1 功效性觀察

2.6.1.1 一般情況

詳細(xì)詢問(wèn)病史，了解受試者飲食情況，觀察精神狀況、睡眠、飲食、大小便、血壓等主要臨床癥狀。觀察受試物對(duì)受試者是否有不良影響。

2.6.1.2 皮膚水分檢測(cè)

2.6.1.2.1 測(cè)定環(huán)境：在寬敞、通風(fēng)條件良好，溫度、濕度適中的空間環(huán)境穩(wěn)定的檢查室中進(jìn)行。

2.6.1.2.2前額眉間皮膚水份測(cè)定

在安靜狀態(tài)下，用潔凈棉球蘸蒸餾水清潔眉間被測(cè)部位，擦干后15分鐘進(jìn)行水分的測(cè)定，試食前后測(cè)定工作由同一臺(tái)儀器、同一人操作完成。

2.6.2 安全性觀察

2.6.2.1 血液、尿常規(guī)及便常規(guī)檢查

紅細(xì)胞計(jì)數(shù)，血紅蛋白，白細(xì)胞計(jì)數(shù)，尿十項(xiàng)，便常規(guī)檢測(cè)。

2.6.2.2生化指標(biāo)測(cè)定

血清白蛋白ALB，總蛋白TP，肝腎功能（總膽紅素TBIL，谷丙轉(zhuǎn)氨酶ALT，尿素氮BUN，肌酐CRE），血糖GLU、血脂（總膽固醇TC，甘油三酯TG）。

2.6.2.3 腹部B超，心電圖，X線胸部透視。（在實(shí)驗(yàn)開始時(shí)檢查一次）

2.7 改善皮膚水分功效判定

有效：水分得到改善，并經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)有顯著性差異。

無(wú)效：水分沒(méi)有得到明顯的改善。

2.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)為劑量資料，用t檢驗(yàn)進(jìn)行分析。凡自身對(duì)照資料可以采用配對(duì)t檢驗(yàn)，兩組均數(shù)比較采用成組t檢驗(yàn)，后者需要進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，對(duì)非正態(tài)分布或方差不齊的數(shù)據(jù)進(jìn)行適當(dāng)?shù)淖兞哭D(zhuǎn)換，待滿足正態(tài)方差后，用轉(zhuǎn)換的數(shù)據(jù)進(jìn)行t檢驗(yàn)。

有效率采用χ2檢驗(yàn)進(jìn)行檢驗(yàn)。四格表總例數(shù)小于40，或總例數(shù)等于或大于40但出現(xiàn)理論數(shù)等于或小于1時(shí)，應(yīng)改為確切概率法。

3結(jié)果與分析

3.1 一般狀況

受試者104人，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，共100例有效，均為女性。試食組50例，年齡最小35歲，最大50歲，平均年齡（45.10±4.85）歲;對(duì)照組50例，年齡最小31歲，最大50歲，平均年齡（44.34±5.15）歲。

3.2 受試物對(duì)皮膚水分變化的影響

3.3 功效判斷

由表1、2可見，試食組試食前后皮膚水分增加有顯著性差異（P<0.001），總有效率為84.00%顯著高于對(duì)照組（P<0.001）;實(shí)驗(yàn)后試食組皮膚水分增加2.70±2.21，而對(duì)照組無(wú)明顯變化，兩組比較（P<0.001）。試食組試食后與對(duì)照組相比，皮膚水分有顯著性差異（P<0.001）。

3.4 一般情況

3.5 血常規(guī)和血生化變化

由表4可見，試食前后試食組和對(duì)照組各項(xiàng)血生化和血常規(guī)指標(biāo)均在正常范圍內(nèi)。

3.6 血壓、心率、尿和便常規(guī)變化

由表5可見，試食前后試食組和對(duì)照組血壓、心率、尿和便常規(guī)指標(biāo)均在正常范圍。

3.7 腹部B超，心電圖，X線胸部透視試食前后試食組和對(duì)照組均在正常范圍內(nèi)。

3.8 受試者脫失率

納入受試者104例，試食組52例、對(duì)照組52例。其中試食組試食結(jié)束時(shí)有2例未在規(guī)定時(shí)間按時(shí)接受復(fù)查;對(duì)照組有2例未在規(guī)定時(shí)間內(nèi)按時(shí)接受復(fù)查。試食組與對(duì)照組各有2例符合受試者排除標(biāo)準(zhǔn)，有效受試者每組50例，受試者脫失率均為3.85%。

3.9 不良反應(yīng)觀察

未見過(guò)敏及其他不良反應(yīng)。

3.10 結(jié)論

采用自身與組件對(duì)照兩種對(duì)照設(shè)計(jì)，納入病例104例，隨機(jī)分為試食組和對(duì)照組。有效受試者100例，試食組、對(duì)照組各50例。試食組按要求服用該膠原蛋白復(fù)合粉30天后，皮膚水分平均增加2.70±2.21，與對(duì)照組比較有顯著差異（P<0.001），其中42例皮膚水分增加，有效率為84.00%;對(duì)照組為安慰劑組，30天后復(fù)查時(shí)有20例皮膚水分增加，有效率為40.00%。試食組有效率高于對(duì)照組（P<0.001）。服用該膠原蛋白復(fù)合粉前后，試食組自身比較及與對(duì)照組比較，皮膚水份均顯著性增加（P<0.001）。因此，可以認(rèn)定，該膠原蛋白復(fù)合粉具有改善皮膚水分的作用。

試食者胸透、腹部B超、心電圖均基本在正常范圍內(nèi)。試食該膠原蛋白復(fù)合粉前后，血常規(guī)、尿常規(guī)、便常規(guī)及血生化指標(biāo)均在正常范圍內(nèi)，說(shuō)明該膠原蛋白復(fù)合粉對(duì)受試者健康無(wú)不良影響。此外，試食該膠原蛋白復(fù)合粉后，未見過(guò)敏及其他不良反應(yīng)。

4 討論

本研究采用的方法為將受試者隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組兩組，分別使用膠原蛋白復(fù)合粉和安慰劑，安慰劑除功效成分外，在劑型、口感、外觀和包裝上與受試產(chǎn)品一致。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：食用膠原蛋白復(fù)合粉后受試者皮膚水分得到了顯著的改善，同時(shí)血常規(guī)、血生化等各項(xiàng)指標(biāo)的檢測(cè)結(jié)果也均未見異常。試食組在試食膠原蛋白復(fù)合粉之后皮膚水分得到了明顯的提高，并與試食前皮膚水分具有顯著性差異，同時(shí)也與對(duì)照組皮膚水分改善情況比較后也具有顯著性差異，說(shuō)明該種膠原蛋白復(fù)合粉不僅能夠改善皮膚水分，而且對(duì)人體沒(méi)有任何的不良影響。

皮膚老化是人體衰老的外在表現(xiàn)，是內(nèi)源性和外源性因素等綜合作用的結(jié)果。膠原蛋白因其獨(dú)特的皮膚修復(fù)能力，且具有較大的親和力、良好的生物相容性，已被廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)領(lǐng)域[3]。由于膠原蛋白分子含有許多的親水取代基，因此，具有很強(qiáng)的保濕能力，具體體現(xiàn)在提高組織細(xì)胞的貯水能力、使皮膚潤(rùn)澤保濕[4]。大量的實(shí)驗(yàn)研究表明，試食膠原蛋白能起到改善皮膚水分的作用。馬慧軍[5]應(yīng)用膠原蛋白凝膠對(duì)各類淺Ⅱ度以下燒傷創(chuàng)面進(jìn)行護(hù)理，發(fā)現(xiàn)膠原蛋白凝膠組在色素沉著發(fā)生率及疼痛緩解時(shí)間上均有明顯下降。周雙琳[6]通過(guò)人體試食實(shí)驗(yàn)，口服小分子魚膠原蛋白粉，發(fā)現(xiàn)可在一定程度地改善女性面部膚質(zhì)，且無(wú)明顯不良反應(yīng)，具有較好的安全性和有效性。余宙[7]等使用魚膠原蛋白粉進(jìn)行了人體試食的安全性與功能性研究，發(fā)現(xiàn)試食組食用前后，自身對(duì)照皮膚水分有顯著差異（P<0.05），具有顯著的改善皮膚水分作用。

作為該款膠原蛋白復(fù)合粉其他兩種成分亦有保濕作用，有研究表明庫(kù)拉索蘆薈提取液可以很好的降低皮膚失水率和提高皮膚的含水量[8]。萬(wàn)克英等[9]通過(guò)動(dòng)物試驗(yàn)，表明蘆薈凝膠中的多糖成分能促進(jìn)皮膚組織中纖維連接蛋白增加，有助于皮膚水分的改善。透明質(zhì)酸由于具有很強(qiáng)的吸水性而有保濕作用，其保濕效果與甘油相比效果更好，能夠使用皮膚在不同季節(jié)環(huán)境下保濕的需求[10]。

參考文獻(xiàn)

[1] 張兆強(qiáng)，胡余明，尹進(jìn)，等.膠原蛋白軟膠囊改善皮膚水份人體試食實(shí)驗(yàn)研究[J].實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué)，2009，16（06）：1753-1754.

Zhang ZQ， Hu M， Yin J，et al. Human Experiment on Effect of Collagen Soft Capsules on Improving Human Skin Moisture[J].Practical Preventive Medicine， 2009，16（06）：1753-1754.

[2]梁飛，左紅梅.膠原蛋白肽的性質(zhì)、應(yīng)用及發(fā)展前景的研究綜述[J].明膠科學(xué)與技術(shù)，2014，34（03）：109-115.

Liang F，Zuo HM. A review of the properties， applications and development prospects of collagen peptide[J].The Science and Technology of Gelatin，2014，34（03）：109-115.

[3]周倩，羅志剛，何小維.膠原蛋白的應(yīng)用研究[J].現(xiàn)代食品科技，2008，24（3）：285-289.

Zhou Q，Luo ZG，He XW.Progress of Collagen Application[J]. Modern Food Science and Technology，2008，24（3）：285-289.

[4]陳光，徐珍珍，吳銘.膠原蛋白與重組膠原蛋白的研究進(jìn)展[J]. 明膠科學(xué)與技術(shù)，2011，31（1）：1-6.

Chen G，Xu ZZ，Wu M. Research Progress of Collagen and Recombinant Collagen[J]. The Science and Technology of Gelatin， 2011，31（1）：1-6.

[5]馬慧軍，賈赤宇，魏蓉，等.膠原蛋白凝膠促皮膚創(chuàng)面修復(fù)的臨床研究[J].中國(guó)美容醫(yī)學(xué)，2011，20（2）：235-236.

Ma HJ，Jia CY，Wei R， et al. Study on the clinical application of collagen gel in skin wound repair[J]. Chinese Journal of Aesthetic Medicine，2011，20（2）：235-236.

[6]周雙琳，王海燕，岳丹霞，等.小分子魚膠原蛋白粉對(duì)改善女性面部膚質(zhì)的療效及安全性觀察[J].實(shí)用皮膚病學(xué)雜志，2011，4（3）：143-146.

Zhou SL，Wang HY，Yue DX， et al.Clinical effects and satefy of oral treatment with low-molecular fish collagen hydrolysate on female facial skin properties[J].Journal of Practical Dermatology ，2011，4（3）：143-146.

[7]余宙，范青生.魚膠原蛋白粉的制備及其對(duì)人體皮膚水份調(diào)節(jié)作用的安全有效性[J].食品工業(yè)科技，2010，5（31）：339-342.

Yu Z，F(xiàn)an QS. Preparation of fish collagen powder and the Safety and the Skin moisture regulation action of the Human being[J]. Food Industry Science and Technology，2010，5（31）：339-342.

[8]劉亞娟，夏文維，廖慧舒.庫(kù)拉索蘆薈提取液對(duì)皮膚水分的影響研究[J].廣東化工，2018，45（03）：40+71.

Liu YJ，Xia MW，Liao HS. Study on the Effect of the Kuraso Aloe Extract on the Moisture Content. [J].www.gdchem.com，2018，45（03）：40+71.

[9]萬(wàn)克英，李娟.蘆薈凝膠應(yīng)用于燒傷豚鼠模型傷口局部上皮出現(xiàn)時(shí)間及皮膚組織中纖維連接蛋白含量測(cè)定[J].中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù)，2007，11（40）：8134-8135.

Wang KY， Li J. Emergence time of partial wound epithelium and fibronectin content in skin tissue of burn guinea pig models with aloe gel[J]. Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research， 2007，11（40）：8134-8135.

[10]蒙亮亮，杜桐，王欣欣，等.透明質(zhì)酸在化妝品中的應(yīng)用研究進(jìn)展[J].山東化工，2018，47（18）：52-54+56.

Meng LL，Du T，Wang XX， ，et al. Study on the Application of Hyaluronic Acid in Cosmetics

作者簡(jiǎn)介：周致瑩、學(xué)歷：本科、職稱：執(zhí)業(yè)藥師、職務(wù)：產(chǎn)品注冊(cè)主管、主要研究領(lǐng)域：功能食品、電話：15011820816、郵編：510000。

周致瑩 喬小青 張旭光

湯臣倍健股份有限公司，廣州，510000