白菜提取液對(duì)斜紋夜蛾幼蟲(chóng)的引誘效果評(píng)價(jià)

劉美竹 李德海

摘要? 采用熱回流法，依據(jù)溶劑極性由小到大依次利用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、蒸餾水提取白菜中的活性成分，并采用“Y”形嗅覺(jué)儀評(píng)價(jià)不同濃度（母液、稀釋1、2、3、5倍）提取液對(duì)斜紋夜蛾2～3齡幼蟲(chóng)行為的調(diào)節(jié)作用。結(jié)果表明，白菜提取液對(duì)斜紋夜蛾2～3齡幼蟲(chóng)具有一定的引誘效果，可用于斜紋夜蛾綠色防治，為斜紋夜蛾的綠色防治奠定了理論基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞 斜紋夜蛾;有機(jī)溶劑;植物源性引誘劑

中圖分類(lèi)號(hào)：S482.39 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：2095-3305（2019）01-001-02

DOI： 10.19383/j.cnki.nyzhyj.2019.01.001

Evaluation on the Attrac？鄄tion Effect of Chinese Cabbage Extract on the Larva of Prodenia litura

LIU Mei-zhu? et al（College of Chemistry Biology and Environment， Yuxi Normal University， Yuxi， Yunnan 653100）

Abstract The active components of Chinese cabbage were extracted with petroleum ether， dichloromethane， ethyl acetate and distilled water by using thermal reflux method， and the effects of different concentrations on the behavior of the second and third instar larvae were evaluated by "Y" olfactory instrument. The results showed that the extract of Chinese cabbage had certain attractive effect on the second and third instar larvae of Prodenia litura， and could be used for the green control of Prodenia litura.

Key words? ?Prodenia litura; Organic solvent; Botanical attractant

斜紋夜蛾（Prodenia litura Fabri？鄄cius）屬鱗翅目夜蛾科，是一種世界性分布的雜食性農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)，具有間歇性暴發(fā)的特點(diǎn)，現(xiàn)已經(jīng)成為對(duì)十字花科植物造成危害的最主要害蟲(chóng)之一[1]?，F(xiàn)階段斜紋夜蛾的防治主要有農(nóng)業(yè)防治、物理防治、生物防治及化學(xué)防治等方法[2]，農(nóng)藥的大量重復(fù)使用易使蟲(chóng)體產(chǎn)生較大的抗藥性影響殺蟲(chóng)效率[3]，破壞生態(tài)系統(tǒng)，造成環(huán)境壓力。隨著人們健康意識(shí)的增強(qiáng)和對(duì)綠色食品的追求，農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)綠色防治技術(shù)成為當(dāng)今研究的熱點(diǎn)[4-8]。

綠色防治技術(shù)是以“綠色植?！睘槔砟?，綜合考慮農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)、農(nóng)產(chǎn)品、環(huán)境三者間的利益而建立的一種農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)防治手段。其防治方法包括噴施低濃度農(nóng)藥，人為摘除卵塊和幼蟲(chóng)，拔除周?chē)s草，應(yīng)用誘蟲(chóng)燈，利用天敵、微生物和引誘劑等[9-10]。 目前引誘劑的研究為性引誘劑和植物源性引誘劑兩大類(lèi)，其中，植物源性引誘劑是利用植物釋放的揮發(fā)性物質(zhì)調(diào)節(jié)昆蟲(chóng)的行為。在昆蟲(chóng)與植物長(zhǎng)期的進(jìn)化過(guò)程中，植物不僅為昆蟲(chóng)提供了適應(yīng)其生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)成分，還會(huì)釋放某些化學(xué)物質(zhì)，昆蟲(chóng)就是通過(guò)這些物質(zhì)對(duì)寄主進(jìn)行選擇、定位和取食[11]。從寄主植物中篩選對(duì)昆蟲(chóng)具有引誘效果的揮發(fā)性物質(zhì)，是農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)綠色防治產(chǎn)品研發(fā)的重點(diǎn)之一。

白菜（Brassica pekinensis（Lour.） Rupr.）屬雙子葉植物綱、十字花科，為斜紋夜蛾的主要寄主植物。由此推測(cè)在白菜中應(yīng)該存在對(duì)斜紋夜蛾具有引誘效果的物質(zhì)。因此，筆者以白菜為供試植物，采用不同的溶劑對(duì)白菜進(jìn)行提取，篩選對(duì)斜紋夜蛾2～3齡幼蟲(chóng)具有引誘效果的提取液，以期為斜紋夜蛾綠色防治技術(shù)的研究及其產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)奠定理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 供試?yán)ハx(chóng)和植物 斜紋夜蛾采自芥藍(lán)田，在室內(nèi)采用芥藍(lán)苗進(jìn)行飼養(yǎng)，連續(xù)飼養(yǎng)3代。室內(nèi)飼養(yǎng)條件：溫度（27±1）℃，相對(duì)濕度60%～70%，光周期為L(zhǎng)∶D=12 h∶12 h。白菜由實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)種植，品種為“快綠”，種植過(guò)程中不施用任何農(nóng)藥和化肥;石斛購(gòu)自市場(chǎng);腫柄菊從野外采集。

1.1.2 供試溶劑和儀器 石油醚，天津市風(fēng)船化學(xué)試劑科技有限公司;二氯甲烷，四川西隴化工有限公司;乙酸乙酯，四川西隴化工有限公司;無(wú)水乙醇，四川西隴化工有限公司。供試儀器有大氣采樣儀、索氏提取器、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、水浴鍋、“Y”形嗅覺(jué)儀。

1.2? ?試驗(yàn)方法

1.2.1 白菜提取液的制備 取白菜柔嫩的葉片洗凈、自然晾干。稱(chēng)取干品10 g，根據(jù)溶劑的極性由小到大依次加入100 ml石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、無(wú)水乙醇、水，采用索氏提取法進(jìn)行提取，待測(cè)管溶液顏色變淡提取終止，提取液濃縮至10 ml，將上述濃縮液作為母液，用提取溶劑分別稀釋1倍、2倍、3倍、5倍作為供試液。4℃保存，備用。

1.2.2 測(cè)定方法 采用“Y”形嗅覺(jué)儀測(cè)定不同稀釋倍數(shù)的提取液對(duì)斜紋夜蛾2～3齡幼蟲(chóng)行為的調(diào)節(jié)作用[12-13]。嗅覺(jué)儀直管設(shè)定風(fēng)速為 3～5 cm/min，用移液槍取20 μl供試液作為處理組（Tr），相同用量的溶劑作為對(duì)照組（CK），滴加到0.8 cm×0.8 cm 的濾紙片上。待有機(jī)溶劑揮干，將濾紙放在“Y”形嗅覺(jué)儀的2個(gè)支管。取20頭饑餓的 2～3齡斜紋夜蛾幼蟲(chóng)，放在“Y”形嗅覺(jué)儀的主管。20 min后記錄各支管內(nèi)幼蟲(chóng)的數(shù)量，每處理4次重復(fù)，室內(nèi)環(huán)境條件同上。

1.2.3 試驗(yàn)數(shù)據(jù)的處理 反應(yīng)率=處理組數(shù)量（或CK組數(shù)量）/20%。

數(shù)據(jù)采用χ2檢驗(yàn)，評(píng)價(jià)提取液對(duì)斜紋夜蛾幼蟲(chóng)的引誘效果。

2 結(jié)果與分析

從圖1可以看出，白菜石油醚提取液稀釋1～5倍時(shí)，處理組蟲(chóng)口數(shù)量高于CK組，隨著白菜石油醚提取液稀釋倍數(shù)的增加，處理組斜紋夜蛾幼蟲(chóng)的數(shù)量增加，其中白菜石油醚提取液稀釋2、3、5倍時(shí)斜紋夜蛾2～3齡幼蟲(chóng)的數(shù)量明顯高于CK組數(shù)量，母液稀釋2倍時(shí)，蟲(chóng)口數(shù)量與CK組數(shù)量差異不顯著，可見(jiàn)，白菜石油醚提取液稀釋2、3、5倍對(duì)斜紋夜蛾幼蟲(chóng)具有引誘效果。

白菜二氯甲烷提取液稀釋1、2、3倍蟲(chóng)口數(shù)量明顯高于CK組數(shù)量，表明采用二氯甲烷提取白菜提取液稀釋倍數(shù)低于3倍時(shí)，對(duì)斜紋夜蛾2～3齡幼蟲(chóng)具有明顯的引誘效果。不同濃度間對(duì)斜紋夜蛾幼蟲(chóng)的引誘效果差異不顯著（圖2）。

采用乙酸乙酯提取白菜時(shí)，除1倍稀釋液外，其他處理組蟲(chóng)口數(shù)量明顯高于CK組，表明白菜乙酸乙酯提取液稀釋2～3倍對(duì)斜紋夜蛾幼蟲(chóng)具有明顯的引誘效果，但兩處理間引誘效果差異不顯著（圖3）。

采用無(wú)水乙醇提取白菜時(shí)，提取液稀釋5倍、2倍和1倍時(shí)，處理組蟲(chóng)口數(shù)量明顯高于CK組，提取液稀釋3倍時(shí)，處理組蟲(chóng)口數(shù)量與CK組差異不顯著，表明白菜的無(wú)水乙醇提取液5倍、2倍和1倍稀釋液對(duì)斜紋夜蛾2～3齡幼蟲(chóng)具有明顯的引誘效果，其引誘率間差異不顯著（圖4）。

白菜蒸餾水提取液稀釋2～5倍時(shí)，處理組蟲(chóng)口數(shù)量明顯高于CK組（圖5）。表明白菜蒸餾水提取液對(duì)斜紋夜蛾幼蟲(chóng)具有引誘效果，不同處理間的引誘率差異不顯著。

3 討論

在昆蟲(chóng)與植物的進(jìn)化過(guò)程中，昆蟲(chóng)對(duì)植物釋放的揮發(fā)性物質(zhì)存在不同喜好。由于不同植物釋放的揮發(fā)性物質(zhì)種類(lèi)和含量存在差異，導(dǎo)致植物對(duì)昆蟲(chóng)的行為調(diào)節(jié)存在引誘和趨避2種方式，一般情況下，寄主植物對(duì)昆蟲(chóng)具有引誘效果。如王桂花等報(bào)道木瓜、棉花和甜瓜等寄主植物提取物對(duì)斜紋夜蛾成蟲(chóng)具有明顯的引誘效果[14]。白菜是斜紋夜蛾主要寄主植物之一，試驗(yàn)結(jié)果顯示，采用石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷、無(wú)水乙醇和蒸餾水作為溶劑提取白菜，提取液稀釋1～5倍對(duì)斜紋夜蛾2～3齡幼蟲(chóng)具有一定的引誘效果，表明白菜提取液可用于斜紋夜蛾綠色防治。但白菜石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷、無(wú)水乙醇和蒸餾水的提取液中何種物質(zhì)對(duì)斜紋夜蛾2～3齡幼蟲(chóng)表現(xiàn)為引誘效果還需要對(duì)提取物的活性成分做進(jìn)一步分析和試驗(yàn)研究。

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