李飛翔
摘要:為較全面的認(rèn)識遲緩愛德華氏菌及其引發(fā)的魚類遲緩愛德華氏菌病,有效的鑒定、防治與控制遲緩愛德華氏菌的感染,對遲緩愛德華氏菌生物學(xué)特性及其致病力、鑒定方法、免疫控制等方面做如下綜述。
關(guān)鍵詞:遲緩愛德華氏菌病;生物學(xué)特性;鑒定方法;致病力;免疫控制
中圖分類號:S941.42+9 ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A
遲緩愛德華氏菌是魚類的細(xì)菌性致病菌之一,許多魚類會受到該菌感染并造成大量死亡。為比較全面地認(rèn)識遲緩愛德華氏菌及其造成的魚類遲緩愛德華氏菌病,有效地預(yù)防和控制該病菌的感染,現(xiàn)對遲緩愛德華氏菌感染癥狀、致病力、診斷以及免疫控制等方面做如下介紹:
1 ?生物學(xué)特性
遲緩愛德華氏菌為短桿菌,有鞭毛,無莢膜,也不形成芽孢。生長溫度為15℃~42℃,最適為37℃;適宜pH為5.5~9.0,但以pH為7.2較好;鹽度為0%~4%。研究發(fā)現(xiàn),在普通瓊脂培養(yǎng)基上,25 ℃條件下,該菌培養(yǎng)24 h能形成隆起、灰白色、形狀為圓形并帶有光澤、呈半透明狀態(tài)的菌落,直徑約為0.5~1.0 mm。
2 ?魚類感染癥狀
遲緩愛德華氏菌感染斑點叉尾鮰后,魚體出現(xiàn)顏色不正常的、凸出的腫脹區(qū)域,如果刺穿,則會產(chǎn)生惡臭,明顯可見肛門出血和眼睛不透明。鰓、腎、肝和脾以及在腸(較少)中觀察到小的白色結(jié)節(jié),這些結(jié)節(jié)被細(xì)菌包裹。研究發(fā)現(xiàn),感染愛德華氏菌的牙鲆可見腸道脫垂于肛門外,腹腔內(nèi)有大量濃液狀腹水,但腸道內(nèi)無腹水,肝和腎肥大并伴有出血癥狀[1]。大菱鲆急性感染該病菌時,病魚會出現(xiàn)下頜和鰓蓋邊緣發(fā)紅,鰭基部以及腹部皮下充血。腎臟出現(xiàn)腫大、潰瘍、出血,嚴(yán)重時整個腎臟呈膿樣壞死或灰白色;脾臟時有腫大,失血呈粉紅色[2]。
3 ?致病性
遲緩愛德華氏菌是愛德華氏菌屬中唯一能夠感染人的致病菌,危害極大,可引起人的腸胃炎、腹瀉等,還可以引起腦膜炎和敗血癥等較為嚴(yán)重的疾病。劉春等[3]發(fā)現(xiàn),遲緩愛德華氏菌的分離菌株Z1接種感染透明四帶無須鯉和斑馬魚,當(dāng)遲緩愛德華氏菌液達(dá)到1×106 cfu/mL的濃度時,能使他們的死亡率分別達(dá)到80%和90%。
4 ?遲緩愛德華氏菌的鑒定
4.1 ?血清學(xué)
酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)具有特異性強、敏感性高、檢測時間短等優(yōu)點。研究發(fā)現(xiàn),以遲緩愛德華氏菌WY28作為抗原,獲得效價較高的多克隆抗體,建立遲緩愛德華氏菌的快速檢測法ELISA[4]。將該方法進(jìn)行規(guī)范化后具有簡便、靈敏等特性,與腸桿菌科其他細(xì)菌參考菌株無交叉反應(yīng),具良好的特異性。
4.2 ?分子方法
環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增法(LAMP)擴(kuò)增遲緩愛德華氏菌溶血素基因片段的方法對于鑒定遲緩愛德華氏菌是較為簡便的。因為LAMP法操作非常簡單,可在一個小試管內(nèi)就能完成所有檢測,并且可以通過肉眼觀察顏色變化進(jìn)行判斷,最重要的是所需儀器價格便宜,具有很高的經(jīng)濟(jì)性[5]。然而,LAMP法也有一些不足之處,比如引物設(shè)計較為復(fù)雜,而且一旦發(fā)生非特異性擴(kuò)增,試管內(nèi)顏色沒有變化,難以辨別。
通過設(shè)計遲緩愛德華氏菌gyrB基因的特異性引物也可檢測遲緩愛德華氏菌,此種方法的特點是:快速、靈敏、特異高。王燕等[6]通過總結(jié)菌株在形態(tài)與生理生化特征及16S rDNA同源性等方面的實驗結(jié)果,分離得到了遲緩愛德華氏菌(WY28菌株)。直到現(xiàn)在,生理生化特征鑒定以及16S rDNA和gyrB基因序列分析也是作為確定遲緩愛德華氏菌的重要依據(jù)。雖然PCR方法操作簡化,靈敏度提高,檢測時間也較短,但是它對試驗儀器要求較高。因此,該方法在實際檢測應(yīng)用中受到了限制。
5 ?疾病控制
5.1 ?疫苗的開發(fā)
疫苗免疫是預(yù)防魚類病害的重要手段之一。實驗證明,使用病魚體內(nèi)分離的遲緩愛德華氏菌菌株制備的滅活疫苗能較有效保護(hù)大菱鲆免受遲緩愛德華氏菌強毒株的感染[6]。這種弱毒疫苗通過浸泡、口服等途徑效刺激機體系統(tǒng)免疫應(yīng)答,進(jìn)而發(fā)揮免疫保護(hù)作用[7]。此外,鞭毛蛋白可作為魚類疫苗的潛在佐劑,對開發(fā)魚類疫苗產(chǎn)品具有重要作用。
5.2 ?免疫增強劑
免疫增強劑包括維生素C、免疫多糖等,它能起到增強機體免疫力的作用。研究證明,飼料中添加維生素C能有效降低感染遲緩愛德華氏菌半滑舌鰨的紅細(xì)胞氧化損傷程度[8]。在飼料中添加多糖免疫佐劑能提高大菱鲆的SOD活性和血清溶菌酶活性等免疫指標(biāo)??傊?,在在飼料中添加免疫增強劑可提高魚類的抗病能力。
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