赤蒼藤化學(xué)成分的GC-MS分析

梁臣艷，張 璐，唐云麗，黎炎燊，甄丹丹

（廣西中醫(yī)藥大學(xué)，廣西 南寧 530200）

赤蒼藤（Erythropalum scandens Bl.）為鐵青樹科赤蒼藤屬赤蒼藤的多年生常綠大型木質(zhì)藤本植物。其味苦，性平，全株清熱利濕、祛風(fēng)、活血，主治水腫、小便不利、黃疸、半身不遂、風(fēng)濕骨痛、跌打損傷［1］。赤蒼藤含有豐富優(yōu)質(zhì)的維生素、礦物質(zhì)、氨基酸等營養(yǎng)成分，在民間常用于治療尿道炎以及急性腎炎。廣西、廣東、云南及海南等地區(qū)的民間具有采集赤蒼藤嫩尖葉食用以利尿排毒的習(xí)俗［2］，現(xiàn)代藥理研究也證實(shí)了赤蒼藤能預(yù)防和治療高尿酸血癥［3］。赤蒼藤根的化學(xué)成分中含有蘇門樹脂酸、桂皮酸松柏醇酯、酚類及三萜類化合物［4］。本課題組前期從赤蒼藤乙醇提取物中分離得到甲基異茜草素-1-甲醚、正丁基-吡喃果糖苷等8個(gè)化合物［5］，并采用氣相-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)從赤蒼藤揮發(fā)油中鑒別出二十七烷、1-辛烯-3-醇等鏈狀脂肪族、芳香族和萜類化合物［6］?，F(xiàn)本研究進(jìn)一步對赤蒼藤乙酸乙酯部位的化學(xué)成分進(jìn)行分析，為充分合理利用廣西豐富的赤蒼藤資源，實(shí)現(xiàn)藥材的可持續(xù)開發(fā)利用提供科學(xué)依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 儀器 Agilent 7890B-5977氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國安捷倫公司）；LG16-WA高速離心機(jī)（北京醫(yī)用離心機(jī)廠）。

1.2 試藥與試劑 赤蒼藤藥材采自廣西南寧市四塘鎮(zhèn)，經(jīng)廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥用植物教研室梁子寧教授鑒定為鐵青樹科赤蒼藤屬植物赤蒼藤Erythropalum scandens Bl.的根莖，藥材經(jīng)自然風(fēng)干后粉碎為粗粉，樣品存在廣西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院藥學(xué)中心實(shí)驗(yàn)室。提取試劑均為分析純，廠家為國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

2 方法

2.1 供試品溶液的制備 取赤蒼藤藥材粗粉8 kg，加入70%乙醇回流提取3次，提取時(shí)間分別為4 h、3 h和2 h，合并提取液，回收乙醇，得乙醇浸膏。硅膠60℃拌樣后，先用石油醚脫脂，再用乙酸乙酯萃取，得到乙酸乙酯萃取液，回收溶劑，得到乙酸乙酯浸膏。取50 g浸膏，采用硅膠柱色譜分離，以石油醚∶乙酸乙酯梯度洗脫。在不同的洗脫比例得到淡黃色油狀化合物1和橘黃色油狀化合物2。各取油狀物約1 mg，加入石油醚-甲苯溶解，再加入0.4 mol/L氫氧化鈉-甲醇溶液，60℃水浴加熱1 h，加入超純水分層后，取上清液，以無水Na2SO4脫水干燥，10 000轉(zhuǎn)/分鐘離心，取上清液備用。

2.2 氣相-質(zhì)譜聯(lián)用分析條件

2.2.1 氣相分離條件 采用梯度升溫程序。組分1升溫程序：起始溫度150℃，150～200℃（3℃/min），200～280℃（8℃/min）；組分2升溫程序：起始溫度120℃，120～160 ℃（3 ℃/min），160～250 ℃（5 ℃/min）。

2.2.2 質(zhì)譜條件 色譜柱為美國安捷倫HP-5MS毛細(xì)管色譜柱（30 m×0.25 mm×0.25μm），載氣為氦氣，溶劑延遲3 min，流速為1 ml/min，分流進(jìn)樣1 μl，分流比為30∶1。進(jìn)樣口溫度為280℃，離子源溫度為250℃，電離方式EI。電離能量為70 eV，掃描質(zhì)量范圍：50～500 amu。

3 結(jié)果與討論

在上述條件下對供試品進(jìn)行GC-MS分析，得到組分1和組分2的總離子流圖，分別見圖1和圖2。對總離子流圖中各個(gè)化合物質(zhì)譜圖譜經(jīng)HPMSD化學(xué)工作站以及NIST11標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫檢索，對質(zhì)荷比、基峰和相對豐度等進(jìn)行比較，并結(jié)合相關(guān)圖譜解析，對各色譜峰加以確認(rèn)，再按峰面積歸一化法來計(jì)算各個(gè)化合物的百分含量。從組分1鑒定確認(rèn)了8個(gè)成分，詳見表1；從組分2鑒定確認(rèn)了8個(gè)成分，詳見表2。

圖1 組分1的GC-MS總離子流圖

圖2 組分2的GC-MS總離子流圖

結(jié)果顯示，赤蒼藤乙酸乙酯部位組分1和組分2的成分主要為脂肪酸和烯酸類化合物。其中，組分1主要含十七烷酸甲酯（22.29%）、油酸甲酯（18.29%）；組分2主要含有11，14-十八碳二烯酸甲酯（28.95%）、硬脂酸甲酯（21.71%）。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)赤蒼藤有良好的利尿作用，而脂肪酸甲酯類容易水解為脂肪酸，故推測脂肪酸類可能為其利尿藥效的物質(zhì)基礎(chǔ)［7］。

表1 組分1化學(xué)成分分析結(jié)果

表2 組分2化學(xué)成分分析結(jié)果