心房顫動(dòng)病人血清sCD14、sCD163的表達(dá)及臨床意義

心房顫動(dòng)(AF)是臨床上常見的心律失常，發(fā)病率隨著年齡增加而升高，80歲以上老年人發(fā)病率高達(dá)9%[1]。AF常伴隨有其他并發(fā)癥，可引起嚴(yán)重的致殘致死事件，隨著人口老齡化的日益嚴(yán)重，AF的危害將繼續(xù)增長，目前研究認(rèn)為AF是多種機(jī)制共同作用的結(jié)果，國外有學(xué)者發(fā)現(xiàn)AF與炎癥有相關(guān)性[2]。白細(xì)胞分化抗原14(CD14)是機(jī)體炎癥反應(yīng)的標(biāo)志物之一，在體液中以可溶性CD14(sCD14)形式存在[3]；CD163是一種血紅蛋白特意清道夫受體，表達(dá)在單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的表面，在炎癥刺激下，CD163脫落，形成可溶性的CD163(sCD163)，從而具有抗炎作用[4]，然而CD14、CD163在AF疾病發(fā)生發(fā)展中作用尚不清楚。本研究通過檢測AF病人血清sCD14、sCD163的表達(dá)水平，分析其表達(dá)水平的相關(guān)性及其與臨床特征的關(guān)系，旨在探討血清sCD14、sCD163表達(dá)水平在AF病人發(fā)病及病情發(fā)展中的意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取2015年4月—2017年9月中國人民解放軍總醫(yī)院第一附屬醫(yī)院收治的AF病人68例，其中男40例，女28例，年齡35～82(67.38±12.12)歲。按照歐洲心律學(xué)會房顫癥狀評分(EHRA score)[5]將房顫危險(xiǎn)度分為4級，Ⅰ級29例，Ⅱ級22例，Ⅲ級8例，Ⅳ級9例；按能否自行復(fù)律分為自發(fā)性房顫組(20例)與非自發(fā)性房顫(48例)。納入標(biāo)準(zhǔn)：經(jīng)詢問病史及心電圖確診為AF的病人；入院前未接受治療；病人及家屬簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并感染、腫瘤或免疫系統(tǒng)疾?。惶悄虿〔∪?、肝腎功能不全者；原發(fā)性心臟病。選取同期體檢健康人40名作為對照組，其中男20名，女20名，年齡38～79(65.74±9.89)歲。

EHRA分級標(biāo)準(zhǔn)：依據(jù)病人癥狀及對日常生活影響將AF分為4個(gè)等級。Ⅰ級：無癥狀； Ⅱ級：癥狀輕微，不影響日?；顒?dòng)；Ⅲ級：癥狀嚴(yán)重，日?；顒?dòng)受限；Ⅳ級：不能從事任何活動(dòng)。

1.2 研究方法

1.2.1 樣本采集 AF病人在確診后未給予治療前，于清晨空腹采集靜脈血3 mL，離心后取上清液置于無菌EP管內(nèi)，-20 ℃冰箱中保存；對照組于清晨采用相同方法采集血清。

1.2.2 血清中sCD14、sCD163水平檢測 采用ELISA法檢測血清中的sCD14、sCD163水平，檢測試劑盒購自美國R&D公司，多功能酶標(biāo)儀購自美國Bio-Rad公司，檢測操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。為保證檢測結(jié)果精密度和準(zhǔn)確性，所有樣本均由同一人員在一臺機(jī)器上操作完成，每個(gè)樣本設(shè)置3次重復(fù)。

1.2.3 臨床指標(biāo)檢查 采用全自動(dòng)生化分析儀766-020型(日本日立公司)檢測血清炎癥因子白介素6(IL-6)、C反應(yīng)蛋白(CRP)水平，檢測試劑盒購自美國R&D公司。

2 結(jié) 果

2.1 兩組血清炎癥因子表達(dá)水平 研究組血清炎癥因子IL-6、CRP表達(dá)水平顯著高于對照組(P<0.05)。詳見表1。

表1 兩組血清炎癥因子表達(dá)量比較(±s)

2.2 兩組血清sCD14、sCD163表達(dá)情況 與對照組相比，研究組血清sCD14表達(dá)水平顯著升高(P<0.05)，血清sCD163表達(dá)水平顯著升高(P<0.05)。詳見表2。

表2 兩組血清sCD14、sCD163表達(dá)水平比較(±s)

2.3 AF病人血清sCD14、sCD163表達(dá)水平與臨床特征的關(guān)系 以sCD14、sCD163在AF病人血清中表達(dá)水平平均值為界，將68例AF病人血清分為CD14高表達(dá)組(44例)與低表達(dá)組(24例)；CD163高表達(dá)組(46例)與低表達(dá)組(22例)。AF病人血清CD14、CD163表達(dá)水平與病人年齡、性別、心房顫動(dòng)類型、EHRA分級比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。詳見表3。

表3 AF病人血清可溶性CD14、CD163表達(dá)水平與臨床特征的關(guān)系 例

2.4 AF病人血清sCD14與sCD163表達(dá)水平相關(guān)性分析 經(jīng)Pearson法分析，在AF病人血清中，sCD14表達(dá)水平與sCD163表達(dá)水平正相關(guān)(r=0.415，P<0.05)。詳見圖1。

圖1 AF病人血清sCD14與sCD163表達(dá)量相關(guān)性分析結(jié)果

2.5 AF病人血清sCD14與sCD163表達(dá)水平與炎性因子水平的相關(guān)性 sCD14與sCD163表達(dá)水平與AF病人血清炎癥因子IL-6、CRP水平正相關(guān)(P<0.05)。詳見表4。

表4 AF病人sCD14與sCD163表達(dá)水平與炎性因子的相關(guān)性分析

2.6 影響AF發(fā)生因素的Logistic回歸分析 經(jīng)Logistic分析顯示，sCD14、sCD163表達(dá)水平及血清炎癥因子IL-6、CRP水平是影響AF發(fā)生的危險(xiǎn)因素。詳見表5。

表5 與AF相關(guān)變量的Logistic回歸分析結(jié)果

3 討 論

AF作為最常見的心律失常，常伴有中風(fēng)、腦卒中等并發(fā)癥，甚至可出現(xiàn)血栓栓塞導(dǎo)致死亡，嚴(yán)重危害人類健康。AF確切發(fā)病機(jī)制尚不明確，隨著近年來不斷地深入研究，發(fā)現(xiàn)炎癥反應(yīng)可能在AF病情發(fā)生發(fā)展中起著重要作用。CRP和IL-6是敏感的炎癥標(biāo)志物，1997年，Bruins等首先發(fā)現(xiàn)在冠狀動(dòng)脈搭橋術(shù)后IL-6和CRP表達(dá)水平有不同程度的升高[6]。2003年美國心血管健康研究發(fā)現(xiàn)，CRP表達(dá)水平對AF發(fā)病危險(xiǎn)性有良好的預(yù)后效果[7]。有研究推測，心房心肌細(xì)胞和間質(zhì)的炎癥反應(yīng)能直接導(dǎo)致細(xì)胞膜跨膜電位的變化，形成觸發(fā)活動(dòng)。另有研究證實(shí)炎癥反應(yīng)能夠引起心房結(jié)構(gòu)重構(gòu)，使心房顫動(dòng)易于維持[8]。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，AF病人血清中CRP、IL-6表達(dá)水平顯著高于對照組，AF病人發(fā)病與血清CRP、IL-6表達(dá)水平有關(guān)，同時(shí)提示AF的發(fā)病可能與機(jī)體的炎癥反應(yīng)相關(guān)。

CD14是一種特異性的單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞表面標(biāo)志物，屬于細(xì)胞表面糖蛋白家族。根據(jù)CD14在體內(nèi)的存在形式及存在部位，可將其分為兩類：一類是位于單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和中性白細(xì)胞等細(xì)胞膜上，稱之為膜結(jié)合型(mCD14)；另一類存在于人的血漿等體液中，稱之為sCD14[9-10]。內(nèi)皮細(xì)胞(ECS)等不表達(dá)CD14的細(xì)胞在內(nèi)毒素脂多糖(LPS)-sCD14復(fù)合物作用下被活化，釋放白細(xì)胞介素、生長因子、一氧化氮等并表達(dá)黏附分子，參與炎癥反應(yīng)導(dǎo)致組織器官損傷[11]。sCD14與LPS的直接結(jié)合，可減少LPS與mCD14的結(jié)合，調(diào)節(jié)單核細(xì)胞等的細(xì)胞反應(yīng)。CD14可促進(jìn)單核細(xì)胞與活化的上皮細(xì)胞黏附，與活化的淋巴細(xì)胞表面的CD14配體相互作用，抑制T細(xì)胞增殖和B細(xì)胞產(chǎn)生抗體；并且可以促使巨噬細(xì)胞黏附到激活的內(nèi)皮細(xì)胞和T細(xì)胞上，可非特異性中和、清除LPS，從而減輕炎癥反應(yīng)。單核細(xì)胞上的特異性表達(dá)異常及sCD14的濃度異常對敗血癥、結(jié)節(jié)病、血液系統(tǒng)疾病具有良好的診斷及預(yù)后價(jià)值[12]。另有研究表明，血清sCD14表達(dá)水平在AF常見并發(fā)癥腦卒中病人中升高[13]。本研究發(fā)現(xiàn)，AF病人血清sCD14表達(dá)量高于對照組，提示sCD14可能與AF疾病發(fā)生有關(guān)；AF病人血清中sCD14表達(dá)水平與病人年齡、性別、心房顫動(dòng)類型、EHRA分級有關(guān)，表明sCD14表達(dá)水平與AF病人病情進(jìn)展相關(guān)。

巨噬細(xì)胞參與人體固有免疫系統(tǒng)的重要細(xì)胞組成，能夠吞噬病原微生物、介導(dǎo)炎癥反應(yīng)。CD163是在M2型巨噬細(xì)胞表面特異性表達(dá)的，僅表達(dá)在活化單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的細(xì)胞膜上[14]。CD163屬于清道夫受體半胱氨酸結(jié)構(gòu)與家族，在體內(nèi)有兩種存在形式，一種是跨膜大分子形式存在于巨噬細(xì)胞上，另一種是存在于血清或其他組織液中，具有可溶性，即sCD163[15]。CD163可識別腫瘤壞死因子樣凋亡弱誘導(dǎo)因子，與之結(jié)合發(fā)揮抗炎作用；能刺激細(xì)胞生長，誘導(dǎo)血管生成，促使多種炎性因子的釋放[16-17]。在炎癥性腸病中，sCD163表達(dá)水平顯著升高[18]。有研究報(bào)道，sCD163表達(dá)水平在急性冠脈綜合征病人中升高，可作為診斷急性冠脈綜合征理想指標(biāo)[19-20]。本研究結(jié)果顯示，AF病人血清中sCD163表達(dá)水平顯著高于對照組，表明sCD163與AF的發(fā)病有關(guān)；AF病人血清中sCD163表達(dá)水平與病人年齡、性別、心房顫動(dòng)類型、EHRA分級有關(guān)，表明sCD163表達(dá)水平與AF病人病情進(jìn)展相關(guān)。經(jīng)Pearson法分析，AF病人血清sCD14、sCD163表達(dá)水平呈正相關(guān)，sCD14、sCD163表達(dá)水平與炎癥因子IL-6、CRP表達(dá)水平呈顯著正相關(guān)，證實(shí)sCD14、sCD163表達(dá)水平在AF發(fā)病中起到一定作用。進(jìn)一步分析結(jié)果表明，血清sCD14、sCD163、IL-6、CRP表達(dá)水平是影響AF發(fā)生的危險(xiǎn)因素。

綜上所述，sCD14、sCD163在AF病人血清中高表達(dá)，與病人年齡、性別、心房顫動(dòng)類型、EHRA分級及炎癥因子水平有關(guān)，提示血清sCD14、sCD163表達(dá)水平可能與AF的發(fā)病和病情進(jìn)展有關(guān)，可作為病情監(jiān)測指標(biāo)。